课程思政融入药理学教学的探索与实践

课程思政是坚持社会主义办学方向、实现立德树人的基本要求.药理学是医学院校的一门核心基础课程,根据药理学知识体系的特点,探索药理学课程思政的有效途径以及评价机制,力求逐步将药理学建设成既传授专业知识技能,又培养学生高度的社会责任感、良好的人文素养和职业道德的好课、金课.

吗啡依赖大鼠不同脑区肌动蛋白及其结合蛋白的表达变化

目的研究吗啡依赖大鼠不同脑区肌动蛋白及其结合蛋白p-cofilin的表达变化。方法 42只♂SD大鼠,随机分为吗啡依赖1周组(M1组)、2周组(M2组)和4周组(M4组),各依赖组均设对照,每组7只。吗啡依赖组采用剂量递增法腹腔注射吗啡,每日3次,连续7 d,日剂量按5,10,15,20,30,40,50 mg.kg-1逐日递增,对照组给与等体积的生理盐水。M2和M4组大鼠继续分别给予50 mg.kg-1盐酸吗啡,每天1次,连续注射1或3周。在最后一次给药后5 h断头处死大鼠,迅速分离前额叶皮质、海马、纹状体和丘脑。Western blot检测吗啡依赖大鼠不同脑区肌动蛋白及其结合蛋白的表达变化。结果与对照组相比,M2和M4组大鼠前额叶皮质内F-actin/G-actin比值分别上调53%(P<0.05)和102%(P<0.01);M2和M4组大鼠前额叶皮质内p-cofilin表达量分别上调93%(P<0.01)和88%(P<0.01)。M4组大鼠海马中F-actin/G-actin比值上调94%;M2和M4组大鼠海马中p-cofilin蛋白表达量分别上调45%(P<0.05)和30%(P<0.05)。M2和M4组大鼠纹状体内p-cofilin的蛋白表达量分别下调25%(P<0.05)和30%(P<0.05)。结论长期吗啡处理可诱导大鼠形成依赖,伴随着依赖相关脑区肌动蛋白重构,并呈现脑区特异性和时间依赖性。

滇丹参、甘西鼠尾、褐毛甘西鼠尾对离体豚鼠心脏的影响

采用Langendorff离体豚鼠心脏灌流法 ,观察滇产 3种唇形科鼠尾属药物扩张冠脉作用并与标准丹参进行比较 .结果发现 :4种药物在高剂量可明显增加正常离体豚鼠心脏的冠脉流量、降低心肌收缩力、减慢心率 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,甘西鼠尾低剂量即能增加冠脉流量 (P <0 0 5 ) ,4种药物高、低剂量均能够对抗垂体后叶素致冠脉流量的减少和心肌收缩力的减弱 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) .结果表明 ,滇产 3种丹参均能够增加正常离体豚鼠冠脉流量 。

气相色谱-质谱联用测定大鼠脑部的神经甾体

应用气相色谱 质谱联用技术建立了大鼠脑部神经甾体的测定方法。游离型甾体和甾体硫酸酯分两步萃取。第一步用乙酸乙酯提取游离型甾体,第二步用氯仿/2 丁醇提取甾体硫酸酯,然后经固相萃取纯化。甾体硫酸酯进行溶剂解形成游离型甾体。游离型甾体和甾体硫酸酯分别经七氟丁酸酐衍生化后进行气相色谱 质谱分析。经初步研究雄性大鼠脑部游离型神经甾体孕烯醇酮(PREG)、黄体酮(PROG)、别孕烯醇酮(AP)和脱氢表雄酮(DHEA)的含量分别为(8 53±1 11)ng/g,(7 01±2 60)ng/g,(1 17±0 19)ng/g,(0 92±0 20)ng/g。甾体硫酸酯孕烯醇酮硫酸酯(PREGS)和脱氢表雄酮硫酸酯(DHEAS)的含量分别为(5 94±2 03)ng/g和(1 93±0 92)ng/g。每一种神经甾体都有好的线性关系和准确度。该法适合同时测定大鼠脑部游离型和结合型甾体。

吗啡成瘾和应激诱导成瘾复发的大鼠脑内神经甾体水平的变化(英文)

