Co-IP联合质谱分析筛选中华蜜蜂气味受体OR1和OR2的互作蛋白

【目的】中华蜜蜂(Apis cerana cerana)是我国特有的蜜蜂品种,其高度灵敏的嗅觉系统能在复杂气味环境中识别群体内化学信号以及区分食物源散发的特异性气味分子,气味受体(Odorant receptors,ORs)在中蜂识别气味分子的行为过程中起到了重要而又关键的作用。通过分析筛选OR1和OR2的互作蛋白,为深入探究OR1和OR2蛋白在蜜蜂嗅觉系统中的功能提供理论依据。【方法】通过构建OR1和OR2基因的真核表达载体pFastBac-OR1和pFastBac-OR2载体,转染Sf9细胞,提取细胞总蛋白,利用免疫共沉淀(Co-IP)联合质谱分析技术筛选鉴定与OR1和OR2互作的细胞蛋白,并对这些互作蛋白进行GO功能注释、KEGG信号通路和蛋白互作网络分析。【结果】IP组和IgG组重组蛋白在细胞内得到正确表达,利用Co-IP联合质谱分析技术共筛选到273个与OR1互作的细胞蛋白和204个与OR2互作的细胞蛋白,主要为微管蛋白、热休克蛋白、核糖体蛋白等。对这些蛋白进行GO功能富积分析,发现这些蛋白质涉及多种生物学功能,包括RNA剪接、核糖体和能量运输有关。KEGG信号通路分析结果表明互作蛋白参与调节了多条细胞内的重要通路,包括核糖体、剪接体、RNA转运等与核糖体相关的通路,丙酮酸代谢、硫胺素新陈代谢、脂肪酸生物合成、淀粉和蔗糖代谢、FoxO信号通路,Hedgehog信号通路等。【结论】OR1和OR2可能通过与多种蛋白直接或间接的相互作用调控并影响其嗅觉感受。

畜牧学科青年研究生导师指导能力提升机制的探讨

青年研究生导师的质量对研究生培养成效至关重要。山西农业大学畜牧学科近年来发展迅速,越来越多的青年导师加入研究生导师队伍。青年导师拥有诸多优势,但处于研究生培养的起步阶段,存在指导经验和能力不足,教学、科研工作繁多,对优质生源吸引力不强等问题,使得他们在研究生培养过程中遇到很多困难,会在一定程度上制约着畜牧学科青年导师队伍的建设和发展。文章探讨了青年研究生导师能力提升路径与青年导师队伍建设的发展思路,旨在为畜牧学科青年研究生导师培养、队伍建设、管理机制的完善,进而提高研究生培养质量提供参考。

公安机关侦办串通投标犯罪案件面临的挑战与应对策略

上世纪八十年代我国引入了招投标制度,这种交易方式对合理、高效配置市场资源,促进公平竞争营商环境建设起到了重要作用。与此同时,不法分子在利益驱动下,利用相关规范不完善、法律相对滞后等制度漏洞,实施串通投标的行为愈演愈烈。近年来,由于受疫情影响,招投标方式发生了变化,串通投标犯罪手段随之变得更加隐蔽,团伙化、职业化特征明显,涉案人员趋向多元化,给公安机关线索获取、案件定性、调查取证、数据分析等打击治理工作带来诸多挑战。对此,应及时变革侦查思维及模式,积极打通数据通道,多元化获取案件线索,利用数据化实战手段突破壁垒,形成多警种、多部门融合侦查的全新办案模式,为全面打击串通投标犯罪赋能增效。

吕梁山区中蜂管理现状调研及发展建议

本文基于36份调查问卷结果,分析吕梁山区(山西三市与陕西榆林市)的中蜂蜂群现状。研究发现吕梁山区的养蜂业在饲养规模、组织化程度和养蜂技术等方面具有一定的基础,但仍面临诸多挑战,如蜂蜜销路不畅、价格不理想、人力不足和蜜源不佳、收入不稳定、病虫害、蜜源不足和授粉服务市场待开发等问题。为了促进养蜂业的可持续发展,提出针对性建议,以期为当地养蜂业的发展提供数据支持。

