牛环曲病毒云南株纤突蛋白基因分子特征及进化分析

【目的】了解牛环曲病毒(Bovine torovirus,BToV)在云南部分地区牛群中的流行及其S基因遗传进化情况。【方法】采集云南省内13个地区15个牛场不同年龄牛的粪便样品655份,利用RT-PCR方法检测BToV,并对其中6株BToV阳性样品进行S基因扩增、克隆、测序及遗传进化分析。【结果】RT-PCR检测结果显示,655份牛粪便样品检出71份BToV阳性,总阳性率为10.8%;其中腹泻样品阳性率为21.2%(59/278),非腹泻样品阳性率为3.2%(12/377);1周龄、1周龄~1月龄、1~6月龄和1岁及上样品的阳性率分别为15.0%(3/20)、17.7%(20/113)、14.0%(45/321)和1.5%(3/201)。相似性分析结果显示,6条BToV S基因序列相似性为96.0%~99.8%,且与原始毒株Breda1的相似性为94.7%~96.0%,与国内流行毒株的相似性为95.2%~99.7%。遗传进化分析结果显示,6条S基因均与原始毒株Breda1不在同一大分支,与国内四川、河南毒株及土耳其毒株形成一个大分支,表明云南省BToV毒株与目前国内流行毒株一致,亲缘关系近。氨基酸突变位点分析结果显示,S基因存在少量独特的氨基酸突变位点。重组分析结果显示,BTOV-China/YN03-2021、BTOV-China/YN01-2021和BTOV-China/YN06-2022为重组序列,其中重组序列BTOV-China/YN06-2022得分最高,重组区域为1438~1609 bp区间,主要亲本为BTOV-China/YN05-2021;重组序列BTOV-China/YN03-2021,重组区域位于1668~3569 bp区域,主要亲本为土耳其毒株BToV-HT2-TUR(MG957146.1);重组序列BTOV-China/YN01-2021,重组区域位于261~2552 bp,主要亲本为土耳其毒株BToV-HT2-TUR(MG957146.1)。基因选择压力分析结果显示,BToV S基因的进化方式主要以中性选择为主,但同时也存在净化选择和正向选择的压力影响。【结论】本研究揭示了BToV已存在于云南省部分地区牛群体中且防控形势较严峻,可为中国研究BToV流行病学和BToV S基因遗传进化关系提供参考,同时也为云南地区制定BToV感染的防控措施提供理论依据。

布氏杆菌病检测技术的研究进展

综述了检测布氏杆菌病的新老方法。布氏杆菌病(Brucellosis)在全球引起巨大的经济损失,对人危害严重,基因苗即将为其防制提供保障。认为,细菌学检验和凝集试验测将淘汰;沉淀试验和补体结合试验不理想;放射免疫试验不能广泛运用;变态反应主要用于绵羊,也用于山羊的筛检,不作山羊个体的诊断依据。竞争酶联免疫吸附试验尚无诊断标准。间接酶联免疫吸附试验是一种先进、快速、可靠的新方法,但不能区别疫苗抗体与致病株抗体。PCR可检1pg的布氏杆菌DNA,应用细菌DNA检测是最可靠的方法。最近建立的荧光探针分析可在野外快速准确地诊断,可用于家畜和野生动物的检测。

红薯藤地面青贮品质评价及经济效益分析

为了保持和贮存好红薯藤的多汁性,采用葡萄渣、细米糠、麦麸作为吸附剂进行地面青贮,结果鲜红薯藤与红薯藤地面青贮的干物质、粗蛋白、粗脂肪和灰分差异极显著(P<0.01);干物质量鲜红薯藤低于红薯藤地面青贮;葡萄渣、细米糠、麦麸与红薯藤混合的地面青贮饲料的差异不显著(P>0.05)。红薯藤地面青贮饲料的粗蛋白和粗脂肪是新鲜红薯藤的10倍,红薯藤地面青贮饲料总体品质评价高于新鲜红薯藤。红薯藤地面青贮饲料养猪每增重1 kg的直接成本为3.10元,而对照组为3.62元;日增重比对照组高100 g,可提前10 d出栏。

