胚胎形态动力学参数在胚胎整倍体预测模型构建中的应用研究

目的:基于胚胎形态动力学参数建立整倍体预测模型,为辅助生殖技术中胚胎发育潜能的评估提供参考。方法:回顾性分析2020年12月至2023年6月接受胚胎植入前遗传学检测患者的临床资料,共纳入364个周期的1383个可利用囊胚。根据囊胚整倍性分为整倍体组(442个囊胚)和非整倍体组(941个囊胚)。比较两组胚胎形态动力学参数,并进行多因素logistic回归分析,构建整倍体预测模型,采用ROC曲线分析整倍体预测模型的灵敏度和特异度。另选取2023年7月至2024年4月纳入的215个周期的658个可利用囊胚的形态动力学参数资料进行临床验证,分析预测模型与临床实际的一致性。结果:整倍体组的t4、t5、s2、形成囊胚时间(tSB)、囊胚孵出时间(tHB)、tHB-tSB均小于非整倍体组(P<0.05)。logistic回归分析显示,t4、t5、s2、tSB、tHB、tHB-tSB为囊胚整倍性的影响因素(P<0.05)。整倍体预测模型:P=e x/(1+e x),X=-3.299-0.026×t4-0.018×t5-0.264×s2-0.009×tSB-0.007×tHB-0.153×tHB-tSB。Hosmer-Lemeshow拟合优度检验显示整倍体预测模型的拟合水平较好(χ^(2)=8.700,P=0.368)。整倍体预测模型的ROC曲线下面积为0.871(95%CI=0.852~0.889,P<0.001),灵敏度为75.86%,特异度为82.11%。临床验证整倍体预测模型的准确率为79.94%,预测模型与临床实际的一致性中等(kappa=0.561)。结论:胚胎形态动力学参数t4、t5、s2、tSB、tHB、tHB-tSB与整倍体形成具有相关性。本研究基于胚胎形态动力学参数构建的整倍体预测模型对胚胎整倍性具有较高的预测价值,可为胚胎发育潜能的评估提供参考。

济宁地区孕产妇人体寄生虫病防治知识的调查与分析

目的 了解济宁地区孕产妇对相关人体寄生虫病防控知识的知晓情况,加强健康教育促进优生优育。方法 针对2023年7—10月来济宁医学院附属医院就诊的20岁以上孕/产妇发放统一设计的调查问卷,采用Excel 2019软件建立数据库,分别计算1胎孕/产妇、2胎孕/产妇、3胎孕/产妇对问卷的知晓情况;采用SPSS 26.0软件对来自不同地区、年龄段、文化程度以及职业的孕产妇进行统计分析,差异采用χ^(2)检验进行比较。结果 参与调查的有效孕产妇人数为630人,总体正确率为74.79%,各类孕产妇的综合正确率由高到低分别为3胎孕/产妇(83.22%)、2胎孕/产妇(76.57%)、1胎孕产妇(74.69%),不同地区、年龄段、文化程度以及职业等变量的差异具有统计学意义(χ^(2)=19.791,16.455,40.040,42.074,P均<0.01)。结论 济宁地区孕产妇对人体寄生虫病防治知识的知晓率欠佳,且不同人群变量之间差异较大,今后应加强济宁地区孕产妇对人体寄生虫病健康意识,普及优生优育防治知识。

