大鼠骨髓基质干细胞体外分离、培养及分化的相关实验研究

目的探索大鼠骨髓基质干细胞(BMSC)体外分离、培养及纯化的合适实验条件,并探讨其在体外定向诱导分化为神经元样细胞的可行性。方法通过密度梯度离心法从成年大鼠骨髓中分离出BMSC,而后通过贴壁培养法培养及纯化,观察其生长特性;对纯化后的BMSC使用碱性成纤维生长因子(bFGF)和表皮生长因子(EGF)进行定向诱导分化,并进行免疫细胞化学鉴定。结果体外培养的BMSC传4代后,纯度最高,可达(95.23±3.06)%;其诱导分化7 d后,(75.43±7.63)%的细胞表现为-βTubulinⅢ阳性的神经元样细胞,(33.01±6.73)%的细胞则为GFAP阳性的胶质细胞。结论BMSC在体外培养条件下生长良好,经bFGF和EGF诱导后可大量分化为神经元样细胞和神经胶质细胞。

脑胶质瘤卒中误诊为急性脑出血临床分析

目的探讨脑胶质瘤卒中误诊的原因、临床表现及诊治方法。方法回顾性分析11例胶质瘤卒中病例的临床资料，病人初诊时误诊为脑出血，经手术和病理证实为脑胶质瘤。结果肿瘤大部分切除7例，部分切除4例。术后病理示间变性星形细胞瘤5例，多彤性胶质母细胞瘤3例，少突胶质细胞瘤2例，室管膜瘤1例。术后8例随访3—36个月，复发6例，再次手术4例。小组共死广6例，生存时间超过3年4例，失访1例。结论脑胶质瘤卒中起病急，初诊时易误诊为急性脑出血，CT增强扫描或MRJ检查有助于鉴别诊断。早期手术有利于明确诊断，提高病人生存率。

右正中神经电刺激早期干预对高血压脑出血患者预后的临床疗效观察

目的:观察右正中神经电刺激对高血压脑出血患者预后的临床疗效。方法:选取高血压脑出血患者55例,随机分为常规治疗组27例(对照组)和右正中神经电刺激+常规治疗组28例(治疗组),治疗时间4周。观察两组患者脑血流量变化并对格拉斯哥昏迷评分量表(glasgow coma scale GCS)、格拉斯哥预后量表(glasgow outcome scale GOS)、日常生活功能量表(activity of daily living scale ADL)以及神经功能缺损评分情况进行比较。结果:经右正中神经电刺激治疗后,治疗组患者的大脑中动脉及基底动脉脑血流速度均比对照组显著加快;治疗组患者GCS、GOS、ADL评分明显高于对照组,而神经功能缺损评分较对照组有显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:右正中神经电刺激治疗能显著增加高血压脑出血患者的脑血流量,改善患者意识状态,促进患者肢体功能恢复,提高患者生存质量。

颅骨修补术后并发脑内血肿1例

我科收治1例颅骨缺损患者行颅骨修补术后并发少见的脑内血肿,现报道如下。 1病例资料 患者,女,53岁,因头部摔伤致右侧额颞叶脑挫裂伤并硬膜下血肿、左枕部硬膜外血肿行左枕部硬膜外血肿清除＋右额颞部硬膜下血肿清除术＋去骨瓣减压术,术中去除骨瓣面积约10 cm×12 cm。术后1.5个月行颅骨修补术。修补术前头颅CT示右额颞、左枕部颅骨缺损,右颞部硬膜下积液,右额叶低密度软化灶（图1A）。

锥颅脑室外引流尿激酶注入联合腰大池持续外引流治疗脑室出血

目的探讨锥颅脑室穿刺外引流尿激酶注入联合腰大池持续外引流治疗脑室出血的效果。方法对48例脑室出血患者行锥颅脑室穿刺外引流术,术后应用尿激酶注入,并辅以腰大池持续外引流及其他综合治疗措施。结果 ADLⅠ(恢复正常)15例,占31.3%,ADLⅡ(生活自理)12例,占25%,ADLⅢ～Ⅳ(卧床不起)8例,占16.7%,ADLⅤ(植物生存)7例,占14.6%,死亡6例,占12.5%。结论锥颅脑室穿刺外引流尿激酶注入联合腰大池持续外引流是治疗脑室出血安全、有效的方法。

