清肺通络方调控Caspase-1对肺炎支原体诱导人正常肺上皮细胞BEAS-2B焦亡的干预作用

【目的】探讨清肺通络方(桑白皮、地骨皮等)对肺炎支原体(MP)诱导人正常肺上皮细胞BEAS-2B由半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)/消皮素D(GSDMD)通路介导的细胞焦亡的干预作用。【方法】建立MP感染的BEAS-2B细胞模型,分别给予清肺通络方、Caspase-1抑制剂干预。制备过表达Caspase-1质粒,转染MP感染的BEAS-2B细胞,给予清肺通络方干预。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞增殖活性,Western Blot法检测细胞焦亡关键蛋白pro-Caspase-1、Caspase-1、消皮素D(GSDMD)、消皮素D-N端片段(GSDMD-N)的表达水平,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测细胞因子白细胞介素(IL)-1β和IL-18水平,生化法检测乳酸脱氢酶(LDH)和Na+-K+-ATP酶活性,流式细胞术检测细胞焦亡。【结果】MP感染BEAS-2B细胞增殖活性明显降低,细胞焦亡关键蛋白pro-Caspase-1、Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N表达水平均明显升高,下游细胞因子IL-1β和IL-18水平也显著升高,LDH活性明显升高,Na+-K+-ATP酶活性明显下降,细胞焦亡率显著上升。应用清肺通络方、Caspase-1抑制剂干预MP感染BEAS-2B细胞,及应用清肺通络方干预过表达Caspase-1质粒转染的MP感染BEAS-2B细胞后,细胞增殖活性均升高,细胞焦亡关键蛋白pro-Caspase-1、Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N表达水平降低,下游细胞因子IL-1β和IL-18水平均显著降低,LDH活性明显降低、Na+-K+-ATP酶活性明显上升,细胞焦亡率明显下降。【结论】MP感染BEAS-2B细胞后,激活Caspase-1/GSDMD通路,促进炎症因子释放,使细胞结构受损,最终导致细胞焦亡。清肺通络方可以抑制Caspase-1/GSDMD通路的激活,减轻炎症反应,减轻细胞损伤,抑制细胞焦亡。

清肺通络方通过胱天蛋白酶-1/Gasdermin D蛋白细胞焦亡途径对支原体肺炎小鼠的干预机制

目的:探讨清肺通络方通过胱天蛋白酶-1(Caspase-1)/Gasdermin D(GSDMD)蛋白细胞焦亡途径对支原体肺炎小鼠干预机制。方法:将30只BALB/c小鼠随机分为空白对照组、模型组、清肺通络方组,每组10只。采用肺炎支原体菌株滴鼻法建立支原体肺炎小鼠模型。造模同时予灌胃治疗,连续治疗3 d,实验第4天处死各组小鼠。PCR检测小鼠肺组织MP-DNA含量,HE染色观察小鼠肺组织病理改变,Western blot检测胱天蛋白酶-1前体(pro-Caspase-1)、Caspase-1、GSDMD、Gasdermin D氮端活性结构域多肽(GSDMD-N)表达,ELISA检测肺泡灌洗液中白介素-1β(IL-1β)、白介素-18(IL-18)含量,生化法检测肺组织细胞乳酸脱氢酶(LDH)和Na+-K+-ATP酶活性。结果:镜下观察模型组小鼠肺间质出现炎性细胞浸润、渗出明显。与空白对照组比较,模型组小鼠pro-Caspase-1、Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N表达及IL-1β、IL-18含量均升高,LDH活性上升,Na+-K+-ATP酶活性下降(均P<0.05);与模型组比较,清肺通络方组小鼠肺间质炎症细胞浸润明显减轻,肺组织中Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N表达及IL-1β、IL-18含量均降低(均P<0.05),LDH活性下降,Na+-K+-ATP酶活性上升(均P<0.05);两组pro-Caspase-1表达比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:清肺通络方通过抑制Caspase-1/GSDMD通路,缓解细胞焦亡,减轻小鼠肺组织炎症反应。