无血清培养上调N2a细胞钙反应性反式激活因子的表达

目的探讨钙反应性反式激活因子(calcium-responsive transactivator,CREST)是否与神经细胞的分化有关。方法选用在促分化因素作用下具有分化为神经元能力的小鼠神经母细胞瘤(N2a)细胞,用无血清培养(血清撤除)诱导N2a细胞分化。接种和培养N2a细胞12～24h后,将其分为对照组和无血清诱导组,对照组继续在含5%胎牛血清(FBS)的培养基中培养,无血清诱导组在不含FBS的培养基中培养。采用免疫印迹技术、免疫荧光技术和RT-PCR检测无血清诱导分化对N2a细胞CREST蛋白和mRNA表达的影响。结果在含5%胎牛血清(FBS)培养基培养的对照N2a细胞中,CREST蛋白水平在各时间点均无明显变化,CREST mRNA水平仅在培养48h后略有升高。而在无血清诱导分化的N2a细胞中,CREST蛋白表达水平在无血清诱导12h时无明显变化,但在诱导24h后明显升高,诱导48h后进一步升高;RT-PCR检测显示,CREST mRNA在无血清诱导12h后即开始升高,诱导24h和48h则升高更为明显。结论无血清诱导分化的N2a细胞中CREST的表达上调,提示CREST可能参与神经细胞的分化。

Beclin1调控的自噬在胚胎碎片形成中的作用及机制研究

目的:Beclin1调控的自噬在胚胎碎片形成中的作用及可能机制。方法:选择2016年7月至2019年10月我院行取卵体外受精的患者240例,选取胚胎(3PN)后根据碎片含量不同,细分为如下四组:低碎片组(碎片比例<10%)、中低碎片组(25%>碎片比例≥10%)、中高碎片组(50%>碎片比例≥25%)、高碎片组(碎片比例≥50%),每组均60例。使用G2囊胚培养液对所选胚胎进行培养,使用干扰素(浓度40ng/mL)干扰36h。采用免疫印迹法定量检测Beclin1蛋白、PI3K蛋白、LC3B蛋白、mTOR蛋白、AKT蛋白含量。结果:干扰前后比较,四组患者Beclin1蛋白、PI3K蛋白、LC3B蛋白、mTOR蛋白、AKT蛋白含量均显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。干扰前比较6项蛋白含量,从高到低依次为:低碎片组、中低碎片组、中高碎片组、高碎片组,差异均有统计学意义(P<0.05)。干扰后比较,四组患者Beclin1蛋白、PI3K蛋白、LC3B蛋白含量的差异均有统计学意义(P<0.05)。Beclin1与PI3K、LC3B、mTOR、AKT相关性均有统计学意义(P<0.05)。结论:高比例胚胎碎片将抑制Beclin1、PI3K、LC3B、mTOR、AKT蛋白含量,Beclin1调控自噬过程可能产生干扰素类似效应,从而影响相关通道蛋白的表达。

不孕患者血清和卵泡液中抗米勒管激素及白细胞介素6与卵巢过度刺激综合征的相关性研究

目的探讨不孕患者血清和卵泡液中抗米勒管激素(AMH)及白细胞介素6(IL⁃6)与卵巢过度刺激综合征(OHSS)的相关性。方法回顾性选取2020年1月至2022年12月济宁医学院附属医院收治的150例接受辅助生殖技术治疗的不孕女性患者。根据是否发生OHSS将患者分为OHSS组(43例)和非OHSS组(107例)。比较2组患者血清性激素、血清和卵泡液中AMH及IL⁃6水平,使用Pearson法分析血清和卵泡液AMH、IL⁃6与OHSS的相关性。结果OHSS组血清雌二醇水平显著高于非OHSS组(P<0.05),而黄体生成素水平明显低于非OHSS组(P<0.05);OHSS组患者血清和卵泡液中AMH、IL⁃6水平均显著高于非OHSS组[血清:(6.1±1.8)μg/L比(3.3±1.0)μg/L、(4.0±1.1)ng/L比(2.5±0.8)ng/L;卵泡液:(7.4±2.2)μg/L比(4.2±1.2)μg/L、(23.9±7.0)ng/L比(11.7±3.3)ng/L](均P<0.001)。Pearson分析结果显示,血清AMH和卵泡液AMH、IL⁃6水平与OHSS严重程度呈明显正相关(均P<0.05)。结论不孕患者血清AMH和卵泡液AMH、IL⁃6水平与OHSS发生及严重程度密切相关,建议对辅助生殖技术治疗者予以密切监测。

