IL-7的诱导表达增强靶向GPC3 CAR-T细胞的增殖及体外抗肿瘤活性

目的:探讨IL-7的诱导表达对靶向磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)嵌合抗原受体基因修饰T淋巴细胞(CAR-T细胞)的增殖和体外抗肿瘤活性的影响。方法:通过无缝克隆将GPC3 CAR序列片段插入GV400载体的Bam HⅠ/Eco RⅠ位置,构建第二代CAR慢病毒载体GPC3-BBZ及GPC3-BBZ-NFAT-IL-7,以293T细胞包装相应的慢病毒载体后,感染人T细胞制备CAR-T细胞。实验分为未转导T细胞(NT)组、GPC3-BBZ CAR-T细胞组、GPC3-BBZ-NFAT-IL-7 CAR-T细胞组。采用流式细胞术检测各组CAR-T细胞中CAR的表达水平,qPCR法检测经GPC3蛋白激活的CAR-T细胞中IL-7 m RNA的表达水平,细胞计数法检测CAR-T细胞在GPC3抗原刺激下的增殖能力,ELISA检测CAR-T细胞在受到肿瘤细胞刺激后IL-7、IFN-γ和TNF-α的分泌水平。应用实时细胞分析(RTCA)技术检测CAR-T细胞对人肝癌Huh-7细胞的杀伤作用。结果:成功构建慢病毒载体GPC3-BBZ和GPC3-BBZ-NFAT-IL-7,制备出靶向GPC3的CAR-T细胞。经GPC3抗原激活后,GPC3-BBZ-NFAT-IL-7 CAR-T细胞可有效表达IL-7 mRNA(P<0.01),其表现出更强的增殖能力(P<0.05)。与GPC3-BBZ CAR-T细胞相比,GPC3-BBZ-NFAT-IL-7 CAR-T细胞与GPC3阳性靶细胞Huh-7细胞共培养后,分泌更高水平的IL-7、IFN-γ和TNF-α(P<0.01或P<0.001)。RTCA结果显示,GPC3-BBZ-NFAT-IL-7 CAR-T细胞对GPC3阳性Huh-7细胞的杀伤活性显著高于GPC3-BBZ CAR-T细胞(P<0.05)。结论:成功制备可诱导表达IL-7的靶向GPC3的CAR-T细胞,IL-7的诱导表达增强靶向GPC3 CAR-T细胞的免疫活性,在体外展现出较强的肿瘤细胞杀伤能力。

考虑属性关联的区间灰熵决策模型

决策问题的复杂性和人类思维认知的模糊性,往往导致决策在不确定的环境下进行。利用灰色系统来处理决策中的不确定性已经取得了丰硕的成果。然而,如果仅仅使用精确数来表达偏好可能无法准确地反映专家的意见。因此,在这种情况下,本文引入了区间灰数来模拟专家在多个决策模型上的不确定性。尽管基于区间灰数的决策模型数量众多,但它们中的大多数都没有考虑到人类的有限理性。针对属性值以区间灰数形式给出且属性间具有相互作用关系的多属性决策问题,本文提出了基于几何面积的属性关联区间灰熵多属性决策方法。首先,考虑到分辨系数的主观选择会对关联排序造成不良影响,提出基于序列波动情况的指数型分辨系数。其次,给出面积相离度公式替代传统对应点之间的距离来计算接近度。最后提出了新的体现属性间相关性的调整权重公式,计算均衡接近度并排序。算例分析和对比分析验证了本文所提方法的可行性和合理性。

长期传代人脐带间充质干细胞的特性及功能

目的:探讨传至10代(P10)的人脐带来源间充质干细胞(P10-hUC-MSC)的生物学特性及功能。方法:人脐带来源于厦门弘爱医院(伦理批号:HAXM-MEC-20201012-037-01),分离、收集、培养hUC-MSC并传代培养,收集P1-、P10-hUC-MSC,FCM检测hUC-MSC表型,细胞衰老β-半乳糖苷酶染色法及FCM法检测终末期细胞衰老与凋亡情况,秋水仙碱处理检测细胞染色体稳定性,体外成脂、成骨诱导实验检测其多向分化能力,以不同比例与外周血单个核细胞(PBMC)混合培养后FCM检测T细胞亚群及表型变化。结果:成功分离和培养的P10-hUC-MSC与P1-hUC-MSC的表型相似,表现为CD45、CD34、HLA-DR表达阴性而CD105、CD90阳性率≥95%。终末期的P1-hUC-MSC和P10-hUC-MSC均表现出β-半乳糖苷酶表达阳性和早期凋亡特征,细胞染色体核型一致且保持稳定,未发生转化现象。P1-、P10-hUC-MSC在体外都可被诱导分化成脂肪、成骨细胞。P10-hUC-MSC与PBMC以1∶1混合培养7 d后,可显著上调CD4^(+)/CD8^(+)T细胞比值、CD4^(+)Treg细胞比例和PD-1表达(均P<0.01)。结论:长期传代的P10-hUC-MSC仍然保持其生物学特性和安全性,并具备多向分化能力及免疫调节能力,这为最大限度发挥hUC-MSC的临床放疗损伤修复与预防作用提供了前期实验依据和指导。

