枸杞对T、B淋巴细胞增殖和T细胞亚群变化的调节作用

本文报告了中药枸杞子（Ｌｙｃｉｕｍｂａｒｂａｒｕｍ，ＬＢ）对Ｔ、Ｂ淋巴细胞增殖和Ｔ细胞亚群的调节作用。实验结果指出，枸杞对未经活化的淋巴细胞没有诱导增殖的作用；对于分别经ＰＨＡ和ＰＭＡ活化的淋巴细胞增殖有显著的促进作用（Ｐ＜０．０５），这表明枸杞对活化的Ｔ、Ｂ淋巴细胞的增殖有促进作用。选择最大促进效应浓度的ＬＢ对ＰＨＡ活化的Ｔ淋巴细胞亚群的变化进行双标记检测，结果指出，和ＰＨＡ活化后的情况相比，ＬＢ的作用导致ＣＤ４￣－ＣＤ８￣＋和ＣＤ４￣＋ＣＤ８￣＋细胞比例明显下降，同时使ＣＤ４￣＋ＣＤ８￣－细胞比例显著增加，表现出免疫促进作用。同时实验结果还显示，枸杞的免疫调节作用和剂量有关。

枸杞对IL－2产生和IL－2受体（α，β）表达的调节

枸杞对于ＰＨＡ活化的淋巴细胞的ＩＬ－２产生有明显的促进作用（Ｐ＜０．０５）；ＡＰＡＡＰ和ＦＡｃＳ检测表明，枸杞对经ＰＨＡ活化的淋巴细胞的ＩＬ－２受体α和β的表达有明显的促进作用；ＦＡＣＳ分析同时表明拘杞不仅使高表达ＩＬ－２Ｒ（α，β）的细胞数量增加．同时也促进细胞表面的ＩＬ－２Ｒ（α，β）表达量的增加．利用ＹＴ细胞检测的结果表明在构杞的作用下，ＹＴ细胞的ＩＬ－２Ｒ（α，β）的表达都有所增加，提示构杞对ＩＬ－２受体的表达有直接的调节作用。

白细胞介素8在银屑病发病机理中的作用

用酶免疫组化法观察１３例银屑病皮损、９例非皮损皮肤和１０例正常皮肤组织中ＩＬ－８的表达与分布，并研究ＩＬ－８对表皮细胞增殖的影响。结果表明９例皮损组织的表皮层显示ＩＬ－８阳性反应，而患者非皮损皮肤及正常人皮肤表皮层均呈阴性反应。体外实验证实，ＩＬ－８能明显促进原代培养的人表皮细胞增殖，并呈一定的剂量依赖性。

氧化苦参碱对淋巴细胞增殖的影响

研究了氧化苦参碱对人扁桃体淋巴细胞和小鼠脾淋巴细胞在不同丝裂原存在时对增殖能力的影响。结果表明：根据人扁桃体淋巴细胞对PHA，SAC反应能力的不同，氧化苦参碱可使低反应性的人扁桃体淋巴细胞增殖能力提高，而对高反应性的人扁桃体淋巴细胞及正常小鼠脾细胞增殖则表现为抑制作用。提示氧化苦参碱对淋巴细胞增殖的影响和细胞状态密切相关。

枸杞多糖对小鼠淋巴细胞信号系统的效应

对枸杞多糖（ＬＢＰ）发挥免疫调节效应的信号传导系统进行探讨。结果显示，５０～４００μｇ／ｍｌＬＢＰ可剂量依赖性的升高小鼠淋巴细胞内ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ的水平，５０μｇ／ｍｌ尚可升高ＰＭＡ活化的脾淋巴细胞内ｃＧＭＰ的水平。另外，１００μｇ／ｍｌＬＢＰ可增加ＣｏｎＡ活化后的小鼠脾淋巴细胞膜上的ＰＫＣ活性。说明ＬＢＰ的作用途径可能是通过影响ｃＡＭＰ／ｃＧＭＰ系统以及促进ＰＫＣ活性来发挥免疫调节效应的。