血栓闭塞性脉管炎的临床管理及进展

血栓闭塞性脉管炎(TAO)也称为Buerger’s病,临床表现为肢体远端缺血和血栓性浅静脉炎,其主要导致中小动静脉节段性闭塞性慢性病变,好发于45岁以下男性青壮年,但近年来女性的TAO发病率在逐步升高。TAO是导致青壮年严重下肢缺血的难治性血管疾病,截肢率和致残率极高。目前,TAO的病因尚不明确,其病理改变不同于动脉硬化、创伤性动脉血栓形成、腘动脉限迫综合征、血管炎性病变。TAO在世界范围内均可发病,但东亚地区的发病率较高。针对TAO的治疗手段有限,预后差,近年来,国内外学者在不断地研究TAO的发病机制和治疗方式,更多的危险因素被发现,包括吸烟、基因改变、牙周炎等因素,同时关于TAO患者治疗过程中心理管理、疼痛管理、伤口管理及自我管理等的研究逐步增多。本文结合相关文献,对TAO发生的危险因素、发病机制、管理原则及治疗进展进行综述。

CREST对N2a细胞突起生长的影响

目的观察钙反应性反式激活因子(CREST)过表达对小鼠神经母细胞瘤(N2a)细胞突起生长的影响。方法实验分为3组,实验组用pCMV-HA-CREST转染的N2a细胞,空载体对照组用pCMV-HA转染的N2a细胞,空白对照组用未转染任何试剂的N2a细胞,分别加入70mmol/L KCl孵育过夜。在转染后24h,48h采用考马斯亮蓝染色法检测N2a细胞突起生长状态。结果在转染后24h,CREST基因过表达的细胞与两对照组细胞相比较,细胞突起生长差异无显著性。在转染后48h,CREST基因过表达的细胞与两对照组细胞相比较,突起生长明显,部分突起交织成网络。两对照组间在细胞转染后各时间点突起生长状态差异无显著性(P<0.05)。结论过表达CREST可促进N2a细胞突起的生长。

D3卵裂期胚胎冻融后移植与冻融后培养至囊胚移植临床结局分析

目的分析D3卵裂期胚胎冻融后移植与冻融后培养至囊胚移植临床结局差异,探讨冻存的D3卵裂期胚胎解冻后培养至囊胚移植对临床妊娠结局的影响。方法选取2010年1月至2015年7月在我院生殖中心接受常规黄体期长方案行体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)治疗且有D3胚胎冻存的不孕不育夫妇为研究对象,以行D3卵裂期胚胎冻融后培养至囊胚移植为实验组,共44个周期;以D3卵裂期胚胎冻融后移植为对照组,共58个周期;分析卵裂期胚胎冻融后囊胚形成率,两组解冻周期临床妊娠率、移植周期临床妊娠率、多胎率和早期流产率等临床结局间差异。结果 D3卵裂期胚胎冻融后培养囊胚形成率为45.1%;实验组解冻周期临床妊娠率和移植周期临床妊娠率为63.6%和71.8%,高于对照组43.1%和43.9%(P<0.05),实验组种植率为57.8%显著高于对照组26.7%(P<0.01);实验组多胎率为35.7%,高于对照组的32.0%,但两组间差异无统计学意义(P>0.05);囊胚移植组早期流产率为7.7%,低于对照组14.8%,但两组间无统计学差异(P>0.05)。结论 D3卵裂期胚胎冻融后培养至囊胚移植可以得到较好的临床结果,但有无囊胚形成而取消移植的风险,卵裂期胚胎冻融后体外培养至囊胚阶段移植需要结合患者具体情况谨慎的开展。