基于DMSP-OLS与NPP-VIIRS的长时序夜间灯光数据模拟

以2000—2013年DMSP-OLS数据和2012—2019年NPP-VIIRS数据为基础数据,对其进行预处理之后,选取2012年和2013年数据,提取县域行政范围内灯光亮度值进行拟合。结果表明,2类灯光数据间存在明显的相关关系,且模拟数据与原始数据之间存在更为显著的相关关系。

基于夜间灯光数据的全国栅格尺度碳排放模拟

以DMSP-OLS和NPP-VIIRS夜间灯光数据为基础数据,对其进行融合校正形成DMSP-OLS长时序夜间灯光数据集,结合省域碳排放统计数据,利用空间面板数据模型对全国栅格尺度碳排放进行模拟,构建2000—2019年1 km×1 km分辨率的全国栅格尺度碳排放模拟数据,分析全国碳排放时空格局变化特征。结果表明,DMSP-OLS和NPP-VIIRS数据重叠年份之间存在较高的关联性,回归拟合优度为0.9077,拟合效果良好;碳排放空间面板数据模型模拟结果良好,R^(2)=0.874;2000—2019年,全国碳排放总量持续增长,且高碳排放地区呈现出显著连片扩张趋势。

中药溻渍治疗在人流术后促进产后恢复中的应用

探究人流术后采用中药溻渍治疗的临床疗效。方法 择取本院100例人流术产妇(2021.01-2022.12)深入分析,依据随机数字表法分组(对照组:保阴固肾汤,观察组:保阴固肾汤+中药溻渍治疗),各组40例,对比疗效。结果 两组治疗后VAS评分、中医症候积分、子宫内膜厚度、临床指标、总有效率对比有统计学意义(P<0.05)。结论 人流术后采用中药溻渍治疗,可快速恢复子宫功能,疼痛明显缓解,减轻临床症状,可推广。

子宫托辅助盆底康复训练在子宫脱垂患者临床护理中的应用价值

分析子宫托在子宫脱垂患者临床护理中的应用价值。方法 纳入子宫脱垂患者100例,于2023年3月-2024年1月入院,按入院日期先后顺序分组。对照组(n=50,2023年3月-2023年7月)、观察组(n=50,2023年8月-2024年1月),对照组通过盆底康复训练干预,观察组采用盆底康复训练联合子宫托进行干预。两组均干预2周,于干预前、干预2周后比较两组患者的护理效果、尿流动力学、盆底功能。结果 干预2周后、出院后1个月、出院后3个月后,观察组盆底功能影响问卷(PFIQ)和盆底功能障碍性疾病症状问卷(PFDI-20)评分显著小于对照组(P<0.05)。干预2周后,观察组最大膀胱压测定容量(MCC) 、腹压漏尿点压(ALPP) 、尿道最大闭合压( MCP)显著高于对照组(P<0.05)。干预2周后,观察组Ⅰ类肌纤维、Ⅱ类肌纤维盆底肌肉疲劳度低于对照组(P<0.05),观察组Ⅰ类肌纤维、Ⅱ类肌纤维电值显著高于对照组(P<0.05)。结论 子宫托在子宫脱垂临床护理中有显著优势,可明确改善护理效果及尿流动力学,对促进盆底功能的恢复有积极意义。

采用NaA型分子筛膜反应器合成奥拉西坦的研究

为了解决奥拉西坦合成工艺复杂、产品收率低的技术难题,本文采用NaA型分子筛膜反应器通过蒸汽渗透技术与环合反应耦合制备奥拉西坦,考察了工艺条件对处理效果的影响。结果表明,在NaA分子筛膜渗透侧真空度为0.02~0.05MPa、反应温度为85℃、反应时间为24h的条件下,奥拉西坦的产品收率达到80.5%;在NaA分子筛膜污染后经过再生,渗透通量恢复率达到99.1%。

可分散性纳米二氧化硅补强硅橡胶的性能

以表面改性的可分散性(DNS)系列二氧化硅纳米微粒为研究对象,考察了其对硅橡胶力学性能的影响,Payne效应分析了其在硅橡胶中形成网络结构,并与气相白炭黑填充硅橡胶体系做了对比。结果表明,由于SiO2纳米微粒表面包覆有有机基团,无需加入分散剂,DNS系列纳米二氧化硅在硅橡胶中分散性好,与硅橡胶相容性好,对硅橡胶有较强的补强效果,在相同添加量的情况下,DNS系列二氧化硅纳米微粒补强的硅橡胶的拉伸强度、撕裂强度、扯断伸长率等力学性能都优于气相白炭黑。

