卵巢癌淋巴结定向转移裸鼠动物模型的建立

目的:在裸鼠体内建立人卵巢癌定向淋巴道转移动物模型。方法:将卵巢癌细胞株SKOV3移植于裸鼠爪垫下,待裸鼠卵巢癌发生转移时,取其淋巴结转移灶癌细胞再次移植裸鼠爪垫下传代,反复传3代。结果:SKOV3卵巢癌细胞在裸鼠体内传3代后,各代裸鼠的淋巴结转移率一直稳定,且转移途径较为单一;各代癌细胞的体内外增殖能力不断增强。结论:成功建立了人卵巢癌定向高淋巴道转移模型。

ERK及JNK/MAPK通路在宫颈癌及癌前病变组织中的表达及临床意义

目的探讨在宫颈癌的发生发展及预后中ERK及JNK/MAPK通路表达的意义。方法收集正常宫颈组织、宫颈CINⅠ级、CINⅡ/Ⅲ级、宫颈癌的病例各30例,应用免疫组化技术检测ERK、JNK在四组中的表达。结果 ERK的表达率呈递增趋势,相邻两组间ERK表达率比较差异有统计学意义(P<0.05),说明ERK由CINⅠ级到CINⅡ/Ⅲ级的变化过程在宫颈癌的发展中起着至关重要的作用。JNK的表达率相邻两组之间比较无统计学意义(P>0.05)。结论 ERK及JNK/MAPK通路的激活与抑制和宫颈癌的发生发展有密切相关,且ERK/MAPKs通路的激活在CINⅠ级到CINⅡ/Ⅲ级的变化过程与宫颈癌的发生较为密切。

84例腹腔镜下子宫后壁大肌瘤剥除术临床分析

目的探讨腹腔镜下后壁子宫大肌瘤手术的临床应用价值。方法回顾性分析84例腹腔镜下后壁大子宫肌瘤剥除术的手术过程,观察手术时间、出血量、术后恢复情况等。结果手术平均时间为(70.6±40.8)min,术中平均出血量(80.6±42.5)m L,术后排气时间(24.00±6.58)h,术后住院时间(3.80±1.23)d,术后腹部伤口均愈合良好,其中4例因术野暴露不清,中转开腹,余均能在镜下手术完成,且无术后并发症。结论只要掌握一定的手术技巧,肌瘤大小不是腹腔镜手术绝对禁忌证。

米非司酮联合利凡诺在60例中孕引产中的临床分析

目的:研究利凡诺联合米非司酮在中孕引产中的优点。方法:选取两组病例,A组利凡诺联合米非司酮引产者60例;B组单用利凡诺腔内引产者63例。观察两组患者总引产时间、分娩过程中疼痛评分、产后出血量、胎盘残留或粘连程度。结果:使用利凡诺联合米非司酮的中孕引产者在胎儿娩出期间疼痛明显减轻,胎儿娩出时间较B组明显少,产后出血量无明显改变,产后胎盘残留或粘连明显少,100%引产成功,B组3例引产失败,改用其他引产方式。结论:中孕引产使用利凡诺联合米非司酮较单用利凡诺临床效果好。

裸鼠动物模型在卵巢癌研究中的应用与进展

裸小鼠（nude mice）是1962年英国格拉斯医院Grist在非近交的小鼠中偶然发现的先天性免疫缺陷的动物，用“nu”表示裸基因符号。1969年丹麦Rygaard首先将人类结肠腺癌移植裸小鼠成功，从而为免疫缺陷动物研究和应用开创了新局面。卵巢癌在女性生殖系统恶性肿瘤中发病率居第3位，而死亡率却位居榜首，这主要是由于目前卵巢癌发病病因尚不明确及其早期诊断的困难。随着人类肿瘤组织及肿瘤细胞株移植的成功，动物模型成为各项肿瘤实验研究领域的重要工具。特别是裸小鼠动物模型在卵巢癌中的应用更为广泛。现就近年裸鼠动物模型在卵巢癌中的应用予以概述。

