用RNA干扰技术创造高直链淀粉马铃薯材料

【目的】创造块茎高直链淀粉含量的转基因马铃薯材料。【方法】采用RT-PCR技术分别克隆了马铃薯Sbe1基因CDS内300bp的片段SⅠ和Sbe2基因CDS内410bp的片段SⅡ,并将SⅠ和SⅡ顺序连接得到融合片段SⅢ;以载体pHANNIBAL和pART27为基础,构建具有SⅢ反向重复结构的植物表达载体pRNAiⅢ;采用农杆菌介导法转化马铃薯优良品种陇薯3号、甘农薯2号和大西洋。【结果】获得了融合片段SⅢ,构建了以Sbe1基因和Sbe2基因为靶标的RNA干扰载体pRNAiⅢ,通过农杆菌介导法获得了24个转基因株系,其中21个转基因株系试管薯的淀粉粒形态发生明显变化,表观直链淀粉含量介于59.31%～87.14%,比受体材料平均高出3.2倍。RT-PCR分析表明,在8个直链淀粉含量超过80%的转基因株系中检测不到Sbe1和Sbe2基因mRNA的积累。【结论】采用RNAi技术通过沉默内源Sbe1和Sbe2,可获得高直链淀粉含量的马铃薯材料。

ubi启动子驱动的花生芪合酶基因表达载体的构建及玉米遗传转化初报

研究克隆了玉米的ubi启动子,以pBI 121为基本载体,构建了含有ubi启动子的中间载体pBI UB及ubi启动子驱动的GFP基因的植物表达载体pBI UG;采用基因枪法将载体pBI UG转入洋葱表皮细胞对启动子活性进行检测,结果表明GFP基因在洋葱表皮细胞中得到了表达。本实验同时采用RT-PCR技术克隆了花生的芪合酶基因(Res),该基因编码的蛋白质的氨基酸序列与已公布的芪合酶的氨基酸序列的同源性为99.49 %,并且164位的活性中心Cys没有发生突变;将该Res基因插入载体pBI UB构建了ubi启动子控制下的花生芪合酶基因植物表达载体pBI UA,并对玉米进行了遗传转化,得到了转化苗。

采用一种新型RNAi载体培育转基因高直链淀粉马铃薯

采用PCR技术分别克隆nos终止子、烟草axi1内含子和烟草ubi.u4启动子,亚克隆部分与马铃薯Sbe1同源、部分与Sbe2同源的融合基因SIII,构建具有“ubi.u4启动子—反向SIII—反向nos终止子—axi1内含子—正向nos终止子”结构的异源3′端UTR反向重复序列型RNAi载体pCUSNI,采用农杆菌介导法转化马铃薯品种陇薯3号、甘农薯2号和大西洋,获得了16个转基因植株,其中14个的块茎直链淀粉含量大幅度增加,表观直链淀粉含量介于53.80%~85.33%;但随着直链淀粉含量的升高,转基因马铃薯淀粉含量下降。半定量RT-PCR分析表明,在直链淀粉含量超过80%的转基因株系中检测不到Sbe1和Sbe2基因mRNA的积累。结果表明,异源3′端UTR反向重复序列型RNAi载体pCUSNI能够高频、高效地同时抑制马铃薯Sbe1和Sbe2基因的表达,是一个优良的RNAi载体。以载体pCUSNI为基础,再以植物的其他基因为靶,只需在pCUSNI的BamHI和XbaI位点之间插入干涉片段替换SIII即可完成载体构建,而不必构建靶标基因的反向重复序列,使载体制备迅速便捷。

利用ihpRNA介导的基因沉默培育抗冷糖化马铃薯

为培育抗冷糖化的转基因马铃薯材料,克隆了368 bp的马铃薯酸性转化酶(AcInv)基因3′端非翻译区(3′UTR)和281 bp的马铃薯VP1-ABI3-like protein基因的第一内含子,构建了内含子连接的马铃薯AcInv基因3′UTR的发夹型RNA(ihpRNA)载体pBIV;采用微束激光穿刺技术转化马铃薯品种,得到了149个转基因株系,其中139个转基因株系在低温贮藏35 d时块茎还原糖含量低于亲本材料。RT-PCR分析表明还原糖含量降低的转基因植株中检测不到AcInv基因mRNA的积累。本研究结果表明以3′UTR作为RNAi载体的干涉片段可以有效地抑制靶标基因mRNA的积累,通过对AcInv沉默可获得抗低温糖化的马铃薯育种材料。

