商品果胶酶中endo－PG的分离纯化及其部分性质研究

以Ａ．ｎｉｇｅｒ来源的果胶酶为材料，经过ＣＭ－ＳｅｐｈａｄｅｘＣ－５０及ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００两步骤分离纯化得到电泳均一的ｅｎｄｏ－ＰＧ１及ｅｎｄｏ－ＰＧ２，其亚基分子量分别为３５ｋＤ及３７ｋＤ，含糖量为１１．２２％及８．３％，最大紫外吸收峰分别在２７４ｎｍ及２６９ｎｍ处，氨基酸组成分析结果表明Ｇｌｙ含量较高，Ｍｅｔ含量较低，不含Ｃｙｓ，并且酸性氨基酸含量高于碱性氨基酸，圆二色谱结果表明二级结构主要为α螺旋和β折叠，其中ｅｎｄｏ－ＰＧ１含α螺旋４５．１％，β折叠２４．９％；ｅｎｄｏ－ＰＧ２含α螺旋３９．６％，β折叠３６．５％。

以魔芋葡甘聚糖凝胶为载体亲和层析分离纯化猪血SOD

以魔芋葡甘聚糖（ＫＧＭ）凝胶作为铜金属螯合亲和层析的载体一步亲和纯化猪血ＳＯＤ，得到电泳均一，比活为８６２２Ｕ／ｍｇ，纯化倍数为７７．８倍的ＳＯＤ，其回收率为８５．４％．探讨了魔芋葡甘聚糖凝胶作为亲和载体的可能性及前景．

魔竽葡苷聚糖凝胶为亲和层析载体与Sepharose 4B的比较研究——Ⅰ.KGM金属螯和层析分离纯化猪血SOD

将KGM凝胶和Sepharose 4B在同样条件下活化偶联,制成Cu^(2+)金属螫合亲和胶,亲和纯化猪血SOD,并对这两种亲和胶的层析效果和性能进行了比较。KGM金属螫合胶对猪血SOD吸附量、纯化倍数、纯化SOD的比活力和回收率分别为53000U/ml胶、19倍、12000U/mg蛋白和94.6％,而Sepharose 4B亲和胶对SOD 的吸附量、纯化倍数、纯化SOD的比活力和回收率分别为79920U/ml胶、11倍、10125U/mg蛋白和95.4％。两种亲和胶所纯化的SOD经聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、活性染色及SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)证明其均为电泳纯。KGM金属螯合胶使用六次后,其对SOD吸附量、去Cu量及SOD的回收率均无明显影响。

PGIP在植物抗病方面的研究进展

至今为止 ,已在 2 0多种植物体内发现了多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白 (PGIP)。这类蛋白质主要集中于细胞壁和内膜系统 ,但在不同生长时间、不同品种及不同器官中其含量是不一样的 ,研究表明这种差异与植物的抗性强弱有着密切关系。PGIP是病原真菌分泌的endo_PG的抑制剂 ,因此能延缓病原真菌对植物细胞壁的降解。来自菜豆和小麦的实验证据表明病原真菌侵染植株能诱导pgip基因高水平转录、表达 。

Endo-PG诱导培养小麦细胞PGIP产生的研究

The activity of polygalacturonase inhibiting protein (PGIP)was assayed in four kind of cultures induced endo-polygalacturonase (endo-PG). It was discovered that endo-PG stimulated obviously the accumulation of PGIP. The PGIP contents of SuMai No. 3 and SA-Ⅱ cells,which are fungal disease-resistant,are higher than the contents of Mian Yang No. 11 and JingHua No.1. It is indicated in cell level that PGIP has relation to resistance of plant.

魔芋葡苷聚糖(KGM)凝胶为亲和层析载体与Sepharose 4B的比较研究 Ⅱ.KGM染料亲和层析分离人血清白蛋白

将 KGM和 Sepharose4 B凝胶在相同条件下活化、偶联接上染料 CibacronBlue F3GA制成了 KGM和 Sepharose 4 B染料亲和吸附剂 ,并用来与牛血清白蛋白( BSA)作用 ,每毫升 KGM亲和吸附剂可吸附 BSA2 8mg,用 Na SCN洗脱时回收为84 .5% ,而 Sepharose 4 B梁料亲和吸附剂每毫升可吸附 BSA 15.3mg,用 Na SCN洗脱时回收为 81.7% ,并对两种凝胶的染料亲和吸附性能进行了比较。用 KGM染料亲和吸附剂分离的人血清白蛋白与人血清白蛋白标准品有同样的纯度 ,都达到了电泳纯。

猪血粉制备复合氨基酸工艺研究

本文采用正交试验法优选硫酸水解猪血粉制备复合氨基酸的最佳条件,经中试及工业规模生产证明:复合氨基酸收率平均为53.3％,氨基酸含量为72.7％。

猪血浆纤维连接蛋白的分离纯化和抗血清的制备

纤维连接蛋白(Fibronectin,FN)是一类结构上类似、免疫原性相同的高分子糖蛋白,具有广泛的生物学活性。根据在体内分布的不同,一般分为血浆型与细胞型两种,血浆型FN主要存在于血浆及体液中,又称可溶性FN。血浆FN含量对多种疾病的诊断和预后有重要意义。临床上采用FN的替代治疗血浆FN缺乏患者具有一定的疗效。为此,我们改进了从猪血浆中纯化FN的方法,制备了单价特异的兔抗猪血浆FN血清,初步探讨了免疫电泳检测FN的可能性。

