食管鳞癌组织芯片中MTA1蛋白表达的免疫组织化学研究

目的研究食管鳞癌组织中转移相关基因MTA1蛋白定位及表达水平的改变及与食管鳞癌进展、转移的关系。方法应用食管鳞癌组织芯片通过免疫组织化学染色研究MTA1蛋白在食管癌中的表达情况。结果MTA1蛋白在食管鳞癌组织中主要定位于胞核,在淋巴结转移灶中出现胞浆与胞核同时着色。正常组织与重度不典型增生、原位癌及癌组织之间差异有统计学意义,在食管鳞癌不同进展阶段的组织中MTA1表达逐渐升高,并且出现异位表达。结论MTA1与食管鳞癌的侵袭和转移高度相关,在食管鳞癌的发展过程中可能发挥着重要作用,可作为判断食管癌侵袭及转移能力的辅助因子。

P2P平台迎跑路与融资潮 钱途光明还是火中取栗?

事件背景:6月4日,北京P2P平台"网金宝"被证实已跑路。6月9日,P2P平台"科迅网"被曝已跑路。6月18日,P2P平台"有利网"宣布完成近5000万美元的B轮融资,投资机构为晨兴资本;据报道有利网此轮融资估值超20亿元人民币,是A轮估值的5倍。6月19日,专注于汽车抵押借贷细分领域的P2P平台"微贷网"获汉鼎宇佑集团和盛大资亿元人民币投资。6月20日,北京"融信宝"法人代表跑路。相关数据据中国电子商务研究中心(100EC.CN)监测数据显示。

RNA干扰技术的应用

RNA干扰(RNAi)能产生序列特异性的基因沉默。RNAi的研究与应用在短时间内得到了迅速发展,其应用主要围绕特异性降解同源mRNA的作用方面。现对其应用进展进行综述。

互联网巨头发力消费金融

在国内互联网巨头纷纷展开对消费金融业务布局的同时，市场风险及监管缺失的问题不可避免地出现了。如何理顺监管．保证市场健康发展，是巨头们成功的关键。

天猫“双十一”新政背后

随着“双十一”的临近,各大电商又开始使出浑身解数招揽消费者,天猫更是对此不遗余力。电商价格战肯定是要打的,但是让价格战更有新意才是最重要的。 就笔者所知,蚂蚁小贷与天猫推行的天猫分期购在完成在天猫电器城试运营后,将要扩展至天猫家电、化妆品、数码、服饰、家装、汽车等所有商品类目。目前已经覆盖了15万家商户、80万余款商品。

“双十二”移动支付热闹了谁

在攻占了线上支付的大部分市场之后，阿里巴巴又将目光瞄准了线下支付。2014年“双十二”，线下门店排起的一条条长队成了一道另类的风景线。

肿瘤转移的几种理论模型及其意义

肿瘤转移是恶性肿瘤的主要特征，也是肿瘤患者致死的主要原因。没有发生转移的恶性肿瘤的治疗预后很好；而一旦发生了转移，患者基本上已经失去了彻底治愈肿瘤的机会。因此，肿瘤转移是肿瘤临床治疗实践中迫切需要解决的问题，肿瘤转移的机制研究也成为当前研究的热点。

黑色素瘤分化相关基因-7研究进展

黑色素瘤分化相关基因 7(MDA 7)是一分泌型肿瘤细胞抑制因子。许多肿瘤细胞MDA 7mRNA水平明显高于原发和转移的人黑色素瘤细胞。MDA 7通过抑制血管生成、激活GADD等信号传导途径 ,促进肿瘤细胞的生长抑制和凋亡 ,而对正常细胞无明显影响。MDA 7是第一个被报道的具有白介素作用的肿瘤抑制分子。

