基于NOD2介导的AMPK/mTOR信号通路探讨宫颈癌细胞恶性行为的机制

目的 基于核苷酸结合寡聚化结构域受体2(NOD2)介导的AMP活化蛋白激酶(AMPK)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路探讨宫颈癌(CC)细胞恶性行为的机制。方法 生物信息学分析确定NOD2在CC组织中的表达。将靶向NOD2(shNOD2)、shRNAs阴性对照(shNC)以及NOD2过表达(NOD2)质粒和载体(Vec)转染CC细胞。通过CCK-8测定、集落形成和Transwell细胞侵袭测定来确定NOD2对CC细胞生长的影响。通过高通量RNA测序(RNA-Seq)进行转录组分析。Western blot试验检测细胞系中NOD2、AMPK/mTOR信号通路和自噬蛋白的表达。24只雌性BALB/c裸鼠随机分为4组,每组6只:载体组(Vec组)、NOD2过表达组(NOD2组)、shNC组和shNOD2组。构建小鼠远处转移模型,监测肺转移的荧光强度,计数肺转移结节的数量。结果 在线数据库分析显示,NOD2在CC组织中表达明显高于正常组织,并且不同分期的CC中NOD2的mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05)。此外,NOD2的高表达与较差的总生存期和无病生存期相关(P<0.05)。NOD2过表达对CC细胞增殖、集落形成、迁移和侵袭具有促进作用,而NOD2敲低则相反。与体外结果一致,在转移的小鼠尾静脉注射模型中,NOD2组CC细胞的肺定殖、肺转移灶较Vec组增加(P<0.05),而shNOD2组CC细胞的肺定殖、肺转移灶较shNC组减少(P<0.05)。RNA-Seq结果显示NOD2表达与AMPK信号激活、mTOR信号抑制、自噬调节途径激活和自噬体形成显著相关。与shNC组相比,shNOD2组磷酸化AMPK、LC3蛋白表达水平减少(P<0.05),磷酸化mTOR、p62蛋白表达水平增加(P<0.05);与Vec组相比,NOD2组LC3、AMPK蛋白表达水平增加(P<0.05),磷酸化mTOR、p62蛋白表达水平减少(P<0.05)。与shNC组相比,shNOD2组GFP-mRFP-LC3的点积累减少(P<0.05);与Vec组相比,GFP-mRFP-LC3的点积累增加(P<0.05)。结论 NOD2可能通过AMPK/mTOR信号促进CC增殖、迁移和侵袭,其作用机制部分涉及自噬激活。

维生素D缺乏对多囊卵巢综合征患者体外受精-胚胎移植妊娠结局的影响

目的 探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清及卵泡液中25-羟基维生素D[25(OH)D]对体外受精-胚胎移植(IVE-ET)妊娠结局的影响。方法 选取2019年5月至2020年5月在我院生殖中心首次就诊的不孕且行IVE-ET治疗的80例PCOS患者作为研究对象,根据临床妊娠结局将其分为临床妊娠组(n=38)和临床未妊娠组(n=42)。比较两组受试者的临床资料及促排卵情况,通过ELISA法测定25(OH)D水平,通过Pearson法分析血清与卵泡液25(OH)D水平的相关性,采用Cox回归分析影响受试者妊娠结局的因素。结果 临床妊娠组患者的受精率、血清及卵泡液中25(OH)D水平都高于临床未妊娠组,差异有统计学意义(t值分别是2.236、2.446、2.893,P<0.05)。血清与卵泡液中25(OH)D水平呈正相关(r=0.981,P<0.05);Cox回归分析显示,血清和卵泡液25(OH)D是影响受试者临床妊娠结局的独立因素(HR值分别是2.874、2.338,P<0.05)。结论 PCOS患者血清及卵泡液25(OH)D水平是影响患者IVE-ET妊娠结局的独立因素。