基于准PR调节器的三电平单相逆变器分岔现象研究

以2H桥级联式三电平单相逆变器为研究对象,利用频闪映射方法建立逆变器数学模型,利用分岔图、折叠图分析该逆变器的非线性现象,确定其稳定工作范围,对深刻理解和认识2H桥级联式三电平单相逆变器工作稳定性具有一定的意义,为提高逆变器系统工作稳定性能的设计和调试提供依据。

9种中药益生菌复方抗病毒性炎症功效的比较

目的 了解9种中药益生菌复方抗病毒性炎症的能力。方法 MTT实验评估9种中药益生菌复方的生物安全性;利用聚基胞苷酸[poly(I:C)]诱导巨噬细胞RAW 264.7发生炎症反应,检测细胞上清液中白细胞介素6(IL-6)水平。Poly(I:C)诱导绿色荧光蛋白标记中性粒细胞的斑马鱼鱼鳔发生炎症反应,统计鱼鳔处中性粒细胞水平。结果 9种中药益生菌复方中,复方8和9号对poly(I:C)诱导RAW264.7细胞发生炎症反应表现出剂量依赖性的抗炎功效,复方4和7号仅在高剂量时可抑制细胞炎症反应(P<0.01或0.05)。高剂量6、8号复方及中高剂量9号复方斑马鱼鱼鳔处中性粒细胞个数均少于模型对照组(P<0.01或0.05)。结论 9种中药益生菌复方中9号复方的抗炎效果最好,对poly(I:C)诱导RAW 264.7细胞释放炎症因子IL-6抑制率最高,并且在poly(I:C)诱导的斑马鱼炎症模型中能显著阻断中性粒细胞向鱼鳔处迁徙,具有较高的抗病毒性炎症功效。

高职院校创新型人才培养路径探究

人才强国战略对高职院校培养创新型人才提出了新的要求,探索营造开放宽松的创新氛围、组建交叉成长型团队、重构三层递进式教学项目、搭建创新实践教学平台等创新型人才培养路径,为提升高职院校人才培养质量提供有力支撑。

白细胞介素10基因多态性和多囊卵巢综合征遗传易感性的研究

目的 探讨白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)基因rs1800871 A/G的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNP)和rs1800872 T/G SNP与多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome, PCOS)患者遗传易感性。方法 通过SNaPshot SNP分型方法共分析了121例PCOS患者和158例健康对照IL-10基因rs1800871 A/G和rs1800872 T/G的单核苷酸多态性。结果 病例组体重指数、肥胖家族史阳性、T水平高于对照组,FSH水平低于健康对照组(P<0.05)。采用SHEsis软件对这两个多态性位点进行分析显示,两个位点存在完全连锁现象(D'=1)。病例组与健康对照组基因型构成和等位基因差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,肥胖家族史、IL-10基因rs1800871A/G单核苷酸多态性是PCOS发病的危险因素(P<0.05)。结论 IL-10基因rs1800871 A/G增加了对PCOS的遗传易感性,携带AG和GG基因型可能增加了PCOS的发病风险。

基于Fink模式的情境模拟培训对神经外科护士学员自我效能压力知觉及共情能力的影响

目的探讨基于Fink模式的情境模拟培训对神经外科护士学员自我效能感、压力知觉及共情能力的影响。方法基于Fink课程设计模式制定神经外科护理临床实践培训方案,并对郑州大学第一附属医院神经外科专科护士学员实施培训。比较培训前后学员的一般自我效能感量表(GSES)、压力知觉量表、杰弗逊共情量表(JSE-HP)、综合测评试卷评分,培训后采用课程质量及教学质量评价表评价学员对培训的满意情况。结果培训后,学员的GSES、JSE-HP总分及各维度评分和综合测评试卷评分均高于培训前,压力知觉量表评分低于培训前(P<0.01);学员对课程质量及教学质量评价满意度总分为(93.08±0.60)分。结论基于Fink模式的情境模拟培训有助于提高神经外科护士学员的自我效能感、共情能力和综合素质,同时降低了压力水平,培训满意度较高,具有临床适用性。