重型颅脑对冲伤术中急性脑膨出手术治疗分析

目的:探讨重型颅脑对冲伤术中急性脑膨出的最佳手术方式及其疗效。方法:对58例重型颅脑对冲伤术中急性脑膨出的患者分别行标准外伤大骨瓣开颅减压术及常规骨瓣开颅减压术,术后对两种方法的疗效进行比较及统计学分析。结果:采用标准外伤大骨瓣开颅减压术的30例患者中,术后恢复良好(生活基本自理)19例(占63.3%),重残7例(占23.3%),死亡4例(占13.3%);采用常规骨瓣开颅减压术的28例患者中,术后恢复良好8例(占28.6%),重残8例(占28.6%),死亡12例(占42.9%),两组病例对比,患者的预后及死亡率有显著差异(P<0.05),标准外伤大骨瓣减压术组预后明显优于常规骨瓣开颅术组。结论:标准外伤大骨瓣开颅减压术能有效防治重型颅脑对冲伤术中出现的急性脑膨出,并能有效改善预后,降低死亡率。

微创穿刺引流术治疗轻型高血压脑出血与保守治疗疗效的比较

目的评价微创穿刺引流术与保守治疗轻型高血压脑出血的疗效。方法将2007-01-2013-12间我科收治的68例轻型高血压脑出血患者,按治疗方式分为微创穿刺组（33例）与保守治疗组（35例）。对两组患者治疗前后分别进行神经功能缺失评分（NDS）、日常生活能力评定（ADL）及疗效评价。结果微创穿刺组术后1 d、7 d、14 d、28 d NDS减少明显优于保守治疗组,差异有统计学意义（P〈0.05）;治疗28 d后微创穿刺组ADL达良好者（Barthel指数95-100分）14例（42.42%）,保守治疗组为3例（8.57%）,微创穿刺组优于保守治疗组,差异有统计学意义（P〈0.05）;微创穿刺组显效率84.85%,有效率93.94%,保守治疗组显效率54.29%,有效率80.00%,微创穿刺组显效率和有效率明显高于保守治疗组,两者比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论与保守治疗相比,微创穿刺引流术能有效、快速地清除颅内血肿,明显促进患者术后神经功能的恢复,是治疗轻型高血压脑出血的一种有效方法。

大鼠骨髓基质干细胞体外诱导分化为神经元样细胞相关基因研究

目的探索大鼠骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)体外定向诱导分化为神经元样细胞所涉及的相关基因,并探讨这些基因在BMSCs诱导分化为神经元样细胞时所起的作用。方法体外培养BMSCs至第4代,以碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子诱导7d,于诱导前和诱导后第7天抽提和纯化RNA,采用Affymetrix U133 plus 2.0基因表达谱芯片及技术对诱导前后的所有基因进行比较,找出其中的差异表达基因,并对其功能进行研究。结果通过对诱导前后的所有基因进行比较,总共找到97条差异基因,其中上调基因62条,下调基因35条。明确与神经元发育密切相关的基因有24条,其中上调18条,下调6条。结论 BMSCs体外诱导分化为神经元样细胞的相关基因表达谱中,有一些与神经元分化密切相关的基因存在差异表达,深入研究这些基因可能为基因工程改造BMSCs奠定基础。

CT定位微创治疗高血压脑出血患者的有效性分析

目的:探索CT定位微创疗法治疗高血压脑出血患者的疗效。方法:选取苏州市吴中人民医院神经外科2017年1月—2020年12月收诊的高血压脑出血患者80例,按照随机数字法分为对照组和观察组,各40例,对照组实施开颅血肿清除术,观察组实施CT定位下的微创血肿清除术,比较两组的术后并发症发生率、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、住院时间等。结果:观察组的治疗总有效率97.50%高于对照组的治疗总有效率82.50%(P<0.05);观察组的术后并发症发生率2.50%显著低于对照组的20.00%(P<0.05);观察组术后1周的NIHSS评分显著低于对照组(P<0.05);观察组住院时间显著短于对照组(P<0.05);术后随访3个月观察组的再出血发生率5.00%低于对照组的再出血发生率22.50%(P<0.05)。结论:在高血压脑出血患者的手术治疗中CT定位微创血肿清除术疗效肯定,能减少术后并发症,促进患者神经功能修复,预防再次出血,值得推广。

水分离技术在治疗高血压脑出血中的应用

目的探讨水分离技术在经侧裂岛叶手术治疗高血压脑出血中的应用。方法回顾性分析13例高血压基底核脑出血病人的临床资料,术中应用水分离技术解剖侧裂和清除血肿。结果 10例血肿完全清除,3例血肿清除大于90%。13例病人随访3个月,日常生活能力分级为:1级2例,2级7例,3级3例,4级1例。结论在经侧裂岛叶清除高血压基底核脑出血中使用水分离技术有助于解剖侧裂和清除血肿。