目的观察大鼠吗啡成瘾及应激诱导成瘾复发是否与脑组织神经甾体水平的变化有关。方法给大鼠注射吗啡（5mg·kg^-1·d^-1，ip，18：00～20：00）并在条件性位置偏爱（CPP）箱中训练，每日1次，连续10d，最后1次给药后24h测试大鼠是否产生CPP。再经过7d的自然消退期后，给予足底电击（0．5mA，0．5S，间隔40s，15min）诱发大鼠CPP复发，电击后2h进行CPP测试。测试后立即取样，取样时间18：00～20：00，气相色谱-质谱联用技术测定大鼠脑组织神经甾体。结果给予吗啡并训练10d，大鼠形成明显的CPP，同时脑组织内神经甾体孕烯醇酮和别孕烷醇酮水平显著升高。经过7d的自然消退后再给予足底电击可诱发大鼠CPP复发，脑组织神经甾体脱氧表雄酮和硫酸脱氢表雄酮水平显著升高。结论大鼠吗啡成瘾及应激诱导成瘾复发过程可能与脑组织内源性神经甾体水平有关。

睾酮类避孕药对大鼠生精细胞凋亡的影响

目的:研究睾酮类避孕药丙酸睾丸酮对大鼠生精细胞凋亡的影响及其机制。方法:30只35日龄雄性SD大鼠,随机分为实验组和对照组,每组15只。实验组每天肌内注射丙酸睾丸酮40mg/kg,对照组注射生理盐水。于大鼠出生第50天取血,并处死大鼠切取双侧睾丸。应用原位末端标记检测、流式细胞测定(FCM)、电镜及放射免疫等技术,对大鼠睾丸生精细胞的凋亡进行定性、定位和定量研究。结果:与对照组相比,实验组大鼠睾丸生精细胞凋亡数量增多,主要为初级精母细胞;实验组、对照组大鼠生殖细胞凋亡率分别为(11.3±0.9)%和(3.6±2.3)%,1C峰细胞的百分比分别为(21.8±7.1)%和(33.8±7.5)%,2C峰细胞的百分比分别为(52.6±8.2)%和(37.1±12.5)%,差别均有统计学意义(P<0.01)。实验组和对照组大鼠血清中睾酮水平分别为(3486.8±333.3)ng/L和(846.9±167.5)ng/L,卵泡刺激素水平分别为(2.5±0.8)IU/L和(5.2±1.7)IU/L,差别均有统计学意义(P<0.01)。结论:外源性丙酸睾丸酮可能通过反馈性抑制垂体性腺轴而诱导生精细胞凋亡,发挥其避孕的作用。

气相色谱-质谱联用测定大鼠血清中的神经甾体

目的 建立气相色谱 质谱测定大鼠血清中神经甾体的方法。方法 本实验采用固相萃取方法对非结合型神经甾体和结合型神经甾体进行分离及纯化。经溶剂解后的结合型甾体和非结合型甾体分别与七氟丁酸酐进行衍生化 ,选择性离子检测模式进行气相色谱 质谱分析。结果 经初步研究雄性大鼠血清中非结合型神经甾体PREG、PROG和DHEA的含量分别为 5 75× 10 - 9、1.2 8× 10 - 8、2 .3 6× 10 - 9mol L。结合型神经甾体PREGS和DHEAS的含量分别为 4.8×10 - 9、8.78× 10 - 8mol L。每一种甾体都有好的线性关系和准确度。结论 本方法适合同时测定血清中结合型和非结合型神经甾体 。

复方半夏水提取物药理作用研究

目的:研究复方半夏水提取物的抗过敏、抗病毒、抗菌作用。方法:用蓝斑实验检测药物对被动皮肤过敏反应的影响;用二硝基氟苯法检测药物对迟发型变态反应的影响;用肉芽肿实验研究药物的抗炎作用;体外实验研究药物的抗菌和抗病毒作用。结果:复方半夏水提取物可剂量依赖性地减小致敏后皮肤的蓝斑直径并显著降低蓝斑光密度,对小鼠耳肿胀度、胸腺指数和脾指数无明显影响,对大鼠棉球肉芽肿重量系数无显著影响。复方半夏水提取物对白葡萄球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、甲型和乙型溶血链球菌无明显杀菌作用,可抑制呼吸合胞病毒的生长。结论:复方半夏水提取物具有抗病毒、抗被动皮肤过敏反应,但无抗菌、抗炎作用,对迟发性变态反应也无影响。

