口服妈富隆并延长氯米芬用药时间治疗耐氯米芬的无排卵患者

目的评价常规服用氯米芬促排卵失败的妇女口服避孕药妈富隆配合延长氯米芬服用时间促排卵的治疗效果。方法114例患者在采用传统方法促排卵连续3个周期失败后,改服妈富隆2个周期以上。自停药后月经第5天开始服用氯米芬(50mg/d)促排卵,阴道B超(TVS)监测记录卵泡生长,至出现优势卵泡停服。B超监测排卵经过以及子宫内膜厚度的变化。结果114例患者在服用氯米芬5天后有37例出现优势卵泡,35例成功排卵,2例出现卵泡黄素化未破裂综合征(LUFS);延长服药时间后又有34例成功排卵,17例出现LUFS,13例出现卵泡发育,但未形成优势卵泡即闭锁;13例无卵泡发育。结论对于耐氯米芬的无排卵患者口服妈富隆联合延长氯米芬服药时间,是一种有效的促排卵方案。

冷冻平皿并添加血清替代物改善小鼠囊胚的玻璃化冷冻效果

目的:观察在冷冻液中添加血清替代物(SSS)并使用冷冻的平皿作载体改善昆明小鼠囊胚玻璃化冷冻的效果。方法:平皿组冷冻保护液中添加高浓度SSS,处理好的囊胚滴在冷冻的平皿后投入液氮中行玻璃化冷冻;开放麦管组囊胚装入开放的麦管中玻璃化冷冻。冷冻一周,解冻后移入人输卵管液中孵育。结果:解冻后平皿组囊胚回收率100%,回收囊胚扩张率88%、孵化率82%;开放麦管组囊胚回收率89%,回收囊胚扩张率77%、孵化率67%,二者相比差异有显著性(P<0.05);平皿组囊胚质量分级退化率8%,开放麦管组退化率28%,但二者相比差异无显著性(P>0.05)。结论:保护液中添加血清替代物并使用冷冻的平皿可以改善小鼠囊胚玻璃化冷冻的效果。

伯克霍尔德氏菌胞外酯酶催化己酸乙酯合成的研究

从变质的食用油中分离得到1株具有产己酸乙酯酯化酶能力的伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.)X10,并对其发酵条件和酯化条件进行了优化。结果表明,该菌株最佳发酵条件为:淀粉4%,酵母膏3%,橄榄油4%,发酵液初始p H值6.5,培养温度30℃,转速180 r/min。最佳酯化条件为:己酸添加量2%,酯化温度35℃,酯化液初始p H4.6,振荡方式为连续振荡。优化条件下酯化酶活力由1.79 U/m L提高到3.53 U/m L,较优化前增加了97.21%。

GC双内标法同时测定发酵液中己酸和己酸乙酯的含量

建立毛细管气相色谱法同时测定发酵液中己酸和己酸乙酯的方法。发酵液经甲酸酸化后，用正己烷萃取，以2-乙基正丁酸和乙酸正丁酯作为双内标，采用Rtx-Wax毛细管色谱柱。结果表明，己酸和己酸乙酯浓度分别在100～1000 mg/100 mL（r=0.9991）、10～100 mg/100 mL（r=0.9995）质量浓度范围内线性关系良好，平均回收率（n=9）分别为101.74%、94.96%，RSD分别为0.85%、0.38%。该方法简单、灵敏、准确度高，可用于同时测定发酵液中己酸和己酸乙酯的含量。

子宫内膜异位症血清CA125水平与体外受精结局

目的:探讨子宫内膜异位症(EMs)不孕患者体外受精-胚胎移植(IVF-ET)前血清CA125水平与其结局的关系。方法:在控制性超排卵前一周期的非月经期测定65例(67个周期)中-重度EMs不孕(EMs组)及78例(78个周期)输卵管不孕(对照组)患者的血清CA125水平。对两组IVF-ET不同结局及其血清CA125水平进行分析。结果:EMs组IVF-ET不良结局发生率高于对照组(P=0.044),有不良结局的患者血清CA125水平高于对照组中相应的患者(P=0.000)。EMs组内不良结局患者血清CA125水平高于继续妊娠患者(P=0.002)。EMs组血清CA125水平与不良结局呈显著正相关(rs=0.427,P=0.002),血清CA125最佳截断点为12.37kU/L,当以CA125≥12.37kU/L为依据,判别EMs不孕患者IVF-ET不良结局的敏感性为83%(39/47),特异性为80%(16/20),准确率为82%(55/67)。结论:EMs患者IVF-ET前血清CA125≥12.37kU/L预示其结局可能不良。