稠油油藏大段塞调驱后提高采收率新技术及应用

H1块为普通稠油区块,开展多轮次调驱后,取得较好的增油效果。但随着大段塞调驱剂注入,后期压力维持在较高水平,含水率持续上升,同时注入井吸水能力下降,油井产液能力下降,产量递减加大,亟需有效开发接替技术。为进一步改善开发现状,室内设计了在大段塞调驱段塞后,注入降黏剂进一步提高采收率。室内通过大量实验,筛选出了具有良好降黏性以及界面活性降黏剂JN-1,当质量分数达到0.2%时,降黏率可达82.0%,降低油水界面张力至4.72×10^(-3)mN·m^(-1)。室内物模实验表明,在注入0.3PV调驱段塞后,继续注入0.2%降黏剂段塞0.3PV,可充分启动残余油,进一步提高采收率16.8%。现场开展降黏驱4井组先导实验,设计注入质量分数0.2%、0.14 PV降黏剂,注入后平均单井日增油0.8 t,综合含水率下降6%。

包头地区295例VVC分离株的菌种分布及药物敏感性分析

目的:探讨包头地区外阴阴道念珠菌病(vulvovaginal candidiasis,VVC)患者感染念珠菌菌种分布特点及对抗真菌药物的敏感性,为临床精准治疗提供参考。方法:收集2021年1月至12月295例VVC患者阴道分泌物进行分离培养,应用MALDI-TOFMS、PCR方法完成菌种鉴定,按照CLSI M27-S4标准采用微量肉汤稀释法进行9种药物体外药敏试验。结果:感染患者以31~35年龄段最多见(30.85%),其次是26~30年龄段(20.34%),21~40年龄段患者占82.04%,性生活、妊娠等易感因素在VVC中占比较大;共分离鉴定出非重复菌株295株,白念珠菌居首位占79.32%,光滑念珠菌次之占13.90%,尼瓦利亚、布加拉等少见念珠菌共7种各1株;白念珠菌对伊曲康唑的耐药率高于非白念珠菌(P<0.01),二者对氟康唑、伏立康唑和泊沙康唑耐药情况差异无统计学意义(P>0.05),非白念珠菌对卡泊芬净和5-氟胞嘧啶的耐药率高于白念珠菌(P<0.01);未发现制霉菌素耐药菌株,所有菌株对两性霉素B的敏感性均为100%,对特比奈芬的耐药率均很高。结论:包头地区VVC患者感染菌种多样,以白念珠菌多见,但不同菌种念珠菌对常用抗真菌药物敏感情况差异较大,应定期进行持续的耐药监测,以便指导妇科医生制订正确的诊疗方案,同时延缓耐药性的产生。

河道砂石运输自动监管系统设计与实现

河道砂石采运管理单在砂石采运过程中发挥了重要作用,但难以对砂石进行精确计量且不适用于中小河流旱采等应用场景。利用数据监听、图像识别、物联网等技术手段,结合各砂场运营特点设计出了地磅开单、皮带秤监管、打印机监听等自动化数据采集监管手段,实现了砂石运输过程自动监管。目前,该监管系统已全面应用于四川省砂石采运管理大数据平台,数据采集过程实时准确可靠,在解决工作人员现场监管人力不足的同时可有效提高监管的效率,实现了对水运采运管理单的管理延伸。

