期刊文献+
共找到10篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
广西沼泽型水牛IL-4和IL-5基因的克隆及其序列分析 被引量:3
1
作者 阳玉梅 黄维义 +3 位作者 代华龙 郑小龙 石云良 张为宇 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期768-772,共5页
从刀豆素A(Concanavalin A,ConA)刺激的广西沼泽型成年水牛外周血单个核细胞(Peripheralblood mononuclear cells,PBMCs)中提取总RNA,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法扩增出白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)和白细胞介素-5(IL-5)基... 从刀豆素A(Concanavalin A,ConA)刺激的广西沼泽型成年水牛外周血单个核细胞(Peripheralblood mononuclear cells,PBMCs)中提取总RNA,用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法扩增出白细胞介素-4(Interleukin-4,IL-4)和白细胞介素-5(IL-5)基因,分别克隆到pMD18-T载体上,进行序列分析。结果表明,从培养9 h、17 h的单个核细胞中扩增得到的IL-4基因在核苷酸水平上与GenBank上登录的印度水牛IL-4 cDNA序列同源性为98.8%,与牛、绵羊、猪和马的同源性分别为99.3%、94.1%、84.8%和80.6%;氨基酸水平的同源性分别为96.3%、98.5%、90.4%、78.4%和59.6%。从培养12 h的单个核细胞中扩增得到的IL-5基因在核苷酸水平上与GenBank上登录的牛、绵羊、猪和马IL-5 cDNA序列同源性分别是99.0%、96.5%、89.6%和89.1%;氨基酸水平的同源性分别为97.8%、96.2%、85.9%和86.7%。本研究为进一步了解水牛IL-4和IL-5的结构和水牛免疫学特性奠定了基础。 展开更多
关键词 沼泽型水牛 单个核细胞 IL-4 IL-5 克隆 测序
下载PDF
广西沼泽型水牛白细胞介素-10和干扰素-γ基因的克隆及其序列分析 被引量:2
2
作者 阳玉梅 郑小龙 +3 位作者 黄维义 石云良 代华龙 张为宇 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2007年第12期12-16,共5页
将本地沼泽型成年水牛外周血单核细胞(PBMC)在刀豆素A(ConA)的刺激下体外培养,提取培养的单核细胞总RNA,应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术扩增水牛白细胞介素-10(IL-10)和干扰素-γ(IFN-γ),并克隆到pMD18-T载体上,用EcoRⅠ和Hind... 将本地沼泽型成年水牛外周血单核细胞(PBMC)在刀豆素A(ConA)的刺激下体外培养,提取培养的单核细胞总RNA,应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术扩增水牛白细胞介素-10(IL-10)和干扰素-γ(IFN-γ),并克隆到pMD18-T载体上,用EcoRⅠ和HindⅢ双酶切鉴定筛选阳性克隆,然后进行测序。序列分析结果显示:IL-10开放阅读框(ORF)由536个核苷酸组成,共编码178个氨基酸;在核苷酸水平上与印度水牛、牛、绵羊、猪、马、人和鼠的IL-10基因的同源性为75.9%~99.6%;氨基酸的同源性为74.2%~100%。IFN-γ的ORF由501个核苷酸组成,共编码166个氨基酸;在核苷酸水平上与印度水牛、牛、绵羊、猪、马、人和鼠的IFN-γ基因的同源性为60.7%~99.6%;氨基酸的同源性为40.6%~100%。 展开更多
关键词 沼泽型水牛 单核细胞 IL-10 IFN-Γ 克隆 测序
下载PDF
广西沼泽型水牛IL-18和TNF-α基因的克隆与序列分析 被引量:1
3