大黄酸调控Rac1/LIMK1/cofilin信号通路抑制卵巢癌细胞运动与侵袭

目的探讨大黄酸对卵巢癌淋巴结高转移SKOV3-PM4细胞运动和侵袭能力的影响,揭示大黄酸调控Rac1/LIMK1/cofilin信号通路与抑制卵巢癌细胞运动侵袭作用的机制。方法划痕实验观察大黄酸对卵巢癌细胞运动的影响,Matrigel-Transwell方法检测细胞侵袭能力,激光共聚焦扫描显微镜和扫描电镜观察大黄酸对卵巢癌细胞形态和细胞骨架超微结构的影响,Western blot分别检测Rac1/LIMK1/cofilin通路上Rac1、LIMK1、PAK1、cofilin蛋白的表达。结果与空白对照组相比,大黄酸能抑制SKOV3-PM4细胞侵袭和迁移能力,浓度为8.8、17.60、26.40μmol·L^(-1)的大黄酸处理24 h后,细胞体外迁移和侵袭能力均明显下降(P<0.05);细胞出现伪足减少,细胞内微丝断裂、分布紊乱,质膜凹凸不平、细胞间的间隙变宽等超微结构改变;Western blot结果表明大黄酸能明显下调Rac1蛋白的表达水平,并呈浓度依赖性。卵巢癌细胞经大黄酸及Rac1抑制剂处理后,磷酸化LIMK1、cofilin、PAK1蛋白水平与空白对照组比较明显下降,且大黄酸联合Rac1抑制剂处理后的磷酸化蛋白下调更为明显(P<0.05);而Rac1激活剂联合大黄酸组比大黄酸组磷酸化蛋白上调明显(P<0.05)。结论大黄酸为潜在的Rac1小分子抑制剂,其作用机制可能是调控Rac1/LIMK1/cofilin信号通路,抑制卵巢癌淋巴结转移细胞运动和侵袭的能力。

改良水囊在治疗宫颈妊娠出血中的应用

目的：探讨改良一次性使用子宫造影通水管水囊在治疗宫颈妊娠出血的临床应用效果，方法：对7例宫颈妊娠患者在清宫术后应用改良一次性使用子宫造影通水管水囊压迫止血，清宫术后有妊娠物残留的患者再择期行宫腔镜电切术＋水震压迫，结果：7例患者中。2例急诊清宫术中出血500～1000ml，5例择期清宫术中出血80～250ml，术后水囊压迫24～48小时．4例宫颈管内仍有妊娠物残留，择期行宫腔镜电切术＋水囊压迫，术中出血50～200ml。7例患者均能在水嵌压迫24～48小时内阴道流血停止，术后1个月内血B—HCG均降至正常，复查超声宫颈未见异常回声，随访月经来潮正常。结论：改良水囊应用于宫颈妊娠出血，方法简单、经济、有效，在临床上，尤其是在基层医院值得尝试。

应用功能分类基因芯片筛选卵巢癌淋巴结定向高转移细胞系中差异性表达基因

目的:在裸鼠体内建立以人卵巢浆液性乳头状腺癌细胞系SKOV3具有淋巴结定向高转移亚克隆第二代SKOV3-pm2、第三代SKOV3-pm3细胞系,应用基因芯片技术比较这3种具有不同淋巴结定向转移能力的细胞亚系中基因表达谱的差异,寻找卵巢癌侵袭转移相关基因。方法:采用Trizol一步法抽提SKOV3、SKOV3-pm2、SKOV3-pm33种细胞总RNA;取等量RNA逆转录合成cDNA用Ampolabeling-LPR(linear polymerase re-action,线性聚合酶反应)法标记的cDNA链做探针,混合后与功能分类基因芯片[OligoTumor Metastasis Microarray Catalog No.OHS-028(人)]杂交,计算机分析后比较3种细胞中差异性表达基因,并应用RT-PCR技术对其中3个表达差异明显的基因进行验证。结果:共筛选出表达差异性基因60个,其中表达上调基因47个(ratio>3),有21个基因在SKOV3-pm2、SKOV3-pm3中共同表达上调;表达下调基因13个(ratio<0.5),有1个基因在SKOV3-pm2、SKOV3-pm3细胞中共同表达下调。结论:基因表达芯片检测与肿瘤淋巴体外转移模型相结合,为肿瘤转移研究提供了新方法、新思路。