卵母细胞体外成熟预防卵巢过度刺激综合征的应用

目的:探讨卵母细胞体外成熟预防卵巢过度刺激综合征(ovarian hyperstim- ulation syndrome,OHSS)的效果。方法:51例IVF长方案超排卵过程中出现OHSS早期征象时,按患者意愿分成两组,实验组于当天注射人绒毛膜促性腺激素(hCG)36h后取卵,经体外培养成熟行体外受精、胚胎移植;对照组则继续按常规用药方案及受精方案行胚胎移植。测定两组出现OHSS早期征象当日的E_2、统计FSH用药天数、用药量、受精率及临床妊娠率。结果:实验组与对照组在出现OHSS早期征象当日的血E_2水平、受精率、优质胚胎率、临床妊娠率无统计学差异;但实验组的FSH总用量、FSH用药天数、获卵数方面显著低于对照组(P<0.05)。实验组1例发生中度OHSS,对照组则发生3例重度OHSS和2例中度OHSS,重度OHSS发生率差异极显著(P<0.01)。结论:超排卵过程中,出现OHSS早期征象时改行卵母细胞体外成熟培养技术可有效地降低OHSS的发生率。

安徽地区1163例男性不育患者Y染色体无精子因子基因微缺失分析

目的通过分析安徽地区1 163例不育男性的Y染色体无精子因子(AZF)微缺失情况及特点,探讨其在诊治男性不育症中的临床价值。方法采用多重聚合酶链式反应(m PCR)技术扩增1 163例精子数目、活力异常的男性不育患者AZF基因的15个序列标签位点(STS),并使用琼脂糖凝胶电泳对目的片段进行鉴别分析。结果 1 163例不育患者中130例(11.18%)患者AZF基因位点发生微缺失。在AZF微缺失组合类型中,AZFc+AZFd位点微缺失最多,共97例(8.34%,97/1 163);其次为AZFb+AZFc+AZFd的组合缺失,共21例(1.81%,21/1 163);AZFa+AZFb+AZFc+AZFd四个AZF区域均发生缺失的患者,以及仅仅在AZFa区域发生微缺失的患者分别为6例,各占总不育患者的0.52%(6/1 163)。结论 Y染色体AZF区域微缺失是部分男性不育症的重要遗传致病因素,有必要对精液质量异常的男性不育患者进行AZF基因微缺失检测,将有助于明确病因并指导后续治疗。

迈之灵片治疗轻度精索静脉曲张伴弱精子症效果观察

目的 评价迈之灵治疗轻度精索静脉曲张伴弱精子症的临床效果.方法 选取2010年2月至2012年6月在安徽省宿州市立医院男性科门诊就诊的98例诊断为轻度VC伴弱精子症的患者,给予植物药制剂迈之灵片口服,150 mg/次,2次/d,6周为1个疗程,共治疗2个疗程,分别于治疗前和治疗后12周,采用计算机辅助精子自动分析系统进行精液参数分析,以评价治疗效果.结果 入选患者98例.共95例患者完成全部治疗疗程,中断或放弃治疗者3例,未纳入统计.除11例患者精液质量未见明显改善外,其余84例患者精液质量均有不同程度改善,有效率为88.4％（84/95）.其中,精子浓度和精液量治疗前后差异无统计学意义（P＞0.05）,精子总活力、前向运动精子率、快速前向运动精子率（直线速度＞35 μm/s）、平均运动速度（VAP）、直线运动速度（VSL）、曲线运动速度（VCL）等主要精子运动参数指标在治疗后均有明显改善[（40±14）％比（28±l2）％,（30±11）％比（18±9）％,（18±9）％比（l0±6）％,（26±6）μm/s比（21 ±4）μm/s,（24±6）μm/s比（21±5）μm/s,（32±6）μm/s比（26±6）μm/s]（均P＜0.01）.治疗期间及治疗后3个月内有12例患者配偶怀孕,怀孕率为12.6％ （12/95）.结论 迈之灵片对轻度VC伴弱精子症具有良好的治疗效果,且无明显不良反应.