滇丹参注射液对兔血小板功能的影响

观察云南产滇丹参对血小板聚集功能的影响。方法 :采用Born氏比浊法 ,测定滇丹参体内、体外对抗ADP、PAF、AA诱导的兔血小板聚集的作用。体外每种药物浓度分别为 40 g/L、2 0 g/L、10 g/L、5g/L、2 5 g/L ,体内实验分为 7组 ,即生理盐水组、两种丹参低中高剂量组分别为 5 g/kg、10 g/kg、2 0 g/kg ,每组 6只。 结果 :与对照组相比 ,滇丹参体外显著抑制ADP、AA诱导的血小板聚集 ,抑制效应呈浓度 效应关系 (P <0 0 5 ,0 0 1) ,IC50 为 33 7g/L(ADP)、18 1g/L(AA)。滇丹参也显著抑制PAF诱导的血小板聚集 ,其最大抑制率为 36 8% ;体内实验结果显示 ,滇丹参在高剂量时可显著抑制ADP、PAF和AA诱导的血小板聚集 (P <0 0 5 ,0 0 1) ,且均具有剂量依赖性。滇丹参在药后 2 0min开始显效 ,40min达到最大抑制作用 ,抑制率分别为 95 6 % (ADP)、91 5 % (PAF)和 88 5 % (AA)。结论 :以上结果表明 ,滇丹参体外、体内显著抑制血小板聚集 ,且其抗血小板聚集作用优于丹参 。

兔抗大鼠神经甾体合成关键酶P450scc抗体的制备、特性鉴定及应用

目的: 制备兔抗大鼠神经甾体合成关键酶P450侧链裂解酶 (rP450sidechaincleavage, rP450scc)合成肽片段的抗体, 并检测rP450scc在大鼠脑组织及神经细胞中的表达。方法: 利用多肽固相合成法 (Fmoc法 )合成对称的 8分支 16肽rP450scc多重抗原肽片段 (rP450scc- 16), 并以其免疫雄性新西兰兔制备抗rP450scc -16抗体。采用ELISA、Westernblot和免疫细胞化学染色法鉴定抗rP450scc- 16抗体的特性。结果: 于末次免疫后 5d, 动脉放血分离血清, 用ELISA法检测抗rP450scc -16抗体的效价为 1∶6 400。Westernblot检测显示, 抗rP450scc- 16抗血清与大鼠的脑、睾丸及肾上腺组织蛋白于相对分子质量为 50 000处出现一条特异性的条带。用抗rP450scc -16抗体进行免疫细胞化学染色显示, 在正常大鼠的下丘脑、皮质、海马等区及培养的胶质细胞胞质中均可见棕色颗粒。结论: 制备出高特异性的兔抗rP450scc- 16抗体, 该抗体可检测rP450scc在正常大鼠脑组织中的表达和分布。

RNAi靶向抑制HBV复制和HBeAg表达

目的观察靶向HBVC基因区的RNA干扰对HBV复制的抑制作用。方法选择HBV基因组C区的Nt2021-2049作为靶序列,合成相应的正、反义寡核苷酸,退火后形成双链,克隆入shRNA表达质粒,将得到的质粒与HBV质粒共转染HepG2细胞,观察HepG2细胞中HBV的受抑制情况。结果病毒复制及HBeAg的表达明显受到抑制。结论所选靶区通过RNA干扰可有效抑制HBV复制。

国产盐酸特拉唑嗪片的人体药代动力学和生物等效性研究

20名男性健康受试者随机交叉口服单剂量国产盐酸特拉唑嗪片(受试制剂)和英国雅培公司产盐酸特拉唑嗪片(参比制剂)2mg,应用反相高效液相法测定其血药浓度,用DAS软件计算药代动力学参数及评价生物等效性。结果服药后两种制剂各时点血浆药物浓度、药代动力学参数无统计学意义,表明两种制剂具有生物等效性。

