基于解痉多肽表达化生病证结合的小鼠模型探讨胃癌前病变脾胃虚实证候的本质

目的为了构建病证结合的小鼠模型及进行胃癌前病变(gastric precancerous lesions,GPL)脾胃虚实证候的本质研究。方法采用他莫昔芬(tamoxifen,TMXFR)诱导构建解痉多肽表达化生(spasmolytic peptide expression metagenesis,SPEM)小鼠模型,并在SPEM模型基础上分别模拟构建脾胃湿热证、脾气虚证模型,结合TMXFR诱导的SPEM模型具有自恢复的特性,以TMXFR组及生理盐水处理组作为对照组,监测小鼠一般情况,HE染色检测SPEM模型的构建及恢复情况,ELISA检测小鼠血清胃泌素水平,PCR检测各组小鼠胃黏膜中miR-7a-5p含量,免疫组化检测各组小鼠胃黏膜中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-13(interleukin-13,IL-13)表达。结果病证结合的脾胃湿热证、脾气虚证组较TMXFR组、SPEM组织恢复明显延迟;脾胃湿热证较对照组及TMXFR组的胃泌素表达异常升高(P<0.05),SPEM模型组小鼠胃黏膜中miR-7a-5p较对照组水平降低(P<0.05),病证结合的脾胃虚实组miR-7a-5p表达较TMXFR有下降趋势;病证结合的脾胃虚实组IL-1β表达较TMXFR组、对照组升高(P<0.05),脾胃湿热证、脾气虚证组中IL-13表达有升高趋。结论此项研究结果侧面证实了在癌前病灶已形成的前提下,虽无幽门螺杆菌感染,在外感湿热之邪、进食肥甘厚腻、饥饱失常、过劳伤脾等诱因下,机体可突破自身代偿修复能力,延缓SPEM恢复甚至使GPL进一步进展。这可能跟miR-7a-5p介导炎症因子IL-1β使得Th1/Th2细胞失衡相关,但具体机制尚待进一步研究。

从细胞侵袭与血管生成角度探究“奇经痰瘀方”对子宫腺肌病的治疗机制

目的:观察奇经痰瘀方对子宫腺肌病模型小鼠疼痛敏感程度、子宫形态的影响,并从细胞侵袭与血管生成角度探索其治疗机制。方法:将10只ICR雌性小鼠与5只ICR雄性小鼠合笼交配,随机选取2只母鼠产下的雌性小鼠为空白组,其余母鼠产下的雌性小鼠为实验组,实验组小鼠采用口服他莫昔芬的方法制作子宫腺肌病模型。造模成功后,实验组小鼠随机分为模型组、米非司酮组(4.55 mg/kg)和中药低、高剂量组(20.566 g/kg、82.264 g/kg),每组10只;空白组取10只小鼠进入研究。各组分别灌胃给予等容量药液或蒸馏水,每日1次,连续给药1个月。末次灌胃结束后24 h,各组小鼠先进行热板试验记录疼痛潜伏期,间隔约1 h后进行醋酸扭体试验记录扭体次数。醋酸扭体试验结束后第2日,处死各组小鼠,取子宫组织进行大体形态观察;取各组小鼠右或左半子宫组织,固定包埋切片染色后于光镜下进行病理形态观察;取各组3只小鼠另一半子宫组织,提取总蛋白,采用蛋白免疫印迹(Westernblot)法检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达。结果:模型组小鼠热板试验疼痛潜伏期明显短于空白组(P<0.01),醋酸扭体试验扭体次数明显多于空白组(P<0.01);中药高剂量组、米非司酮组小鼠疼痛潜伏期明显长于模型组(P<0.01),各治疗组小鼠扭体次数均明显少于模型组(P<0.01);中药高剂量组小鼠疼痛潜伏期明显长于中药低剂量组(P<0.01)。与空白组比较,模型组小鼠子宫体表面血管扭曲增粗,子宫增粗、局部肿胀及结节形成;光镜下可见子宫内膜增厚、腺体增多、子宫内膜与肌层分界不清,腺体植入肌层,并见微小血管形成。各给药组小鼠子宫大体形态病变及子宫组织病理改变均轻于模型组,中药高剂量组病变程度最轻。模型组小鼠子宫组织MMP-9、IL-1β、VEGF蛋白表达均明显高于空白组(P<0.05,P<0.01),TIMP-1蛋白表达明显低于空白组(P<0.01)。中药高剂量组小鼠子宫组织上述指标表达均较模型组明显改善(P<0.05,P<0.01),其中IL-1β蛋白表达明显低于米非司酮组(P<0.05);中药低剂量组小鼠子宫组织VEGF蛋白表达明显低于模型组(P<0.01);米非司酮组小鼠子宫组织MMP-9、VEGF蛋白表达明显低于模型组(P<0.05)。结论:奇经痰瘀方能够降低子宫腺肌病模型小鼠疼痛敏感性,改善子宫病理改变,其可能通过调节相关蛋白分子MMP-9、TIMP-1、IL-1β、VEGF表达水平,影响子宫内膜细胞侵袭性与血管生成,阻碍腺体植入肌层,控制局部炎症反应,缓解疼痛。