氧化苦参碱对淋巴细胞第二信使的影响

本文研究了氧化苦参碱对淋巴细胞胞浆游离钙、钙摄取功能、cAMP 及cGMP 水平的影响。结果表明:氧化苦参碱可使淋巴细胞浆游离钙水平上升,其钙离子来源于细胞内储存钙的释放。另外,氧化苦参碱可使PHA 活化的人扁桃体淋巴细胞的cAMP 水平降低。我们推测它可能通过某种方式和细胞膜发生作用,从而影响细胞内钙和cAMP 的水平,进而影响细胞功能。

枸杞子水提取物对白细胞介素6和肿瘤坏死因子产生的影响

研究了枸杞子水提取物（ＬＢｒ）对全血培养细胞白细胞介素６（ＩＬ－６）和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）产生的影响。结果表明，ＬＢｒ单独不能诱导ＴＮＦ产生，ＬＢｒ０．５μｇ／ｍｌ可明显促进ＬＰＳ诱导的ＴＮＦ产生，但ＬＢｒ１０μｇ／ｍｌ则对ＬＰＳ诱导的ＴＮＦ产生无明显作用ｉＬＢｒ０．５μｙ／ｍｌ不仅可促进ＬＰＳ诱导的ＩＬ－６产生，单独亦可诱导ＩＬ－６产生，但ＬＢｒ１０μｇ／ｍｌ则对ＩＬ－６的产生无明显调节作用。

氧化苦参碱对LAK细胞活性的影响

ＬＡＫ细胞具有很强的广谱杀瘤作用，而氧化苦参碱具有较强的免疫抑制作用。本文研究了氧化苦参碱对ＬＡＫ细胞活力的影响，结果表明：氧化苦参碱可抑制ＩＬ－２对小鼠脾细胞的促增殖作用。并且对ＩＬ－２活化ＬＡＫ细胞杀伤Ｐ８１５的能力也有抑制作用。当ＩＬ－２（５００ｕ／ｍｌ）与２００μｇ／ｍｌ的氧化苦参碱共同孵育４ｄ后，可使ＬＡＫ细胞杀瘤能力（在效靶比为１００：１时）的８２．５％被抑制。同时氧化苦参碱本身对Ｐ８１５的增殖无任何效应。

枸杞多糖对S_（180）荷瘤小鼠的免疫抑瘤作用

枸杞多糖（ＬＢＰ）是具有广泛增强免疫功能的一种中药生物活性组分。以Ｓ_（１８０）荷瘤Ｂａｌｂ／ｃ小鼠为模型较为系统地研究了ＬＢＰ对瘤重和脾细胞免疫功能的影响。结果表明，ＬＢＰ剂量依赖性地抑制瘤重。恢复和提高荷瘤鼠脾细胞数及活化Ｔ细胞增殖能力，明显促进ＮＫ活性和ＴＮＦ分泌水平。揭示ＬＢＰ增强荷瘤鼠细胞免疫功能是其抑制肿瘤效应的机制。

枸杞多糖的分离、纯化、鉴定及生物活性的研究

构杞子经热水提取,乙醇沉淀,获得构杞粗多糖。后者经 Sevag 法、蛋白酶法和透析纯化得到枸杞多糖(LBP)。LBP 进一步经 Sephadex G-50分子筛层析分离,可分为LBP_1(分子量>10000)和 LBP_2(分子量<10000)两种成分。LBP_1和 LBP_2用 DEAE-DE32离子交换层析去除色素,PAGE 电泳和 Brandford 法测蛋白质含量仅测到微量蛋白质(<5μg 蛋白/mg 糖)。经岛津 UV-260扫描,LBP、LBP_1、LBP_2未见核酸(260nm)和蛋白质(280nm)特征吸收峰,红外光谱分析表明有典型多糖吸收峰。分子量测定 LBP_1、LBP_2分别为35400、9900。体内外试验证明 LBP、BLP_1和 LBP_2对小鼠脾脏 T 淋巴细胞的功能呈双相调节,可明显促进 ConA 诱导的淋巴细胞增殖反应。抗体形成细胞试验显示 LBP_2还可明显增强小鼠体液免疫功能;并具抗辐射损伤作用,能明显延长 BALB/C 小鼠的生存期。

