着丝粒蛋白U在结直肠癌患者肠组织中的表达情况及临床意义

目的旨在探讨着丝粒蛋白U(centromere protein U,CENPU)在结直肠癌患者肠组织中的表达情况,并结合生物信息学分析其表达水平对结直肠癌患者预后的影响。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR)、蛋白质免疫印迹(Western blot,WB)法以及免疫组织化学染色(immunohistochemistry,IHC)实验验证CENPU在组织中的表达情况。结合患者临床病例资料,通过单因素和多因素Cox回归分析CENPU的表达与结直肠癌患者临床病例参数的相关性;然后通过绘制受试操作者操作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线和Kaplan-Meier生存曲线,探究CENPU的表达对结直肠癌患者预后的预测作用。最后,通过生物信息学分析CENPU的表达对结直肠癌疾病进展影响的可能分子机制。结果通过qRT-PCR、WB法以及IHC实验均发现,与正常组织比较,CENPU在结直肠癌患者癌组织中表达显著升高。Cox回归分析表明CENPU的表达与患者的年龄和TNM分期显著相关,是影响患者预后的危险因素。Kaplan-Meier生存曲线分析表明:CENPU高表达的结直肠癌患者的生存率显著降低。ROC曲线结果表明:基于CENPU的表达建立的模型具有较高的预测结直肠癌患者预后的能力。生物信息学分析结果表明:CENPI、CENPN、CENPD、CENPK、CENPP、CENPM、CENPQ、CENPH、NDC80以及ITGB3BP这10个基因与CENPU基因具有相互作用关系;CENPU参与DNA修复、MYC/TARGETS/V1以及PI3K/AKT/MTOR等信号通路。结论结直肠癌患者癌组织中高表达的CENPU与患者的不良预后显著相关,提示CENPU有望成为结直肠癌患者早期诊断及预测预后的潜在靶点。

PDGF受体β亚单位2个不同切割位点核酶的体外切割效率的比较

目的研究针对大鼠PDGF受体β亚单位基因2个不同切割位点核酶的体外切割活性并加以比较。方法应用计算机对大鼠PDGF受体β亚单位mRNA二级结构进行模拟,设计针对PDGF受体β亚单位mRNA 4 5位CUU和2 5 2位CUU的锤头状(Hammerhead)核酶(Ribozyme)基因RZ1和RZ2 ,定点克隆于自我切割型核酶载体P1 5的5′cis核酶和3′- cis核酶之间;将大鼠PDGF受体β亚单位cDNA6 0 8bp的PCR片段克隆于pGEM T载体T7启动子下游,在T7启动子作用下分别体外转录成RZ1、RZ2和70 6nt的PDGF受体β亚单位mRNA ,比较RZ1和RZ2对70 6nt的PDGF受体β亚单位mRNA的切割活性的差异。结果RZ1在体外有较高的切割活性,而RZ2在体外无切割活性。结论提示在应用核酶技术进行基因治疗时,应选择有效的核酶切割位点,以达到有效的治疗目的。

结缔组织生长因子与转化生长因子β1在肝纤维化组织中的表达

目的:研究结缔组织生长因子与转化生长因子β1在肝纤维化组织中的表达及其相关性。方法:用CCl4皮下注射法制备肝纤维化模型,用免疫组化方法动态检测结缔组织生长因子(CTGF)、转化生长因子β1(TGFβ1)、I、III型胶原在肝纤维化组织中的表达。将免疫组化结果行图像扫描半定量分析后进行统计学分析。结果:正常对照组CTGF不表达,TGFβ1微量表达,I、III型胶原主要分布在门静脉、中央静脉内皮下以及Disse间隙。随着CCl4注射时间的延长,肝纤维化程度的加深,上述4种蛋白质在肝纤维化组织中的表达逐渐增加,且CTGF与TGFβ1之间存在着显著的相关性。结论:结缔组织生长因子与转化生长因子β1相伴表达,且与肝纤维化的发生密切相关,可作为肝纤维化治疗的新靶点。

