基于UPLC-Q-TOF-MS技术鉴定太子参环肽入血成分

目的:分析太子参环肽的主要入血成分。方法:SPF级雄性SD大鼠灌胃太子参环肽提取物,不同时间点于眼眶取血。离心分离血浆样品,通过超高效液相色谱-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术进行分析,采用Waters ACQUITY UPLC■CSH C18(2.1×100 mm,1.7μm)色谱柱;以乙腈、0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱。结合分子离子和碎片离子特征峰信息,分析不同环肽在大鼠体内的入血原型成分及代谢物。结果:经液质联用分析,共检测出15个入血成分,其中有7个为原型成分,8个为代谢产物。代谢途径主要包括Ⅰ相的水解、脱甲基戊羧酸、脱氢、加氢和Ⅱ相的甲基化结合反应。结论:初步鉴定了太子参环肽的入血原型成分及代谢产物,为其进一步的药效物质基础及质量控制研究提供了数据支撑。

市售铁皮石斛多糖及甘露糖含量比较研究

目的按照《中国药典》2015版方法,比较目前市售铁皮石斛药材的多糖及甘露糖含量。方法从市场上随机采购铁皮石斛样品6批,采用硫酸-苯酚法检测铁皮石斛总多糖含量,柱前衍生HPLC法检测其甘露糖含量。结果市售铁皮石斛多糖含量在34%~42%之间,甘露糖含量在19%~27%之间。结论市售铁皮石斛质量虽存在差异,但均符合药典标准。

太子参均一多糖对大鼠小肠α-糖苷酶活性影响

目的:考察太子参均一多糖对大鼠小肠α-糖苷酶活性影响,探讨其降血糖途径。方法:由大鼠分离小肠α-糖苷酶,以对硝基酚-α-葡萄糖苷(pNPG)为底物,利用α-葡萄糖苷酶将其分解成pNP及葡萄糖,而pNP在碱性条件下显色的原理测定酶活力,以考察太子参均一多糖对酶活性的影响。结果:太子参均一多糖HP_(0.5MSC-F)和HP_(H-1-2),浓度为400μmol/L时对大鼠小肠α-糖苷酶活性抑制率分别为19.00%和28.07%。结论:两种太子参均一多糖对α-葡萄糖苷酶活性具有一定的抑制作用。

不同提取方法对太子参多糖含量的影响

目的:考察不同提取方式对太子参粗多糖的得率、总多糖含量的影响。方法:采用热水提取法、超声提取法和酶提取法分别提取太子参多糖,苯酚硫酸法测定总多糖含量。结果:热水提取法、超声提取法和酶提取法对太子参粗多糖得率分别为14.54%、11.12%和17.81%,太子参总多糖含量依次为10.18%、8.68%和10.69%。结论:综合考虑提取效率、多糖纯度和工艺成本,热水提取法较为适用于太子参多糖的生产。

野生和林下种植金线莲的体外抗氧化活性研究

目的:研究野生和林下种植金线莲的体外抗氧化活性。方法:采用紫外分光光度法,检测野生金线莲和林下种植金线莲水提液及醇提液对DPPH自由基的清除能力。结果:野生金线莲和林下种植金线莲对DPPH自由基具有一定的清除作用,其活性均为水提液优于醇提液;野生金线莲与林下种植金线莲对DPPH自由基的清除活性总体差异不大。结论:林下种植可以作为缓解金线莲资源紧张的重要途径。

柘荣县太子参种植土壤重金属含量分析

目的:参照中国农业行业标准NY/T395-2012方法检测6批太子参种植土壤重金属含量。方法:从柘荣地区不同太子参种植地采集土壤样品,分别采用盐酸-硝酸-高氯酸及硫酸-高锰酸钾法消解土壤,原子吸收分光光度法检测土壤中铜、镉、铅、砷、汞的含量。结果:柘荣6批太子参种植土壤5种重金属含量均符合《国家土壤环境质量标准》二级标准值。结论:柘荣县太子参种植土壤环境未受这5种重金属污染。