COOK子宫颈扩张球囊在晚期妊娠孕妇促宫颈成熟中的应用价值

【目的】探讨Cook子宫颈扩张球囊在晚期妊娠孕妇促宫颈成熟中的应用价值。【方法】选择2014年1月至2017年1月本院诊治的有引产指征的患者189例,按照处理方式的不同分为Cook子宫颈扩张球囊组（COOK组）、地诺前列酮组和缩宫素组,每组63例。比较各组促宫颈成熟效果和阴道分娩率。【结果】各组在引产前的宫颈Bishop评分比较差异无统计学意义（P〉0.05）;COOK组患者经COOK宫颈扩张球囊处理后宫颈Bishop评分为（4.3±1.9）分,较引产前显著升高（P〈0.05）;而其他两组患者在处理前后宫颈Bishop评分比较差异无统计学意义（P〉0.05）;COOK组中51例患者自然分娩,12例行剖宫产,自然分娩率为80.95%;COOK组与地诺前列酮组的自然分娩率（76.19%）比较差异无统计学意义（P〉0.05）,但均显著高于缩宫素组的58.73%（P〈0.05）。【结论】Cook宫颈扩张球囊作为机械性方法促宫颈成熟,疗效显著,阴道分娩率明显提高,是一种理想的晚期妊娠促宫颈成熟方法。

阴道延长及卵巢移位术治疗年轻宫颈癌患者的临床研究

目的研究宫颈癌根治术的同时行阴道延长及卵巢移位术对提高年轻患者生存质量的意义。方法 41例手术适应证的年轻宫颈癌患者,30例(研究组)在根治术的同时行卵巢移位和阴道延长术;11例(对照组)行常规根治术。观察两组术后阴道长度及性生活满意度,用化学发光法检测患者手术前、后血清促卵泡素(FSH)、雌二醇(E2)水平,并进行统计学分析。结果研究组术后阴道长度长于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。研究组手术前后血清FSH、E2水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论阴道延长及卵巢移位术可提高年轻宫颈癌患者的术后生存质量。

淋巴管内皮细胞微环境对卵巢癌淋巴结定向高转移细胞上皮-间质转化的影响

目的通过人卵巢癌淋巴结定向高转移的细胞株(SKOV3-PM4)与人淋巴管内皮细胞株(HLEC)的条件培养和共培养,探讨HLEC微环境对SKOV3-PM4的运动迁移能力以及上皮-间质转化(EMT)的影响。方法采用transwell小室体外侵袭法,观察经HLEC的条件培养后SKOV3-PM4的侵袭、迁移能力的改变。SKOV3-PM4经HLEC的条件培养和共培养后的爬片细胞,采用免疫组化法检测转化生长因子(TGF-β1)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)表达的变化。结果经HLEC培养基的条件培养后SKOV3-PM4细胞的侵袭率为(53±11)%,单独培养的SKOV3-PM4细胞的侵袭率为(30±5)%(P<0.05);条件培养后SKOV3-PM4细胞的迁移率为(48±5)%,单独培养的SKOV3-PM4细胞的迁移率为(34±2)%(P<0.05)。SKOV3-PM4细胞经条件培养和共培养后TGF-β1和vimentin表达上调(P均<0.05),E-cadherin表达下调(P<0.05)。结论淋巴管内皮细胞微环境可促进卵巢癌淋巴结定向高转移细胞间质化的转变,增强卵巢癌细胞的侵袭、迁移能力。

血管内皮细胞对卵巢癌淋巴结定向转移细胞侵袭能力的影响

目的:研究血管内皮细胞对卵巢癌淋巴结高转移细胞的运动迁移和侵袭能力的影响。方法:建立卵巢癌淋巴结高转移细胞(SKOV3-PM4)、人脐血管内皮细胞(human umbilical venous endothelial cells,HUVEC)条件培养基的交互培养体系,通过MTT法测定生长曲线,HE染色观察细胞超微结构的改变,Transwell穿膜运动实验、划痕实验、明胶酶谱分析等实验方法研究交互培养后各组细胞的侵袭转移能力的变化。结果:与同期单独培养的SKOV3-PM4、HUVEC相比,交互培养后的SK-OV3-PM4伪足增多,生长速度明显快于SKOV3-PM4,交互培养后HUVEC呈不规则形态,出现空泡化超微结构,生长速度与HUVEC相似,细胞的运动和侵袭能力增强,基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)在单独的SKOV3-PM4中低表达,在HUVEC中不表达,在共培养的SKOV3-PM4-HUVEC中高表达。结论:HUVEC上清液培养后的SKOV3-PM4的生物学行为和运动侵袭能力发生改变,推测可能与血管内皮分泌的VEGF、MMP-2等因子有关。