全株甘蔗+全株大麦混合青贮技术研究

为探讨全株甘蔗+全株大麦青贮技术,将由于旱灾不能成熟作为榨糖原料的全株甘蔗和全株大麦铡细混合青贮后饲喂肉牛,青贮成熟45 d后取样分析养分。结果表明:①全株甘蔗+全株大麦铡细混合青贮制成率67.58%(393.3/582),制成可饲用率99.69%;②全株玉米青贮的DM 95.27%、CP 4.42%、EE 1.74%、Ash 4.73%、Ca 0.060%、P 0.050%、NDF 55.77%和ADF 32.96%,而全株甘蔗+全株大麦青贮后的各营养成分分别为94.16%、9.37%、2.82%、6.98%、0.289%、0.166%、34.62%和24.14%;③2012年榨季不能达标榨糖的全株甘蔗收购价250元/t,按照平均产量60 t/hm2,产值达15 000元/hm2。全株甘蔗+全株大麦青贮技术获得成功,为今后甘蔗及其副产物利用提供了技术参考。

云南省某牛场牛轮状病毒检测及遗传进化分析

为查明云南省某牛场牛轮状病毒(BRV)感染情况,本研究采集了94份临床疑似感染BRV的牛粪便样本,提取RNA,设计特异性引物进行RT-PCR扩增,阳性产物测序结果提交NCBI进行序列分析。94份牛粪便样本中有11份检测出BRV阳性,感染率为11.7%;通过序列分析发现测序株BRV-YNDL-2023株与爱尔兰毒株CIT-A18同源性最高,为98.8%。本次检测分析结果明确了该牛场存在BRV的流行,为云南省牛场BRV的免疫防控措施提供参考。

云南景谷县粮改饲种植青贮玉米红单10号效果分析

为实施好农业部粮改饲计划,在云南省景谷县开展青贮玉米红单10号试验示范,施用农家肥45t/hm^2,钙镁磷900 kg/hm^2,玉米专用复混肥(总养分≥25%,氮15%、磷5%和钾5%)3 t/hm^2。条播种量45~60 kg/hm^2,行距40 cm,株距20 cm,密度应为7 000株/hm^2以上,生育期91 d,青贮玉米处于乳熟后期时收获。每个测产区4个重复,测产样方为4 m×5 m=20 m^2。同时,测定株高、叶片总数、枯叶片数、单株重量等。测定表明平均全株鲜秸秆总产量112.90±4.91 t/hm^2,密度111 088.25±1 277.66株/hm^2,株高3.24±0.15 m,叶片总数15.75±0.50片,枯叶总数3.00±0.00片,单株重量1.07±0.07 kg/株。根据从当地相同区域内种植不同农作物的产量及产值统计看出:产值分别为种植青贮玉米达到39 515.88元/hm^2,甘蔗11 340.00元/hm^2,玉米籽粒12 000.00元/hm^2。以种植玉米籽粒的产值为1进行比较,种植青贮玉米的产值是玉米籽粒的3.29倍,种植甘蔗最低,仅是玉米籽粒的95%。说明粮改饲计划及其实施是农民增收、农业增效和农业产业结构调整的重要途径,在提高单位面积产出方面具有重大意义。

武定鸡肠黏膜乳酸菌的分离鉴定及应用

为进一步挖掘益生菌资源,从武定鸡黏膜分离鸡源乳酸菌,共分离到20株乳酸菌,分别命名为LacC1~LacC20。根据培养特性、革兰氏染色、生理生化特性和16s-rRNA方法等鉴定为7个种。并通过乳酸菌益生特性试验筛选出3株优良菌株,进行雏鸡饲喂试验。结果表明在雏鸡的饮水中添加乳酸菌,可以明显增加武定鸡的日增重、法氏囊和脾脏等免疫器官的重量和鸡群肠道中乳酸菌含量,提高鸡免疫器官指数和外周淋巴细胞指数SI,降低料肉比和死亡率。

