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东北老工业基地振兴与中小企业发展 被引量:2
1
作者 阮铮 何禹霆 《商业研究》 北大核心 2006年第5期152-154,共3页
东北老工业基地的振兴吸引了中国各界人士的眼光,对出现东北现象的原因有诸多解释,东北三省中小企业没有发展壮大是“东北现象”出现的原因之一,中小企业对区域经济没有发挥应有的作用。有鉴于国有大企业与中小企业分工与合作还不成熟,... 东北老工业基地的振兴吸引了中国各界人士的眼光,对出现东北现象的原因有诸多解释,东北三省中小企业没有发展壮大是“东北现象”出现的原因之一,中小企业对区域经济没有发挥应有的作用。有鉴于国有大企业与中小企业分工与合作还不成熟,在产业结构调整和升级过程中要大力发挥中小企业的作用。所以要注意政府在东北老工业基地振兴过程中的作用,用市场调节手段引导中小企业发展。 展开更多
关键词 中小企业 东北老工业基地 振兴
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中小商业银行与关系型融资 被引量:2
2
作者 阮铮 李晖 《沈阳理工大学学报》 CAS 2005年第2期67-70,共4页
关系型融资在中小企业成长阶段中有着重要作用,中小商业银行在向中小企业提供关系型融资时比大银行具有优势.文中通过比较银行的交易型贷款和关系型贷款得出中小商业银行向中小企业提供关系型融资是有边界的,边界的确定取决于两个因素:... 关系型融资在中小企业成长阶段中有着重要作用,中小商业银行在向中小企业提供关系型融资时比大银行具有优势.文中通过比较银行的交易型贷款和关系型贷款得出中小商业银行向中小企业提供关系型融资是有边界的,边界的确定取决于两个因素:一是中小银行提供关系型贷款和交易型贷款所获取的租金的多少;二是借款者的资信质量. 展开更多
关键词 中小银行 关系型融资 市场竞争
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美国中小企业金融支持模式 被引量:2
3
作者 阮铮 《经济师》 2005年第5期99-99,101,共2页
美国中小企业在美国经济中发挥着重要作用是与中小企业发展的金融支持分不开的,然而中小企业自身的特征,目前仍然选择了成本较高的信用卡融资和从企业主借款,证实了美国的信贷市场对于中小企业来说是无效的说法,但是中小企业与中小银行... 美国中小企业在美国经济中发挥着重要作用是与中小企业发展的金融支持分不开的,然而中小企业自身的特征,目前仍然选择了成本较高的信用卡融资和从企业主借款,证实了美国的信贷市场对于中小企业来说是无效的说法,但是中小企业与中小银行间建立起来的关系型融资却有效地降低了中小企业由于信息不透明而造成的交易成本,而政府主要发挥着政策与导向作用,从而构成了独特的金融支持模式。 展开更多
关键词 中小企业 金融支持 模式
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美国中小企业股权融资的需求分析及启示
4
作者 阮铮 《金融理论与教学》 2006年第1期12-14,共3页
从美国全国中小企业金融调查的数据来看,对于大多数中小企业来说,内部的自有资本是最主要的资金来源,而不是外部的资本。大多数中小企业主要依靠内源融资(如业主的出资,业主借款,留存利润)和向金融机构的借款来维持企业运转和成长。中... 从美国全国中小企业金融调查的数据来看,对于大多数中小企业来说,内部的自有资本是最主要的资金来源,而不是外部的资本。大多数中小企业主要依靠内源融资(如业主的出资,业主借款,留存利润)和向金融机构的借款来维持企业运转和成长。中小企业先从内部融资到金融机构融资再到非金融机构融资。另外,内部股权融资和银行贷款被看作是一种相互补充的关系。这对我国国有中小企业的改革和民营中小企业发展过程中通过内外部股权融资提供了有益的启示。 展开更多