HLA-A＊0201／Kb及MAGE-3基因共转染B16细胞的制备及其在MAGE-3肿瘤疫苗评价中的作用

目的:为了用HLA-A2·1转基因鼠制备荷瘤模型以评价肿瘤疫苗的免疫效果,制备共表达HLA-A*0201/Kb嵌合基因和MAGE-3的B16黑色素瘤细胞。方法:采用基因共转染的方法,将HLA-A*0201/Kb和MAGE-3转染到B16黑色素瘤细胞(B16-HLA-MAGE-3),利用RT-PCR、流式细胞术(FCM)和Westernblot检测了HLA-A*0201/Kb和MAGE-3在B16黑色素瘤中的表达;通过测定CTL活性和体内抑瘤实验证实肿瘤抗原MAGE-3可以在B16-HLA-MAGE-3中得到有效加工处理和提呈。结果:RT-PCR、FCM和Westernblot检测到HLA-A*0201/Kb和MAGE-3在B16-HLA-MAGE-3黑色素瘤中的表达;LDH的方法观察到MAGE-3疫苗免疫小鼠脾细胞对B16-HLA-MAGE-3细胞的特异性CTL反应,抑瘤实验也证实,B16-HLA-MAGE-3细胞在免疫小鼠体内生长明显受到抑制。结论:MAGE-3基因在B16-HLA-MAGE-3黑色素瘤细胞中得到表达,并被有效的加工处理、提呈给特异性CD8+T细胞;B16-HLA-MAGE-3细胞可以用来制备荷瘤模型,且该方法适合利用转基因小鼠用于人表位疫苗的体内评价。

酒精依赖和戒断时大鼠伏隔核、杏仁核区内神经甾体水平的变化

目的:采用♂大鼠酒精依赖模型,观察酒精依赖及戒断对大鼠伏隔核、杏仁核中不同神经甾体水平的影响。方法:通过大鼠自由饮含6%的乙醇溶液,连续42d使大鼠形成酒精依赖,并撤除酒精使其自然戒断。断头取脑分离取出伏隔核、杏仁核脑区。使用液液萃取和固相萃取两步法提取脑组织中的孕烯醇酮(PREG)、脱氢表雄酮(DHEA)、别孕烯醇酮(AP)、脱氢表雄酮硫酸酯(DHEAS)、孕烯醇酮硫酸酯(PREGS),以高效液相色谱-质谱联用法测定神经甾体含量。结果:与对照组相比,酒精依赖大鼠伏隔核DHEA,PREG,AP,DHEAS,PREGS的水平显著降低(P<0.05),杏仁核AP,PREGS的水平显著降低(P<0.05);酒精戒断6h大鼠伏隔核DHEA,DHEAS,PREGS的水平显著降低(P<0.05),杏仁核PREGS的水平显著降低(P<0.05);酒精戒断24h大鼠杏仁核DHEA的水平显著上升(P<0.05),伏隔核、杏仁核DHEAS、PREGS的水平显著下降(P<0.01)。结论:酒精依赖形成和戒断对伏隔核、杏仁核中的神经甾体水平有不同的影响,具有区域特异性。

雷公藤甲素与阿霉素联用对人乳腺癌细胞系MCF-7的协同促凋亡作用

目的研究雷公藤甲素(TPL)与化疗药物阿霉素(DOX)联用对人乳腺癌细胞系MCF-7的促凋亡作用及其机制。方法雷公藤甲素与不同浓度阿霉素单独或联合处理MCF-7细胞,用CCK-8法检测细胞活力并计算联合指数;平板集落法检测细胞增殖;流式细胞测量术检测细胞凋亡及细胞周期;Western blot检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、cleaved caspase-3以及PI3K/AKT信号通路中相关因子的表达。结果雷公藤甲素联合不同浓度的阿霉素处理细胞24、48和72 h后,与单用阿霉素组相比均显著抑制细胞增殖(P<0.05),可明显抑制细胞集落形成能力(P<0.01),而且细胞凋亡率显著增加(P<0.01),Bax、cleaved caspase-3的表达显著升高,Bcl-2、p-PI3K、p-AKT的表达降低(P<0.05)。联合用药后可将细胞周期阻滞于S期(P<0.05)。结论雷公藤甲素与阿霉素联合使用后可以显著增加MCF-7细胞对阿霉素的敏感性并促进细胞凋亡,其作用机制可能与PI3K/AKT信号通路的抑制相关。