桔梗皂苷D基于TGF-β/Smad通路调控上皮-间质转化对人子宫内膜癌Ishiwaka细胞迁移及侵袭的作用

目的探讨桔梗皂苷D调控上皮间质转化(EMT)对人子宫内膜癌Ishiwaka细胞迁移、侵袭的影响,及对转化生长因子β(TGF-β)/Smad信号通路的调节作用。方法取第4代对数生长期的人子宫内膜癌Ishiwaka细胞,随机分为对照组、桔梗皂苷D组、激动剂组和桔梗皂苷D+激动剂组。桔梗皂苷D组细胞加入桔梗皂苷D 18μmol/L培养24 h,激动剂组细胞加入重组人TGF-β20 ng/mL刺激24 h,桔梗皂苷D组+激动剂组细胞先加入重组人TGF-β20 ng/mL刺激24 h后,再加入桔梗皂苷D培养24 h。MTT法检测细胞存活率,Transwell实验检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力及蛋白印迹法检测TGF-β1、p-smad2/3、上皮钙粘蛋白(E-cad)和神经钙粘蛋白(N-cad)相对表达量。结果与对照组比较,桔梗皂苷D组细胞存活率及TGF-β1、p-smad2/3和N-cad蛋白相对表达量降低,细胞迁移和侵袭能力减弱,E-cad蛋白相对表达量升高,激动剂组TGF-β1、p-smad2/3和N-cad蛋白相对表达量升高,细胞迁移和侵袭能力增强,E-cad蛋白相对表达量降低(P<0.05);与桔梗皂苷组比较,桔梗皂苷D+激动剂组细胞存活率及TGF-β1、p-smad2/3和N-cad蛋白相对表达量升高,细胞迁移和侵袭能力增强,E-cad蛋白相对表达量降低(P<0.05);与激动剂组比较,桔梗皂苷D+激动剂组细胞存活率及TGF-β1、p-smad2/3和N-cad蛋白相对表达量降低,细胞迁移和侵袭能力减弱,E-cad蛋白相对表达量升高(P<0.05)。结论桔梗皂苷D可能通过抑制TGF-β1/Smad2/3信号通路调控上皮间质转化降低人子宫内膜癌Ishiwaka细胞迁移及侵袭能力。

工控系统信息安全保障

随着科技发展,工控系统信息安全潜在风险日益凸显,工控系统信息安全保障需求日益增强。本文着重阐述工控系统信息安全保障机制,该机制包括工控系统信息安全保障体系和工控系统信息安全危机应急处理机制。

计算机自控参数设定的实用方法研究

PID是工业自动化水平,是目前衡量各行各业现代化水平的重要标志。PID控制器因其简单的结构、平稳的工作性能、高度的可靠性、简便的调整程序,使得它发明至今七十余年仍然散发出耀眼的光芒,也因此,PID控制器成为当今工业计算机自动控制的主要技术之一。

miR-27a通过过氧化物酶体增殖物激活受体γ/葡萄糖转运蛋白4调控多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞功能的研究

目的探讨PPARγ/GluT4在颗粒细胞IR、细胞增殖和凋亡中的作用。方法选取2018年8月至2020年8月于青海省人民医院生殖医学中心接受常规IVF-ET辅助生殖治疗的多囊卵巢综合征(PCOS)已婚患者45例,根据胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)分为IR组(PCOS-IR组,HOMA-IR≥2.57,n=23)和非IR组(PCOS-NIR组,HOMA-IR<2.57,n=22),另选取同期本院因男性或输卵管因素的已婚不孕患者为对照组(Con,n=21)。miR-27a模拟物(miR-27a mimics)、miR-27a抑制剂(miR-27a inhibitor)和相应对照(mimics NC和inhibitor NC)转染PCOS-IR组颗粒细胞,分为miR-27a mimics组、miR-27a inhibitor组、mimics-NC组和inhibitor-NC组。双荧光素酶报告试验证实miR-27a与PPARγ结合。CCK-8法和Annexinv-FITC/PI法检测细胞增殖和凋亡。定量实时PCR和Western blot法分别检测miR-27a、GluT4、PPARγ、B淋巴细胞瘤-2相关X(Bax)、活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved caspase-3)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)蛋白表达。结果与Con组比较,PCOS-NIR、PCOS-IR组miR-27a表达升高(P<0.01),PPARγmRNA和蛋白表达降低(P<0.01)。与PCOS-NIR组比较,PCOS-IR组miR-27a表达升高(P<0.05),PPARγmRNA和蛋白表达降低(P<0.01)。双荧光素酶报告显示,PPARγ和miR-27a之间有靶向结合位点。与inhibitor-NC组比较,miR-27a inhibitor组24、48、72和96 h时细胞活性升高(P<0.05或P<0.01),miR-27a inhibitor、mimics-NC组凋亡率降低(P<0.05或P<0.01),miR-27a mimics组凋亡率升高,48、72和96 h时细胞活性降低(P<0.01)。与miR-27a inhibitor组比较,mimics-NC、miR-27a mimics组凋亡率升高,24、48、72和96 h时细胞活性降低(P<0.05或P<0.01)。与inhibitor-NC组比较,miR-27a mimics组miR-27a、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.05或P<0.01),GluT4、PPARγ、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.01),miR-27a inhibitor组GluT4、PPARγ、Bcl-2蛋白表达表达升高(P<0.05或P<0.01),miR-27a、Bax和Cleaved caspase-3蛋白降低(P<0.01)。与miR-27a inhibitor组比较,mimics-NC、miR-27a mimics组miR-27a、Bax和Cleaved caspase-3蛋白表达升高(P<0.01),GluT4、PPARγ、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05或P<0.01)。结论miR-27a表达与颗粒细胞IR,细胞增殖及细胞凋亡相关,其过程可能与PPARγ信号通路相关。