肾移植受者家属心理历程的质性研究

目的深入了解和探索肾移植受者家属在对患者的整个照顾过程中的真实心理历程，为临床护理人员对肾移植家庭进行心理支持提供借鉴。方法运用Edmund Husserl和Heidegger的观点构成的质性研究，与11名全程照顾肾移植患者的家属进行深入访谈，现场录音和笔录，并运用Colaizzi的分析程序进行分析。结果了解到了肾移植患者家属情感变化的特点以及其压力来源及特点。结论肾移植患者家属需要得到更广泛而持续的支持，护理人员应当采取个性化的护理措施，帮助和指导肾移植患者及家属提高生活质量。

HBsAg阳性患者行IVF-ET治疗对早期胚胎发育及妊娠结局的影响

目的探讨HBs Ag阳性患者行IVF-ET治疗对早期胚胎发育及妊娠结局的影响。方法选取在我院生殖中心接受常规黄体期长方案行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的不孕不育夫妇,以夫妇双方至少一方血清HBs Ag检测结果为阳性的124对夫妇为实验组,以夫妇双方血清HBs Ag检测结果均为阴性的316对夫妇为对照组,回顾性分析两组间受精情况、早期胚胎发育情况及妊娠结局间差异。结果实验组和对照组组间年龄、不育年限、基础FSH、GN用量等基础情况均无统计学差异(P>0.05);两组间受精率、卵裂率、优质胚胎率、种植率、临床妊娠率也均无统计学差异(P>0.05)。结论 HBs Ag阳性患者行IVF-ET治疗对早期胚胎发育及妊娠结局均无显著性影响。

人卵胞浆内单精子显微注射对囊胚印迹基因H19甲基化的影响

目的探讨人卵胞浆内单精子显微注射技术(ICSI)侵入性操作对囊胚期胚胎印迹基因H19差异性甲基化区(DMR)Cp G岛甲基化的影响。方法对行人类辅助生殖技术(ART)助孕患者自愿放弃并签署科研捐献知情同意书后的胚胎,依据胚胎来源分成常规IVF组、ICSI组、早期补救ICSI(R-ICSI)三组,继续培养至囊胚阶段;并采用重亚硫酸盐DNA测序法(BSP)对所获得的囊胚行H19这个经典的且对环境敏感的印迹基因差异性甲基化区(DMR)Cp G岛甲基化程度进行检测,并统计三组的甲基化程度差异。结果 BSP法单囊胚扩增成功率为2.4%,ICSI组和R-ICSI组囊胚H19基因甲基化阳性率为27.3%和25.5%,低于常规IVF组49.5%的甲基化阳性率,差异有统计学意义(P<0.05);但ICSI组和R-ICSI组两组间无统计学差异(P>0.05);结论 ICSI技术侵入性操作可造成囊胚期胚胎印迹基因H19差异性甲基化区(DMR)Cp G岛甲基化程度的降低,造成甲基化的丢失和甲基化模式的异常,其甲基化模式的异常对胎儿发育及子代影响需要进一步研究。

膀胱全切术后行腹壁造口患者照顾者创伤后成长体验的质性研究

目的深入了解膀胱全切术后行腹壁造口患者照顾者创伤后成长的真实体验。方法采用现象学研究方法,通过目的抽样,于2021年1月—5月对杭州市某三级甲等医院泌尿外科11名膀胱全切术后行腹壁造口患者照顾者进行半结构式访谈,借助Nvivo11软件整理访谈资料,采用Colaizzi 7步分析法分析资料。结果膀胱全切术后行腹壁造口患者照顾者创伤后成长的真实体验可分为4个主题:①个人力量增强(自我效能感增强、接受能力增强、责任感增强);②与他人关系的改变(家庭关系更加和谐、为己利他行为、感受到他人的帮助);③新的可能性(实现新的价值、憧憬未来生活);④人生哲学的变化(改变生活的优先次序、对生命价值的欣赏)。结论膀胱全切术后行腹壁造口患者照顾者在照顾过程中能体验创伤后成长,呈现积极的自我变化,护理人员应从成长的角度出发,关注照顾者的积极体验,充分发掘照顾者的潜能和力量,提高其照顾质量。