基于ROS/Ras/MEK信号通路探讨四君子汤干预溃疡性结肠炎癌变的作用机制

目的探讨四君子汤通过ROS/Ras/MEK信号通路干预溃疡性结肠炎癌变(Ulcerative colitis Associated Carcinogenesis,UCAC)小鼠的作用机制。方法60只BALB/c小鼠适应性喂养一周,采用随机数字法分为正常组(10只)和造模组(50只)。造模组小鼠予以DMH溶液进行腹腔注射,自由饮用3%DSS溶液19周构建UCAC模型,经病理验证成功后,将造模组随机分为模型组(8只)、西药组及中药低、中、高剂量(每组10只)。中药低、中、高剂量组分别予以4.29 g/kg、8.58 g/kg、17.16 g/kg的四君子汤药液灌胃,西药组予以0.4 g/kg的柳氮磺吡啶肠溶片药液灌胃,正常组与模型组均给予等量生理盐水灌胃。造模期间,每日观察各组小鼠的一般状态。末次造模给药结束后,各组小鼠以1%戊巴比妥钠(40 mg/kg)腹腔注射麻醉,取小鼠病变结肠组织,HE染色观察结肠组织病理变化,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR,RT-PCR)检测Ras、MEK mRNA转录水平,蛋白免疫印迹法(Western-blot,WB)检测Ras、MEK蛋白表达水平,免疫组化法(Immunohistochemistry,IHC)检测Ras、MEK2、MAP2K1蛋白表达水平。结果与正常组相比:模型组小鼠的一般状态相对较差,结肠组织存在着明显肠道黏膜组织损伤,ROS的含量明显上升(P<0.01),Ras、MEK mRNA转录水平提高(P<0.01),Ras、MEK、MEK2、MAP2K蛋白表达水平提高(P<0.01)。与模型组相比:西药组与中药各剂量组小鼠的一般状态较前明显改善,小鼠结肠组织黏膜结构有所修复;西药组ROS含量、Ras和MEK mRNA转录水平及Ras、MEK、MEK2、MAP2K1蛋白表达水平下降(P<0.01);中药中、高剂量组ROS含量均有所下降(P<0.05,P<0.01),中药各剂量组Ras和MEK的mRNA转录水平均下降(P<0.05,P<0.01),中药各剂量组Ras、MEK蛋白表达水平下降(P<0.05,P<0.01),中药低、高剂量组及中药中剂量组MEK2、MAP2K1蛋白表达水平降低(P<0.05,P<0.01)。结论四君子汤能通过阻断ROS/Ras/MEK信号通路传导,修复UCAC小鼠结肠组织黏膜损伤,改善UCAC小鼠肠道炎症,从而达到干预UCAC进程的作用。柳氮磺吡啶肠溶片也可以通过阻断ROS/Ras/MEK信号通路传导,从而达到干预UCAC进程的作用。