尿素酶比活性定量分析对HP感染的诊断价值

目的 :建立幽门螺杆菌 (HP)尿素酶比活性定量分析法 ,探讨该法对慢性胃病 HP感染的诊断价值。方法 :将患者胃粘膜处理后分别检测 HP尿素酶活性 ,将定量分析法与定性方法 (粘膜涂片革蓝氏染色 ,1min尿素酶试验 ,PCR法和组织学切片 HE染色法 )进行比较。结果 :HP尿素酶比活性平均值在慢性浅表性胃炎 (CSG)慢性萎缩性胃炎(CAG)、胃溃疡 (GU)、十二指肠球部溃疡 (DU)、胃癌 (GC)组分别为 2 80 .2、389.5、342 .7、832 .0、347.5 (u/ dl) ,患者各组的比活性均明显高于正常对照组 (9.1u/ dl,P<0 .0 0 1)。该法定量检测 HP:(1)敏感性为 94.0 % ,接近于 PCR法和尿素酶法 ,而高于涂片法和组织学法。(2 )特异法为 91.1% ,与尿素酶法、涂片法和组织学法相近 ,略高于 PCR法。结论 :本研究资料提示胃粘膜 HP尿素酶比活性定量分析有助

血小板源生长因子在肝星状细胞内的信号转导机制

肝星状细胞 (HSC)的激活和增殖是肝纤维化的中心环节 ,血小板源生长因子 (PDGF)为重要的促细胞活化、分裂的增殖剂。PDGF与其受体结合后通过RAS 细胞外信号调节激酶 (ERK)途径、磷脂酰肌醇 3 激酶 (PI3 K)途径、钙通道、Na+ H+交换等途径进行细胞内信号转导 ,促进HSC的增殖。

迷迭香的引种栽培和抗氧化试验

食用油脂及其加工食品,在空气中保存会氧化变质,若加入适量的抗氧化剂,便能有效地阻止氧化,延长保存期。目前国内外使用的化学合成抗氧化剂,主要有二丁基羟基甲苯(简称BHT)、丁基羟基茴香醚(BHA)、没食子酸丙脂(PG)和特丁基对苯二酚(TBHQ)等,这些化学物质,对人体肝、肺都有影响,人们对它的毒性问题引起了不安,采取限量或禁止使用。

结缔组织生长因子在肝纤维化组织中的动态表达及其意义

目的观察结缔组织生长因子在实验性肝纤维化组织中的动态表达。方法用四氯化碳(CCl4)皮下注射法制备肝纤维化模型,用免疫组化方法动态检测结缔组织生长因子(CTGF)、α-平滑肌收缩蛋白(α-SMA)、Ⅰ、Ⅲ型胶原在肝纤维化组织中的动态表达,将免疫组化结果行图像扫描半定量分析后进行统计学分析。结果随着CCl4注射时间的延长,肝纤维化程度的加深,上述四种蛋白质在肝纤维化组织中的表达逐渐增加,且CTGF与α-SMA、Ⅰ、Ⅲ型胶原之间存在着显著的相关性。结论结缔组织生长因子与肝纤维化的发生密切相关,CTGF可作为肝纤维化治疗的新靶点。

肝硬化并发症一:门静脉高压性上消化道出血

有关资料显示,我国现有肝硬化患者500万到700万,肝硬化患者病情有轻有重,特别是晚期阶段的肝硬化可以出现诸多严重并发症,直接危及生命。如何做到肝硬化的预防、早期诊断、早期治疗,在这里专家给您提个醒、支个招。

核转录因子-κB拮抗剂PDTC抗大鼠肝纤维化作用研究

目的:研究核转录因子κB(NF-κB)拮抗剂吡咯烷二硫代氨基甲酸铵(PDTC)抗大鼠肝纤维化的作用。方法:SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、阴性治疗对照组和PDTC治疗组。以四氯化碳(CCl4)制备肝纤维化模型,在注射CCl4造模的同时,腹腔注射NF-κB抑制剂PDTC。注射6周末处死大鼠,取肝组织,分别用免疫组化法及RT-PCR法检测NF-κB、TNF-α、Ⅰ、Ⅲ型胶原在4个组中的表达。结果:(1)免疫组化法检测结果:NF-κB主要分布在肝细胞核内,TNF-α位于肝细胞的胞浆,Ⅰ、Ⅲ型胶原位于汇管区和中央静脉周围。4种蛋白表达正常对照组为-或+,模型组和阴性治疗对照组均为强阳性表达(+++),PDTC治疗组多为+,少数++表达,PDTC治疗组与模型组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)RT-PCR检测结果:4种蛋白表达量正常对照组最低,肝纤维化模型组及阴性治疗对照组表达量均明显升高,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。PDTC治疗组表达量较模型组明显下降,两组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:NF-κB拮抗剂PDTC能明显抑制细胞外基质的合成,具有明显的抗肝纤维化作用。