腹腔镜下困难及复杂全子宫切除术129例临床体会

目的探讨腹腔镜下困难及复杂全子宫切除术的可行性和手术技巧。方法对129例因子宫>孕12周的子宫肌瘤,子宫内膜异位症,或肌瘤位于阔韧带、子宫峡部、宫颈等原因需切除子宫患者的临床资料进行回顾性分析。结果 125例在腹腔镜下顺利完成手术,手术时间(153±42.7)min,术中出血量(213±65)ml,术后住院时间3～5d;中转开腹4例,无一例出现大出血及膀胱、输尿管、直肠等器官损伤。结论困难及复杂的全子宫切除术可在腹腔镜下完成,关键在于术者熟练灵活的操作技术及先进的腹腔镜器械设备。

7例羊水栓塞患者临床特点分析及防治措施研究

目的探讨羊水栓塞患者临床特点及防治措施。方法选取2006年11月—2016年12月我院7例羊水栓塞患者,对其临床资料进行回顾性分析。结果本组7例羊水栓塞患者中,有5例经阴道试产中出现典型的紫绀、呼吸困难等症状,其中1例经阴道分娩,胎儿及产妇均死亡,4例改剖宫产后,1例产妇死亡,3例存活,新生儿出现不同程度窒息。另外2例剖宫产术后出现羊水栓塞者,1例产妇死亡,新生儿无窒息。结论羊水栓塞的主要临床特点包括DIC、凝血功能障碍和休克。早期采取积极有效的防治措施可以降低羊水栓塞的死亡率和提高抢救成功率。

应用SELDI-TOF-MS技术筛选卵巢癌淋巴结定向高转移特性细胞株差异表达蛋白

背景与目的:人卵巢浆液性乳头状腺癌细胞株SKOV3及其在裸鼠体内建立的淋巴结定向高转移亚克隆第二代SKOV3-pm2、第三代SKOV3-pm3细胞株,为卵巢癌转移分子机制的研究提供了细胞模型。本研究应用飞行时间质谱技术结合蛋白芯片分析筛选卵巢癌淋巴结定向高转移与非定向转移细胞株之间的蛋白质表达差异。方法:采用动物实验测定SKOV3、SKOV3-pm2和SKOV3-pm3三种细胞株的淋巴结转移率。应用表面增强激光解吸离子化-飞行时间质谱(surface-enhanced laser desorption and ionization-time of flight-mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)技术检测各细胞株提取的胞浆总蛋白和分泌蛋白,每种细胞分别采用CM-10型弱阳离子交换芯片和IMAC-3型固定金属亲和芯片检测。应用Ciphergen Protein Software3.2.0软件和Biomarker Wizard软件对采集3组细胞的蛋白峰进行比较,峰强度相差0.5倍以上者定义为差异蛋白。结果:动物实验显示,细胞株SKOV3及高转移亚克隆SKOV3-pm2、SKOV3-pm3的淋巴结转移率分别为20%、90%和100%,前者与后二者之间的差异有统计学意义(P<0.05)。获得CM-10和IMAC3两种蛋白芯片上SKOV3、SKOV3-pm2、SKOV3-pm3细胞株蛋白质谱图谱,对比发现:质荷比(m/z)为6971、7475、9089、9453、10103、11655的胞浆蛋白及质荷比(m/z)为4746的分泌蛋白在上述三种细胞株中存在不同程度差异表达。结论:应用SELDI-TOF-MS技术结合固定金属亲和芯片和弱阳离子交换芯片,可有效筛选卵巢癌淋巴结定向高转移特性细胞株中的特异性表达蛋白;寻找到的差异蛋白与淋巴结定向高转移潜能密切相关。

胎盘植入的治疗进展

胎盘植入是产科危重的并发症之一，胎盘植入临床上表现为分娩时胎儿娩出后胎盘不能自行剥离或人工剥离亦不能自行取出，导致产妇严重的产时、产后出血、子宫穿孔、继发感染，甚至危及产妇的生命。以往处理多行子宫切除术，但对产妇尤其是年轻的产妇造成生理和心理创伤，难以被产妇及家属接受。近年来，胎盘植入的发生呈明显上升趋势，如何选择最合适的治疗手段挽救产妇的生命，提高产妇的生活质量，成为临床医生普遍关注的问题。本文就胎盘植入治疗方面的进展作一综述。