体外成熟卵母细胞及畸形精子症体外受精方式的探讨

目的:为体外成熟卵母细胞(IVM)及重度畸形精子症选择有效、安全、经济的受精方式。方法:一组为拟接受常规体外受精(IVF)改为IVM的患者,另一组为重度畸形精子症患者(改良巴氏染色正常形态精子<5%,密度>20×106/mL,a+b级精子≥50%)。如患者获未成熟卵母细胞数≥15,选择其1/3卵母细胞行常规IVF方式受精,余2/3卵母细胞行单精子卵胞浆内注射方式受精。比较同一患者同一周期不同受精方式的受精率、卵裂率、优质胚胎率。结果:两种受精方式的受精率、卵裂率、优质胚胎率均无明显差异,两组中共有4例临床妊娠。结论:(1)为防止超排卵发生的卵巢过度刺激而由常规IVF改为IVM时,若男方精液质量和形态均正常,可以选择常规IVF方式受精。(2)重度畸形精子症者若精液质量正常,亦可选择常规IVF方式受精。

两种方法处理后精子形态的变化

目的研究上游法和密度梯度离心法(Percoll法)处理前后精子畸形率的改变。方法60例精液标本分别行上游法和密度梯度离心法优选,处理前后均行精子形态改良巴氏染色分析。结果上游法和密度梯度离心法都可以显著降低精子的畸形率,上游法以颈部和尾部畸形最为明显,其他畸形降低不显著;而密度梯度离心法处理后精子以大头和双头畸形降低较为显著,其他种类畸形精子率下降不显著。结论上游法和密度梯度离心法对改善精子畸形率的作用有限。

不同浓度的蔗糖溶液快速冻存人类精子的实验研究

目的:探讨使用非渗透性冷冻保护剂蔗糖快速冻存人类精子的可行性。方法:收集正常精液标本40份,经上游法处理后,收集上游精子悬液,分成6份,1份作为对照,其余5份分别用常规精子冷冻法,0.15、0.20、0.25、0.30 mol/L蔗糖溶液冷冻精子,复苏后比较6组精子活动率、前向运动精子活动率及精子质膜完整性。结果:所有冷冻组复苏后精子活动率、前向运动精子活动率及膜完整率与冷冻前上游组(96.2±1.8)%,(93.8±2.8)%,(99.0±0.8)%比较均显著下降,差异有显著性(P<0.05)。精子活动率结果:蔗糖冷冻组之间比较,0.20 mol/L组解冻后精子活动率高于0.15、0.25、0.30 mol/L组,分别为(55.5±6.3)%、(45.9±6.6)%、(50.4±9.4)%、(45.5±11.2)%,差异有显著性(P<0.05)。0.20、0.25 mol/L蔗糖冷冻组与常规慢速冷冻组(53.6±5.0)%比较,差异均无显著性(P>0.05);0.15、0.30 mol/L蔗糖组均低于常规慢速冷冻组(P<0.05)。前向运动精子活动率结果:0.20 mol/L蔗糖冷冻组与常规冷冻组比较差异无显著性[(44.4±7.4)%vs(42.3±8.1)%,P>0.05];以上两组均高于0.15、0.25、0.30 mol/L蔗糖冷冻组,分别为(37.1±8.3)%、(33.1±9.2)%、(22.0±9.1)%,差异有显著性(P<0.05)。精子膜完整率结果:0.20 mol/L蔗糖冷冻组(70.1±6.9)%高于常规冷冻组、0.15、0.25、0.30 mol/L蔗糖冷冻组,分别为(63.1±6.8)%、(57.7±8.3)%、(63.5±10.7)%、(57.8±12.9)%,差异有显著性(P<0.05);常规冷冻组与0.15、0.25、0.30 mol/L蔗糖冷冻组比较差异无显著性(P>0.05)。结论:终浓度为0.20 mol/L的蔗糖溶液作为人类精子冷冻保护剂是可行的,快速冷冻方法简便、快速、经济、安全有效。