一种闽产青红酒粗多糖和总黄酮的测定

目的:采用分光光度法,测定一种闽产青红酒中粗多糖和总黄酮含量。方法:采用醇沉法,分离酒中粗多糖,以无水D-葡萄糖为对照品,采用苯酚-硫酸法检测粗多糖含量;以芦丁为对照品,在360 nm波长下测定吸光度,计算总黄酮含量。结果:测定葡萄糖范围3.86~12.87μg/mL,回归方程为y=53.32x-0.021,r=0.9984;测定芦丁线性范围7.56~22.68μg/mL,回归方程为y=0.034x-0.022,r=0.9993。结论:通过测定青红酒中粗多糖和总黄酮含量,有利于对产品配方及工艺进行质量控制。

施用生物菌肥对太子参中氨基酸组成和含量的影响

目的 研究微生物菌肥对太子参中氨基酸组成和含量的影响。方法 以施用哈茨木霉菌、芽孢杆菌、磷细菌微生物菌肥种植所得太子参为研究对象,采用邻苯二甲醛(OPA)柱前衍生,水∶乙腈=20∶80为流动相,高效液相色谱法测定太子参氨基酸指纹图谱,以氨基酸对照品对样品共有峰进行定性鉴别和定量分析。结果 施用不同微生物菌肥种植太子参,其总氨基酸含量高于常规施肥种植太子参,重茬连作太子参总氨基酸含量最低;18种氨基酸含量高低分布与总氨基酸基本一致。结论本文考察施用哈茨木霉菌、芽孢杆菌、磷细菌三种微生物菌肥种植,对太子参中氨基酸成分组成含量的影响,从一个侧面评价太子参的质量。

分子对接模拟太子参环肽B与VEGFA、HMGB1相互作用的研究

目的:采用计算机模拟分子对接技术研究太子参环肽B (Heterophyllin B, HPB)与血管内皮生长因子A (vascular endothelial growth factor A, VEGFA)、高迁移率族蛋白1 (high mobility group box 1 protein, HMGB1)的相互作用关系。方法:利用PyRx软件中的Autodock Vina模块研究太子参环肽B与蛋白质之间的相互作用,并利用PyMOL进行构像分析和绘图。结果:模拟分析确定HPB与VEGFA,HPB与HMGB1靶标相互作用的功能区域,HPB与VEGFA活性位点氨基酸Tyr38、Glu86有氢键作用;HPB与HMGB1活性位点的氨基酸无氢键作用,相互间主要作用力为范德华力。结论:本研究分析了HPB与靶蛋白的相互作用关系,为探索其药效作用机制奠定基础。

畲药“十二时辰”水煎液对皮肤的刺激性实验研究

目的:考察畲药“十二时辰”水煎液对大鼠足溃疡的影响,初步评价其对皮肤刺激性。方法:以10%水合氯醛0.3 mL/100 g腹腔注射麻醉大鼠,用直径5 mm的活检打孔器,取大鼠足背部皮肤至筋膜层,制备大鼠足溃疡模型;以不同剂量“十二时辰”水煎剂外涂,左右两足完整皮肤与破损皮肤自体对照,观察“十二时辰”对皮肤的刺激性,按皮肤刺激反应评分标准进行评分。结果:在实验条件下,“十二时辰”水煎液对大鼠足完整皮肤无刺激性,但中高剂量水煎液对大鼠足溃疡皮肤有中轻度刺激性。结论:“十二时辰”临床外用时,需控制药液浓度。

闽产黄精青红酒缓解体力疲劳功效测定

目的:通过小鼠负重游泳试验,测定一种含黄精青红酒缓解体力疲劳的功效。方法:3.33 mL/kg?bw/d、1.11 mL/kg?bw/d、0.56 mL/kg?bw/d高中低三个剂量组,以相应酒精度的基酒为对照,每日一次,连续灌胃一个月,测定各项指标值。结果:高剂量组小鼠负重游泳时间长于对照组(P 0.05),故该项指标为阴性。结论:根据《保健食品检验与评价技术规范》,若负重游泳试验结果阳性,且血乳酸、血清尿素、肝糖原三项生化指标中任二项指标阳性,即可判定该受试样品具有缓解体力疲劳作用。在本试验条件下黄精青红酒具有缓解体力疲劳作用。