关键词 中小企业 股权融资 内源融资
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电力系统扰动后稳态频率预测直接法改进 被引量:15
5
作者 王晓茹 阮铮 刘克天 《电力系统及其自动化学报》 CSCD 北大核心 2010年第4期1-5,共5页
在线预测系统扰动后的稳态频率,有利于扰动后系统频率稳定性评估和紧急控制。文中提出一种新的扰动后系统稳态频率预测算法。根据直角坐标潮流二次方程及其泰勒展开式,推导了节点注入功率增量表达式,结合发电机调速器和负荷静态特性建... 在线预测系统扰动后的稳态频率,有利于扰动后系统频率稳定性评估和紧急控制。文中提出一种新的扰动后系统稳态频率预测算法。根据直角坐标潮流二次方程及其泰勒展开式,推导了节点注入功率增量表达式,结合发电机调速器和负荷静态特性建立了稳态频率预测方程。利用扰动后瞬间系统广域量测数据,直接计算系统扰动后的稳态频率。相比已有的频率稳定分析直接法,该算法预测稳态频率的精度更高。最后,利用PSS/E仿真软件,在WSCC9节点系统上对提出的算法进行仿真试验,验证了所提出算法的正确性。计算结果为系统在扰动后的频率稳定性分析和紧急控制提供了重要依据。 展开更多
关键词 电力系统 频率稳定 广域量测 直角坐标 预测算法
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学生管理系统的研究与设计
6
作者 阮铮 徐双 《信息记录材料》 2023年第2期216-219,共4页
随着智能化办公技术的不断发展,提高教学和办公效率最有效的方法就是拥有属于自己院校独立的学生管理系统。本文结合软件的使用情况以及开发步骤和工作规则进行系统的研究与设计,并分成用户、教师、选课及管理4个模块进行研究和设计,该... 随着智能化办公技术的不断发展,提高教学和办公效率最有效的方法就是拥有属于自己院校独立的学生管理系统。本文结合软件的使用情况以及开发步骤和工作规则进行系统的研究与设计,并分成用户、教师、选课及管理4个模块进行研究和设计,该系统具有高效、方便管理、人性化等诸多特点,通过实现服务端与客户端的数据通信,可方便进行学生及信息管理。 展开更多
关键词 JAVA编程 JSP技术 SQLSERVER数据库 WEB服务器
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鼠抗人c-Kit单克隆抗体的制备及其特性鉴定 被引量:1
7
作者 刘虹辰 毛朝明 +5 位作者 苏晓瑜 阮铮 丁秋兰 王学锋 王鸿利 奚晓东 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期619-622,共4页
目的:鼠抗人c-Kit单克隆抗体(mAb)的研制及其生物学特性的鉴定。方法:利用PCR技术获得人c-Kit的胞外免疫球蛋白区编码序列,并将其亚克隆至原核表达载体pQE30,构建出重组表达质粒pQE30-hKitD4-5。测序鉴定正确后转化M15,经IPTG37℃诱导4h... 目的:鼠抗人c-Kit单克隆抗体(mAb)的研制及其生物学特性的鉴定。方法:利用PCR技术获得人c-Kit的胞外免疫球蛋白区编码序列,并将其亚克隆至原核表达载体pQE30,构建出重组表达质粒pQE30-hKitD4-5。