紫杉醇联合卡铂周疗和三周疗法治疗卵巢癌的Meta分析

目的系统评价紫杉醇联合卡铂周疗和三周疗法治疗卵巢癌的有效性及安全性。方法计算机检索Pub Med、EMbase、The Cochrane Library（2016年第2期）、WHO国际临床试验注册平台（ICTRP）、CNKI、VIP和Wan Fang Data数据库,搜集每周与每三周紫杉醇联合卡铂化疗方案治疗卵巢癌的随机对照试验,检索时限均为从建库至2016年2月。由2位评价者按照纳入与排除标准独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险后,采用Rev Man 5.3软件进行Meta分析。结果共纳入9个研究共2723例患者。Meta分析结果显示：与紫杉醇联合卡铂三周疗法比较,紫杉醇联合卡铂周疗能提高卵巢癌患者的总生存率（OS）（HR=0.85,95%CI 0.73~0.98,P=0.03）,但在治疗有效率（OR=1.13,95%CI 0.91~1.39,P=0.27）、生存率（OR=1.10,95%CI 0.99~1.22,P=0.07）和无进展生存期（PFS）（HR=0.89,95%CI0.74~1.06,P=0.18）方面两组差异无统计学意义。在安全性方面,紫杉醇联合卡铂周疗组血液系统的不良反应高于三周疗组,差异有统计学意义（OR=1.68,95%CI 1.20~2.36,P=0.003）。紫杉醇联合卡铂周疗组在导致呕吐（OR=0.67,95%CI 0.54~0.83,P=0.0002）、脱发（OR=0.57,95%CI 0.44~0.74,P〈0.0001）方面低于三周疗组,差异均有统计学意义,但在肝功能异常（OR=1.30,95%CI 0.88~1.90,P=0.19）、肾功能异常（OR=1.07,95%CI 0.65~1.77,P=0.79）、感觉异常（OR=1.13,95%CI 0.91~1.41,P=0.26）、心电图异常（OR=0.74,95%CI 0.35~1.58,P=0.44）等方面两组差异均无统计学意义。结论紫杉醇联合卡铂周疗可改提高卵巢癌患者的OS,降低呕吐、脱发发生率,在治疗有效率、生存率、PFS、肝功能异常、肾功能异常、感觉异常和心电图异常等方面与三周疗法无明显差异。但每周治疗组的血液系统不良反应高于每三周治疗组。

食管癌细胞来源的外泌体对肿瘤细胞迁移及侵袭能力的影响及机制研究

目的探讨食管癌KYSE410细胞来源的外泌体对肿瘤细胞迁移及侵袭能力的影响及其机制。方法超速离心法分离食管癌KYSE410细胞培养上清中的外泌体;采用透射电镜及Western blotting观察所获得的外泌体的形态及其标志物;共聚焦显微镜观察KYSE410、KYSE510和YES2细胞摄取荧光染料标记的KYSE410外泌体;采用Transwell小室实验分析3种食管癌细胞的迁移及侵袭能力以及KYSE410外泌体对3种食管癌细胞迁移及侵袭能力的影响;Western blotting检测Wnt/β-catenin和PI3K/Akt信号通路相关蛋白的变化。结果透射电镜下观察KYSE410外泌体具有膜结构,直径分布在30~100nm;3种食管癌细胞的迁移及侵袭能力从大到小依次为KYSE410、KYSE510、YES2;KYSE410外泌体能够促进KYSE410、KYSE510、YES2细胞迁移及侵袭能力并增强3种食管癌细胞中β-catenin和p-Akt的表达。结论来源于高迁移及侵袭能力的食管癌KYSE410细胞的外泌体能够促进自身和低迁移及侵袭能力的食管癌KYSE510、YES2细胞的迁移和侵袭,并且可能通过激活Wnt/β-catenin和PI3K/Akt信号通路发挥上述作用。

宫颈癌中转移相关基因MTA1高表达的临床意义及其协同表达基因的生物信息学分析

目的分析转移相关基因MTA1高表达与宫颈癌临床转移的相关性,并筛选MTA1协同表达基因网络中的潜在干预靶点基因。方法应用SPSS软件分析TCGA-CESC数据集中MTA1与宫颈癌转移和病理分级的相关性,应用edge R软件分析该数据集中MTA1高表达组与低表达组的全转录组差异表达基因,应用DAVID平台对这些差异表达基因进行聚类分析,应用STRING在线平台和Cytospace软件对这些基因进行互作网络分析,筛选关键的网络节点基因。结果TCGA-CESC宫颈癌数据库中MTA1表达水平与肿瘤临床转移和病理分级呈显著正相关(P<0.01),在不同MTA1表达水平的宫颈癌转录组中存在显著且较一致的差异表达基因集,这些基因主要聚集在癌症通路、干细胞通路、细胞转移、细胞分化等方面,与肿瘤的恶性生物学行为显著相关。基因筛选显示,宫颈癌中与MTA1协同表达的Agt、Acta1、Fpr2、Pmch和RGS18等基因是差异表达基因集中最重要的节点基因,这些基因聚集在GPCR相关通路。结论 MTA1高表达与宫颈癌转移显著相关,且与肿瘤细胞的干细胞通路、趋化因子受体通路、细胞转移、细胞分化等基因调控网络活化相关。MTA1的协同表达基因网络中的节点基因可能参与了宫颈癌的转移调控,并最有可能成为宫颈癌治疗的分子靶点。