怀来盆地弃耕地自然恢复过程中土壤养分动态

研究了怀来盆地丘陵区弃耕地自然恢复过程中土壤养分的变化规律。采取空间代替时间的方法,确定了代表弃耕地初期阶段、草地阶段和灌丛地阶段的3种样地,通过分层取样测定了土壤有机质、全量养分和速效养分含量。结果表明,全量养分对生态系统恢复的响应与其相应的速效养分明显不同。随着弃耕地的恢复,土壤有机质有明显增加的趋势,P循环和K循环由物质控制向生物控制转换,但速效P在恢复初期增加缓慢。速效N由于耕种期施肥的影响表现出先降低而后增加的特点。全量养分中,只有全N在弃耕地自然恢复中有增加的趋势。灌丛可以在更深的层次上影响土壤养分。植被的恢复与土壤肥力的提高密切相关,这种作用随着植被的恢复而不断增强。

IPCC第五次评估报告第二工作组报告中国引文计量分析

IPCC第五次评估报告（AR5）第二工作组（WGII）报告由来自70个国家的308位主要作者协调人、主要作者和编审共同编写，共有12位中国科学家参与。IPCC AR5系列报告自发布以来，引起了社会各界的广泛关注，许多学者、政策研究者分别从不同角度对其进行分析。本文拟通过对WGII AR5中国引文的分析，掌握中国当前在气候变化影响、适应和脆弱性领域的研究现状。

小麦白粉病发生气象条件和气象预报研究进展

基于已有成果,采用影响事实检测法,系统分析和汇总气象条件对小麦白粉病影响的规律,对气象因子在国内小麦白粉病预报中的应用进行综述,指出当前研究存在的问题,并对未来发展进行展望。已有研究表明,夏季气温偏低对白粉病病菌的越夏有利;秋冬季及早春气温偏高或阴雨日偏多利于病情发展,但雨水过多且集中则不利于病害发展;冬小麦生长中后期高温干旱会抑制病情发展;日照少则利于白粉病流行;病菌借助大气环流完成异地传播。关于气象因子对小麦白粉病影响的研究多基于田间观测,通过与气象资料对比分析,建立小麦白粉病发生发展与各气象因子及因子组合间的定量关系。有关小麦白粉病的气象预报分定性和定量两大类:定性预报一般采用指标预测法;定量预报以数理统计方法应用为多,人工神经网络法、模糊数学法和灰色系统理论也有应用。目前国内小麦白粉病预报研究中尚存在数据资料有限、指标选择不当、模拟方法仅限于黑箱和灰箱模型、研究结果地域性强、实用性较差等问题。机理模型的研究极少,未来亟待开展。

可分散性纳米SiO_2对甲基乙烯基硅橡胶结构与性能的影响

考察了原位改性法制备的可分散性DNS-2型纳米SiO2对甲基乙烯基硅橡胶(MVQ)结构与性能的影响,并与气相法白炭黑填充MVQ进行了比较。结果表明,DNS-2-1型、DNS-2-2型和DNS-2-3型纳米SiO2为类球形颗粒,其表面改性的有机物质量分数分别为6.0%,3.9%,3.1%;DNS-2型纳米SiO2填充MVQ的加工性能及力学性能均优于气相法白炭黑填充MVQ;填充DNS-2型纳米SiO2后,MVQ的结晶温度降低,熔融吸热减小,在低温下不易硬化;DNS-2型纳米SiO2与MVQ的相容性及其在硅橡胶中的分散性优于气相法白炭黑。

冰封期河流中污染物损耗估算模型

在讨论常规的沉淀、生物降解模型在冰封期应用的基础上,进一步给出了冰冻作用损耗模型.实例分析结果表明,在冰封期,河流中化学需氧量(COD)的损耗方式以沉淀和冰冻作用为主,而生物降解作用则相对较弱.