全株甘蔗与全株大麦混合青贮试验

将由于旱灾未能成熟的全株甘蔗与全株大麦铡细,按照1∶1的比例混合青贮,并以全株玉米青贮作为对照,待青贮原料封严后45d取样分析营养成分,并饲喂牛只研究其饲用价值。结果发现:全株甘蔗与全株大麦混合青贮制成率为67.58%,制成可饲用率为99.69%,与全株玉米青贮相近;全株甘蔗与全株大麦混合青贮的DM、CP、EE、Ash、CF、Ca、P、NDF和ADF分别为94.16%、9.37%、2.82%、6.98%、19.75%、0.29%、0.17%、34.62%和24.14%,全株玉米青贮则分别为95.27%、4.42%、1.74%、18.22%、4.37%、0.06%、0.05%、55.77%和32.96%;将不能作为榨糖原料的全株甘蔗与全株大麦混合青贮,实现甘蔗产值15 000元/hm2。试验表明,全株甘蔗与全株大麦混合青贮技术研究获得成功,为今后甘蔗及其副产物利用提供了技术参考。

云南猪源乳酸杆菌的筛选及应用

为进一步开发猪源益生菌资源,从昆明屠宰场猪小肠样品中分离纯化出25株乳酸菌,经过表型鉴定和16S-r RNA鉴定均为乳酸杆菌,包括6个菌种。经过抗逆性环境分析筛选获得一株敏捷乳杆菌,其生长性能好、耐酸耐胆盐能力强、肠黏附效果好,适合作为益生菌制剂的候选菌种。将该菌种应用于仔猪生产,能促进仔猪生长、提高饲料利用率、减少腹泻发生,对仔猪生产性能上产生有益影响;能提高仔猪血清中免疫球蛋白含量、细胞因子水平和淋巴细胞的增殖指数。

红薯藤地面青贮育肥PIC猪试验

为了探索用红薯藤地面青贮育肥猪的效果,在东川荣森良种猪试验场开展试验。用断奶的PIC猪36头,分为三组,每组12头;在粗饲料不同精料相同的条件下,对照组按常规饲养法饲喂,试验组的粗饲料用红薯藤地面青贮(对照组,试验组2个重复)。在同一栋猪舍内经过72d的饲养试验。结果试验组全期平均日增重(ADG)920g,对照组820g,试验组比对照组高100g,增加12.19%;试验组每头猪增加出栏体重8kg,按市价8元/kg计算,增加收入64元,36头猪共增加收入2304元。试验证明红薯藤地面青贮养猪成功,该技术应大力推广应用。

2013年云南省禽流感病毒H9N2亚型监测及其血凝素基因序列分析

为了解H9N2亚型禽流感病毒（AⅣ）的变异情况,本研究对2013年云南省16个地区的3 622份家禽临床样品进行AⅣ的鸡胚分离和RT-PCR检测,其中分离鉴定到97份H9N2亚型AⅣ分离株,并选取21个分离株进行HA基因测序及系统进化分析,结果表明：21份H9N2亚型AⅣ分离株的HA基因核苷酸序列同源性为86.0 ％～99.4％,均属于欧亚分支的类A/Chicken/BeiJing/1/1994亚分支,而且又进一步划分为Ⅲ-1、Ⅲ-2两个小分支.其中Ⅲ-2分支为云南地区新出现的进化分支.氨基酸比对分析显示,测序的21个HA基因编码蛋白的裂解位点基序均具有低致病性病毒分子特征;与现用疫苗株相比,HA推导氨基酸序列中存在多个氨基酸位点差异;其中,Ⅲ-1与Ⅲ-2分支的AⅣ的HA氨基酸序列多个位点存在各自特有的点突变（氨基酸替换）,这种变异具有一定的进化（亚）分支特异性.此外,HA基因多个受体结合位点氨基酸存在变异,其中234位氨基酸全部变为L,呈现了人流感受体结合特性;部分糖基化位点、抗原表位关键性氨基酸也存在变异.

云南地区部分猪场猪呼吸道疾病综合征致病病毒感染的流行病学调查

为了解云南地区猪场猪呼吸道疾病的流行病学,从而为有效防制该疾病提供科学依据,利用ELISA和RT-PCR方法检测了春、夏、秋、冬四季,云南地区不同区域规模养殖场1 164份血清和全血样品中的猪瘟抗原、猪繁殖与呼吸综合征抗原、猪伪狂犬gE抗体、猪圆环病毒2型特异抗体。结果显示:猪瘟抗原阳性率为11.34%,猪圆环病毒2型抗体阳性率为50.86%,猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性率为35.40%,猪繁殖与呼吸综合征抗原阳性率为44.51%。表明云南地区规模化猪场存在猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病野毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒感染,不同季节和猪群年龄阶段感染情况有一定差异性。