甲状腺癌中CCR7和D2-40的表达及其与淋巴结转移的关系

目的研究趋化因子受体7(CCR7)及D2-40在甲状腺癌组织中的表达及其与淋巴结转移的关系。方法应用MAX Vision免疫组织化学法研究二者在甲状腺癌和正常甲状腺组织中的表达情况,并以淋巴管内皮标记物D2-40计算微淋巴管密度(lymphatic microvessel density,MLVD)。结果 CCR7在87例甲状腺癌和正常甲状腺组织中阳性率分别为66.7%和15%;乳头状癌、髓样癌、滤泡癌、未分化癌CCR7阳性率分别为75.0%、70.0%、73.0%、25.0%,淋巴结阳性组(40?49)与淋巴结阴性组(18?38)CCR7阳性率分别为81.6%、47.4%(P<0.05)。D2-40标记的MLVD计数在甲状腺癌和正常甲状腺组织中分别为5.72±2.89、2.60±1.14,甲状腺乳头状癌、髓样癌、滤泡癌、未分化癌中分别为7.55±2.29、6.60±1.75、4.27±1.10、1.00±0.34。甲状腺癌中淋巴结阳性组与淋巴结阴性组D2-40标记的MLVD计数分别为9.39±4.24、3.24±1.67(P<0.05)。CCR7阳性组MLVD(9.37±2.25)高于阴性组(5.51±2.47),差异有统计学意义(P<0.05)。D2-40标记的MLVD与CCR7表达呈正相关(rs=0.645,P<0.001)。CCR7、D2-40标记的MLVD与淋巴结转移呈正相关,甲状腺癌中淋巴结转移阳性组CCR7、D2-40标记的MLVD高于淋巴结转移阴性组。结论肿瘤细胞高表达CCR7,D2-40能标记肿瘤淋巴管,联合监测CCR7与D2-40有望成为判断淋巴转移更为有效的指标。

反转录病毒介导的Luciferase基因稳定转染细胞株的建立及其生物发光成像检测

目的建立反转录病毒介导的Luciferase基因（Luc2）稳定转染的细胞株,通过体内及体外实验探讨Luc2阳性细胞数与生物发光成像系统光通量之间的关系。方法采用分子克隆方法构建pMX-Luc2质粒,将其与pMD.G质粒共转染293T gag-pol细胞,获得表达Luc2的反转录病毒。将该反转录病毒感染小鼠结肠癌CT26、人小细胞肺癌NCI-H446、人结肠癌HT-29、人卵巢癌SKOV3、人肝癌SMMC-7721细胞系,建立并筛选Luc2阳性表达的细胞株。分别接种10~1×104个SKOV3-Luc2细胞于培养皿中,在4只裸鼠背侧皮下16个位点分别接种200μl不同浓度（1×107、5×106、2.5×106、1×106、5×105、2.5×105、1×105、5×104/ml）的SKOV3-Luc2细胞,在另外4只裸鼠尾静脉中分别注射1×106和3×106个SKOV3-Luc2细胞。采用生物发光成像系统检测体外、体内接种细胞的光通量值。结果成功获得表达Luc2的反转录病毒,感染肿瘤细胞系CT26、NCI-H446、HT-29、SKOV3、SMMC-7721,筛选阳性细胞株,均可稳定表达Luc2。体外生物发光成像系统检测结果表明,光通量值与培养皿中接种的细胞数之间存在显著的线性关系（R2=0.944,β=0.972,P〈0.01）;活体检测结果表明,光通量值与裸鼠尾静脉注射和皮下接种的细胞数之间均存在显著的线性关系（R2=0.991,β=0.996,P〈0.01;R2=0.351,β=0.628,P〈0.01）。结论采用表达Luc2的反转录病毒感染肿瘤细胞系是快速建立Luc2阳性细胞株的一种可行方法。Luc2阳性细胞数与生物发光成像系统中光通量值具有显著的线性关系。

