microRNAs调控脓毒症Toll样受体通路研究进展

脓毒症是重症监护病房(ICU)患者死亡的重要原因。近年来,随着现代医学的发展,脓毒症救治成功率有所提高,但总的死亡例数继续增加,研究脓毒症发生机制及救治策略具有重要的临床意义。目前认为,免疫炎性反应紊乱是脓毒症的重要特征,也是脓毒症患者死亡的根本原因;Toll样受体(TLRs)炎性信号通路失调是脓毒症的重要病理生理机制;micro RNAs(mi RNAs)是其中的关键调控分子,mi RNAs对TLR信号通路组成分子的调控,包括对TLRs、TLR信号蛋白、转录因子、细胞因子及TLR信号通路的调控分子等5个水平。本文综述了近年来micro RNAs调控脓毒症Toll样受体通路的研究进展。

脓毒症后认知功能障碍的研究进展

脓毒症(sepsis)是机体对感染反应的失控引发危及生命的全身性疾病,特点是发病率高、病死率高、花费高。尽管有大量的研究证实了有益的治疗策略,但临床的结局并不是十分好,脓毒症的总体病死率并没有得到显著的改善。而脓毒症引起的脏器损伤,尤其是损伤脑部引发的认知功能障碍,在临床中日显突出。脓毒症引起的认知功能障碍,表现为记忆力、注意力、视觉空间能力等的下降和执行困难,使得患者的生活质量下降,社会医疗和患者看护的成本增加,给社会和家庭带来了极大的负担。因此,重视脓毒症引起的认知功能障碍的预防和治疗是有积极意义的。本文综述了脓毒症后认知功能损伤的相关研究,从流行病学、危害、发病机制和救治现状来讨论这一问题,以便能够为读者提供参考。

高氧抑制LPS/ATP诱导的骨髓源性巨噬细胞的焦亡

目的:研究不同浓度的氧气在LPS/ATP诱导的骨髓源性巨噬细胞焦亡中的作用。方法:提取C57BL/6小鼠的骨髓源性巨噬细胞,用1μg/ml脂多糖(LPS)刺激细胞24 h,用5 mM三磷酸腺苷(ATP)刺激细胞4 h,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞培养上清液中IL-1β水平的变化。用5 mM ATP刺激细胞后,给予细胞40%、60%和100%的氧气处理1.5 h,ELISA检测细胞培养上清液中IL-1β水平的变化。结果:1μg/mL LPS和5 mM ATP先后刺激下,骨髓源性巨噬细胞培养上清液中IL-1β的水平明显升高(P<0.001),用caspase-1特异性抑制剂AC-YVAD-CMK刺激骨髓源性巨噬细胞后IL-1β水平明显降低(P<0.001)。5 mM ATP刺激之后给予细胞不同浓度的氧气干预1.5 h后,细胞培养上清液中IL-1β的水平明显下降。结论:高氧抑制LPS/ATP诱导的骨髓源性巨噬细胞的焦亡。

microRNA参与脓毒症免疫调控机制研究进展

脓毒症是重症监护病房(ICU)患者死亡的重要原因之一,因其高患病率、高死亡率、高治疗费用的特点,以及缺乏有效的救治策略,使它成为人类健康的巨大威胁。免疫炎症反应失衡与脓毒症的发生发展密切相关,但其关键调控机制尚不清楚。微小RNA(micro RNA,mi RNA)在固有免疫反应和适应性免疫反应中起着重要作用。mi RNA通过调控炎症信号通路中关键分子的表达,从而影响脓毒症相关炎症因子的表达。因此,mi RNA可能成为在基因转录后水平诊断和治疗脓毒症的新靶点。

重组人脑利钠肽对脓毒症相关性脑病小鼠神经细胞凋亡的治疗作用

目的:探讨重组人脑利钠肽(recombinant human brain natriuretic peptide, rhBNP)对脓毒症小鼠脑病理损伤和认知功能障碍的治疗效应,明确其脑保护作用机制。方法:采用盲肠结扎穿刺法(Cecal ligation and puncture, CLP)建立脓毒症小鼠模型。在CLP手术后6小时皮下注射rhBNP,相同容积的生理盐水被作为对照,连续14天,每日一次。通过旷场实验,评价动物基础运动状态、探索能力和焦虑情绪;采用条件相关恐惧实验,检测动物情景相关记忆能力变化。TUNEL染色检测动物海马CA1区神经细胞凋亡变化;蛋白质免疫印迹法(Western blot, WB)检测动物海马组织TNF-α、Caspase-8和Caspase-3蛋白表达水平变化。结果:在旷场实验中,与Sham+Veh组小鼠相比较,CLP+Veh组小鼠表现出平均运动速度(P<0.0001)、5分钟穿格次数(P<0.0001)和中央区域运动时间明显下降(P<0.0001)。与CLP+Veh组小鼠相比较,CLP+rhBNP组小鼠旷场中平均运动速度(P=0.35)和5分钟穿格次数(P=0.064)无显著变化,中央区域运动时间明显增加(P=0.0005)。在条件相关恐惧测试中,与Sham+Veh组小鼠相比较,CLP+Veh组小鼠表现为僵直时间比例明显减少(P<0.0001)。与CLP+Veh组小鼠相比较,CLP+rhBNP组小鼠表现为僵直时间比例显著增加(P=0.0014)。CLP诱导的脓毒症小鼠表现出海马CA1区神经细胞凋亡。rhBNP治疗可以明显的减轻脑病理变化,并且通过抑制Caspase-3上游信号通路TNF-a-Caspase-8减轻神经细胞凋亡。结论:rhBNP对SAE具有治疗作用,其机制可能与抑制神经细胞凋亡有关。