人淋巴管内皮细胞对卵巢癌淋巴结定向转移细胞分泌蛋白表达的分析

目的:初步探讨人淋巴管内皮细胞(HLEC)对卵巢癌淋巴结定向转移细胞(SKOV3-PM4)分泌蛋白的影响。方法:将细胞体系分为4组(A组:SKOV3;B组:SKOV3+HLEC;C组:SKOV3-PM4;D组:SKOV3-PM4+HLEC),采用抗体芯片和iTRAQ-2D-LC-MALDI-TOF/TOF/MS方法检测各组细胞培养基中的蛋白,筛选出差异明显的分泌蛋白,对其行生物信息学分析,并采用ELISA方法在人血清标本和细胞培养基中进行验证。结果:抗体芯片与质谱分析结果提示,C组与A组相比、D组与C组相比Progranulin(GRN)、VEGFA表达上调,SPARC、IGFBP7表达下调。经过综合生物信息学分析,IGFBP7和VEGFA联系紧密,相互影响。与正常组血清相比,VEGFA在卵巢癌中的表达最高,IGFBP7表达最低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:淋巴结定向转移与淋巴管内皮细胞微环境关系密切,共培养后的差异蛋白涉及到基质细胞蛋白、细胞黏附作用因子等方面。其中VEGFA、GRN的表达上调及SPARC、IGFBP7的表达下调与卵巢癌淋巴结定向高转移密切相关。

胎儿纤维连接蛋白在孕晚期引产中的临床应用价值

目的探讨胎儿纤维连接蛋白(fFN)水平在孕晚期引产中的临床应用价值。方法选取2019年1月~2020年1月我院孕晚期产妇92例为观察对象,检测fFN水平,fFN<50μg/L定义为阴性,fFN≥50μg/L定义为阳性;比较打水囊前后f FN阳性、fFN阴性产妇的宫颈成熟度评分、合并症、引产结局;比较fFN<50μg/L、50~2000μg/L、>2000μg/L的产妇引产结局;分析fFN水平对孕晚期引产结局的预测价值。结果打水囊后产妇阴道分泌物fFN阳性率、阴性率与打水囊前比较差异有统计学意义(P<0.05);打水囊前后fFN阳性、fFN阴性产妇之间宫颈成熟度评分、合并症和打水囊前相比差异无统计学意义(P>0.05),fFN阳性产妇的顺产率较高,剖宫产率较低(P<0.05);打水囊前,阴道分泌物f FN<50μg/L、50~2000μg/L、>2000μg/L的产妇顺产率、剖宫产率差异无统计学意义(P>0.05),打水囊后,随着产妇阴道分泌物fFN水平升高,顺产率升高,剖宫产率下降(P<0.05);与打水囊前比较,打水囊后阴道分泌物fFN水平预测孕晚期引产结局的特异度显著升高(P<0.05),敏感度、阳性预测值、阴性预测值无明显差异(P>0.05)。结论孕晚期引产中,打水囊后产妇阴道分泌物的fFN阳性率升高,阴性率下降,阴道分泌物的fFN水平对引产结局有一定的预测价值。

盐酸利托君联合硫酸镁对未足月早产胎膜早破患者fFN、IGFBP-1及炎性状态的影响

目的研究盐酸利托君联合硫酸镁对未足月早产胎膜早破患者血清胎儿纤维连接蛋白(f FN)、胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP-1)及炎症状态的影响。方法选取广西壮族自治区民族医院2018年10月至2020年6月收治的96例未足月早产胎膜早破患者,按照随机数字分表法分为对照组和观察组,各48例,分别实行硫酸镁治疗(对照组)和硫酸镁联合盐酸利托君治疗(观察组)。对比两组患者治疗后临床疗效;对比两组患者治疗前后血清f FN、IGFBP-1、白介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-y(IFN-y)水平变化。结果观察组患者治疗效果较对照组明显提升;治疗后两组患者血清f FN、IGFBP-1以及IL-2、TNF-α、IFN-y均较治疗前下降,且观察组下降幅度大于对照组(均P<0.05)。结论盐酸利托君联合硫酸镁不仅可提高未足月早产胎膜早破患者临床疗效,还可降低患者分泌物及炎性因子水平有效控制局部炎症反应,有利于患者产后恢复。

胎儿纤维连接蛋白在产科应用中的研究进展

胎儿纤维连接蛋白(fetal fibrinectin,fFN)在妊娠开始至分娩结束,一直处动态变化的过程,这与妊娠不同时期的病理生理变化相关。为了解fF N与病理过程相关性,国内外已进行许多相关方面研究,在此将胎儿纤维蛋白在产科中的应用进行总结,以便更好地认识及了解fF N,以期在以后的临床研究中发现其更好用途及科研方向。