RGD序列多肽与不同肿瘤细胞结合特性研究

目的:通过体外细胞和动物体内研究期望获得不同肿瘤细胞整合素αvβ3受体表达的资料,以指导临床研究。材料和方法:采用荧光显微镜检测FITC标记HYNIC-RGD对人胰腺癌、肝癌、肠癌和子宫颈癌细胞的结合;用99mTc-HYNIC-RGD在小鼠乳腺和肝癌动物模型上比较了肿瘤对99mTc-HYNIC-RGD的摄取。结果:体外研究表明胰腺癌和肝癌细胞对RGD结合明显高于肠癌和子宫颈癌。注射后3小时小鼠皮下接种的乳腺癌和肝癌肿瘤组织对99mTc-HYNIC-RGD的摄取达到高峰,乳腺癌对99mTc-HYNIC-RGD摄取高于肝癌40%以上。结论:体外研究表明胰腺癌和肝癌细胞均对RGD有高的摄取,活体小鼠动物模型研究表明乳腺癌对RGD具有高的摄取。

钙网蛋白在甲氨蝶呤耐药绒毛膜癌中的作用研究

目的:探讨钙网蛋白(CALR)在对甲氨蝶呤(MTX)耐药的人绒毛膜癌中的作用。方法:采用Western blot印迹和细胞免疫荧光方法检测CALR蛋白在对MTX间断诱导耐药绒毛膜癌细胞株JeG-3/MTXA1与亲本细胞JeG-3中的表达差异,观察利用RNA干扰(RNAi)技术干扰CALR表达后耐药细胞耐药指数的变化。结果:Western blot验证结果,CALR在耐药细胞JeG-3/MTXA1中的表达明显高于亲本细胞JeG-3。细胞免疫荧光结果,在耐药细胞JeG-3/MTXA1中,CALR蛋白表达明显较亲本细胞JeG-3增多,且近核表达增强。经过RNAi后,耐药细胞JeG-3/MTXA1的耐药指数下调74.05%(33.94±0.68vs8.81±1.58),而对细胞增殖无明显影响。结论:CALR蛋白在耐药细胞中明显上调,干扰其表达后耐药细胞可明显降低其耐药指数。CALR可能参与对MTX耐药绒毛膜癌的发生。

人胰腺癌吉西他滨耐药细胞系的建立及耐药特性的检测

目的为揭示吉西他滨在胰腺癌中引起耐药的机制,建立了人胰腺癌吉西他滨耐药细胞系并对其细胞生物学特性进行了研究。方法逐步增加培养基中吉西他滨的浓度,在人胰腺癌细胞系SW1990中建立了对吉西他滨耐药的细胞系SW1990-GEM。采用四氮唑蓝(MTT)法和集落形成实验,计算SW1990和SW1990-GEM的半数抑制浓度(IC50)和耐药系数(RI)。比较SW1990和SW1990-GEM的生长曲线并计算出两细胞系的倍增时间。采用MTT法检测SW1990-GEM对几种常用抗肿瘤药物的交叉耐药谱。结果SW1990和SW1990-GEM的IC50分别为(0.428±0.069)μmol/L和(230.53±13.12)μmol/L,RI为537.45(P<0.001)。根据生长曲线计算出SW1990和SW1990-GEM的倍增时间为22.8小时和35.8小时。交叉耐药实验表明,SW1990-GEM对5-FU、表柔比星、丝裂霉素、甲氨蝶呤、紫杉醇、泰素帝、长春新碱和依托泊苷产生交叉耐药,对顺铂、阿糖胞苷无交叉耐药。结论成功建立了人胰腺癌吉西他滨耐药细胞系SW1990-GEM,耐药性能明显、稳定。SW1990-GEM对5-FU、表柔比星、丝裂霉素、甲氨蝶呤、紫杉醇、泰素帝、长春新碱和依托泊苷产生交叉耐药,对顺铂、阿糖胞苷无交叉耐药。