链霉菌发酵产物抗菌活性的研究

本文研究链霉菌发酵液对植物病原菌的抗菌活性。采用菌丝生长速率法、十字交叉法测定菌落扩展直径,考察链霉菌发酵液对所选大叶镰刀菌、子囊菌和木贼镰孢菌3种太子参种植中病原真菌活性的影响。链霉菌发酵液与病原菌共培养72 h,对大叶镰刀菌和木贼镰孢菌的平均抑制率分别为30.64%和51.37% (P <0.01),对子囊菌的抑制率为12.29 (P <0.05)。链霉菌发酵液对木贼镰孢菌的抑制作用最强,其原理涉及阻碍菌体核酸的生成;大叶镰刀菌次之,对子囊菌的抑制作用最弱,对大叶镰刀菌和子囊菌的核酸含量没有显著的影响。链霉菌发酵液对3种植物病原菌呈现不同程度的抗菌活性。

太子参不同极性部位的化学成分研究

目的:对太子参不同极性部位中的化学成分进行鉴定,并比较不同极性部位之间化学成分的差异。方法:将太子参饮片用80%乙醇制备总提取物后,分别用乙酸乙酯和正丁醇依次萃取,得到不同极性部位提取物。采用InfiniteC18色谱柱(4.6 mm × 250 mm, 5 μm),以乙腈(A)和0.2%甲酸溶液(B)为流动性进行梯度洗脱,流速为0.3 mL•min−1;离子源采用电喷雾离子源(ESI),扫描模型是正离子模式,结合Metlin数据库和文献报道的质谱信息对太子参不同极性部位中的化学成分进行鉴定。结果:从太子参乙酸乙酯和正丁醇部位中分别鉴定出10个和7个化合物。结论:本研究为太子参的药效物质基础研究提供了理论参考。

一种保健功能青红酒30天喂养试验研究

目的:大鼠灌胃黄精青红酒进行30天喂养试验,初步评价其安全性。方法:黄精青红酒以3.33 mL/kg·bw/d、7.23 mL/kg·bw/d、11.12 mL/kg·bw/d(相当于人体推荐量的30倍、65倍、100倍)的剂量给予大鼠30天,测定血液学指标和血液生化指标。结果:受试动物一般情况良好,体重无异常改变;血液学指标及生化指标结果显示,各项指标均在正常值范围内。结论:30天喂养试验,给予动物人体推荐剂量100倍的黄精青红酒,未观察到有害作用。

太子参环肽提取物对LQIS-COPD大鼠动物模型的干预作用

目的:考察太子参环肽提取物对肺气虚证慢性阻塞性肺疾病模型大鼠的干预作用。方法:采用烟熏+木瓜酶蛋白制备肺气虚证慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease of lung-qi insufficiency syndrome,LQIS-COPD)大鼠模型,太子参环肽提取物高、中、低剂量(100 mg/kg/d、200 mg/kg/d、400 mg/kg/d),灌胃给药30 d;测定大鼠的气道阻力和肺动态顺应性。结果:LQIS-COPD大鼠给予太子参环肽提取物治疗后,咳嗽、气急、喘鸣的症状明显改善,显著降低模型大鼠的肺气道阻力,增加其肺动态顺应性。结论:太子参环肽提取物对LQIS-COPD有良好的干预作用。

十二时辰软膏剂制备工艺研究

目的:研究十二时辰软膏剂的最佳制备方法,确定最佳基质处方、成型工艺条件。方法:以高温试验、低温试验、离心实验和外观性状为评价标准,比较不同基质的软膏剂处方的稳定性,选出最佳基质处方进行单因素考察,在此基础上采用Box-Behnken设计,选出最佳软膏基质配比;以药物与基质的不同比例制备药膏,确定十二时辰软膏剂的最佳含药量,并观察软膏剂的外观性状。结果:最佳基质配方为以聚山梨酯为乳化剂的O/W型基质,最佳基质的配比为单硬脂酸甘油酯:吐温-80:白凡士林(0.8∶4∶3)。最佳载药量为20%。结论:探讨了十二时辰软膏剂的初步成型工艺,为增加治疗糖尿病足的制剂品种提供了一定的研究基础。