盆腹腔原发性室管膜瘤临床病理观察及文献复习

目的 总结盆腹腔原发性室管膜瘤的临床病理特征、诊断要点及治疗和预后情况。方法 总结经北京协和医院会诊确诊的1例及文献报道的共30例盆腹腔原发室管膜瘤病例。结果 本例患者女性,34岁,B超显示左侧髂窝边界清楚的弱回声团块,于外院行肿瘤细胞减灭术,术中见左髂窝实性肿物,包膜完整,质地中等。镜下见肿瘤组织排列成筛管状、实性、乳头状及腺样,可见菊形团,核分裂象罕见。免疫组化肿瘤细胞EMA、D2-40呈核旁点状阳性,GFAP、ER、PR、PAX-8、S-100和WT-1不同程度阳性。结论 盆腹腔原发室管膜瘤十分罕见,多见于年轻女性,误诊率高,ER、PR、WT-1和PAX-8免疫组化有较高的表达率。治疗以手术及术后化疗为主,肿瘤易复发,但死亡率低。

高温高压合成含硼金刚石的研究进展

在掺杂金刚石中,含硼金刚石凭借其诸多优良的物化性能成为了近年来的研究热点之一。文章简单介绍了含硼金刚石的结构特征和性能,并以触媒掺硼和石墨掺硼两个分类,对高温高压合成含硼金刚石近年来的研究进行了概括综述。并对采用石墨层间化合物配合触媒合成含硼金刚石进行了总结分析,探讨目前含硼金刚石在导电性能方面所面临的难题,并对其发展进行了展望。

警察院校艺术实践课程教学与公安基层共享共建创新实践研究——以浙江警察学院为例

近十年警察院校艺术实践课程的教学、竞赛在与基层的合作过程中积累了丰富的经验,通过开展警察院校艺术实践课程与公安基层共享共建创新实践研究,形成了完整的警察院校专属艺术实践教学课程体系、教学内容、实践项目、人才、成果。文章对公安院校艺术教育进行研究,对公安宣传人才培养的可能性、应用性、多样性进行了探索。警察院校艺术教育与公安基层宣传工作相辅相成,共同参与公安人才培养与公安宣传工作的创新与发展。

中华蜜蜂Smoothened基因的鉴定、表达及生物信息学分析

旨在明确中华蜜蜂Smoothened基因(AcerSmo)的序列特征及表达特性,为进一步研究其在蜜蜂体内的功能奠定理论基础,对中华蜜蜂AcerSmo基因DNA序列进行扩增鉴定,运用多种生物信息学软件对其进行结构和功能分析,并采用RT-qRCR对中华蜜蜂不同组织和发育时期的表达特性进行检测。序列分析结果表明,基因cDNA全长3 495 bp(GenBank登录号:OP616035),其中开放阅读框(ORF)区域2 952 bp,共编码936个氨基酸。该蛋白理论分子质量为111.15 ku,理论等电点为8.82,属于不稳定的两性蛋白。该蛋白N-末端有一段含21个氨基酸的信号肽,有6个跨膜结构域,亚细胞定位主要在内质网和细胞核。该蛋白二级结构和三级结构以无规则卷曲(50.76%)为主,其次为α-螺旋(25.33%),从昆虫到哺乳动物,AcerSmo蛋白序列高度保守;荧光定量PCR结果表明,AcerSmo在30日龄中华蜜蜂不同组织中均存在表达,而在触角与头的表达量显著高于其他组织,在中华蜜蜂触角与头组织中,5日龄时AcerSmo的mRNA表达量最高。AcerSmo蛋白具有Smoothened蛋白的保守结构,且在触角中呈高丰度表达,推测AcerSmo基因可能在蜜蜂的嗅觉识别过程发挥着重要作用。