毛细管电泳用于Y染色体微缺失的研究

目的:探讨毛细管电泳在研究男性不育中特发性无精子症和射出精液严重少精子症与Y染色体无精子因子(azoospermiafactor,AZF)缺失的作用。方法:应用多重PCR技术对4例无精子症和29例严重少精子症患者的外周血细胞中Y染色体AZF所在的11.23区的15个位点进行扩增,分别用琼脂糖凝胶电泳和毛细管电泳分离扩增产物,并以6例正常生育男性和2例女性为对照。结果:毛细管电泳发现4例无精子症中3例发生缺失,29例严重少精子症患者中6例发生缺失。其中6例同为SY254(C)、SY242(C)、SY255(C)、SY239(C)、SY152(D)缺失。6例正常生育男性毛细管电泳未发现Y染色体微缺失,而凝胶电泳有2个条带模糊,难以判断。结论:毛细管电泳可提高AZF检测准确性。Y染色体AZFc/DAZ的缺失可能是引起无精子和严重少精子并造成男性不育的重要原因之一。

人-兔异种核移植构建克隆胚的实验研究

“治疗性克隆”是人类最关注的课题之一,而人体细胞核移植是治疗性克隆的基础和前提。异种核移植的方法虽已被引入人体细胞克隆胚的构建,但供体细胞的类型、培养代数及准备方法与其效率之间的关系尚有待探讨。本实验以不同培养代数和不同准备方法的人卵丘细胞、皮肤成纤维细胞和软骨细胞为供体构建了克隆胚,对其发育情况的比较表明,以卵丘细胞为供体时重构胚的体外发育率高于其余二者,差异显著(P<0.05);不同培养代数的成纤维细胞克隆胚和不同冷藏天数供体细胞克隆胚体外发育率无明显差异。此外,本实验还尝试用荧光原位杂交法检测所构建的异种克隆胚核遗传物质的来源,结果显示来自人体细胞。本研究表明,人-兔异种核移植构建克隆胚切实可行;体细胞的类型与核移植效率相关;供体细胞的体外培养传代对克隆胚的发育并无影响;而冷藏是一种简便有效的供体细胞准备方法;此外,用FISH方法对重构胚进行核遗传物质的鉴定切实可行。

控制性卵巢刺激方案及血清CA125水平对复发性卵巢子宫内膜异位囊肿患者体外受精-胚胎移植结局的影响

目的研究卵巢刺激方案及血清CA125水平对手术后复发的卵巢子宫内膜异位囊肿不孕患者体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗结果的影响。方法回顾分析2004年1月至2007年12月间经IVF治疗的39个周期(38例)卵巢子宫内膜异位囊肿手术后复发的不孕妇女治疗的临床结果,以及卵巢刺激方案与垂体降调后血清CA125水平间的相关性。结果长效促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)垂体降调后采用短方案卵巢刺激13个周期,临床妊娠6个周期(46.2%);长方案卵巢刺激26个周期,临床妊娠8个周期(30.8%)。长方案组周期平均获卵数(8.42±5.22)显著高于短方案组(5.00±2.35)(P=0.021),但受精率、周期临床妊娠率组间无显著差异(P=0.482)。垂体降调后23个周期血清CA125为(18.5±12.6)U/ml;其中妊娠8例CA125为(10.2±5.8)U/ml,与妊娠结局呈显著负相关(r=-0.492,P=0.017)。结论卵巢子宫内膜异位囊肿术后复发的不孕妇女,垂体降调后作IVF有较好疗效。卵巢刺激短方案或长方案的妊娠结局无显著差异。降调后血清CA125水平可作为疗效的预测指标。

