PI3K抑制剂林普利塞对弥漫大B细胞淋巴瘤的体外抗肿瘤效应

目的探讨PI3K抑制剂林普利塞(Linperlisib,YY-20394)对弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B-cell lymphoma,DLBCL)的抗肿瘤效应及其作用机制。方法采用CCK-8法检测不同浓度YY-20394对SU-DHL-4细胞(GCB亚型)和U2932细胞(ABC亚型)增殖能力的影响,并计算出24 h时药物的IC_(25)、IC_(50)、IC_(75)。采用流式细胞术检测IC_(25)、IC_(50)和IC_(75)浓度YY-20394对SU-DHL-4细胞和U2932细胞凋亡的影响。采用高通量RNA测序技术(RNA-Seq)检测药物作用前后各组细胞基因表达的变化,对差异表达基因进行KEGG信号通路分析和GO富集分析,并且对各组细胞基因表达数据进行GSEA富集分析。结果在YY-20394作用下,SU-DHL-4细胞增殖抑制率和细胞凋亡率增加(P<0.05),但U2932细胞增殖及凋亡能力未发生明显改变(P>0.05)。KEGG和GO富集分析结果显示,YY-20394对SU-DHL-4细胞的抗肿瘤作用涉及多条信号通路,其中PI3K-AKT、MAPK、JAK-STAT等信号通路的活性下调,且可能通过影响醇类物质合成等细胞生物学功能发挥作用;而U2932细胞中未富集到具有显著差异的信号通路。GSEA富集分析显示PI3K-AKT信号通路在SU-DHL-4细胞中的活化水平显著低于U2932细胞。结论PI3K抑制剂YY-20394通过影响PI3K-AKT等肿瘤相关信号通路,对GCB亚型的SU-DHL-4细胞产生抗肿瘤效应,而对ABC亚型的U2932细胞不敏感。

肝特异性Rbp4基因敲除小鼠的建立及糖代谢特征分析

目的 建立肝特异性Rbp4基因敲除小鼠模型,并初步探索肝特异性Rbp4基因缺失对糖代谢的影响。方法 利用Cre-LoxP技术,使用C57/BL6J小鼠和Alb-Cre小鼠构建肝特异性Rbp4基因敲除小鼠模型。利用PCR及琼脂糖凝胶电泳鉴定小鼠基因型。选取10只18周龄C57/BL6J雄性小鼠为野生对照组(WT),10只同周龄flox纯合且Alb-Cre阴性小鼠为实验对照组(Rbp4~(flox/flox):Cre~-),10只同周龄flox纯合且Alb-Cre阳性小鼠为实验组(Rbp4~(flox/flox):Cre~+)。分别利用Western Blot及qRT-PCR验证小鼠肝中RBP4蛋白及Rbp4 mRNA表达水平。利用qRT-PCR检测其他组织中Rbp4 mRNA表达水平。采用苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织形态。利用血糖仪检测小鼠尾静脉血液标本血糖值,进行葡萄糖耐量及胰岛素耐量实验。利用qRT-PCR检测肝糖代谢基因磷酸烯醇丙酮酸羧化酶(Pepck)和葡萄糖-6-磷酸酶(G6pase)表达水平。结果 成功繁育并鉴定出肝特异性Rbp4基因敲除小鼠。Rbp4~(flox/flox):Cre~+组小鼠肝中RBP4蛋白表达显著减少(P<0.05),Rbp4 mRNA表达显著减少(P<0.05)。三组小鼠脂肪、肾、胰、脾、心脏和肌肉组织中Rbp4 mRNA的相对表达量差异无显著性(P>0.05)。HE染色、葡萄糖耐量及胰岛素耐量实验结果表明肝特异性Rbp4基因敲除对肝组织形态、葡萄糖耐量及胰岛素耐量无显著影响(P>0.05)。三组小鼠肝中Pepck mRNA表达差异具有显著性(P<0.05),两两比较显示,Rbp4~(flox/flox):Cre~+组小鼠肝中Pepck mRNA相对表达量较Rbp4~(flox/flox):Cre~-组小鼠降低(P<0.05)。三组小鼠肝中G6pase mRNA表达差异无显著性(P>0.05)。结论 成功构建了肝特异性Rbp4基因敲除小鼠模型,基因缺失可抑制小鼠肝Pepck mRNA表达,为进一步探索该基因在小鼠糖代谢中的作用提供依据。