SR-AⅡ和CD36的表达水平与AGEs及糖尿病并发症的相关性研究

目的:分析糖尿病患者白细胞中清道夫受体SR-AⅡ和CD36的表达水平与血浆晚期糖基化终产物(AGEs)浓度以及糖尿病并发症之间的相关性。方法:收集具有合并症的糖尿病患者抗凝血78例,用荧光分光光度法测定血浆AGEs浓度。用Trizol法提取白细胞RNA,再以RT-PCR法测定SR-AⅡ和CD36的相对表达水平。结果:在测定的糖尿病各合并症中,SR-AⅡ在糖尿病性肾病中表达水平最高,在脂肪肝患者中最低;CD36在脂肪肝患者中最高,在冠心病患者中最低。在高血压患者中这2种受体的表达水平均比较高,但在白内障患者中2种受体的表达相对较低。血浆AGEs浓度与白细胞中CD36表达水平呈负相关(r=-0.89,P<0.01),但与SR-AⅡ的表达为正相关(r=0.82,P<0.05)。结论:血浆高浓度AGEs刺激白细胞中SR-AⅡ表达增加,糖尿病性肾病和脂肪肝分别与SR-AⅡ、CD36的表达增加有密切关系,部分糖尿病患者CD36的表达较低可能是导致他们血浆AGEs水平过高的原因之一。

从“治未病”防治胃肠息肉

从临床治验出发,传承岭南名老中医劳绍贤教授治疗胃肠息肉经验,总结出脾胃本虚,六淫、饮食、七情等导致胃肠寒热失调,寒凝血瘀而变生息肉之病机特点,故以胃肠一体,"治未病"贯穿始终,从脾论治胃肠息肉。

冬虫夏草代用品研究进展

对凉山虫草、霍克斯虫草、秦巴蛹虫草、新疆虫草、香棒虫草、蔗蛾虫草、蝉花等品种的理化分析，其主要成分氨基酸相似，含量较一致。药理研究表明，上述品种均具有程度不同的补益作用，为解决冬虫夏草代用品，提供了一定的实验依据。

运脾降浊法治岭南老年性湿热便秘思路探讨

结合岭南地区高温、潮湿的气候现象,从"脾主运化"角度探讨老年性湿热便秘之本虚标实的发病特点;并针对老年人本身的病理生理状态,提出其治疗应灵活变通,紧扣运脾降浊之大法,同时应兼清热,并时刻注意顾护阴液,如此有望临床取得良效。

蓝氏贾第虫核纤层蛋白基因的初步研究

贾第虫一度被认为是迄今已知的最原始的真核细胞 ,但近来争议日盛。利用PCR和测序等技术 ,对蓝氏贾第虫 (Giardialamblia)的核纤层蛋白 (lamin)基因进行了研究。结果表明 :蓝氏贾第虫基因组中存在一个编码具有明显lamin特征的基因序列。如该基因序列的 3′ -端具有编码与核内膜亲和的特征性模体 (motif)CaaX的序列 ;具有B型lamin基因所特有的高度保守的 2 7bp片段 ,该片段编码高度保守的位于α螺旋杆状区的 9氨基酸片段等。同时 ,这些序列特征又与多细胞的后生动物存在一定差异。这些事实说明在贾第虫中已经进化产生了典型真核细胞的B型lamin (基因 )或至少是类似B型的lamin (基因 ) ,该生物的进化地位可能并非过去所认为的那么原始。