太子参均一多糖HPLC-FLD检测方法的建立

目的:建立一种太子参均一多糖的高效液相色谱-荧光检测方法 (HPLC-FLD)。方法:用异硫氰酸荧光素(FITC)标记太子参均一多糖,采用HPLC-FLD,考察不同溶剂、流动相、色谱柱对检测结果的影响,确定最佳检测条件,建立太子参荧光均一多糖的HPLC-FLD检测方法。结果:荧光检测激发波长为490nm,发射波长为518nm;大连依利特Hypersil BDS C18(4.6mm×250mm,5μm)色谱柱;样品溶于30%乙腈,乙腈-0.01mol/L磷酸二氢钾(30∶70)为流动相;确定HPLC-FLD检测荧光多糖最佳条件。结论:该方法准确、有效,可用于检测太子参荧光均一多糖,为太子参多糖在体内外吸收特征和活性研究奠定基础。

基于气相指纹图谱及网络药理学探讨微生物菌肥对太子参脂肪酸组成的影响及抗炎作用

目的研究微生物菌肥对太子参脂肪酸组成的影响并探讨其抗炎作用机制。方法以哈茨木霉菌、芽孢杆菌、磷细菌微生物菌肥种植所得太子参为研究对象,首先采用气相色谱法建立太子参脂肪酸指纹图谱,然后通过GC-MS法对各共有峰进行定性鉴别,最后通过网络药理学方法探讨太子参脂肪酸抗炎活性的潜在作用靶点。结果建立太子参脂肪酸成分的GC指纹图谱的测定方法,不同微生物菌肥所得太子参指纹图谱与对照种植太子参比较相似度均>0.91,筛选获得19个共有峰,并完成各共有峰的GC-MS定性鉴别;网络药理学研究结果提示,其抗炎的核心靶点为:PPARA、PTGS1、NR1H4、PTGS2、PPARG、ALOX5等。结论哈茨木霉菌、芽孢杆菌、磷细菌3种微生物菌肥种植不影响太子参中脂肪酸类成分的组成,太子参脂肪酸抗炎活性有27个潜在的作用靶点。

基于网络药理学与分子对接探究荆芥-防风药对防治新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的作用机制

目的:采用网络药理学与分子对接法探究荆芥-防风药对防治新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的作用机制。方法:借助中药系统药理学分析平台TCMSP检索荆芥与防风的化学成分与作用靶标,采用Uniprot数据库查询各靶标对应的基因。通过String进行GO富集分析与KEGG通路富集分析,预测其作用机制。通过Omicshare绘制气泡图,运用Cytoscape软件构建化合物-靶标-通路网络并进行可视化分析。利用CB-Dock对核心活性化合物与COVID-19的3CL水解酶及ACE2进行分子对接。结果:以口服利用率OB≥30%,类药性DL≥0.18为活性化合物筛选条件,从荆芥-防风药中筛选出27个活性成分和212个靶标,与350个COVID-19相关靶标的交集靶标共有47个。其中,核心靶标25个,包含IL6、TP53、CASP3、MAPK1、CXCL8、CCL2等。核心化合物包括槲皮素、木犀草素、汉黄芩素、β-谷甾醇等。GO富集得出1381条结果,其中生物过程1210条,细胞组成54条,分子功能117条。KEGG通路富集得到相关通路160条,提示荆芥-防风药对可能作用于多条炎症、免疫、病毒感染相关通路,发挥防治COVID-19的作用。结论:通过网络药理学结合分子对接预测了荆芥-防风药对可通过槲皮素、木犀草素、汉黄芩素、β-谷甾醇等活性化合物,介导多条免疫、炎症、感染相关通路,进而发挥防治COVID-19的作用。

太子参水煎液对T2DM大鼠肠道短链脂肪酸含量的影响

目的探讨太子参水煎液对2型糖尿病(T2DM)大鼠结肠内容物中短链脂肪酸(SCFAs)含量的影:响,为太子参在抗T2DM处方中的临床应用提供理论依据。方法采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)联合高脂高糖饲料喂养建立T2DM大鼠模型,太子参水煎液灌胃给药,采用气相色谱法检测大鼠结肠内容物中乙酸、丙酸、丁酸等8种SCFAs的含量。结果与空白组相比,模型组大鼠结肠内容物中丁酸、异丁酸、异戊酸、戊酸、己酸含量显著降低(P<0.05);与模型组相比,太子参水煎液组大鼠结肠内容物中丁酸、异丁酸、异戊酸,戊酸含量显著增加(P<0.05)。结论太子参水煎液可影响T2DM大鼠结肠中SCFAs的代谢,进而对T2DM产生影响。