测序鉴定正确后转化M15,经IPTG37℃诱导4h后,SDS-PAGE显示融合蛋白(表达产物)以包涵体形式存在。用镍柱对融合蛋白进行纯化,将纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,经流式细胞术(FCM)分析和多次克隆化培养,筛选出特异分泌鼠抗人c-Kit分子mAb的杂交瘤细胞株。采用Western blot、Ig亚型快速定性试纸法、FCM等对mAb的生物学特性进行鉴定。结果:成功表达及纯化了人c-Kit重组蛋白,并获得1株持续、稳定分泌鼠抗人c-KitmAb的杂交瘤细胞株,命名为SRJ1。ELISA和Western blot、FCM结果显示了该株mAb能够识别Kasumi白血病细胞株表面表达的天然的c-Kit分子,并与人正常外周血细胞无交叉反应。值得注意的是,Kasumi细胞含有一个不被SRJ1识别的亚群,虽然其表达c-Kit(Ab81mAb的结合正常)。结论:成功构建了原核表达载体pQE30-Kit4-5,并获得高纯度的人pQE30-Kit4-5重组蛋白;成功制备了1株特异性的鼠抗人c-KitmAb杂交瘤。其所分泌的抗体能特异地识别人c-Kit分子,并且可能成为区分细胞表面表达不同c-Kit分子的潜在检测工具。 展开更多
关键词 C-KIT 原核重组蛋白 杂交瘤 单克隆抗体 白血病
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一种城轨车辆牵引变流器控制单元的硬件设计 被引量:1
8
作者 阮铮 《中国铁道科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第6期134-140,共7页
为满足城轨车辆部件轻量化、小型化、集成化的要求,通过对城轨车辆牵引变流器的功能进行分析,明确了牵引变流器控制单元应具备系统级和逆变器级控制、通讯、信号处理和故障诊断等功能,从而提出以控制系统模块、数据处理和监控模块、信... 为满足城轨车辆部件轻量化、小型化、集成化的要求,通过对城轨车辆牵引变流器的功能进行分析,明确了牵引变流器控制单元应具备系统级和逆变器级控制、通讯、信号处理和故障诊断等功能,从而提出以控制系统模块、数据处理和监控模块、信号处理模块组成的紧凑型牵引控制单元架构。在硬件设计中,采用微控制单元(MCU)完成系统级控制;采用数字信号处理器(DSP)完成逆变器级控制;采用可编程逻辑器件(FPGA)作为MCU和DSP的协处理器,并负责所有对外部电路的接口;采用开关量处理电路、模拟量采集和处理电路、脉冲输出及反馈处理电路,对牵引变流器的各类型信号进行处理,完成控制系统模块指令的输出和系统状态的采集。通过型式试验和牵引系统地面联调试验,验证了牵引变流器控制单元的性能符合设计要求,适用于集成度较高、空间相对紧张的场合。 展开更多
关键词 城轨车辆 牵引变流器 控制单元 系统结构 模块设计
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Myr-RKEFAK肽选择性调控血小板外向内信号转导相关功能
9
作者 龙章彪 黄建松 +4 位作者 施小凤 杨纪春 阮铮 肖兵 奚晓东 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期761-767,共7页