EgM9免疫犬产生抗体变化规律的观察

目的用重组表达蛋白EgM9免疫实验犬,观察免疫犬的抗体变化及EgM9的免疫效果。方法用100μgEgM9及5mg的GST并辅以佐剂QuilA分别免疫实验犬,定期收集血清,以间接ELISA法检测血清中IgG及其亚类、IgM、IgA与IgE;感染45d后剖检实验犬,统计犬体内虫体数量。结果免疫组和对照组血清IgG与IgA差异显著(P<0.05);而IgG1与IgG2免疫组和对照组差异极显著(P<0.01);IgM与IgE免疫组和对照组无显著差异(P>0.05);相对于对照组,免疫组的保护率达86%。结论用重组蛋白EgM9免疫犬后能产生很高的抗体水平,可以抑制细粒棘球绦虫的发育,EgM9或许有望作为一种有效的候选疫苗成分用于包虫病的防治。

高重复频率触发模式皮秒扫描相机

讨论了高重复频率扫描电路的研制,利用此扫描电路研制了扫描相机,使用掺钛兰宝石激光器进行了时间分辨率的标定,使用半导体激光器作为光源进行了脉冲宽度的测试最高工作频率为1MHz,时间分辨率为1.

中西医结合抢救重型原发性颅脑损伤的临床研究

目的 :探讨中西医结合救治重型原发性颅脑损伤的临床疗效。方法 :对 6 1例重型原发性颅脑损伤〔格拉斯哥昏迷评分 (GCS) <8分 ,原发昏迷 >6小时〕患者随机分为 2组 :治疗组 (31例 ) ,对照组 (30例 )。治疗组用中西医结合治疗 ,对照组单用西医治疗。结果 :治疗组患者昏迷持续时间及平均住院时间较对照组均显著缩短 (P均 <0 .0 1)。按格拉斯哥预后评分 (GOS) ,治疗组的显效率 (6 1.2 9% )和总有效率 (83.87% )也明显高于对照组 (分别为 30 .0 0 %和 6 0 .0 0 % ) ,P均 <0 .0 5。结论 :中西医结合救治重型原发性颅脑损伤有显著疗效 ,能缩短昏迷持续时间及平均住院时间。

慢病毒介导的siRNA干扰乳腺癌MCF-7细胞VEGF-C表达的实验

目的研究慢病毒载体介导的siRNA对乳腺癌MCF-7细胞系VEGF-C表达的敲减作用。方法构建慢病毒VEGF-C/siRNA载体,转染乳腺癌MCF-7细胞,采用Real-time PCR检测MCF-7细胞在转染前后VEGF-C的mRNA表达,计算其转染效率和VEGF-C敲减率。结果慢病毒VEGF-C/siRNA转染效率超过80%,其VEGF-C的mRNA表达敲减率达50%。结论慢病毒VEGF-C/siRNA转染率高,能有效敲减VEGF-C的mRNA表达。

关于双打击淋巴瘤的新认识:诊断、预后及治疗进展

双打击淋巴瘤（double hit lymphoma,DHL）是一类高侵袭性B细胞淋巴瘤,其细胞遗传学特征为伴有MYC和BCL2基因重排,或者MYC和BCL6基因重排。如果同时具有MYC、BCL2和BCL6基因重排,则为三打击淋巴瘤（triple hit lymphoma,THL）。