四君子汤调控P62/Beclin-1拮抗UC癌变小鼠结肠巨噬细胞自噬的机制研究

目的观察四君子汤通过调控P62/Beclin-1拮抗UCAC小鼠结肠巨噬细胞自噬的分子机制。方法将60只BALB/c小鼠随机分为正常组10只和UCAC造模组50只。造模组采用腹腔注射DMH联合自由饮用DSS复合法复制UCAC小鼠模型,造模19周。造模成功后,将UCAC造模组随机分为模型组、西药组(柳氮磺吡啶)及中药低、中、高剂量组,每组各10只。西药组予柳氮磺吡啶灌胃(0.4g/kg),中药组低、中、高剂量组分别予4.29、8.58、17.16g/kg剂量的四君子汤灌胃,正常组、模型组予等量生理盐水灌胃,连续给药4周。给药结束,取小鼠病变结肠组织,采用HE染色观察结肠组织病理变化,透射电镜结肠巨噬细胞超微结构及自噬小体情况,RT-PCR、Western Blot法以及IHC法分别检测各组细胞P62和Beclin-1表达水平。结果与空白组比较,模型组小鼠结肠组织存在明显肠道黏膜组织损伤,结肠巨噬细胞超微结构破坏严重,可见明显的自噬小体,P62mRNA及蛋白水平明显升高,Beclin-1mRNA及蛋白显著水平下降(P<0.01);与模型组比较,西药组及四君子汤低、中、高各剂量组的小鼠结肠组织黏膜结构均得到一定程度修复,结肠巨噬细胞超微结构改善,自噬小体明显减少,P62mRNA及蛋白水平显著降低,Beclin-1mRNA及蛋白水平显著上升(P<0.01)。结论四君子汤具有促进肠黏膜免疫屏障修复的作用,从而干预UCAC病程,延缓癌变进程,其机制可能为通过调控P62、Beclin-1的表达抑制巨噬细胞自噬。

益肾痛泄方对腹泻型肠易激综合征大鼠IL-2、IL-10、TGF-β、IFN-γ表达的影响

[目的]研究益肾痛泄方对腹泻型肠易激综合征模型大鼠小肠组织白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素10(IL-10)、转化生长因子β(TGF-β)、γ-干扰素(IFN-γ)表达水平的影响。[方法]将24只Wistar大鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、奥替溴铵组、益肾痛泄方组,每组6只,除正常组大鼠外,其余各组均采用4%醋酸灌肠叠加慢性心理应激法复制腹泻型肠易激综合征模型,奥替溴铵组、益肾痛泄方组大鼠连续给药14 d。观察大鼠的一般情况,大鼠处死后,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组大鼠小肠组织病理变化,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)及蛋白免疫印迹法(Western Blot)分别检测各组大鼠小肠组织IL-2、IL-10、TGF-β、IFN-γmRNA及蛋白表达水平。[结果]与正常组比较,模型组大鼠小肠出现明显的淋巴细胞灶性浸润,且模型组大鼠小肠组织中IL-2、IL-10、TGF-β、IFN-γmRNA及蛋白表达水平均显著升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,奥替溴铵组、益肾痛泄方组大鼠小肠组织未见明显炎症浸润,且小肠IL-2、IL-10、TGF-β、IFN-γmRNA及蛋白表达水平均显著降低(P<0.05或P<0.01);与奥替溴铵组比较,益肾痛泄方组大鼠小肠组织固有层肠腺丰富,未见明显炎症细胞浸润,IL-2、IL-10、TGF-β、IFN-γmRNA及蛋白表达水平均低于奥替溴铵组,但差异无统计学意义(P>0.05)。[结论]益肾痛泄方可能通过降低IL-2、IL-10、TGF-β、IFN-γ的表达,进而缓解小肠炎症损伤,发挥治疗腹泻型肠易激综合征的作用。

脾虚证本质研究的困惑与出路

从脾虚证本质研究取得的成果和存在的问题出发,结合现代系统生物学的代谢组学理论和技术,提出中医脾虚证本质研究应及时纳入代谢组学方法,以期为中医脾虚证的客观化、量化研究提供新的思路和方法。

新医改形势下基层医院建筑与装备的发展需求研究(四)——新城区综合医院总体规划建设方案

文章在区域卫生资源配置现状分析和需求分析的研究基础上,通过解读相关政策法规、借鉴周边医院经验,对项目选址、建设规模、投资估算、资金筹措等关键指标进行分析,为落实医改政策、科学规划与建设现代化医院提供参考意见。

新医改形势下基层医院建筑与装备的发展需求研究(六)——公共配套工程规划建设方案

文章针对医院建筑公共配套工程,系统地阐述了医院建筑给排水系统、强弱电系统、消防系统、医用气体系统的规划设计现状,并结合广东省四会市的地域、气候等特点,提出了具体建议。