青海地区46273例女性宫颈HPV检测结果分析

目的:根据青海地区妇女宫颈人乳头瘤病毒(HPV)检测结果,分析宫颈高危HPV(HR-HPV)感染分布特点,为指导HPV疫苗接种提供理论依据。方法:采用Hybriuax技术检测21种高危型HPV亚型,对2014年1月-2020年2月于我院就诊的46273例女性宫颈人乳头瘤病毒分型检测。结果:46273例妇女中,高危HPV阳性率10.23%,高危HPV阳性率和年龄之间存在线性趋势,随年龄的增大感染比例上升。单一高危亚型HPV感染前三位的HPV亚型为16、58和39,合计占到45.64%。HPV亚型感染以单高危阳性为主,占总HPV阳性数的88.26%,占全部筛查人数的9.03%。HPV16、58、31、68亚型阳性率和年龄段之间存在线性趋势,随年龄的增大感染比例上升。HPV感染亚型检出构成比各年龄段均以HPV16感染排在第一位,排在第二位除61-70岁为双高危外,均为HPV58为主。结论:青海地区女性HPV感染率较高,以单一高危型感染为主,HPV16、58、39、52是主要的感染亚型,所以应针对青海地区HPV感染状况设计具有针对性的预防HPV感染亚型的疫苗。

瞬时感受器电位C亚族蛋白6通道与肿瘤发生的研究进展

细胞内游离钙离子(Ca2+)与肿瘤关系密切,直接参与调控肿瘤的生长、侵袭、转移和分化。瞬时感受器电位(TRP)是细胞膜上的一种非选择性阳离子通道,且被认为是最可能的钙库操纵性钙通道和受体操纵性钙通道的分子基础。TRP通道C亚族蛋白(TRPC)在多种细胞中表达。近年研究多发现调控Ca2+进入细胞的TRPC6通道与多种癌症的发生和浸润转移有关。如果能阻遏此过程,可能对肿瘤的治疗提供一个新的思路。现对近年来TRPC6通道与肿瘤的关系的相关研究作一综述。

干细胞治疗卵巢功能低下性不孕的研究进展和挑战

不孕不育发病率在世界范围内逐年增加,其中女性不孕患者 50% ～ 60%,其可能与生活环境及生活方式的改变有关。由于妇科恶性肿瘤发生率有逐年增加及年轻化趋势,卵巢功能缺陷或卵巢结构缺如导致生殖细胞缺陷的患者可能终身不孕,但干细胞移植治疗为这类患者带来了新的希望。干细胞是具有自我更新及多向分化潜能的未分化细胞,存在于胚胎、胎儿或成年各阶段,这些特点使其成为细胞治疗及再生医学领域的研究热点。理论上,在适宜条件下,干细胞能分化为包括雌性生殖细胞在内的三胚层不同类型细胞,进而形成机体不同组织及器官。现今,多能干细胞诱导分化为雌性生殖细胞的实验研究取得了一定的成果,因此,干细胞转分化为雌性生殖细胞从而进行细胞移植治疗及卵巢组织再生可能作为未来治疗不孕不育的新方法。此综述旨在总结干细胞向雌性生殖细胞转分化的研究进展及其应用于生殖医学所面临的挑战。

文38块稠油开采问题初探

中国已探明石油可采储量约62亿吨,其中已累计采出34.6亿吨,剩余27.4亿吨。按目前的采油量计算,可供开采17年。在新增探明石油储量中低渗透和稠油等低品位储量比例逐年升高,未动用储量中大部分为难采储量,已开发油田总体进入高含水、高采出阶段,产量总递减已成明显趋势。稠油是世界经济发展的重要能源,目前国内对稠油的开采已具有多种成熟的工艺,因此,中原油田也必须加快向稠油开采进军的步伐。

宫颈卵巢原发性双癌和宫颈癌卵巢转移的临床分析

女性生殖系统多部位原发恶性肿瘤(multiple primary malignant carcinomas,MPMC)是指在同一女性生殖系统器官中,同时或先后原发于同一器官不同部位、或2个甚至多个器官的恶性肿瘤,其中以卵巢内膜原发性双癌发病率最高,宫颈卵巢原发性双癌较为罕见。然而与转移性癌相比较,MPMC通常期别较早,预后较好,目前尚无国际公认的标准治疗模式。因此在临床诊疗过程中,要注意鉴别多个肿瘤发生关系的原发性和转移性,做到及时诊断、及时治疗,尽量减少误诊、漏诊。该文就宫颈卵巢原发性双癌及宫颈癌卵巢转移方面的临床特点进行了综述。

杭州农村建筑工匠管理的问题与对策

农村建筑工匠作为农村建设的主力军,在农村住房等土木工程建设中扮演着举足轻重的角色,左右农村住房户型布局和材料选择,决定农村住房结构形式、施工技术和工程质量.工匠的技艺水平与敬业程度是影响农村住房质量的重要因素,因此,＂严把工匠关＂,加强农村建筑工匠管理,提高工匠业务水平,是规范农村住房建设施工行为,保障质量安全的客观需要,也是打造东方品质之城、建设幸福和谐杭州的内在要求.