郭志鸿作品

男，49岁，中国书法出版社副社长、副编审、二级美术师。

利用RNA干涉技术及微束激光转化法培育抗病毒马铃薯

针对马铃薯生产中危害严重、分布广泛并且具有强烈协生作用的马铃薯X病毒和马铃薯Y病毒,开展了抗病毒病的育种研究.采用RT-PCR技术分别克隆了267 bp的编码马铃薯X病毒外壳蛋白（PVX-cp）基因的相对保守区段X和294 bp的编码马铃薯Y病毒外壳蛋白（PVY-cp）基因的相对保守区段Y两个片段,将其按顺序连接,形成融合基因XY,然后分别将融合基因XY正向和反向插入到载体pHANNIBAL中,得到了载体pHIV,再用NotI对pHIV进行酶切,将产生的大片段插入到载体pART27中,得到同时以PVX-cp基因和PVY-cp基因为靶标的XY的RNAi载体pARIV.采用微束激光穿刺转化技术转化马铃薯品种Favorita的愈伤组织,得到了14株表型正常的转基因植株,转基因植株的southern blot分析表明,导入的外源融合基因拷贝数介于2～4之间.攻毒实验表明,其中11株转基因植株对PVX、PVY°以及PVX和PVY°混合侵染均表现免疫,而其它3株的病毒浓度也低于对照.这一结果将为利用RNAi干涉技术开展植物抗多种病毒病的育种提供重要依据,验证了所构建的RNA干涉（RNA interference RNAi）载体具有良好的功能,同时又一次证明微束激光穿刺法是一种有效的遗传转化手段.

数字媒体艺术在现代广告设计中的应用

目的探究数字媒体艺术在现代广告设计中的应用原则及方式。方法以数字媒体艺术为切入点,结合真实、创意、情感、系统等原则,对数字媒体艺术与现代广告设计的结合应用进行探索,并分别介绍数字媒体艺术在影视广告设计、户外广告设计及其他动态广告设计中的具体应用。结论数字媒体艺术与现代广告设计的结合,能够进一步丰富现代广告设计的内涵,提升设计质量,同时能够在一定程度上促进数字媒体艺术的发展和完善,实现共同提高。

非物质文化遗产与高校美术教育——原生态美术的思考

在我国,非物质文化遗产属于崭新的课题。该文作者认为,非物质文化遗产传承和发展的主体是高等院校,高等院校在非物质文化遗产的传承和发展中发挥着非常重要的作用。高校美术教学需要重视非物质文化遗产的研究,更好地传承本民族原生态的美术文化,使那些原生态的美术可以走进高校,使母体文化得到有效的保护和发展。

平面设计中的传统美术色彩运用研究论述

传统美术色彩是平面设计的重要组成部分。随着我国改革开放以来的快速发展,很多具有中国特色的传统文化需要我们继续发扬光大。如今,我国平面设计前景一片光明,为我国经济的发展注入了活力。平面设计中加入传统美术色彩是十分必要的。两者结合不仅符合当今时代的发展趋势,而且有利于我国传统文化的继承和创新。这就要求平面设计工作者具备综合素质,从而将传统美术色彩融入现代平面设计。

艺术设计专业的美术教学优化途径分析及研究

艺术设计专业综合教学中,美术教学是重要的组成部分,美术教学质量的高低与否对学生艺术设计能力的形成和提升具有重要影响。受传统教育教学思想的影响,艺术设计专业美术教学中存在一些问题,阻碍了艺术设计专业美术新课程改革的脚步。新时期,各阶段教学进行改革与创新十分必要,艺术设计专业美术教学也需要进行一定程度的教学优化。该文对艺术设计专业美术教学优化问题进行探讨,并结合教学实践中存在的问题提出具体的优化建议。

谈胡适的读书观

胡适认为读书是为了接受人类遗产、读更多的书、启迪人的思想。读书既要精深 。

艺术设计类人才培养模式改革分析

高校专业理论教育的主要目的是给社会提供更多的优秀人才,提高学生在社会中的竞争力,艺术设计也是如此。随着我国教育改革不断推进,教育改革已然成了一种趋势。但如今,我国艺术设计教学模式依旧比较落后,存在很多的不足。所以,在高校艺术设计教学中,必须进一步完善教学手段、优化课程内容与结构,加快对艺术设计类人才培养模式的改革进度。