探讨医院洁净手术部的规划与建设

目的:探讨医院洁净手术部的规划与建设,优化设计方案,合理利用医疗资源,满足临床发展需求。方法:解读洁净手术部建设的技术规范,论证基层医院的实际使用需求,推动洁净手术部合理建设。结果:通过研究分析和系统论证,提出一套合理、可行的规划与建设方案。结论:重新规划设计的洁净手术部项目建设方案合理可行。

Aquilion 16排螺旋CT探测器故障案例分析

分析东芝Aquilion 16螺旋CT探测器故障部件的工作原理,寻求故障解决方案。成功修复1例探测器故障,为医院节省维修费用,缩短故障停机时间,减少了配件等待期间所造成的损失。

新医改形势下基层医院建筑与装备的发展需求研究(十六)——医院建筑设计要点

以《综合医院建筑设计规范》和《综合医院建设标准》的有关指标为依据,在总结前面章节研究成果的基础上,对四会市新城综合医院项目的医院建筑设计要点进行研究,并提出具体的设计方案。

新医改形势下基层医院建筑与装备的发展需求研究(一)——概述

文章围绕广东省肇庆四会市的基层医院建设项目,通过背景、目的、方法、意义等多个角度,从宏观到微观,阐述新医改形势下区域医疗卫生资源需求和基层医院的建设、发展需求,作为研究课题,该文是概述部分,旨在为"十三五"期间区域医疗卫生资源配置规划及县级公立医院建设规划提供政策指导和理论支撑。

新医改形势下基层医院建筑与装备的发展需求研究(十四)——建筑平面布局与功能分区设计要点

文章以《综合医院建设标准》的有关规范、指标为依据,进一步确定了医院七项基本建设内容的组织关系和面积分配;重点阐述了医疗区域五大功能单元的功能实现、布局关系和流程组织,以及各功能单元内部的功能用房布局分区;同时也分析了医疗区域与非医疗区域之间的流程组织关系,提出了具体的规划建设方案。

新医改形势下基层医院建筑与装备的发展需求研究(十)—“绿色医院”理念在医院建设中的探索与实践

文章在解读"绿色医院"理念和《绿色医院建筑评价标准》的基础上,从"节能减排"和"人文关怀"两大要素着手,探讨了主体建筑、公共配套工程、院区环境等方面的规划设计要点,为广东省四会市新城区综合医院打造成为一家现代化"绿色医院"提供了建议。

中医治疗便秘型肠易激综合征研究进展

便秘型肠易激综合征(constipation predominant irritablebowel syndrome,IBS-C)是一种功能性肠病,表现为反复发作的腹痛,与排便相关或伴随排便习惯改变,临床症状主要为腹痛、腹胀、排便频率减少、大便干结硬块等[1]。现就近年来中医治疗便秘型肠易激综合征的概况综述如下。

加味柴芍六君颗粒对便秘型肠易激综合征模型大鼠结肠组织5-HT的影响

目的:观察加味柴芍六君颗粒对便秘型肠易激综合征模型大鼠结肠组织5-HT的影响,探讨其可能的作用机制及作用靶点。方法:72只大鼠随机分为正常组,模型组,加味柴芍六君颗粒低、中、高剂量组以及莫沙必利组,按冰水灌胃法造模后给予相应药物灌胃,检测粪便含水率及半固体营养糊在小肠的推进率。采用免疫组化法观察大鼠结肠组织中5-HT表达水平。结果:与模型组比较,加味柴芍六君颗粒各组小肠推进率明显增高(P<0.05),且结肠组织5-HT表达水平显著下降(P<0.05)。结论:加味柴芍六君颗粒可能通过降低结肠组织中5-HT的表达,改善肠道敏感性及动力异常,促进IBS-C模型大鼠胃肠蠕动功能的恢复,发挥治疗作用。