用ELISA方法检测原头节及EgM免疫犬IgG变化情况

目的用不同的抗原检测免疫犬后的血清,判定所引起的IgG变化和有无与其他虫种的交叉反应。方法在用原头节可溶性粗抗原和EgM家族重组表达蛋白对犬的免疫保护实验中,以原头节可溶性粗抗原、细粒棘球绦虫成虫可溶性粗抗原和多头绦虫可溶性粗抗原包被检测时,通过间接ELISA的方法检测其中的特异性抗体IgG的变化规律及与多头绦虫抗原有无交叉反应。结果原头节可溶性粗抗原检测出相对应免疫组实验犬IgG应答变化情况,同时用细粒棘球绦虫成虫包被抗原亦检测出IgG存在一定差异,但不十分明显,与多头绦虫无交叉反应。检测EgM重组蛋白免疫组IgG时它们存在一定差异,但不十分明显。结论原头节可溶性粗抗原免疫组通过ELISA的方法较为准确地检测出其IgG的应答情况;EgM重组蛋白免疫组的抗体检测仍需进一步完善。

EgM9免疫犬引起细胞因子表达的变化规律研究

用重组表达蛋白EgM9免疫犬,通过实时定量PCR方法检测IFN-γ和IL-4表达的变化规律。用Trizol试剂提取新鲜全血的总RNA,取0.5μg总RNA,采用实时定量PCR法逆转录扩增IFN-γI、L-4和内参基因G3PDH,扩增产物经电泳分离后,用凝胶图像分析仪照相和扫描分析,检测其相对表达量。IFN-γI、L-4和G3PDH分别在202、3162、82 bp处出现明显条带,与GenBank查阅的基因条带大小基本一致;0、6、10、15周表达量依次升高,在15周时最高,IFN-γ尤为明显,它的变化始终大于IL-4。EgM9免疫犬后,能激起犬体内很强的细胞免疫和体液免疫反应,而且细胞免疫处主导地位。实时定量PCR方法为犬感染细粒棘球绦虫及其他疾病的早期诊断和流行病学调查提供了初步依据。

高压超快三角波脉冲的产生

本文讨论了使用高压功率晶体管作为开关器件研制的高压超快速斜坡脉冲发生器 .得到的脉冲幅值为± 1 k V,上升时间为 1 0 ns,大大提高了脉冲电路的耐大电流冲击性 .利用开关器件可耐大电流冲击的特点合成了三角波脉冲 ,三角波脉冲半宽为 1 0 ns左右 ,通过改变电路参量可得到不同的半宽 .

立体定向脑内窥镜手术治疗老年慢性硬膜下血肿

目的 :探讨立体定向脑内窥镜下治疗老年人慢性硬膜下血肿的治疗效果。方法 :38例 6 0岁以上手术治疗的慢性硬膜下血肿随机分为两组 ;治疗组 (n =18)和对照组 (n =2 0 )。治疗组在CT引导立体定向内窥镜下清除血肿 ;对照组则采用常规钻孔冲洗引流术。结果 :对两组出院时的疗效进行比较分析。治疗组显效率为94.44 % ,明显优于对照组 (6 5 % ) ,P <0 .0 5 ;治疗组的平均住院日为 (11.72± 2 .5 6 )d ,对照组为 (2 2 .17± 3 .2 9)d ,两组比较治疗组亦明显缩短 (P <0 .0 1)。结论 :立体定向脑内窥镜手术治疗慢性硬膜下血肿可在直视下操作、止血 ,清除血肿较彻底。疗程缩短、效果好 ,降低了术后并发症及血肿复发率。

雪崩晶体管的导通方式讨论

本文详细讨论了雪崩晶体管各种不同的导通方式,并发现由于雪崩晶体管C—E极间电压变化速率太大时,造成雪崩晶体管导通,论述了产生这种现象的原因,及此现象的存在对超快速电路的影响。

自发性脑出血的临床分级与预后日常生活能力相关性分析

目的:探讨自发性脑出血的临床分级对外科治疗的选择及预后的关系。方法 :对260例自发性脑出血治疗的分析 ,提出新的临床分级方案。结果 :按ADL分级评定 ,手术组显效率65.4 % ,总有效率94.7 % ,非手术组分别为42.7 %和76.5 %。结论

高压功率晶体管在扫描相机中的应用

本文讨论了使用高压功率晶体管作为开关器件研制的扫描电路，并在变象管扫描相机中应用，获得了良好的结果，大大提高了扫描电路的耐大电流冲击性，提高了相机的可靠性与稳定性，最高扫速可达１０ｍｍ／ｎｓ，扫描非线性最大为３％，触发晃动为±３０ｐｓ。工作频率高达２０ｋＨｚ．