猪血浆α_1-抗胰蛋白酶的分离纯化

α1-抗胰蛋白酶（α1-Antitrypsin,简称α1-AT）是由肝细胞分泌的一种糖蛋白,是存在于动物血液中的一种重要的蛋白酶抑制剂,它能抑制多种丝氨酸类蛋白水解酶,占血浆胰蛋白酶抑制总活力的90％以上。α1-AT通过调节蛋白水解酶的活性而参与机体的一系列生理活动,如血液凝固、纤维蛋白溶解、组织激肽释放、细胞融合、大分子装配和免疫反应等过程,对防止组织过度损伤有重要作用。目前国际上对人的α1-AT研究较多,而对猪α1-AT的研究甚少。

猪血浆α_2巨球蛋白部分性质的研究

对猪血浆α２巨球蛋白性质研究表明其大部分理化性质与人α２巨球蛋白十分相似。而且猪α２巨球蛋白也存在有活性的天然的Ｓｌｏｗ－Ｆｏｒｍ和构象发生变化并不可逆失活的Ｆａｓｔ－Ｆｏｒｍ。猪α２巨球蛋白经测定其ｐＩ为４．５５，５．１。紫外吸收光谱在２７６ｍｍ处有最大吸收，Ｅ＝９．１４。其糖含量为９．３％。氨其酸组成分析表明酸性氨基酸含量较高。圆二色谱分析说明分子中含有较多的β折叠。它还具有连接锌离子的性质。

ConA－Sepharose4B的制备及其对血浆糖蛋白的亲和效率

报道了ＣｏｎＡ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ的制备方法，经测定Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ对ＣｏｎＡ的偶联效率达８５％，该亲和凝胶对血浆糖蛋白有亲和吸附．其亲和效率为１．８ｍｇ（蛋白／ｍｌ凝胶）．

亲和层析法分离纯化猪血浆α_2-巨球蛋白

本文报道通过聚乙二醇分级沉淀,Cibacron Blue F3GA Sepharose4B染料亲和层析和Zn螯合Sepharose4B亲和层析从猪血浆中分离纯化的方法,经高pH不连续PAGE、低pH不连续PAGE和SDS-PAGE检测证明为电泳纯。N-末端氨基酸为丝氨酸,亚基分子量为182000。

胎盘绒毛细胞的培养及其基因组DNA的分离纯化

从采集到的微量胎盘绒毛,经过组织细胞培养,获得了大量的绒毛细胞,对其进行了基因组DNA的分离纯化,提取到足够量的DNA。经过0.8％琼脂糖凝胶电泳,结果显示出完整的绒毛细胞DNA带,得到了典型的大分子DNA电泳图谱。

L-丝氨酸溶解度的研究

本文采用光吸收法测定L-丝氨酸(L-Ser)的溶解度,以重量法校正溶剂的重量,得到L-Ser在纯水中溶解度的回归方程,S=13.565+1.1285 t(t=0—75℃)。同文献上0—40℃的L-Ser溶解度相比,其可靠性一致,r=1.0000,并首次测定了不同温度下L-Ser在不同浓度乙醇内的溶解度,研究了NaCl浓度对L-Ser溶解度的影响。

兔抗猪α_1－AT抗血清的制备及其效价测定

采用完全弗氏佐剂乳化抗原，成功地制备了兔抗猪α＿１－ＡＴ抗血清，经免疫双扩散反应为单一沉淀线，抗血清的效价为１：１．６。

猪血纤维蛋白溶酶原的纯化及性质研究

用偶联有L-赖氨酸的Sepharose 4B亲和柱对猪血纤维蛋白溶酶原进行分离纯化,所得酶原在酸性及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中显示单一蛋白质区带,在碱性条件下电泳及等电聚焦电泳表现出较明显的不均一性。还原及非还原SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得酶原分子量为88kD,经尿激酶激活后,进行还原SDS-凝胶电泳,出现两条新的蛋白质区带,分子量分别为63kD和26kD。酶原含中性糖1.35％,N-末端为异亮氨酸。尿激酶激活后产生的血纤维蛋白溶酶以对甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯为底物,测得Km为4.2m mol/L,V_(max)为13.5 IU。6-氨基已酸对酶活性有双重影响。此外,还观察了胰蛋白酶对猪血纤维蛋白溶酶原的激活。

猪血浆α＿1－蛋白酶抑制剂的部分性质研究

猪血浆α＿１－蛋白酶抑制剂的部分性质研究郑远旗，周昂，李建吾（生物系）在文［１］的基础上，我们对猪血浆α＿１－ＰＩ部分理化性质进行了研究。１材料和方法１．１材料与试剂猪血浆为成都肉联厂屠宰猪血经抗凝后离心所得；Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ，Ｓｅｐｈａｄｅｘ...

猪肠粘膜大分子肝素的研究

本文报导了用凝胶层析法从猪肠粘膜商品肝素中分离制备得到分子量最高达113 500d的几个大分子肝素,并且用碱降解法测定了其平均分子量,分别为He~Ⅰ:113 500、He~Ⅱ:60 256、He~Ⅲ:37 300。

小麦内切多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白的部分性质研究

报导了小麦ＰＧＩＰ的部分性质，小麦ＰＧＩＰ是一种糖蛋白，含糖量６．８９％，对热不稳定，等电点为９．１和９．４，它抑制ｅｎｄｏ－ＰＧ的最适ｐＨ是４．０～５．５。测定了ＰＧＩＰ亚基的氨基酸组成，ｐＨ、离子强度和温度对ＰＧＩＰ活性的影响。

还原糖法测定多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白活性的研究

研究了一种测定ｅｎｄｏ－ＰＧ和ＰＧＩＰ活力的方法──３，５－二硝基水杨酸试剂定糖法，并发现硫酸铵、ＥＤＴＡ对３，５－二硝基水杨酸试剂显色反应有抑制作用，ＮａＣｌ对ｅｎｄｏ－ＰＧ有抑制作用．同时还研究了某些因素对还原糖法测定ＰＧＩＰ活力的影响．