眼虫Astasia longa类核纤层蛋白基因的初步研究

利用PCR和克隆测序技术 ,对眼虫Astasialonga的核纤层蛋白 (lamin)基因进行了研究。参考多种相对较低等多细胞动物的已知序列 ,设计出扩增lamin基因尾部区的引物 ,扩增获得两个主要片段 :序列Ⅰ(6 5 0bp)和序列Ⅱ (797bp)。测序分析表明 ,序列Ⅱ包含序列Ⅰ ,并具有lamin基因尾部特征 (编码“CaaX”序列的四种密码子 +终止密码子 )

核纤层蛋白及其基因的研究

核纤层是细胞核内极其重要的结构.近年来有关核纤层蛋白及其基因的研究取得了较大进展.文中就国际上有关该领域研究的新进展并结合作者所在实验室近年来的有关研究结果,从核纤层蛋白成分及功能、核纤层蛋白基因及其起源分化等方面进行了较系统的介绍和探讨,并提出了一些值得深入研究的新问题.

益胃消瘀颗粒对慢性萎缩性胃炎血清胃功能的影响

目的 为了评估益胃消瘀颗粒对慢性萎缩性胃炎(CAG)患者血清胃功能的影响。方法 通过设计随机、双盲、阳性药物对照试验,评估益胃消瘀颗粒对CAG患者血清胃功能的影响,包括胃蛋白酶原(PG)Ⅰ、PGⅡ、PGⅠ/PGⅡ值(PGR)及胃泌素-17(G-17)。通过招募72例幽门螺杆菌(Hp)阴性的CAG患者,按照1∶1比例随机进入试验组或对照组,试验组获得益胃消瘀颗粒+胃复春模拟剂,对照组获得胃复春片+益胃消瘀颗粒模拟剂,治疗疗程为24周。治疗前后均用酶联免疫吸附(ELISA)检测患者血清胃功能相关指标。结果 治疗24周后,试验组CAG患者PGⅠ、PGR较治疗前明显升高(P<0.05),对照组G-17水平较治疗前降低(P<0.05)。经治疗后两组对比发现,试验组PGⅠ、PGR水平明显高于对照组(P<0.05),而PGⅡ未见明显差异(P>0.05),试验组CAG患者血清G-17表达水平明显高于对照组。结论 益胃消瘀颗粒可明显改善CAG患者血清胃功能水平。

升带汤对子宫内膜异位症模型大鼠异位内膜的影响

目的:研究《傅青主女科》升带汤对子宫内膜异位症模型大鼠的异位内膜的病理影响。方法:自体移植法制备子宫内膜异位症大鼠模型,随机分为模型组、治疗组。模型组每日给予2mL生理盐水灌胃,中药组每日给予升带汤10mL/kg,连续给药20d。处死大鼠,剥取在位及异位子宫内膜组织,石蜡病理切片,HE染色观察。结果:模型组大鼠在位、异位内膜比较。当大鼠在位内膜处于增生晚期时,其异位内膜组织处于增生早期状态。治疗组大鼠在位、异位内膜比较。大鼠在位子宫内膜处于分泌期时。其异位内膜组织亦处于分泌期,间质部分蜕膜样变。结论:子宫内膜异位症模型大鼠异位与在位内膜组织存在不同步发育现象。升带汤有促使大鼠异位内膜组织蜕膜样变的作用。

纤细眼虫(Euglena gracilis)核纤层蛋白基因的初步研究

目的:探讨在纤细眼虫(Euglenagracilis)中是否存在核纤层蛋白(lamin)基因,为核纤层蛋白基因的起源与进化研究提供线索.方法:以较为低等生物的核纤层蛋白基因cDNA序列为参考,设计引物P0010和P0012,以纤细眼虫总DNA为模板进行PCR,PCR产物回收、测序.由于不能获取完整序列,所以据测序结果又设计了P0013和P0014两条中间引物,组成P0010/P0013和P0014/P0012引物对进行PCR,回收产物测序.结果:P0010/P0012、P0010/P0013和P0014/P0012引物对进行PCR分别获得775、400和395bp的特异性PCR产物,对这3种产物分别测序,最终获得了P0010和P0012之间的全序列,共775bp.结论:在纤细眼虫中存在着核纤层蛋白基因.