基于高通量测序技术的堆肥对兰州百合根际微生物多样性的影响

以兰州百合为试材,基于llumina MiSeq测序平台,探讨施用堆肥与化肥对兰州百合鳞茎鲜质量及根际土壤细菌和真菌微生物群落的影响。结果表明,有机堆肥对增加百合鳞茎鲜质量作用显著,相比化肥增产76.6%。物种注释结果显示,细菌的门、纲、目、科、属的数量在施用堆肥的土壤中都大于施用化肥的土壤,而经施用化肥处理的土壤中的真菌各个分类水平的数量大于施用有机肥的。从丰富度指数(Chao1)和多样性指数(Shannon)分析,细菌群落整体变化小于真菌群落的变化。施用有机肥或化肥的样品,一些细菌属的相对丰度变化不明显,这些细菌属包含的大多数菌是有益菌。此外,在有机堆肥组的样品中出现一些有益特有菌属,例如野野村菌属(Nonomuraea),而化肥组的样品中发现致病特有菌属(Aquicella)。在真菌属中,镰刀菌属(Fusarium)、曲霉属(Aspergillus)、青霉菌属(Penicillium)和支顶孢属(Acremonium)的丰度在有机肥处理下显著降低,这些属分布有很多潜在或机会致病真菌,这在一定程度上说明施用有机肥能有效改善百合根际土壤微生物群落。

马铃薯重离子辐射育种研究

在2000—2005年将杂交技术和重离子辐射相结合,采用55MeV/u的40Ar17+离子对马铃薯杂交种子和微型薯进行了不同剂量的贯穿辐射或离子注入处理。结果表明,对马铃薯微型薯进行重离子辐射能显著提高块茎的产量。而杂交技术和重离子辐射相结合是一种更高效的育种方式,不仅能提高块茎的增产幅度,还能改善其加工品质。微型薯重离子辐射的最佳剂量为60Gy,杂交种子辐射的适宜剂量范围在60—120Gy之间。通过对辐射后代的多年选育,获得了几个产量显著高于对照、品质优良的马铃薯新品系。

复方地黄对老年痴呆小鼠形态影响和相关增殖因素变化的研究

目的:研究复方地黄对老年小鼠的神经生长因子改变及形态学的影响,进一步探讨复方地黄对老年痴呆的作用机制。方法:将实验小鼠随机分为4组,实验组给予复方地黄混浊液每天2mL/只灌胃。治疗组给予安理申混悬液每天400mg/kg,空白对照组和模型对照组用等量生理盐水。3周后,各组小鼠进行行为学测试,应用免疫组化法检测脑组织神经生长因子改变及电镜观察形态学改变。结果:复方地黄能够改善SAM-P/8小鼠的学习和记忆能力,减少痴呆模型小鼠的包涵体数量,增加大脑皮层及海马区神经营养因子的含量,对SAM-P/8小鼠具有较好防治作用。结论:复方地黄能够明显改善老年痴呆小鼠的学习能力和蛋白表达。

内源IAA、GA_3调控对百合试管苗生长的影响研究

以东方百合‘Sorbonne’试管苗为对象,对不同浓度IAA及其抑制剂(TIBA)添加后试管苗茎叶和根的生长情况进行了研究,测定了试管苗中内源激素(IAA,GA_3,Zeatin)的变化。数据显示10 mg·L^(^(-1))IAA促进试管苗茎叶、根生长的效果最佳而40 mg·L^(^(-1))IAA抑制试管苗的生长,TIBA抑制试管苗茎叶、根生长的效果显著。内源激素测定结果表明外源IAA及TIBA处理影响了内源激素的变化,IAA对生长的影响可能是通过调节内源激素的变化而实现的。结合生长情况及内源激素变化的分析结果表明:过高浓度的IAA、过低浓度的GA_3都不利于试管苗生长,内源IAA和GA_3在适宜浓度下才能发挥促进生长的作用;内源Zeatin在试管苗的生长调控中可能不发挥作用。本实验为百合种植中外源激素的合理使用提供了依据,有助于提升百合种植者的经济效益。