骨髓基质干细胞向神经元样细胞诱导分化前后相关基因表达谱的变化

背景:一系列研究发现,骨髓基质干细胞可在体外经人工诱导分化为神经元样细胞,有望用以移植治疗神经退行性疾病,但是其分化的分子机制尚不明了。目的:观察骨髓基质干细胞向神经元样细胞分化前后基因表达谱的变化。设计、时间及地点:观察性实验,于2006-12/2007-12在苏州大学附属第二医院神经外科脑肿瘤研究室完成。材料:健康成年近交系Wistar大鼠,体质量约300g。方法:体外培养和纯化大鼠骨髓基质干细胞,用碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子对其进行诱导,分别于诱导前和诱导后第7天抽提RNA后利用Affymetrix基因芯片检测分析诱导前后差异基因表达谱,并有选择地对其中的一些重要基因进行实时定量PCR验证。主要观察指标:①骨髓基质干细胞的培养及诱导分化。②诱导分化后神经细胞的鉴定。③诱导分化前后基因芯片的检测。④基因芯片结果的分析。⑤实时定量PCR的验证。结果:骨髓基质干细胞经诱导后形态上呈神经元样细胞改变,免疫荧光证实β-TubulinⅢ染色后阳性率为(69.04±5.63)%。基因芯片共发现差异基因215条,其中上调基因125条,下调基因90条。明确与神经元发育密切相关的基因有13条,其中上调7条,下调6条。挑选重要的4条基因Bmp4、Robo2、Numb、Enc1进行实时定量PCR验证,其结果与基因芯片结果相符。结论:骨髓基质干细胞在体外诱导分化为神经元样细胞的相关基因表达谱中,有一些明确与神经元分化密切相关的基因存在差异表达,深入研究这些基因可能为基因工程改造骨髓基质干细胞奠定基础。

近交系胎鼠中脑多巴胺能神经元体外定向分化的初步研究

目的体外培养近交系大鼠胚胎腹侧中脑前体细胞(VMP)并诱导其分化为多巴胺能神经元(DN),为研究DN定向分化的分子机制提供细胞模型。方法取材胎龄11d的近交系大鼠胚胎VMP,体外用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)增殖培养7d后换用L-抗坏血酸-2-磷酸酯倍半镁盐(AA-2P)诱导分化为DN,随后进行免疫荧光染色鉴定。结果细胞总数扩增49.76倍,免疫荧光染色显示β-TubulinⅢ阳性的神经元中(71.33±20.42)%为TH阳性的DN,后者占细胞总数的(24.85±12.85)%。结论近交系大鼠VMP经体外原代培养能够得到较高比例的DN,可作为深入研究DN定向分化分子机制的细胞模型。

近交系大鼠胚胎中脑前体细胞体外培养初步研究

目的 尝试体外培养近交系大鼠胚胎中脑前体细胞（ventral meseneephalic precursor，VMP）并进行诱导分化。方法 取材E11近交系大鼠胚胎腹侧中脑细胞在bFGF培养液中原代培养7天，撤去bFGF，加AA-2P诱导分化7～10天，免疫荧光染色法分析前体细胞分化情况。结果 体外培养14天及17天，细胞数量分别扩增至培养前的49．76倍和58．43倍，免疫荧光染色显示细胞群体中除了VMP外，还可见大量的神经元（包括多巴胺能神经元）和星形胶质细胞等。结论 近交系大鼠VMP能够在体外扩增并分化，可得到较多的多巴胺能神经元用于后续分子生物学研究。

骨髓基质干细胞向神经元样细胞分化前后BMP4基因差异表达的初步研究

目的初步探讨骨髓基质干细胞(BMSC)向神经元样细胞分化前后骨形态发生蛋白4(BMP4)基因的表达变化情况。方法体外培养大鼠BMSC,用碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和表皮生长因子(EGF)对其进行诱导,分别于诱导前和诱导后第7天行基因芯片检测BMP4基因表达水平,并采用实时定量PCR进行验证。结果在BMSC向神经元样细胞诱导分化后的芯片表达谱中,BMP4基因的表达明显上调,且实时定量PCR亦证实此结果。结论在BMSC向神经元样细胞的分化过程中,BMP4基因可能发挥着重要的作用。

不同入路显微手术治疗基底节区高血压脑出血的效果对比

目的探讨不同入路显微手术治疗基底节区高血压脑出血的效果。方法将我院2017年1月—2021年3月期间98例患者分组,按照随机数字表法分为对照组49例,给予颞叶皮层入路显微手术治疗,观察组49例给予经外侧裂入路显微手术治疗,观察2组预后状态、术后情况、日常生活能力及并发症发生情况。结果术后半年,观察组预后状况优良率(81.63%)高于对照组(59.18%,P<0.05);观察组血肿消除率(95.92%)大于对照组(81.63%,P<0.05),2组手术时间[观察组(141.22±20.15)min,对照组(134.49±22.58)min]对比差异无统计学意义(P>0.05);观察组日常生活能力优于对照组(P<0.05);观察组并发症(14.28%)与对照组对比无统计学意义(10.20%,P>0.05)。结论相较于颞叶皮层入路,外侧裂入路下显微手术治疗基底节区高血压脑出血患者对血肿清除效果更佳,以此提高手术预后及生活能力,不会增加手术时间及术后并发症发生情况。