鉴定IgE BF/sCD23的IgE介导的间接Western印迹技术的建立

基于 Western 印迹技术的基本原理,利用 IgE 结合因子/可溶性 CD23(IgEBF/sCD23)能够和 IgEFC 端特异性结合的特点,在系统研究了包括:IgE 浓度,反应时间及转移条件等数种因素后,首创了 IgE 介导的间接 Western 印迹技术.用于对 SDS—PAGE 电泳分离后样品中 IgEBF/sCD23特异性片段进行鉴定.实践证明:该法具有重复性高,操作简便及节约资金等优点.运用该技术,我们确定了 RPMI8866细胞上清中具有 IgEBF 活性的五种不同分子量的多肽.此方法的建立对开展 IgEBF/sCD23的研究以及其它特异性分子的鉴定都具有参考价值.

枸杞多糖对细胞膜流动性及蛋白激酶C的体外效应

目的：研究枸杞多糖（LBP）体外免疫调节效应的作用机制。方法：以DPH作为荧光深剂，采用荧光偏振法观察LBP对免红细胞膜流动性的影响。并以32P-组蛋白内参入的放射性强度检测法，观察LBP对淋巴细胞胞膜和胞浆蛋白激酶C（PKC）活性的影响。结果：100mg／LLBP可明显促进兔红细胞细胞膜的流动性，并能增强10mg／L和25mg／LConA对膜流动性的促进作用。同时100ms／LLBP尚可增加ConA活化后的小鼠脾淋但细胞膜上的PKC的活性，但对胞浆PKC的活性无影响。结论：LBP的体外作用途径可能是作用于细胞膜，通过促进细胞膜的流动性及促进ConA活化的小鼠脾淋巴细胞胞浆内PKC从胞浆到胞膜的激活移位而发挥免疫调节效应的。

交联膜CD23分子对B淋巴细胞增殖及细胞内第二信使物质的影响

本文旨在探讨 B 细胞膜表面 CD23分子可能具有的功能和所介导的第二信使物质的改变。以 CD23分子的天然配体 IgE 及抗 CD23单抗作为交联剂,观察分析了交联 B 细胞膜表面 CD23分子后,对B 细胞增殖的影响,以及交联所导致的细胞内一些第二信使物质的改变。结果显示:(1)抗 CD23单抗及 IgE免疫复合物(IgEIC)对活化 B 细胞增殖,依据其浓度不同,呈现促进和抑制双向调节效应。这种双向效应依赖于可上调 CD23表达的淋巴因子 IL-4的存在;(2)单价结合 CD23分子的 IgE 对活化 B 细胞增殖无影响;(3)对于 B 细胞有促增殖浓度的抗 CD23单抗和 IgE IC,可引起活化 B 细胞内 cAMP 水平的升高,而对胞内cGMP 水平无明显影响;(4)抗 CD23单抗能诱导活化 B 细胞胞浆游离 Ca^(2+)浓度快速而短暂的升高。

肿瘤坏死因子的研究进展

肿瘤坏死因子(TNF)是由巨噬细胞产生的仅对肿瘤细胞有杀伤作用而对正常细胞无细胞毒作用的活性因子,它的发现为癌症的免疫治疗翻开了新的一页.本文综述了近年来有关TNF的研究进展.包括TNF的产生及制备;TNF的分子生物学研究进展,如TNF基因结构、氨基酸组成、TNF受体和TNF调节基因;TNF的抗肿瘤作用,如抗肿瘤机制、体外试验、动物试验和临床应用情况,并对TNF的应用前景提出了展望.