多西他赛、培美曲塞联合盐酸埃克替尼不同序贯用药时序及选择合理用药时机对非小细胞肺癌细胞的体外抑制作用

目的:探讨盐酸埃克替尼联合化疗药(多西他赛、培美曲塞)以不同次序序贯及选择合理用药时机用药对非小细胞肺癌细胞系GLC-82的作用。方法:运用x CELLigence系统检测多西他赛、培美曲塞、盐酸埃克替尼单药作用GLC-82的IC50,及单药在GLC-82细胞内的时间依赖性IC50,并检测盐酸埃克替尼不同次序联合多西他赛、培美曲塞对GLC-82的增殖毒性,用流式细胞仪检测埃克替尼与二者联合的不同次序对GLC-82细胞的细胞周期影响。结果:多西他赛、培美曲塞在作用36 h后在细胞内达到平衡期,而埃克替尼在作用60 h后在细胞内达到平衡期。多西他赛作用于GLC-82细胞系36 h的IC50为25 mg·m L-1,培美曲塞作用于GLC-82细胞系36 h的IC50为560μmol·L-1,埃克替尼作用于GLC-82细胞系60 h的IC50为10μmo·L-1。先用多西他赛或培美曲塞后用埃克替尼方案与其他用药方案相比,细胞倍增时间显著增加:D-I组倍增时间为(–829.1±46.9)h;P-I组倍增时间为(–342.0±3.4)h,与其他序贯联合方式相比,差异有统计学意义(P<0.05);并可使细胞阻滞在G2/M期(培美曲塞阻滞在S期),细胞生长抑制效果更好(P<0.05)。结论:先于埃克替尼使用多西他赛或培美曲塞,并且选择合理的用药时机为体外抑制NSCLC细胞增殖的最佳联用方案。

34例肺癌相关性高钙血症患者的生存预后分析

目的探讨影响肺癌相关性高钙血症患者生存时间的影响因素。方法以解放军总医院肿瘤内科2001年1月-2010年12月收治的经病理证实的34例肺癌相关性高钙血症患者作为研究对象,搜集性别、年龄、肿瘤病理类型、器官(骨、肺、肝、肾、脑)转移,远处转移部位的数目、精神症状、确诊肿瘤至出现高钙血症的时间、病程中血钙最高值及治疗方法等临床资料,采用单因素和多因素分析筛选影响患者生存的危险因素。结果 34例患者病程中血钙最高值为2.77～4.87mmol/L,中位值2.94mmol/L。出现高钙血症后生存时间1～1067d,中位生存时间92d。单因素分析显示,影响高钙血症患者的生存时间的因素包括确诊肿瘤至出现高钙血症的时间、精神症状及肾转移(P<0.0001,P<0.0001,P=0.0033)。多因素COX回归分析显示,年龄、确诊肿瘤至出现高钙血症的时间、精神症状及肾转移是影响高钙血症患者的生存时间的危险因素(HR=11.483,P=0.006;HR=4.372,P=0.002;HR=6.064,P=0.026;HR=8.502,P=0.011)。结论肺癌相关性高钙血症患者中位生存时间短,预后差。年龄>50岁、确诊肿瘤至出现高钙血症的时间>90d、发生精神症状或发生肾转移会导致患者生存时间缩短。

“余额宝”们走向落寞

至2014年7月，阿里巴巴旗下“余额宝”已上线整整一年，它凭借高于银行活期存款数倍收益率以及良好的流动性与取现的便利，吸引了大批用户，同时也引起诸多电商、互联网企业跟风入场，如今的理财市场已被各类“宝宝”占据。

P2P不兜底尴尬了谁

在目前的投资环境下,投资人往往是先选择平台再选择项目,对平台依赖度大,因此平台无形中充当着风险投资把关的角色几年前,红岭创投在行业普遍缺乏垫付承诺的背景下打起＂垫付牌＂,从而成为媒体持续关注的焦点。而今年,贷帮网反其道行之,在P2P行业默认垫付的背景下,发声坚持不为坏账兜底,一时间也成为舆论的焦点。资料显示,贷帮网成立于2008年,是国内成立比较早的P2P平台。贷帮网这笔坏账在11月6日被爆出,共计1280万元,涉及500多名投资者。