PC-QoL问卷评价中药联合耳穴治疗对1~6岁慢性咳嗽患儿生活质量的影响

目的应用父母代理咳嗽特异性生活质量问卷(PC-QoL)评价中药联合耳穴贴压对1~6岁慢性咳嗽患儿生活质量的影响。方法纳入2017年8月—2018年9月在上海中医药大学附属龙华医院、上海市奉贤区中医医院、上海市嘉定区中医医院、上海市第七人民医院、上海市浦东新区中医医院儿科门诊就诊的1~6岁慢性咳嗽患儿226例,随机分为单纯中药组和中药+耳穴组,每组113例。单纯中药组给予小儿久咳方加减治疗2周,痰湿恋肺证(湿咳)加半夏3 g、陈皮3 g、胆南星3 g;风邪伤肺证(干咳)加僵蚕5 g、射干3 g、木蝴蝶1.5 g。中药+耳穴组中药治疗同单纯中药组,同时给予耳穴贴压2周(选择肺、气管、神门穴,湿咳加脾穴,干咳加肝穴,单侧贴压,每周换药1次,贴压对侧耳穴)。制定PC-QoL问卷,并进行信度和效度检测;采用PC-QoL问卷评价治疗前后患儿生活质量。结果PC-QoL问卷的各项评分Cranbach’sα均>0.8,KMO均>0.8,有较好的信度和效度。不同病因患儿生理、心理、社会评分及总分比较差异均有统计学意义(P均<0.05),抽动症咳嗽、咳嗽变异性哮喘、上气道咳嗽综合征、过敏性咳嗽、感染后咳嗽患儿生活质量依次递增。湿咳和干咳患儿生理、心理、社会评分及总分比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。2组患儿治疗后生理、心理、社会评分及总分均明显增高(P均<0.05),且中药+耳穴组生理、心理评分及总分均明显高于单纯中药组(P均<0.05)。结论中药联合耳穴贴压治疗可明显改善1~6岁慢性咳嗽患儿的生活质量,PC-QoL问卷可作为评价1~6岁慢性咳嗽患儿生活质量的有效工具。

小儿湿咳方联合穴位敷贴治疗儿童慢性湿性咳嗽临床研究

【目的】观察小儿湿咳方联合穴位敷贴治疗儿童慢性湿性咳嗽的临床疗效。【方法】将120例1~14岁慢性湿性咳嗽患儿随机分为观察组(中药+敷贴组)和对照组(中药组),每组各60例。对照组给予中药小儿湿咳方内服治疗,观察组给予中药小儿湿咳方联合穴位贴敷治疗,疗程为2周。观察2组患儿治疗前后咳嗽症状评分、咳嗽视觉模拟量表(VAS)评分和中医证候评分的变化情况,并评价2组患儿的临床疗效。【结果】(1)治疗2周后,观察组的总有效率为93.3%(56/60),对照组为78.3%(47/60),观察组的临床疗效明显优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)治疗1周和2周后,2组患儿的咳嗽症状评分和VAS评分均较治疗前明显降低(P<0.001),且随治疗时间的延长,观察组的咳嗽症状评分和VAS评分的下降幅度均明显大于对照组,差异均有统计学意义(P<0.001)。(3)治疗2周后,观察组在改善流涕、喉中有痰、食欲等中医证候方面的疗效优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。【结论】中药小儿湿咳方联合穴位敷贴治疗儿童慢性湿性咳嗽具有较好的临床疗效,其疗效优于单纯中药治疗。

探析“互联网+”在中职教材中的应用

随着“互联网+”的发展,中等职业教育中教材的出版形式也在发生变化。传统的中职教材出版方式已经无法满足现在的职业教育学习,职业教育需要的不只是“纸书”,更需要“纸书”背后所包含的各种资源。本文在分析现今中职教材现状的基础上,研究讨论了如何利用“互联网+”中的一些技术方法,更好地改进中职教材的内容,辅助职业教育发展。

小儿干咳方联合耳穴贴压治疗儿童慢性咳嗽风邪伤肺证疗效观察

目的:观察小儿干咳方联合耳穴贴压治疗儿童慢性咳嗽风邪伤肺证的临床疗效。方法:招募选取门诊符合诊断标准的慢性咳嗽风邪伤肺证患儿136例,随机分为中药组和中药+耳穴组,每组68例。中药组口服小儿干咳方,中药+耳穴组为中药内服联合耳穴贴压,均治疗14d,评价两组治疗前后咳嗽症状积分及中医证候积分。结果:中药+耳穴组总有效率97.1%(66/68),显著高于中药组82.4%(56/68)(P<0.05);中药+耳穴组咳嗽症状积分、咳嗽视觉模拟评分显著低于中药组(P<0.05);中药+耳穴组在改善鼻塞、流涕、出汗、睡眠、食欲、大便方面,疗效优于中药组(P<0.05)。结论:小儿干咳方联合耳穴贴压治疗儿童慢性咳嗽风邪伤肺证具有较好的临床疗效,值得临床推广应用。