严重生精功能障碍患者细胞和分子遗传学检查

目的检测严重生精功能障碍患者外周血染色体及Y染色体微缺失,探讨Y染色体微缺失的遗传机制,为拟行ICSI(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)技术助孕的患者提供遗传咨询。方法按常规方法分析严重生精功能障碍患者的外周血淋巴细胞核型,对核型正常的患者,用多重PCR技术对Y染色体AZF(azoospermua fctor,AZF)所在区域的 15个序列标签位点(sequence tag site,STS)进行扩增,应用琼脂糖凝胶电泳分离扩增产物,对有AZF缺失的患者,随访其父亲的生育及AZF缺失情况。结果 71例无精子症患者中有25例染色体核型异常,异常率35．1％,1例核型为46,XY (小Y);75例严重少精子症患者中有4例46,XY(小Y);45例染色体核型正常的严重生精功能障碍患者,14例发生 AZF缺失(31．11％)。严重生精功能障碍患者总遗传缺陷发生率26．7％。所有AZF缺失患者父亲平均生育4．0个子女,其中有5例AZF缺失患者的父亲接受AZF检测,均无缺失。结论 1．染色体异常和AZF的缺失是引起无精子和严重少精子并造成男性不育的重要原因之一。AZF缺失可能并非有父亲遗传而来,其遗传机制尚有待进一步探讨。2．ICSI助孕前,夫妇双方须行遗传学检查以避免遗传缺陷后代的出生。

精液常规联合改良巴氏染色检查在辅助生殖技术中的应用

目的研究少、弱精子症与经改良巴氏染色后精子形态的关系,为选择合适的辅助生殖技术提供依据。方法对262位患者进行精液常规分析和改良巴氏染色检查。结果少精子症患者的正常形态精子百分率的中位数为4.00,正常密度者中位数为8.21,少精子症组和正常密度组的正常形态精子比例的差异有统计学意义;弱精子症患者正常形态精子百分率的中位数为6.67,精子活力正常组则为10.89,两者差异有统计学意义。结论改良巴氏染色法检查精子形态对助孕方式的选择有重要价值。

合肥地区复发性流产夫妇细胞遗传学分析(附6例世界首报异常核型)

对395对复发性流产夫妇进行外周血淋巴细胞染色体分析,结果发现32例染色体核型异常,占受检人数的4·05%,其中有6例为世界首报染色体异常核型。异常核型中男性13例,女性19例,男女发生率无明显悬殊。同时发现流产4次以下夫妇中流产次数与染色体异常的发生率呈正相关,但流产5次以上夫妇中染色体异常的发生率有下降的趋势,6次以上流产夫妇中未发现染色体异常者。对于染色体异常夫妇给予遗传咨询和生育指导。提示:复发性流产夫妇中染色体异常的发生率与与性别无关,与流产次数有一定关联,对一方为染色体异常的复发性流产夫妇给予生育指导可避免继续反复流产和畸形儿出生。

前列培元利湿汤加减治疗慢性前列腺炎继发性功能减退疗效观察

目的:观察前列培元利湿汤加减治疗脾肾两虚型慢性前列腺炎(CP)继发性功能减退的疗效。方法:采用随机数字表法将2019年6月~2020年10月于我院治疗的58例脾肾两虚型CP继发性功能减退患者分为观察组和对照组,每组各29例。对照组给予伐地那非治疗,观察组患者在此基础上给予前列培元利湿汤治疗,两组患者均治疗8周。记录两组患者临床疗效,观察治疗前、治疗8周后两组患者性功能相关指标[美国国立卫生研究院CP症状积分指数(NIH-CPSI)、国际勃起功能指数5(IIEF-5)、勃起硬度评估(EHS)]、阴茎血流动力学[收缩期峰值流速(PSV)、舒张末期流速(EDV)、阻力指数(RI)]、前列腺液炎性因子[白介素1β(IL-1β)、白介素4(IL-4)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)]及心理状态[健康问卷抑郁症状群量表(PHQ-9)、广泛性焦虑量表(GAD-7)]变化情况。结果:观察组临床总有效率为96.55%,明显高于对照组的82.76%(P<0.05)。治疗8周后,两组患者NIH-CPSI、PHQ-9、GAD-7评分及PSV、IL-1β、IL-4、TNF-α、IFN-γ水平明显低于治疗前,且观察组低于同期对照组(P<0.05);两组患者IIEF-5、EHS评分及EDV、RI水平均明显高于治疗前,且观察组高于同期对照组(P<0.05)。结论:前列培元利湿汤加减治疗脾肾两虚型CP继发性功能减退疗效显著,可有效减轻前列腺炎症状,改善性功能及不良心理状态。