目的:研究踝蛋白杆部整合素结合位点2与整合素β3相互作用对于血小板信号转导的影响。方法:设计合成模拟整合素β3胞浆近膜端α螺旋上6个氨基酸序列(R724KEFAK729)的寡肽,并通过十四烷酰化修饰以使其具有穿细胞膜性(myr-RKEFAK肽)。观察... 目的:研究踝蛋白杆部整合素结合位点2与整合素β3相互作用对于血小板信号转导的影响。方法:设计合成模拟整合素β3胞浆近膜端α螺旋上6个氨基酸序列(R724KEFAK729)的寡肽,并通过十四烷酰化修饰以使其具有穿细胞膜性(myr-RKEFAK肽)。观察myr-RKEFAK肽对经典血小板外向内信号转导事件(固相纤维蛋白原上的稳定黏附和伸展、二相聚集、纤维蛋白凝块回缩),以及内向外信号转导事件(一相聚集、游离纤维蛋白原的结合)的影响。结果:myr-RKEFAK肽可以浓度依赖性地抑制血小板固相化纤维蛋白原上稳定黏附和伸展、二相聚集以及纤维蛋白凝块回缩等外向内信号转导功能;但不影响游离纤维蛋白原结合和一相聚集等内向外信号转导功能。结论:穿膜肽myr-RKEFAK对血小板的外向内信号转导相应功能产生抑制,但不影响血小板内向外信号转导相关功能。 展开更多
关键词 整合素Β3 踝蛋白杆部 整合素结合位点2 myr-RKEFAK肽 血小板信号转导
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造血干细胞移植建立血小板整合素β3胞内段截短体转基因小鼠模型
10
作者 崔雄鹰 施小凤 +5 位作者 黄建松 刘萍 陶岚岚 周玉兰 阮铮 奚晓东 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期667-673,共7页
本研究通过逆转录病毒感染整合素β3缺陷小鼠(β3-/-)骨髓造血干细胞再进行骨髓移植建立β3及其胞内段不同截短体的转基因小鼠模型,为进一步研究整合素β3胞内段在血小板双向信号转导途径中的作用提供基础。将整合素β3野生型、β3-Δ7... 本研究通过逆转录病毒感染整合素β3缺陷小鼠(β3-/-)骨髓造血干细胞再进行骨髓移植建立β3及其胞内段不同截短体的转基因小鼠模型,为进一步研究整合素β3胞内段在血小板双向信号转导途径中的作用提供基础。将整合素β3野生型、β3-Δ759(缺失R760GT762氨基酸片段)和β3-Δ754(缺失T755NITYRGT762氨基酸片段)的cDNA分别克隆至带有GFP编码基因的MSCV MigR1逆转录病毒载体质粒中,用质粒转染BOSC23包装细胞株包装出带有β3全长及不同突变体的逆转录病毒,再感染β3-/-供体小鼠骨髓细胞,尾静脉注射移植入经致死剂量辐照的野生型C57BL/6小鼠体内,移植后6-8周流式细胞术检测GFP和β3的表达率以评估转基因效率。结果表明,成功建立了空载(Vector)、β3野生型和截短突变β3-Δ759、β3-Δ754等4种小鼠模型,血小板转基因成功的比率(即GFP阳性率)为18%-66%,转基因血小板β3表达可达到β3+/-水平。结论:利用逆转录病毒感染的造血干细胞移植建立血小板转基因小鼠模型是一种高通量快速有效的建立转基因小鼠模型的方法,这为进一步研究整合素β3胞内不同区段对血小板整合素信号转导途径的影响及体内对血小板进行基因操作和基因治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 血小板整合素β3 截短突变 逆转录病毒 转基因小鼠模型 造血干细胞移植
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关于我国央行货币政策目标的博弈模型分析 被引量:2
11
作者 阮铮 《沈阳工业学院学报》 2000年第4期51-56,共6页
采用博弈分析的方法对我国中央银行稳定币值和促进经济增长的双重目标存在内在结构的冲突 ,可能导致央行的信用下降 ,相机决择的货币政策无效做了论证 ,从而提出我国央行最终走向以稳定币值为唯一目标 ,实行单一规则的货币政策的建议 .