课程思政融入药理学教学设计与实践——以苯二氮类镇静催眠药为例

课程思政是将思想道德教育融入专业课程的一种新的教育理念和教学形式。药理学是医药学专业本专科教学的一门核心课程,是联系医学与药学、基础医学与临床医学之间的桥梁学科。为了推进药理学课程思政建设,以苯二氮类镇静催眠药为例,挖掘药理学课程中的思政元素,并探讨了专业教学与课程思政有机融合的有效路径与方法,以期为药理学课程思政建设提供参考。

大学生自我评估状况的分析

通过对190名在校大学生进行问卷调查,发现大学生自我评估状态总体是良好的,但也存在一些自我评价消极、学习兴趣不浓、学习动机越来越趋向功利化、在自我评价中不能正确面对自我需要等问题。为此,在教育中要引导和鼓励大学生正确面对自我的内心需要,从而促进其自我及心理健康的和谐发展。

褐毛甘西鼠尾注射液对兔血小板功能的影响

目的:观察云南产褐毛甘西鼠尾对血小板聚集率的影响。方法:采用Born氏比浊法,观察褐毛甘西鼠尾及丹参体内、体外对抗ADP、PAF、AA诱导的兔血小板聚集的作用;体内实验分为7组,即生理盐水组、两种丹参各以5、10、20g/kg剂量组,每组6只。结果:(1)与对照组相比,褐毛甘西鼠尾、丹参体外显著抑制ADP、AA诱导的血小板聚集,抑制效应呈浓度-效应关系,IC50分别为褐毛甘西鼠尾55.4g.l-1(ADP)、14.3g.l-1(PAF)、丹参49.6g.l-1(ADP)、14.1g.l-1(PAF),两种丹参也显著抑制PAF诱导的血小板聚集,其最大抑制率为褐毛甘西鼠尾24.8%、丹参22.4%;体内实验结果显示,两种丹参在高剂量时可显著抑制ADP、PAF和AA诱导的血小板聚集(P<0.05,0.01);且均具有剂量依赖性。40min达到最大抑制作用,抑制率分别为褐毛甘西鼠尾65.8%(ADP)、47.6%(PAF)和51.3%(AA),丹参62.3%(ADP)、43.5%(PAF)和50.2%(AA),褐毛甘西鼠尾和丹参无显著差异。结论:以上结果表明,褐毛甘西鼠尾和丹参具有明显的抗血小板聚集作用,为进一步开发和利用滇产丹参提供了依据。

酒精依赖和戒断时大鼠奖赏回路不同脑区脱氢表雄酮及其硫酸酯水平的变化

目的:采用大鼠酒精依赖模型,观察酒精依赖及戒断对大鼠伏隔核、前额叶皮质、杏仁核、海马中神经甾体脱氢表雄酮(DHEA)、脱氢表雄酮硫酸酯(DHEAS)水平的影响。方法:大鼠通过自由饮含6%的乙醇溶液连续42d形成酒精依赖,并撤除酒精使自然戒断。断头取脑分离取出伏隔核、前额叶皮质、杏仁核、海马脑区。使用液-液萃取和固相萃取两步法提取脑组织中的DHEA、DHEAS,以高效液相色谱-质谱联用法测定神经甾体含量。结果:与对照组相比,酒精依赖大鼠伏隔核DHEA、DHEAS的水平显著降低(P<0.05),海马DHEAS的水平显著升高(P<0.05);酒精戒断6h大鼠伏隔核DHEA、DHEAS、额叶皮质DHEAS的水平均显著降低(P<0.05);酒精戒断24h大鼠杏仁核DHEA、额叶皮质DHEAS水平显著上升(P<0.05),伏隔核、杏仁核DHEAS的水平显著下降(P<0.01)。结论:酒精依赖形成和戒断对伏隔核、前额叶皮质、杏仁核、海马中的神经甾体水平具有不同影响。