新医改形势下基层医院建筑与装备的发展需求研究(三)——广东省四会市区域卫生资源配置规划分析

文章介绍了不同类型的医疗卫生机构的功能定位,分析了广东省四会市卫生资源配置的存量和增量,提出了卫生资源配置的调整与优化方案,对各种医疗卫生机构的建设规划提出了建议。

新医改形势下基层医院建筑与装备的发展需求研究(十二)——“价值工程”理念在医院建设中应用的探索与实践

文章在解读"价值工程"理念和医院建设项目概念的基础上,从项目决策阶段和项目实施阶段两方面着手,研究功能与成本的关系,探讨优化建设方案、有效实现功能、合理控制投资、降低全寿命周期成本的方案,以增加新城区综合医院建设项目的综合效益。

新医改形势下基层医院建筑与装备的发展需求研究(九)——“绿色医院”理念及《绿色医院建筑评价标准》解读

文章介绍了绿色建筑、绿色医院、绿色医院建筑这几个概念的来源及内涵;按照《绿色医院建筑评价标准》的章节,归纳总结了该标准对"绿色医院建筑"的具体要求,从而为广东省四会市新城区综合医院的建设提供参考。

医院新建综合住院部洁净系统项目的规划与设计

目的:探讨医院新建综合住院部洁净系统项目的规划与设计,解读洁净系统建设的技术规范,合理利用医疗资源,推动洁净系统合理建设。方法:针对医院洁净系统项目建设过程中的实际情况,论证医院的实际使用需求,提出一套优化的、合理的、可行的规划与设计方案。结果:经过全面的、系统的规划与设计,医院新建综合住院部洁净系统建设方案可完全满足临床需求和发展需求。结论:做好前期的充分论证、周密规划与优化设计,医院新建综合住院部洁净系统项目的建设方案是合理可行的。

四会市乡镇卫生院的资源配置现状研究

目的:通过调查与分析四会市乡镇卫生院的基础建设、人力资源、设备资源等情况,研究2011年度四会市乡镇卫生院的资源配置现状,从而总结"十一五规划"期间四会市乡镇卫生院建设的阶段性成果,分析存在问题,探索解决途径。为卫生管理部门优化资源配置、加大建设力度提供调查依据,以更好地贯彻落实《广东省农村卫生服务体系建设与发展规划》文件精神,促进农村卫生事业的发展。方法:以《广东省乡镇卫生院基本建设标准》为依据,对四会市乡镇卫生院的资源配置概况进行了总体描述,对卫技人员资源配置情况、万元以上医疗设备配置情况等指标进行了重点讨论。通过自行设计调查表,对全市15所乡镇卫生院资源配置现状进行实证研究,并用EXCEL以及SPSS10.0软件包对资料进行统计分析。结果:四会市乡镇卫生院平均占地面积为5166 m2、平均建筑面积为3270 m2,业务用房建设总体水平优于《标准》的相关规定;平均每万人口拥有住院床位数为5.8张、平均每千人口在编人员数为1.3人,资源配置与服务需求大致平衡,基本达到《标准》的相关规定;具有本科及以上学历人员为38人,大专学历人员为191人,中专学历人员为335人,高中及以下学历人员为108人,学历普遍偏低,以中专学历人员为主;具有中级职称人员为18人,初级职称人员为425人,未评定职称人员为229人,职称普遍偏低,无人具有副高以上职称,中级职称比例也极少,以初级职称人员为主,相当多的人员未评定职称;医疗设备总体装备水平偏低,且地域分布不均,多数卫生院的基本医疗设备装备不足,未能达到《标准》的相关规定。结论:四会市乡镇卫生院资源配置总体水平达标,但配置不平衡,地域差异大;卫技人员配置数量达标,但素质不高,学历和职称普遍偏低;医疗设备配置数量不足,类别不齐,档次不高。政府应加大资金扶持力度,重点加强在职人员培训,对基本配置的医疗设备进行填平补齐,改善资源配置不平衡的状况。