关键词 货币政策 相机决择 单一规则 中国 央行 博弈模型
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砷剂对吉非替尼耐药非小细胞肺癌裸鼠皮下肿瘤的作用
12
作者 沈艳 毛建华 +2 位作者 王华枫 阮铮 李祥瑞 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2022年第10期65-73,共9页
旨在研究三氧化二砷对吉非替尼耐药非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株NCI-H1975建立的裸鼠皮下肿瘤模型的作用效果。将NCI-H1975细胞(8×106个/只)注射于裸鼠右腋下,待肿瘤长到100 mm3时,随机将小鼠分为3组,对照组(生理盐水200μL,腹腔注... 旨在研究三氧化二砷对吉非替尼耐药非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株NCI-H1975建立的裸鼠皮下肿瘤模型的作用效果。将NCI-H1975细胞(8×106个/只)注射于裸鼠右腋下,待肿瘤长到100 mm3时,随机将小鼠分为3组,对照组(生理盐水200μL,腹腔注射),砷剂组(三氧化二砷5 mg/kg,腹腔注射)以及吉非替尼组(吉非替尼125 mg/kg,灌胃)。裸鼠接种肿瘤细胞待肉眼可见的肿瘤出现后,每天测量肿瘤的长径和短径,计算肿瘤体积。药物作用18 d时,对小鼠进行整体拍照后进行安乐死,分离肿瘤、肺、脾等脏器,分别进行病理和电镜检测。结果显示:与对照组和吉非替尼组相比,砷剂组小鼠的肿瘤体积、重量及脾脏指数显著(P<0.05)或极显著降低(P<0.0001,P<0.01);肿瘤组织病理观察发现,与对照组和吉非替尼组相比,砷剂组肿瘤内出现明显坏死灶;电镜结果显示,砷剂组肿瘤内部能观察到自噬体;肺部病理结果显示,与对照组和吉非替尼组相比,砷剂组的肺泡壁较薄,仅见少许淋巴细胞浸润。研究表明,在裸鼠体内,砷剂能够抑制吉非替尼耐药NSCLC皮下移植瘤生长,诱导肿瘤发生自噬和坏死,保护肺部结构的完整性。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 三氧化二砷 吉非替尼耐药 裸鼠 皮下移植瘤
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地铁牵引逆变器PWM调制研究与实现
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作者 蒋威 王永翔 +1 位作者 赵雷廷 阮铮 《铁道机车车辆》 2016年第5期121-125,共5页
在研究分析用于牵引传动领域的脉宽调制技术的基础上,针对自主研发地铁牵引逆变器设计了分段调制策略。为使电机控制的采样周期与脉冲产生周期同步且保持恒定,基于设计的调制策略提出了一种具体实现方式,并给出了不同调制模式之间的平... 在研究分析用于牵引传动领域的脉宽调制技术的基础上,针对自主研发地铁牵引逆变器设计了分段调制策略。为使电机控制的采样周期与脉冲产生周期同步且保持恒定,基于设计的调制策略提出了一种具体实现方式,并给出了不同调制模式之间的平滑切换方法和网压波动时切换点的修正方法。试验结果验证了设计调制策略及实现方式的正确性。 展开更多
关键词 地铁 逆变器 脉宽调制 DSP 网压波动
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论我国财政、货币政策的协调配合
14
作者 阮铮 《辽宁经济》 2000年第10期7-8,共2页
关键词 中国 宏观经济政策 财政政策 货币政策
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CHO细胞模型中整合素β3胞浆段尾部NITY基序对αⅡbβ3介导的细胞功能的影响 被引量:1
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作者 杨纪春 施小凤 +4 位作者 黄建松 龙章彪 肖兵 阮铮 奚晓东 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期768-773,共6页