植物生长调节剂对离体香蕉叶片愈伤组织诱导的影响

以＂巴西＂香蕉品种的试管芽为材料,MS＋6-BA 4.0 mg/L＋NAA 0.1 mg/L＋蔗糖30 g/L＋琼脂5.0 g/L为芽增殖培养基,研究植物生长调节剂对离体香蕉叶片愈伤组织诱导和增殖的影响。结果表明,影响香蕉叶片愈伤组织诱导的主要因素是生长素,而细胞分裂素和赤霉素对其影响较小。其中,2,4-D是影响诱导香蕉叶片愈伤组织发生的重要因素。单独使用2,4-D就可以成功诱导出水浸状愈伤组织,且诱导率为100%;2,4-D浓度在0.5~2.0 mg/L时,愈伤组织可在继代过程中分化成白色致密形态的愈伤组织。当2,4-D和NAA共同作用时,能够在继代过程中将水浸状愈伤组织继续分化成浅绿色颗粒状愈伤组织。

西南地区肉牛产业区域比较优势分析

利用2009—2018年全国及西南各地国民经济及畜牧业相关数据,采用不同要素比率分析法,定量分析了西南地区肉牛业的资源禀赋系数、综合优势指数和专门化系数,对不同指标进行了相关性分析。结果表明:(1)西南地区作为我国传统的肉牛主产区域,近年来发展迅速,牛存栏规模平均占全国的36.6%,但牛肉产量平均仅占全国的18.9%;(2)西南地区内部在养殖规模、资源禀赋、综合比较优势及发展速度等方面差异较大,西藏资源禀赋及综合比较优势突出,四川有养殖规模优势,贵州有发展速度优势,云南兼具规模、资源禀赋和综合比较优势,广西和重庆无比较优势,区域内优势差异未发生实质性改变;(3)资源禀赋系数、综合优势指数和专门化系数测算结果具有极强的正相关性,相关结果可以相互印证。结论:(1)西南地区肉牛业长期具有较强的资源禀赋优势,但不具备综合比较优势;(2)西南地区肉牛业区域比较优势顺序为:西藏>云南>贵州>四川>广西>重庆;(3)云南兼具规模、资源禀赋和综合比较优势,贵州发展潜力大,两省可将肉牛业作为产业发展重点;(4)云南、贵州两省应根据当地特点,通过优化资源配置,扩大养殖规模,引导肉牛产业走规模化发展道路,加快肉牛业从资源禀赋优势向综合比较优势转化。

不同粗饲料水平和补充脂肪对奶水牛采食量和泌乳性能的影响研究

本试验选用30头第一泌乳中期的奶水牛,分为5组(1个对照组和4个试验组),每组6头。分别饲喂不同水平的高粗料和补充脂肪日粮。结果表明:①奶水牛喂75%粗饲料日粮,减重约2.5kg;奶水牛喂65%粗饲料,高脂肪(7.5%)和中等脂肪(5.0%)日粮,分别增重3和6 kg。体重比较有极显著差异(P<0.01)。②粗饲料水平和脂肪水平对干物质采食量有极显著影响(P<0.01)。奶水牛喂75%粗饲料与65%粗饲料日粮比较,有较低的干物质采食量(19.7与21.3 kg/d)。奶水牛喂试验日粮,干物质采食量变化相似。③奶水牛喂对照和试验日粮,日均产奶量分别为8.5和8.2 kg,喂高粗料(75%)和高脂肪(7.5%)产奶较少(分别为8.1、8.2、8.25和8.35 kg/d)。在所有试验和对照日粮每千克干物质产奶量差异极显著(P<0.01)。对所有日粮,干物质采食量随时间推移而下降。