意大利蜜蜂防御素-2蛋白序列分析及表达特性研究

【目的】对意大利蜜蜂(Apis mellifera)防御素-2蛋白(Defensin-2,Def-2)进行蛋白序列分析和表达特性研究,以期为意大利蜜蜂防御素基因的免疫防御机制、发育和代谢途径研究提供理论基础。【方法】利用生物信息学在线网站及软件对Def-2蛋白进行预测分析,并采用实时荧光定量PCR对意大利蜜蜂不同发育时期(幼虫期、蛹期及1、5、10、15、20、25和30 d成年期工蜂)的基因相对表达量进行检测分析。【结果】意大利蜜蜂防御素-2基因(Def-2)编码104个氨基酸残基,相对分子量为11858.90 Da,理论等电点(pI)为8.54,为两性不稳定蛋白。该蛋白N-末端有一段含21个氨基酸的信号肽,存在1个跨膜结构域,亚细胞主要定位于内质网、液泡和高尔基体,无糖基化位点,存在15个磷酸化位点,其二级结构以无规卷曲(54.81%)为主、延伸链(28.85%)分布较多,α-螺旋(16.35%)分布较少,蛋白序列高度保守,与Def-1、GB44032-PA、Dl-2、Imd等蛋白存在基因互作关系,具有防御蛋白样结构域(DEFL),结构域采用以半胱氨酸稳定的α/β支架为特征的结构,亲缘关系与小蜜蜂极为相近。Def-2基因在意大利蜜蜂不同发育时期的表达水平存在差异且随日龄增大而升高,30 d的相对表达量显著高于其他日龄(P<0.05)。【结论】意大利蜜蜂Def-2蛋白属于两性不稳定蛋白,参与细胞间信号传输并维持细胞正常形态;蛋白序列高度保守,亲缘关系与小蜜蜂最近,且该基因在30 d成年期工蜂中高丰度表达,推测其可能调节免疫基因转运而影响蜜蜂的免疫识别过程。

复配维生素营养强化剂中维生素K_(1)的稳定性研究

目的了解特殊医学用途配方食品原料复配维生素内维生素K_(1)在车间光照和加速试验下含量的变化情况。方法将复配维生素置于540 lx车间日光灯照射进行光照实验,分别在光照0、5、10、15、20、30、60和120 min后取样检测;将复配维生素置于温度(37±2)℃、相对湿度(75±5)%条件下进行加速实验,分别在第0、1、3个月取样检测。结果复配维生素在车间日光灯照射0~120 min维生素K1的衰减率均小于10%。在温度(37±2)℃、相对湿度(75±5)%条件下加速1、3个月后维生素K1衰减率均为-0.52%。结论复配维生素中维生素K1在光照2 h、温度(37±2)℃、相对湿度(75±5)%条件下加速3个月内较为稳定。

外涂红色诺卡氏菌细胞壁骨架制剂对人乳头瘤病毒感染并宫颈上皮瘤变患者宫颈环形电切术后人乳头瘤病毒转阴和阴道微生态的影响

目的探讨外涂红色诺卡氏菌细胞壁骨架制剂(Nr-CWS)对人乳头瘤病毒(HPV)感染并宫颈上皮瘤变(CIN)患者宫颈环形电切术(LEEP)术后HPV转阴率和阴道微生态的影响。方法采用随机数字表法将2019年1月至2022年1月于邯郸市妇幼保健院妇科就诊的95例HPV感染并CIN患者分为观察组(n=48)和对照组(n=47),所有患者均行LEEP治疗,对照组术后予常规治疗,观察组在此基础上予Nr-CWS治疗,连续治疗3个月。比较两组HPV转阴率、阴道微生态情况,检测外周血T细胞亚群及宫颈局部干扰素(IFN)-γ、白介素(IL)-2及IL-10水平。结果治疗2个月、3个月后,观察组HPV转阴率明显高于对照组(54.17%vs.30.42%、72.92%vs.51.06%,P<0.05)。治疗后,观察组阴道微生态异常率显著低于对照组(29.17%vs.59.57%,P<0.05)。治疗后,两组外周血CD3^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)及阴道灌洗液IFN-γ、IL-2较治疗前升高,而阴道灌洗液IL-10降低,且观察组上述指标优于对照组(P<0.05)。结论外涂Nr-CWS可提高HPV感染并CIN患者LEEP术后HPV转阴率,纠正阴道微生态,其机制可能与提高外周血T淋巴细胞和宫颈局部免疫因子有关。