目的:探讨整合素β3胞浆段尾部NITY基序对αⅡbβ3介导的细胞功能的影响。方法:利用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞模型建立共表达人类野生型整合素αⅡb和野生型β3或突变型β3ΔNITY(β3胞浆段缺失NITY基序)稳转的细胞株,通过细胞在固相化纤... 目的:探讨整合素β3胞浆段尾部NITY基序对αⅡbβ3介导的细胞功能的影响。方法:利用中国仓鼠卵巢(CHO)细胞模型建立共表达人类野生型整合素αⅡb和野生型β3或突变型β3ΔNITY(β3胞浆段缺失NITY基序)稳转的细胞株,通过细胞在固相化纤维蛋白原上的黏附及伸展试验检测各稳转细胞株的黏附及伸展功能,通过免疫共沉淀方法检测蛋白相互作用。结果:成功建立了CHO-αⅡbβ3和CHO-αⅡbβ3ΔNITY细胞株,稳定表达野生型整合素αⅡbβ3的CHO细胞具有在固相化纤维蛋白原上的黏附和伸展能力,与CHO-αⅡbβ3细胞株相比,CHO-αⅡbβ3ΔNITY细胞株的黏附能力减弱,但是黏附后的伸展能力无明显改变。免疫共沉淀结果显示,kindlin-2能够结合野生型整合素β3,但与突变型整合素β3结合的量显著减少。结论:整合素β3胞浆段缺失NITY基序引起细胞黏附功能受损,这种缺失突变导致整合素β3与kindlin-2蛋白的结合受到抑制,从而部分抑制了整合素β3的信号转导。 展开更多
关键词 整合素Β3 CHO细胞模型 β3胞浆NITY基序 αⅡbβ3介导的细胞功能
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利用显性阴性模型对整合素αIIbβ3介导的信号转导的初步研究 被引量:1
16
作者 吕媛婧 苏晓瑜 +1 位作者 阮铮 奚晓东 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2009年第4期1026-1031,共6页
本研究目的是明确整合素β3亚单位胞浆段序列在整合素αIIbβ3介导的信号转导中的重要作用,并进一步了解在无αIIb亚单位存在的条件下其对信号转导及特异性的影响程度。运用由IL-2R胞外段和跨膜段(Tac)与整合素β3胞浆段组成的融合蛋白(... 本研究目的是明确整合素β3亚单位胞浆段序列在整合素αIIbβ3介导的信号转导中的重要作用,并进一步了解在无αIIb亚单位存在的条件下其对信号转导及特异性的影响程度。运用由IL-2R胞外段和跨膜段(Tac)与整合素β3胞浆段组成的融合蛋白(Tac/β3),使其在表达GPIbIX、整合素αIIbβ3的CHO细胞株(IbIX/IIbIIIa-CHO细胞株)中稳定表达(即得到IbIX/IIbIIIa-CHO/Tac-762细胞),并进行多项试验,包括在固相纤维蛋白原的伸展、稳定黏附试验、细胞纤维蛋白凝块回缩功能试验以及游离纤维蛋白原结合试验(分别代表了外向内及内向外信号转导事件)。结果表明,在稳定表达有Tac/β3的IbIX/IIbIIIa-CHO/Tac-762细胞中αIIbβ3介导的双向信号转导严重受到抑制。结论:Tac/β3可以在IbIX/IIbIIIa-CHO/Tac-762细胞中发挥显著有效的显性阴性作用,并且证实整合素β3亚单位胞浆段的单独存在即可影响由αIIbβ3介导的双向信号转导。 展开更多
关键词 显性阴性 整合素 αⅡbβ3 信号转导
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提升商业银行财务分析实用性的实践探索 被引量:7
17
作者 胡岗 阮铮 《现代商贸工业》 2007年第7期157-158,共2页
商业银行的财务分析是建立在其会计科目及财务报表体系之上,通过对多种财务分析方法综合运用,可以从财务指标变动中找到银行内部管理的薄弱环节,帮助管理层迅速作出决策,以提高经营管理效率和决策的准确性。
关键词 商业银行 财务分析 银行内部管理
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转轨国家的管制俘获与政治集中
18
作者 李晖 阮铮 《经济师》 2005年第6期86-87,共2页