作者 阳玉梅 郑小龙 +3 位作者 黄维义 石云良 代华龙 张为宇 《畜牧与兽医》 北大核心 2007年第12期58-60,共3页
从健康沼泽型水牛静脉无菌采血,分离外周血单核细胞(PBMCs),用刀豆素A(ConA)诱导培养3,8和12 h后,提取细胞总RNA,以Oligo(dT)18为引物合成第一链cDNA,根据牛的白细胞介素18(IL-18)和绵羊的肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因序列设计2对特异性... 从健康沼泽型水牛静脉无菌采血,分离外周血单核细胞(PBMCs),用刀豆素A(ConA)诱导培养3,8和12 h后,提取细胞总RNA,以Oligo(dT)18为引物合成第一链cDNA,根据牛的白细胞介素18(IL-18)和绵羊的肿瘤坏死因子α(TNF-α)基因序列设计2对特异性引物,通过PCR方法扩增出水牛IL-18和TNF-α基因,将其克隆到pMD18-T载体,测序后进行序列分析。结果试验中所克隆到的IL-18和TNF-α基因序列的开放阅读框(ORF)分别为602 bp和715 bp,与GenBank所登录的水牛IL-18和TNF-α核苷酸序列同源性为99.1%和99.7%,其推导的氨基酸序列同源性分别是99.0%和98.7%。表明成功从水牛外周血中克隆到了水牛IL-18和TNF-α基因。 展开更多
关键词 沼泽型水牛 IL-18 TNF-Α 基因克隆 序列分析
下载PDF
奶牛附红细胞体感染PCR诊断方法的建立 被引量:8
4
作者 陈明 黄维义 +5 位作者 张为宇 周学光 周春明 韦家周 阳玉梅 张宇 《中国畜牧兽医》 CAS 2005年第4期22-23,共2页
为建立特异、敏感、快速的奶牛附红细胞体感染诊断方法,该研究根据本实验室已测得的奶牛附红细胞体16 S r RNA基因序列,设计1对种特异性引物,建立了奶牛附红细胞体的PCR诊断方法。特异性试验和敏感性试验结果表明,该诊断方法与猪肺炎支... 为建立特异、敏感、快速的奶牛附红细胞体感染诊断方法,该研究根据本实验室已测得的奶牛附红细胞体16 S r RNA基因序列,设计1对种特异性引物,建立了奶牛附红细胞体的PCR诊断方法。特异性试验和敏感性试验结果表明,该诊断方法与猪肺炎支原体、鸡毒支原体、大肠杆菌、肠道沙门氏菌、葡萄球菌、鸡艾美耳球虫、牛双芽巴贝斯虫无交叉反应,能检测的奶牛附红细胞体最低DNA量为0 .15 4 fg,同时能检测出在4℃存放长达3个月的血样。通过临床血样检测,证明该方法可用于本病的早期诊断。 展开更多
关键词 奶牛 附红细胞体 PCR
下载PDF
广西沼泽型水牛γ-干扰素基因的克隆与原核表达 被引量:1
5
作者 张为宇 郑小龙 +2 位作者 阳玉梅 黄维义 石云良 《广西农业生物科学》 CAS CSCD 2007年第3期210-214,共5页
本研究克隆了广西沼泽型水牛γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)基因,并构建了水牛IFN-γ原核表达质粒。从健康沼泽型水牛静脉无菌采血,分离外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),用刀豆素A(Concanavalin A,ConA)... 本研究克隆了广西沼泽型水牛γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)基因,并构建了水牛IFN-γ原核表达质粒。从健康沼泽型水牛静脉无菌采血,分离外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),用刀豆素A(Concanavalin A,ConA)诱导培养13 h后,提取细胞总RNA,用水牛IFN-γ基因特异性引物通过RT-PCR扩增水牛IFN-γ成熟肽编码区cDNA序列,将其克隆到pMD18-T载体中。RT-PCR产物电泳可见约457 bp大小目的片段。经过限制性酶切分析,测序证实克隆得到的基因序列正确。将IFN-γ成熟肽编码区基因片段切下亚克隆到表达载体pET-32a+中,构建成重组表达质粒pET-mIFN-γ。PCR、双酶切电泳和序列测定结果均证实已插入约457 bp的IFN-γ基因片段。经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导,水牛IFN-γ基因在大肠杆菌中获得了高效的表达,融合蛋白的分子量为35 ku,表达量占菌体总蛋白的43.6%。 展开更多