胃粘膜幽门螺杆菌多种方法检测及其比较分析

应用聚合酶链反应(PCR)扩增幽门螺杆菌(HP)特异性的DNA片段,并与组织学、涂片法、尿素酶法同步分析和比较.结果显示HP的PCR扩增产物经琼脂凝胶电泳,均为468bp的单一区带,与原设计一致;与组织学、涂片法和尿素酶法的同步检测,发现PCR法的敏感性为94.4%,明显高于组织学60.9%、涂片法77.8%和尿素酶法86.6%.提示PCR法能快速、敏感、特异地检测临床标本中的HP,对探讨HP与上消化道疾病之间的关系、指导抗菌治疗均具有重要意义.

胰腺癌患者预后的影响因素分析及其对生存结局的预测价值

目的探讨胰腺癌患者预后的影响因素,并分析其对生存结局的预测价值。方法选择胰腺癌患者200例,收集入院时一般临床因素(性别、年龄、BMI)、肿瘤相关因素(肿瘤部位、c TNM分期、转移情况)及血液指标因素[CEA、CA199、中性粒细胞百分比(NEU)、外周血粒淋比(NLR)、预后营养指数(PNI)、血小板与淋巴细胞比值(PLR)、AST、ALT、总胆红素(TBil)、血清白蛋白(Alb)]及入院后治疗方式。随访3年,比较各因素下患者生存期(OS)。采用Cox比例风险回归模型分析胰腺癌患者预后的影响因素,并评估其对生存结局的预测价值。结果单因素分析显示,年龄、肿瘤部位、c TNM分期、肝转移、淋巴结转移、CEA、CA199、NLR可能与胰腺癌患者预后有关(P均<0.05);Cox比例风险回归模型分析显示,CA199、NLR、肝转移、c TNM分期、入院后治疗方式是胰腺癌患者的独立预后因素(P均<0.05)。c TNM分期、NLR、肝转移及CA199预测胰腺癌患者生存结局的ROC曲线下面积分别为0.808、0.717、0.588、0.531。结论 c TNM分期、NLR、CA199、肝转移及入院后治疗方式是胰腺癌患者预后的独立影响因素;c TNM分期、NLR对预测胰腺癌患者生存结局有较好价值。

EHD2与E-cadher in在肝细胞肝癌中的表达及其相关性

目的:研究EHD2、E-cadherin蛋白在肝细胞肝癌中的表达及两者相关性。方法:Western blot法和免疫组织化学法检测肝细胞肝癌及对应的癌旁组织中EHD2与E-cadherin表达情况,分析两者的相关性及与患者临床病理学参数及预后的关系。结果:EHD2、E-cadherin蛋白在肝癌组织中的表达明显低于癌旁组织,且两者的表达水平与肝癌的组织分化程度、静脉侵袭及淋巴结转移密切相关(P<0.05),与年龄、性别、肿瘤大小等参数无相关性。EHD2、E-cadherin低表达与肝癌患者的不良预后显著相关(P<0.05)。结论:EHD2、E-cadherin蛋白表达与肝细胞肝癌的发生发展有关,两者的联合检测有助于肝细胞肝癌的诊断、恶性程度及预后的评估。