内毒素耐受研究进展

背景细菌内毒素（endotoxin，ET）或细菌脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）入血是大多临床全身性炎症综合征和感染性休克的首要原因，而ET或LPS耐受却对机体有一定保护作用。但有关ET耐受的机制还不完全清楚。目的综述近年来有关ET耐受的研究进展，为未来有关ET耐受机制的研究提供指导。内容主要从细胞水平、受体水平、信号通路水平、分子水平研究ET耐受机制的进展情况。趋向进一步研究ET耐受中的分子调控机制。

脓毒症相关性脑病诊断及病理生理机制研究进展

背景脓毒症相关性脑病（sepsis-associated encephalopathy，SAE）是脓毒症常见但发病机制不明确的神经系统并发症，其临床表现从轻度的不适感和注意力不集中到重度的昏迷。SAE的发生与脓毒症高病死率和远期并发症密切相关。目的对SAE的诊断、病理生理机制和治疗进行综述。内容阐述与SAE诊断相关的实验室检查、生物学标记物、病理生理机制，如神经递质和氨基酸紊乱，脑灌注和微循环改变，炎性反应和氧化应激损伤以及临床治疗。趋向SAE无特效的治疗方法，仅有原发病治疗和对症支持治疗。应该根据SAE的病理生理机制选择可能控制紊乱通路的药物治疗而不仅仅是控制患者症状。

亚麻醉剂量异氟醚复合60％氧对脓毒症老龄大鼠急性肺损伤的影响

目的 探讨亚麻醉剂量异氟醚复合60％氧对脓毒症老龄大鼠急性肺损伤的影响.方法 雄性SD大鼠90只,12-14月龄,体重500- 800 g,采用随机数字表法分为3组（n=30）：假手术组（Sham组）、脓毒症组（S组）、脓毒症＋氧醚治疗组（S＋I＋O组）.S组和S＋I＋O组采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症模型.S＋I＋O组分别于术后1和6h时吸入0.7％异氟醚和60％氧气混合气1h.每组取18只大鼠,记录术后7d生存情况.术后24 h时每组取6只大鼠,收集支气管肺泡灌洗液（BALF）,采用BCA蛋白定量法测定蛋白浓度;采集股动脉血样,行血气分析,记录PaO2,计算氧合指数.术后24 h时每组处死6只大鼠,取左侧肺组织,HE染色后光镜下观察病理学结果;取右侧肺组织,测定湿重/干重（W/D）比值;右心房取血,采用ELISA法测定血清IL-1β、IL-6、TNF-α、高迁移率族蛋白1（HMGB1）和IL-10的浓度.结果 与Sham组比较,S组和S＋I＋O组生存率降低,血清IL-1β、IL-6 、TNF-α、HMGB1和IL-10的浓度升高,S组肺组织W/D比值和BALF蛋白浓度升高,氧合指数降低（P＜0.05）.与S组比较,S＋I＋O组生存率升高,肺组织W/D比值和BALF蛋白浓度下降,氧合指数升高,血清IL-1 β、IL-6、TNF-α和HMGB1的浓度降低,IL-10浓度升高（P＜0.05）,肺组织病理学损伤减轻.结论 亚麻醉剂量异氟醚复合60％氧可减轻脓毒症老龄大鼠急性肺损伤,其机制可能与抑制全身炎症反应有关.

IFITM3在脓毒症模型及胆碱能抗炎模型中的表达

目的:探讨干扰素诱导的跨膜转运蛋白3(IFITM3)在LPS刺激的RAW264.7细胞系的脓毒症模型中的表达以及胆碱能抗炎模型中的表达。方法:用1μg/mL LPS刺激RAW264.7细胞24、48、72 h后,用Western-Blot法检测各组细胞IFITM3蛋白表达水平。用1μg/mL LPS刺激RAW264.7细胞后,给予50μM胆碱能受体激动剂GTS-21以及同时给予100 n M胆碱能受体拮抗剂α-BGT刺激细胞24 h后,用Western-Blot法检测各组细胞IFITM3蛋白表达水平。用ELISA法检测IL-1β的方法验证脓毒症模型和胆碱能抗炎模型的建立。结果:(1)1μg/mL LPS刺激RAW264.7细胞后,IFITM3蛋白表达明显降低(P<0.01)。(2)1μg/mL LPS刺激RAW264.7细胞后再给予50μM GTS-21,IFITM3蛋白表达明显升高(P<0.001);而给予100 nMα-BGT后,IFITM3蛋白表达明显降低(P<0.001)。结论:LPS刺激的RAW264.7细胞IFITM3蛋白表达降低。给予胆碱能激动剂GTS-21后能够逆转LPS诱导的IFITM3表达的降低,给予胆碱能受体拮抗剂α-BGT则能阻断这种现象。IFITM3有可能在脓毒症中发挥保护作用,并且参与了胆碱能抗炎通路抗炎过程的调节。