超精密机床研究现状与展望

对国内外超精密机床研究现状和进展进行综述,对超精密机床技术发展趋势进行展望,分析我国在超精密机床研究领域存在的主要问题以及与国外的差距,提出我国超精密机床领域基础研究、技术及产业发展策略与对策.

不同治法方药对脂肪肝大鼠肝组织NF-κBp65及Kupffer细胞p38MAPK蛋白表达的影响

【目的】探讨中医不同治法方药对脂肪肝大鼠肝组织核因子-κB(NF-κBp65)及Kupffer细胞p38MAPK蛋白活性的影响。【方法】选用SD大鼠98只,随机分为正常组、模型组、疏肝组(灌服3.2 g.kg-1.d-1剂量的柴胡疏肝散)、健脾组(灌服10.0 g.kg-1.d-1剂量的参苓白术散)、祛湿组(灌服3.5 g.kg-1.d-1剂量的平胃散)、活血组(灌服7.1 g.kg-1.d-1剂量的膈下逐瘀汤)、综合组(灌服11.9 g.kg-1.d-1剂量的自拟方);采用高脂饲料喂养、白酒灌胃法复制大鼠脂肪肝实验动物模型,给药12周后处死动物取肝组织,应用免疫组织化学法检测NF-κBp65在各组中的活性及组织病理学变化。同时每组取3只大鼠分离Kupffer细胞,应用W estern b lot法检测不同组别大鼠Kupffer细胞p38MAPK蛋白的表达及其磷酸化水平的变化。【结果】模型组大鼠肝组织NF-κBp65蛋白表达较正常组显著增加(P<0.05),疏肝组、健脾组NF-κBp65阳性表达最低、肝组织脂肪变最轻,与模型组比较差异有显著性意义(P<0.05),且脂肪肝大鼠肝组织NF-κBp65表达强度与其病理学的改变呈正相关(P<0.01)。模型组大鼠Kupffer细胞p38MAPK蛋白表达和磷酸化p38MAPK蛋白表达较正常组显著增加(P<0.01),各给药组p38MAPK蛋白表达和磷酸化p38MAPK蛋白表达均较模型组显著降低(P<0.01),其中以健脾组、疏肝组下降最为明显。【结论】抑制NF-κBp65和p38MAPK蛋白及磷酸化p38MAPK蛋白表达可能是上述不同治法方药抗脂肪肝作用的机制之一。

疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病大鼠肝细胞PI3K p85α蛋白表达的影响

目的观察疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠肝细胞磷脂酰肌醇-3-激酶p85α(PI3K p85α)表达的影响。方法以高脂饮食12周建立大鼠NAFLD模型后,造模组大鼠再随机分为模型组、疏肝组、健脾组、综合组和自然恢复组等5组。治疗组分别给予相应药物灌胃,其他组给予等量蒸馏水灌胃,模型组继续高脂饮食,其余均予基础饲料喂养。治疗8周后,用3%戊巴比妥腹腔麻醉,腹主动脉取血,全自动生化仪检测血脂及肝功,稳态模型法评价胰岛素抵抗程度,光镜下观察各组肝脏病理改变,免疫组化方法检测肝细胞内PI3K p85α蛋白的表达情况。结果与模型组相比,药物治疗各组及自然恢复组肝脏脂变程度明显减轻,肝功、血脂、胰岛素抵抗均有显著改善(P<0.05或P<0.01),肝细胞内PI3K p85α蛋白的表达明显减少(P<0.05)。与自然恢复组相比,药物治疗各组肝功、血脂、血糖的改善无显著差异,但肝脏脂变程度减轻,胰岛素抵抗指数明显下降(P<0.05),肝细胞内PI3K p85α蛋白的表达显著降低(P<0.05)。结论疏肝健脾方药对高脂饮食诱导的大鼠NAFLD有较好的治疗作用,其机制可能是与其降低肝细胞PI3K p85α的表达有关。