关键词 沼泽型水牛 Γ-干扰素 基因克隆 原核表达
下载PDF
水牛白细胞介素-2基因的克隆及其序列分析 被引量:3
6
作者 陈忠伟 阳玉梅 +4 位作者 黄维义 郑小龙 代华龙 石云良 张为宇 《广西畜牧兽医》 2006年第4期147-149,共3页
根据GeneBank上发表的牛IL-2基因序列,设计一对引物,采用RT-PCR技术,以ConA刺激培养9h、17h的沼泽型水牛外周血淋巴细胞为材料,从总RNA中扩增出水牛IL-2基因。琼脂糖凝胶电泳显示扩增片段约为724bp,分离纯化,克隆到pMD18-T载体。经EcoR... 根据GeneBank上发表的牛IL-2基因序列,设计一对引物,采用RT-PCR技术,以ConA刺激培养9h、17h的沼泽型水牛外周血淋巴细胞为材料,从总RNA中扩增出水牛IL-2基因。琼脂糖凝胶电泳显示扩增片段约为724bp,分离纯化,克隆到pMD18-T载体。经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切鉴定,以及核苷酸测序结果显示,克隆的水牛IL-2基因与GeneBank上发表的序列同源性为99·8%。 展开更多
关键词 沼泽型水牛 淋巴细胞 IL-2 克隆 测序
下载PDF
基于企业信访人心理特征的企业接访策略
7
作者 周瑞 周程扬 阳玉梅 《办公室业务》 2024年第16期39-42,共4页
新时代背景下,信访工作承担了“了解民情、集中民智、维护民利、凝聚民心”的职能。文章基于新时代企业信访人的心理特征,探究信访人信访的原因,并对其可能产生的影响进行分析,尝试对不同目的信访人提供相应的接访策略,为接访人有效接... 新时代背景下,信访工作承担了“了解民情、集中民智、维护民利、凝聚民心”的职能。文章基于新时代企业信访人的心理特征,探究信访人信访的原因,并对其可能产生的影响进行分析,尝试对不同目的信访人提供相应的接访策略,为接访人有效接访提供策略建议,引导信访者通过合理、合法的渠道和程序解决问题,努力减少信访者重复、越级信访等行为。 展开更多
关键词 企业信访人 心理特征 接访策略
下载PDF
高校固定资产管理现状及对策研究 被引量:5
8
作者 谢志明 阳玉梅 《行政事业资产与财务》 2018年第23期10-11,共2页
我国2012年首次实现国家财政性教育经费占国内生产总值4%的目标突破,国家在未来还将加大投入,高校的资产总量逐渐增加,管理过程也将更复杂。然而,目前高校固定资产的结构与管理出现了一些新的问题,本文以分析高校固定资产管理的现状问... 我国2012年首次实现国家财政性教育经费占国内生产总值4%的目标突破,国家在未来还将加大投入,高校的资产总量逐渐增加,管理过程也将更复杂。然而,目前高校固定资产的结构与管理出现了一些新的问题,本文以分析高校固定资产管理的现状问题为切入点,对其所存在问题的原因进行剖析,提出了对未来高校固定资产管理的对策建议,以期为实际工作提供指导。 展开更多
关键词 高校 固定资产管理 现状分析 对策建议
下载PDF
关于生活化策略在小学数学教学中的应用分析 被引量:1
9
作者 阳玉梅 《教育界(综合教育)》 2018年第12期52-53,共2页
数学学科是小学教学阶段的重要课程,教师要想更好地提升小学数学教学效率,就要积极探寻更多的符合小学生发展规律的教学方法,这样才能够有效解决当前小学数学教学中的问题。文章对生活化策略在小学数学教学中的应用进行了有效的分析和... 数学学科是小学教学阶段的重要课程,教师要想更好地提升小学数学教学效率,就要积极探寻更多的符合小学生发展规律的教学方法,这样才能够有效解决当前小学数学教学中的问题。文章对生活化策略在小学数学教学中的应用进行了有效的分析和探究。 展开更多
关键词 小学数学 应用措施 生活化策略
下载PDF
来自怀化市水小学档案工作的报告
10
作者 谌许业 丁桂林 +1 位作者 阳玉梅 李松柏 《档案时空》 北大核心 2003年第12期17-17,共1页
关键词 怀化市 海水小学 档案工作 档案收集 档案展览
下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部