人肝癌PLC/PRF-5细胞中干细胞样细胞的分离及其特异性miRNAs的筛选

目的:分选及鉴定人肝癌PLC/PRF-5细胞中的肝癌干细胞样细胞,研究其microRNAs(miRNAs)表达谱。方法:以ABCG2为表面标志,免疫磁珠法分选、流式细胞术检测ABCG2+和ABCG2-PLC/PRF-5细胞,观察ABCG2+与ABCG2-PLC/PRF-5细胞的琼脂克隆形成能力和接种NOD/SCID小鼠的成瘤能力。应用miRNA芯片筛选ABCG2+和ABCG2-PLC/PRF-5细胞差异表达的miRNAs,real-time PCR验证部分差异表达的miRNAs。结果:免疫磁珠分选的ABCG2+PLC/PRF-5细胞纯度可达(84.20±4.52)%。ABCG2+PLC/PRF-5细胞比ABCG2-PLC/PRF-5细胞形成更多、更大的克隆集落(47.17±10.50 vs23.33±7.31,P<0.05);NOD/SCID小鼠接种1×104个ABCG2+PLC/PRF-5细胞即可成瘤,而ABCG2-PLC/PRF-5细胞至少需要5×105个才可成瘤;5×105个细胞时,ABCG2+PLC/PRF-5细胞组的肿瘤体积显著大于ABCG2-PLC/PRF-5细胞组[(3.73±1.19)cm3 vs(0.72±0.57)cm3,P<0.01]。ABCG2+PLC/PRF-5细胞和ABCG2-PLC/PRF-5细胞差异表达的miRNAs有20个:上调的13个,下调的7个;real-time PCR验证其中的hsa-miR-30a和hsa-miR-630的差异表达,其结果与miRNA芯片结果基本一致。结论:人肝癌细胞系PLC/PRF-5中ABCG2+细胞具有肿瘤干细胞的特性;ABCG2+和ABCG2-PLC/PRF-5细胞差异表达的miRNAs有20个,它们在肝癌发病中可能起重要的调控作用。

包埋乳酸菌的研制及生物学特性分析

分别选用海藻酸钠(SA)和聚乙烯醇(PVA)2种包埋剂,对乳酸菌进行包埋固定。结果表明,经过包埋固定的乳酸菌在冻干后的存活率大于未包埋菌;在同样培养条件下,未包埋的乳酸菌及用SA、PVA包埋的乳酸菌在24h时的光密度(OD)值分别为1.35、1.67和1.49。在耐热性试验中,以PVA包埋菌的耐热性最好,在100℃下处理1h后仍能存活,海藻酸钠包埋的乳酸菌次之,只添加了蔗糖保护剂的无包埋菌最差。

GM-CSF基因重组腺病毒载体的构建及鉴定

目的:构建人粒细胞 巨噬细胞集落刺 激因子(GM CSF)基因的重组腺病毒载体,为进 一步研究GM CSF基因在肿瘤基因治疗中的应 用提供实验基础。方法:采用PCR方法,从重 组质粒pcDNA3.1 GM CSF扩增出GM CSF 基因片段,通过穿梭质粒pShuttle,将带有CMV 启动子的目的片段克隆入Adeno X腺病毒 DNA中,获得重组腺病毒DNA,通过脂质体转 染HEK293细胞,经包装扩增后,获得重组腺 病毒Adeno X GM CSF,PCR鉴定,ELISA法 检测表达产物。结果:含GM CSF基因的重组 腺病毒Adeno X GM CSF构建成功,经PCR鉴 定和DNA测序等证实了其正确性,重组腺病毒 上清液中GM CSF表达量达26ng/mL。结论: 含GM CSF基因的重组腺病毒构建成功。

二氧化硅纳米微粒对达克罗涂层性能的影响

将纳米SiO_2微粒加入到达克罗涂层中制备出了复合涂层,利用SEM、EDS、XRD等分析方法对添加纳米微粒前后的涂层做了显微表征和分析。结果表明,复合涂层的硬度、抗划伤性、摩擦性能和耐腐蚀性都有不同程度的提高,且涂层保留了本身的优点,外观、耐水性、附着强度等都未受影响;从不同角度探讨了纳米微粒提高涂层性能的方法和原因。

稳定性同位素技术在森林生态系统碳水通量组分区分中的应用

生态系统碳水循环过程中的同位素分馏效应,为区分生态系统净碳交换过程中光合和呼吸通量,蒸散通量中植物蒸腾和土壤蒸发提供了理论依据。本文综述了稳定性同位素技术在这一领域的应用进展。研究结果显示,此方法切实可行,为进一步解释森林生态系统过程提供了广阔的前景。但由于森林生态系统结构复杂,不确定性因素多,国内外研究还处于尝试阶段。该方法在森林生态系统应用中还存在诸如Keeling图技术和涡度相关技术的假设条件难以满足等问题,期待今后在技术和理论上的突破。

怀来盆地丘陵区弃耕地自然恢复中植物群落特征的变化

在对怀来盆地退耕还草过程中的3个阶段———撂荒地、草地和灌丛地植物群落样方调查的基础上,初步给出了其生态系统自然恢复中植物群落组分、群落外貌和结构、群落多样性和均匀度、群落生物量等的变化规律,分析了草地阶段在生态系统恢复中的特殊地位,进一步阐述了灌丛在该区生态系统中对草本植物具有改善其生存环境却又使其处于竞争劣势的双重作用.