白毛藤提取物对肝癌SMMC-7721细胞增殖及c-myc基因表达的抑制作用

目的观察白毛藤水提液对人肝癌SMMC-7721细胞增殖及c-myc基因mRNA表达水平的影响,探讨中药白毛藤的抗癌作用机制。方法用不同浓度白毛藤水提取物处理肝癌SMMC-7721细胞,观察细胞形态变化,用台盼兰染色并作细胞计数,cck-8试剂盒检测不同药物浓度组的细胞增殖抑制情况。RT-PCR检测c-myc基因mRNA表达水平。结果倒置显微镜下可见给药组细胞数目明显减少,且随药物浓度增加其抑制效果增强。WST-8法显示,在药物浓度为2,4,8,16 mg/ml时,细胞增殖明显受到剂量依赖性抑制,其抑制率分别为24.37%,50.07%,66.14%,83.23%。细胞中c-myc基因mRNA表达水平降低,并与药物浓度呈明显的量效关系。结论白毛藤可显著抑制人肝癌SMMC-7721细胞的增殖,下调c-myc基因mRNA表达,这可能是白毛藤的抗癌作用的部分机制。

姜黄和郁金的药理作用比较实验

常用中药郁金、莪术和姜黄均可化瘀血、消食积、去肿痛而奏行气止痛之功,在国外民间有作滋补强壮剂的应用.作为常用的活血化瘀药,姜黄、莪术和郁金多用于气血瘀滞所致瘕痞块、胸肋刺痛、经闭腹痛等症.现代研究表明,活血化瘀和滋补强壮药均能提高耐缺氧能力,改善心肌缺血.本文从整体水平,对比观察了姜黄素及姜黄和郁金不同提取物的耐缺氧、镇痛及止血等药理作用,并对姜黄的抗炎作用进行了初步观察.

基于“脾胃和”论治慢性唇炎思路

慢性唇炎属中医"唇风"的范畴,其发病原因和机理尚不明确,治疗仍是临床的难题。从中医"脾胃和"理论与西医学"菌群稳态"角度切入,认为消化道菌群失调可能是慢性唇炎发生的主要病理基础之一;初步提出中医治疗本病当以"和"为贵,用药时在滋养与化浊或清热之间平衡,既不可化浊或清热太过伤正,也不可滋养过度;兼顾运脾和胃,切勿过分寒凉以败脾损胃,或滋腻太甚而阻滞脾胃;诊治过程中切忌只见"病"而不见"人"。

血清ACE2水平在冠心病发生发展中的变化

目的:通过检测血清血管紧张素转换酶2(ACE2)水平,分析ACE2与冠心病(CHD)不同病程之间的相关性,探讨其在CHD发生发展中的变化规律。方法:选取非CHD对照组样本85例,CHD样本174例,并按照冠状动脉狭窄严重程度分成轻度(<50%)狭窄组(ls-CHD组)、中度(50%~75%)狭窄组(ms-CHD组)和严重(≥75%)狭窄组(ss-CHD组)。通过ELISA检测所有样本血清中ACE2水平,统计分析CHD不同病程下的ACE2水平,从而探讨血清ACE2水平与CHD发生发展间的关系。结果:ls-CHD、ms-CHD和ss-CHD组血清ACE2水平均高于非CHD组,并且随着冠状动脉狭窄严重程度的加深而上升。男性血清ACE2水平要比女性的高。单一性别内,ls-CHD、ms-CHD和ss-CHD组血清ACE2水平均高于非CHD组,并有显著性差异。回归分析发现性别、糖尿病、CHD与血清ACE2水平相关,并且性别和CHD是血清ACE2水平的独立影响因素。结论:男性血清ACE2水平高于女性;与非CHD患者相比,CHD患者血清ACE2水平升高;在CHD发生发展过程中,血清ACE2水平随CHD病情的恶化而持续升高。

锌氧压浸出立式搅拌磨机的研制及工业应用

分析了锌加压浸出工艺对矿料产品粒度及浓度的特殊要求,对传统球磨磨矿工艺和引进的立式砂磨磨矿工艺进行了分析并指出了不足,开发了先进的锌氧压浸出型专用立式螺旋搅拌磨技术,并介绍了在西部矿业10万t锌氧压浸出冶炼厂的应用及优势。在给矿粒度-75μm占50%、磨矿浓度65%~68%的条件下,最终产品细度可以稳定在-45μm占96%~98%。与某厂进口立式砂磨机进行经济技术指标对比,投资和运行费用仅为立式砂磨机的1/3。