高血压性脑出血外科治疗方式和影响疗效因素

目的 探讨高血压性脑出血外科治疗方式的优劣以及影响疗效的因素。方法 60例在外科接受治疗的高血压性脑出血患者,随机分为开颅组（开颅血肿清除术）和引流组（钻孔血肿引流术）,每组30例。两组患者均在发病后的3~72 h之内进行手术治疗,其中超早期治疗（6~7 h）25例,7 h以上接受手术治疗35例。结果 开颅组和引流组的格拉斯哥预后评分（GOS）和日常生活活动能力量表（ADL）结果比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。超早期治疗有利于患者的预后。结论 高血压性脑出血的治疗采用何种手术方式要根据患者的个体情况而定,影响预后的因素也较多,其中血肿量、手术时机、治疗方案的选择都是影响外科治疗高血压性脑出血的重要因素。

超早期脑血肿碎吸引流术治疗高血压性脑出血的疗效

目的:探讨不同手术时机使用脑血肿碎吸引流术治疗高血压性脑出血的疗效。方法:两组患者均采用脑血肿碎吸引流术进行治疗,超早期组在发病6~7 h内施行脑血肿碎吸引流术进行治疗。延期组在7~72 h内进行脑血肿碎吸引流术进行治疗。结果:术后并发症的主要类型为脑出血、消化道出血、感染(以肺部感染为主)、死亡。其中超早期组的3种并发症数量及死亡病例均少于延期组;两组病例在治疗1个月以后使用GOS临床评分的方法进行治疗预后评价,超早期组的GOS预后要明显好于延期组;随访6个月以后进行ADL比较发现在5个等级中,超早期组的ADL评分情况要优于延期组。结论:使用脑血肿碎吸引流术在6~7 h内针对高血压脑出血病例进行手术治疗,能够提高患者的生存质量,有效地减少致残率和致死率。

脑室型颅内压监护与脑实质型颅内压监护在幕上高血压脑出血患者的应用价值

目的探讨脑室型颅内压监护与脑实质型颅内压监护在幕上高血压脑出血患者的应用价值。方法回顾性分析41例需行颅内压监护的幕上高血压脑出血患者的临床资料,并将其随机分为脑室型监护组(A组,21例)和脑实质型监护组(B组,20例)。比较两组间持续性高颅压发生率、开颅减压手术率及预后情况。结果 41例患者中,14例出现持续性高颅压,其中B组持续性高颅压发生率(45.0%)、手术率(70.0%)高于A组(23.8%、38.1%)(P<0.05);A组随访3个月的预后良好率(71.4%)优于B组(45.0%)(P<0.05)。结论脑室型颅内压监护可显著降低幕上高血压脑出血患者持续性高颅压发生率及开颅减压手术率,提高患者生存率及改善患者的预后。

高血压脑出血微创穿刺术后再出血原因分析及处理

目的探讨高血压脑出血行微创穿刺引流术后再出血的原因、预防措施及处理方法。方法对14例高血压脑出血微创穿刺引流术后再出血患者的临床资料进行回顾性分析。结果 14例患者中术中再出血5例,术后再出血9例。通过肾上腺素及立止血冲洗及引流后,8例止血效果良好;3例继续少量出血,但出血逐步停止;3例止血效果较差,出血明显增多,行开颅手术。结论高血压脑出血行微创穿刺引流术后再出血主要与手术时机、血压控制、术中抽吸负压等因素有关,重视这些因素并采取相应措施可降低再出血率,提高手术疗效。

微创穿刺联合阿托伐他汀治疗慢性硬脑膜下血肿的疗效

目的探讨微创穿刺联合口服阿托伐他汀治疗慢性硬脑膜下血肿的临床疗效。方法慢性硬脑膜下血肿患者48例随机均分为两组:对照组患者使用微创穿刺治疗,观察组患者在此基础上加用阿托伐他汀口服(20mg/d,治疗1~3个月)。比较两组疗效。结果观察组总有效率与对照组相仿(95.8%vs.91.7%)(P>0.05);治疗后,观察组日常生活自理能力(ADL-Barthel)评分高于对照组(P<0.05),症状改善时间也早于对照组(P<0.05)。观察组并发症发生率和复发率低于对照组(8.3%vs.33.3%和0vs.20.8%)(P<0.05)。结论在微创穿刺的基础上,联合口服阿托伐他汀治疗可有效地降低慢性硬脑膜下血肿患者的并发症和复发率。