内增强变象管相机中的干扰研究

本文讨论了带快门的内增强变象管相机的快门电路及其对扫描电路的干扰，干扰信号对相机性能指标的影响及解决方法。

新型超快速三角波脉冲电路的研究

本文讨论了一种新型三角波脉冲发生器,此脉冲发生器是由雪崩晶体管作为开关器件,产生出的三角波脉冲半宽度为3.5ns,上升时间最快达2ns,幅值为±1300V,电路的延迟时间为8.3us。

荧光寿命成像及其在生物医学中的应用

荧光寿命取决于荧光分子所处的微环境, 通过对样品荧光寿命的测量和成像可以定量获取样品的功能信息. 介绍荧光寿命成像(fluorescencelifetimeimaging, FLIM) 技术原理、实现途径、发展现状及其在生物医学中的应用. 提出一种基于皮秒扫描相机、梯度折射率微透镜阵列、棱镜分光光谱仪、飞秒钛宝石激光器和荧光显微物镜的新型五维荧光显微成像技术, 该系统具有多光谱分辨功能以及很高的时间和空间分辨率, 能够实现三维多光子荧光强度、光谱分辨强度和寿命测量, 将在高通量生化分析、组织鉴别、胞内生理学和荧光共振能量转移(fluorescenceresonanceenergytransfer, FRET) 等领域获得广泛应用.

微囊法棘球蚴继发感染小鼠动物模型的建立

目的通过体外培养原头蚴发育成微囊,经腹腔注射建立稳定的细粒棘球蚴和多房棘球蚴继发感染小鼠动物模型。方法无菌条件下采集羊源细粒棘球绦虫原头蚴和鼠源多房棘球绦虫原头蚴,经胃蛋白酶消化后检测虫体活力并计数,于37℃、5%CO2条件下进行体外培养至发育成微囊,以每鼠50个微囊的剂量经腹腔注射的途径分别接种BALB/c小鼠。接种6个月后,通过腹部解剖大体观察和病理检测分析各组小鼠的感染情况及包虫囊的生长情况。结果原头蚴在体外培养60d时发育成微囊,显微镜下观察Eg具有明显的透明角质层结构,而Em微囊角质层较薄。小鼠细粒棘球蚴和多房棘球蚴的感染率均为100%,Eg包虫囊为游离单囊,成囊率达70%,囊内无原头蚴;Em包虫囊为类似肿瘤的团块状组织,病灶内有生发囊及原头蚴。结论采用微囊法可建立稳定的棘球蚴继发感染小鼠动物模型,为疫苗研制、药物筛选和疗效判定提供研究动物模型。

用于电子束参数测量的高速分幅相机

具有时间分辨能力的高能强流电子束束流参数测量需要高速的分幅相机,其幅间间隔时间要求达到10ns的水平,每幅曝光时间不大于5ns。针对这种难度较大的应用要求,结合快速电子技术、图像增强技术、光学分光技术等多门学科的成果,成功研制了一台可用于高能强流电子束束流参数的时间分辨测量的高速分幅相机,图像幅间间隔时间最快到达10ns,最小的曝光时间为3ns,一次可以拍摄8幅图像,图像分辨率为1376×1035,标准幅面可以达到Φ80mm,完全满足了目前的测量要求。

浅谈微信联合以案例为基础的教学模式(case-based learning,CBL)对比传统教学模式在肿瘤学研究生临床教学中的应用

探讨微信结合CBL教学法在肿瘤学研究生教学中是否优于传统教学法。方法 将广西医科大学附属肿瘤医院肿瘤内科轮转研究生80人随机分为实验组和对照组,分别采用微信结合CBL教学法和传统教学法,比较两组教学效果。结果 实验组理论与技能考试成绩高于对照组(P<0.05)。在教学法是否增加学习兴趣,提高自学能力,临床思维能力,基础知识掌握,分析解决问题能力方面,实验组评价均优于对照组(P<0.05)。结论 微信结合CBL教学法较传统教学法,能有效提升教学效果,值得推广。