慢性肝炎、肝硬变及原发性肝癌患者血清MMP-13及TNF-α的表达

目的研究基质金属蛋白酶-13(MMP-13)在慢性肝炎、肝硬变及原发性肝癌患者血清中的表达水平,同时检测患者血清中的肿瘤坏死因子α(TNF-α),以了解其与MMP-13之间的关系。方法采用双抗体夹芯酶联免疫吸附法对13例慢性肝炎(慢性肝炎组)、28例肝硬变失代偿(肝硬变组)及22例肝功能失代偿的原发性肝癌(原发性肝癌组)进行MMP-13、TNF-α检测,并分别与20例健康对照组进行比较。结果肝硬变及原发性肝癌组的血清MMP-13与TNF-α比对照组及慢性肝炎组均显著增高(P<0.01)。血清中TNF-α水平与MMP-13水平在原发性肝癌患者中呈显著相关性(P<0.01),而慢性肝炎及肝硬变患者的TNF-α与MMP-13水平无明显相关性。结论MMP-13在肝纤维化形成过程及肝癌细胞的浸润和转移可能起着一定的作用。TNF-α对MMP-13表达在慢性肝炎与肝硬变患者中影响甚小,而在原发性肝癌,TNF-α可能对MMP-13的表达具有调节作用。

血清CA125检测在腹水性质分析中的诊断价值

目的探讨血清CA125检测在腹水性质分析中的诊断价值。方法对14例结核性腹膜炎、10例自发性细菌性腹膜炎、29例肝硬化腹水和44例腹膜转移癌患者血清CA125进行检测,并对59例不伴有腹水的腹腔脏器恶性肿瘤患者和20例健康人进行对照。结果腹水患者血清CA125明显高于正常对照组(P<0·01);不同性质腹水患者之间血清CA125无明显差异(P>0·05);不伴有腹水的腹腔脏器恶性肿瘤(包括卵巢癌)患者血清CA125与正常对照组无明显差异(P>0·05);卵巢癌伴腹膜转移者血清CA125高于其他腹膜转移癌(P<0·05)。结论血清CA125检测,对腹水性质无鉴别诊断价值。血清CA125不是卵巢癌特异性标志物,但可作为卵巢癌腹膜转移的标志。

瘦素在肝纤维化组织中的表达及其与肝星状细胞活化的关系

目的:探讨瘦素(leptin)在肝纤维化组织中的表达及其与肝纤维化过程中转化生长因子(TGF-β1)以及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的相关性,了解leptin与肝星状细胞(HSC)活化的关系.方法:健康♂SD大鼠40只,随机分成正常对照组和CCl4诱导的肝纤维化模型组.于造模2、4、6wk末分批处死动物,分别采用RT-PCR和Westernblot、免疫组织化学方法联合检测leptin、TGF-β1及α-SMA在肝纤维化组织中的表达.结果:正常对照组肝脏组织中leptin、TGF-β1、α-SMA均有微量表达;CCl4注射2wk后,leptin、TGF-β1、α-SMA表达开始增强,2、4、6wk肝组织中的表达强度呈明显递增趋势(P<0.05).leptin与TGF-β1和α-SMA表达均呈显著相关性(r=0.668,0.570,均P<0.05).结论:leptin的阳性表达随着肝纤维化程度的加重而增强.在肝纤维化过程中leptin可能参与了HSC活化、增殖以及ECM的合成.

HS-AFP对原发性肝癌病情及手术预后判断的价值

目的探讨肝癌根治性切除术前后检测肝癌特异性甲胎蛋白（HS-AFP）对原发性肝癌（肝癌）患者病情及预后判断的临床价值。方法采用聚丙烯酰胺凝胶电泳方法（PAGE）结合蛋白印迹技术（Western blot）分离检测，对40例肝癌患者手术切除前后的血清HS-AFP进行动态观察，并与肿瘤大小、肿瘤分期、病理分级、预后及生存期进行对比分析。结果在肿瘤≥5cm组、临床分期Ⅱa＋b期组、病理分级Ⅱ～Ⅲ级各组中术前HS-AFP阳性率均明显高于肿瘤〈5cm组、临床工期组、病理Ⅰ级各组（P〈0．05）。术后发生复发转移者在HS-AFP阳性组为90．9%，而阴性组为20．7％（P〈0．01）。单因素及多因素分析均显示术后HS-AFP与患者预后有关（P〈0．01）。结论HS-AFP有助于术前肝癌的病情判断，对肝癌术后预后判断具有重要价值。

老年人上消化道出血85例临床分析

老年人上消化道出血是临床常见急症之一,其病情危重,病死率高。为探讨老年人上消化道出血的特点,现将我院1990～1995年间诊治的60岁以上的上消化道出血85例,与同期住院的60岁以下的非老年同类患者28例作对照,将结果报告如下。