不同糖蜜量对肉牛育肥效果的研究

[目的]为了探讨肉牛育肥过程中的糖蜜用量。[方法]从120头西杂牛中随机选48头,分为8组,每组6头。以四个处理2个重复进行试验;Tr1为对照组,饲喂全株玉米秸青贮加精料;Tr2=Tr1+糖蜜1 kg,Tr3=Tr1+糖蜜2 kg,Tr4=Tr1+糖蜜3 kg。试验期100 d,其中预试期10 d,试验期90 d。每30 d称重1次,在上午空腹称重。本试验数据采用SAS软件进行统计分析。[结果]表明:添加甜蜜的各组与对照组比较,净增重均有显著性差异(P<0.05),Tr1平均净增重为83.88 kg,显著低于(P<0.05)添加糖蜜的Tr2、Tr3和Tr4,各试验组中以Tr3添加糖蜜2 kg,净增重效果最好,为119.83 kg,显著高于试验各组;同样添加糖蜜的各组ADG与对照组比较差异显著(P<0.05),Tr1为0.92 kg,显著低于(P<0.05)添加糖蜜的各组。[结论]表明添加2 kg糖蜜的Tr3肉牛的增重效果好而经济,头均比Tr1增收入556.67元。

云南黄牛杂交改良效果分析

[目的]为了提高云南黄牛的生产性能,优选主要的杂交改良父本,开展云南黄牛杂交改良。[方法]用西门塔尔牛、短角牛、安格斯牛、海福特牛等分别与云南黄牛母本杂交,测定不同杂交组合后代初生、6月龄、12月龄、24月龄的体重体尺。[结果]云南黄牛经过杂交改良后,改良效果良好,杂交后代对云南高原的气候条件适应性良好。在农村饲养条件下,西×云杂一代牛初生重平均为24.57kg,6月龄体重平均为135.83kg,12月龄体重平均为196.21kg,24月龄体重平均为344.24kg,分别比本地黄牛提高74.13%,59.20%,56.53%和78.10%。短×云杂交一代牛初生重平均为22.28kg,6月龄体重平均为117.20kg,12月龄体重平均为193.56kg,24月龄体重平均为314.86kg,分别比本地黄牛提高57.90%,38.10%,54.21%和62.90%;安×云杂交一代牛犊牛初生重平均为21.21kg,6月龄体重平均为134.34kg,12月龄体重平均为196.18kg,24月龄体重平均为268.45kg,分别比本地黄牛提高50.32%,57.45%,56.51%和38.89%;海×云杂交一代牛初生重平均为22.78kg,6月龄体重平均为124.97kg,12月龄体重平均为190.52kg,24月龄体重平均为289.50kg,分别比本地黄牛提高61.45%,46.47%,51.99%和49.78%。[结论]西×云杂一代牛、短×云杂交一代牛、安×云杂交一代牛和海×云杂交一代牛生产性能显著提高,效益明显。

全株甘蔗与全株大麦混合青贮饲养肉牛效果观察

为研究不同青贮饲料饲养肉牛的效果,选择18月龄左右的健康西门塔尔杂交牛40头,随机分成2组,试验组饲喂全株甘蔗与全株大麦混合青贮+精料,对照组饲喂全株玉米青贮+精料,进行100d的饲养试验。结果发现:试验组肉牛平均日增重在前、中、后及全期分别为1050、1530、1470和1350g,对照组分别为980、1120、1070和1060g;试验组肉牛在消耗精料2274kg、青贮饲料21298kg的情况下增重1220 kg,对照组肉牛在消耗精料2272 kg、青贮饲料21326 kg的情况下增重950 kg;试验组肉牛每头盈利2499.9元,对照组肉牛每头盈利1554.1元。本试验表明,全株甘蔗与全株大麦混合青贮饲养肉牛效果较好,值得推广和应用。

育肥猪饲料添加紫花苜蓿饲养试验

为了探讨育肥猪日粮中适宜添加的紫花苜蓿量,在寻甸随机选择了48头PIC猪进行育肥试验,分为3个处理2个重复,Tr1仅用精料,而Tr2和Tr3在Tr1的基础上添加不同量的紫花苜蓿。经过90 d的育肥试验,结果表明,全期净增重从高到低排列顺序为Tr2最高为78.69 kg和874.31 g,Tr3次之为70.81 kg和786.81 g,Tr1最低为68.25 kg和758.33 g。统计分析结果为,Tr2净增重78.69 kg,ADG为874 g,均显著高于(P<0.05)Tr1(对照组)和Tr3,说明育肥猪日粮中添加紫花苜蓿量以每天2 kg/h为宜。从经济效益方面分析,在2009年6月育肥猪市场价格9元/kg的情况下,养育肥猪是亏损的,而正常年份是可以盈利的。