老化对小鼠激活淋巴细胞分泌白细胞介素3及其mRNA表达的影响

本实验测定老化对小鼠激活淋巴细胞分泌白细胞介素3(Interleukin 3,IL-3)和其基因表达的影响。结果5月龄与37月龄小鼠相比较,后者IL-3活性下降79.3％,IL-3mRNA水平下降74％,二者IL-3mRNA水平高峰均位于Con A刺激培养后20h。Northern印迹分析证明,4月龄与27月龄小鼠IL-3mRNA的位置均无移动。用ConA刺激4组不同年龄小鼠的脾淋巴细胞,比较其IL-2和IL-3活性及其mRNA水平,证明二淋巴因子随着年龄增加而逐渐下降的水平具有平行性。

枸杞多糖的分离、纯化、分析及免疫作用的研究

枸杞子经热水提取，用蛋白酶法和Ｓｅｖａｇ法除蛋白，透析纯化得到枸杞多糖（Ｉｖｃｉｕｍｂａｒｂａｒｕｍｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＬＢＰ）．经ＵＶ扫描，ＬＢＰ未见核酸（２６０ｎｍ）和蛋白质（２８０ｎｍ）特征吸收峰，ＰＡＧＥ电泳和Ｂｒａｄｆｏｒｄ法测蛋白质含量，仅测到微量蛋白质及低于５ｍｇ／ｇ糖，红外分析显示有典型多糖吸收峰，对其活性作了分析，结果表明本室所提取的ＬＢＰ具有明显增强ＣｏｎＡ和ＬＰＳ诱导的小鼠脾脏淋巴细胞增殖作用，并对Ｓ－１８０荷瘤小鼠具明显的免疫抑瘤作用。

从RPMI8866细胞制备CD23分子最佳条件及提取方法的研究

建立从高表达CD23分子的RPMI8866细胞株分离制备CD23分子的两种方法:自然裂解法和木瓜蛋白酶水解法。比较了此两法的优劣,探讨了CD23回收量的影响因素,经Western blot-ting技术鉴定出制备品中18、37、42、45和86KDa的CD23片段。结果表明,上述方法简便、可靠、易行,且回收量较高。可供研究及分离其它膜分子参考。

重组白细胞介素3诱导的人原始粒细胞长期培养的观察研究

目前研究认为,白细胞介素3(IL—3)可以促进骨髓多能干细胞的分化和增殖。本文将一例急性粒细胞白血病患者外周血白血病细胞进行培养,传代70代以上,并对其进行了形态学观察、细胞化学和免疫细胞化学染色、细胞表面标记和染色体分析。结果表明,rIL—3在体外培养中对原始粒细胞确有促进其增殖作用。

LBP_2对大鼠免疫功能影响的体外实验研究

研究了ＬＢＰ２（ｌｙｃｉｕｍｂａｒｂａｒｕｍｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ－２）对ＳＤ大鼠腹腔巨噬细胞（ＭΦ）功能的影响，以探讨ＬＢＰ２的免疫调节机制．ＭΦ吞噬中性红试验研究表明，ＬＢＰ２在体外具有浓度（０３２～２０ｍｇ／Ｌ）依赖性增强大鼠腹腔ＭΦ吞噬中性红的能力．另外，采用生物活性检测法测定了细胞因子的水平，将大鼠ＭΦ用ＬＰＳ（１０ｍｇ／Ｌ）和ＬＢＰ２共同孵育１８～２４ｈ后，培养上清及细胞内ＩＬ－１和ＴＮＦ水平均随ＬＢＰ２浓度的增加而增加，表明ＬＢＰ２对ＭΦ合成和释放ＩＬ－１，ＴＮＦ具有明显促进作用．ＬＢＰ２对ＭΦ功能的影响可能是其免疫调节作用的机制之一．

IL-2受体β链研究新进展

IL-2受体β链是IL-2受体的一个重要组分,由第22对染色体编码。成熟的β链(IL-2Rβ)由525个氨基酸残基组成,包括胞外区、跨膜区和胞内区。IL-2 Rβ持续表达于静止淋巴细胞上,是IL-2信号传导所不可缺少的。IL-2R 介导的信号传导与酪氨酸激酶的活化有关。最近在细胞培养上清中发现了可溶性IL-2Rβ。相信对IL-2Rβ的深入了解可指导IL-2的临床应用。