管制俘获是转轨经济中普遍存在的问题。在这一从中央计划经济向市场经济过渡的特定时期,管制俘获的原因不仅包括同发达国家一样的标准经济学逻辑,还包括在这一特定的时期很多固有的制度特征,特别是政治的集中程度。文章运用经济模型和... 管制俘获是转轨经济中普遍存在的问题。在这一从中央计划经济向市场经济过渡的特定时期,管制俘获的原因不仅包括同发达国家一样的标准经济学逻辑,还包括在这一特定的时期很多固有的制度特征,特别是政治的集中程度。文章运用经济模型和实证的方法研究转轨国家的管制俘获与政治集中度的关联度,得出加强中央政权是避免管制俘获的有效途径的结论。 展开更多
关键词 转轨国家 管制俘获 政治集中
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FDI对我国工业行业发展低碳经济的影响
19
作者 李芳 阮铮 《商业经济》 2011年第11期9-10,共2页
在全球气候变暖的背景下,以低能耗、低污染为基础的"低碳经济"已成为全球热点。当前,我国正向低碳产业结构转型。在利用外资的过程中,既要顺应发展低碳经济的潮流和趋势,还要根据我国的基本国情和国家利益,寻找一条双赢的低... 在全球气候变暖的背景下,以低能耗、低污染为基础的"低碳经济"已成为全球热点。当前,我国正向低碳产业结构转型。在利用外资的过程中,既要顺应发展低碳经济的潮流和趋势,还要根据我国的基本国情和国家利益,寻找一条双赢的低碳发展途径。工业部门作为主要碳排放产业和外资吸收部门,只有采取正确的对策措施,FDI才能够在工业部门发展低碳经济中发挥作用,推动我国向低碳经济转型。 展开更多
关键词 FDI 工业 低碳经济 影响
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腺相关病毒载体血清型8递送的大鼠FVⅢ轻链对不同长度人FVⅢ重链活性的促进作用
20
作者 毛建华 沈艳 +1 位作者 阮铮 奚晓东 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1817-1823,共7页
目的:研究大鼠FVⅢ轻链(rL C)对不同长度人FVⅢ重链(hHC,包括hHC745和hHC1690)活性的影响。方法:将hHC745、hHC1690、人FVⅢ轻链(hLC)和rL C分别克隆至含CB启动子的腺相关病毒血清型8(AAV8)表达载体中,采用HC和LC共表达的双链策略,转染2... 目的:研究大鼠FVⅢ轻链(rL C)对不同长度人FVⅢ重链(hHC,包括hHC745和hHC1690)活性的影响。方法:将hHC745、hHC1690、人FVⅢ轻链(hLC)和rL C分别克隆至含CB启动子的腺相关病毒血清型8(AAV8)表达载体中,采用HC和LC共表达的双链策略,转染293T细胞,收取转染后48 h的细胞培养上清;质粒经尾静脉高压注入血友病A(HA)小鼠,注射后48 h通过眼眶采血收集小鼠的外周血血浆。应用活化部分凝血活酶时间(aPTT)法检测FVⅢ的活性,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测FVⅢ的抗原表达量,计算比活性。结果:在293T细胞中,hHC745和hHC1690与rL C共表达时的FVⅢ活性显著高于与hLC共表达时的活性,分别提高到约4.6倍和2.9倍;ELISA结果表明hHC745和hHC1690与hLC和rL C共表达时的FVⅢ抗原表达无统计学差异;根据aPTT测得的FVⅢ活性与ELISA测得的FVⅢ抗原表达量计算的比活性结果显示,hHC745与rL C共表达时的比活性提高到与hLC共表达时的比活性的约4.1倍,而hHC1690与rL C共表达时的比活性提高到与hLC共表达时的约2.8倍。在高压注射的HA小鼠中,hHC745和hHC1690与rL C共表达时的FVⅢ活性显著高于与hLC共表达时的活性,活性分别提高到约5.1倍和2.1倍;ELISA结果同样显示,hHC745和hHC1690与hLC和rL C共表达时FVⅢ抗原表达无统计学差异;比活性结果表明,hHC745和hHC1690与rL C共表达时的比活性较与hLC共表达时的比活性显著提高,分别提高到约4.2倍和1.8倍;hHC1690与rL C共表达时的FVⅢ活性显著高于hHC745与rL C共表达时的活性。结论:rL C可以显著提高不同长度hF VⅢ重链(hHC745和hHC1690)的活性。 展开更多
关键词 大鼠凝血因子VⅢ轻链 人凝血因子VⅢ重链 血友病A 腺相关病毒载体血清型8 凝血因子VⅢ活性
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