纳豆菌的功能及其应用研究进展

纳豆菌是从纳豆中分离出的一种无病原性的嗜氧型革兰氏阳性菌,也称纳豆芽孢杆菌。它具有耐酸、耐碱、耐高温、耐压等特性且无毒无害,是微生态制剂的理想菌株之一,现已作为绿色饲料添加剂广泛应用于养殖业中。本综述从纳豆芽孢杆菌产生的活性成分,代谢产物的具体功能以及其在动物饲料、食品保鲜和水质净化等方面的应用进行了详细介绍,并对纳豆芽孢杆菌的广阔开发前景进行了展望。

2020年国内部分地区奶牛乳腺炎源大肠杆菌的分子流行病学调查

本研究对来自国内11个地区136份乳腺炎乳样开展了大肠杆菌的生物学特性研究。通过大肠杆菌phoA特异性鉴定引物对乳房炎乳样进行大肠杆菌分离与鉴定,采用K-B法对分离株进行药敏检测。建立3体系三重PCR检测方法,利用大肠杆菌9种毒力基因对分离株进行检测。通过PCR检测chuA、yjaA和TspE4.C2,对分离株进行进化分群鉴定。结果显示:136份乳腺炎乳样中共分离到61株大肠杆菌,阳性率为44.85%。分离株对头孢拉定、氨苄西林、四环素耐药率相对较高,分别为37.70%、32.78%和26.22%。分离株中毒力基因ompA和traT携带率较高(98.36%和75.40%),其次为CNF1(54.09%)、irp2(47.54%)和iucD(32.78%),sitD和chuA携带率较少(14.75%和13.11%),但ST2和hlyA基因均未检出。分群结果显示分离株以A群占(67.21%)和B1群(19.67%)为主,D群(8.19%)和B2群(4.91%)较少。本研究为奶牛乳腺炎源大肠杆菌的防控提供数据参考。

微小隐孢子虫转录共激活因子CpADA2的生物信息学分析及其编码基因的真核表达

本研究旨在对微小隐孢子虫转录共激活因子ADA2的结构和功能进行生物信息学分析,对其编码基因CpADA2进行真核表达。利用在线生物信息学软件对CpADA2进行生物信息学分析,结果显示,CpADA2含有ZnF和SANT结构域,全长673个氨基酸残基,分子质量为76 kDa,属于可溶性蛋白;不含跨膜区和信号肽,但存在多样化的激酶特异性磷酸化位点;二级结构由α螺旋(36.70%)、β折叠(11.74%)和无规卷曲(51.56%)构成;三级结构中SANT结构域呈典型的α螺旋串联重复构象;互作网络模型和功能预测表明,该蛋白具有锌离子结合特性,并可能参与组蛋白乙酰化过程。以微小隐孢子虫cDNA为模板,PCR扩增得到CpADA2基因,成功构建了真核表达质粒p3×FLAG-CMV14-CpADA2,转染至293T细胞后,Western blot分析显示,转染重组质粒的细胞成功表达重组CpADA2蛋白。本研究为后续开展CpADA2的功能研究提供了基础。

分泌表达柔嫩艾美耳球虫EtMIC2重组枯草芽孢杆菌的构建与抗体检测

鸡球虫病是一种严重危害养鸡业生产的流行性肠道寄生原虫病,可造成严重的经济损失。目前,应用抗球虫药是防治球虫病的主要手段,但随着抗药性和环境污染等问题的出现,抗球虫疫苗的研究成为防控球虫病的热点。柔嫩艾美耳球虫是鸡球虫病的主要病原,因此,研究旨在通过芽孢杆菌表达系统,构建能够分泌表达柔嫩艾美耳球虫微线体蛋白2(Eimeria tenella isolate microneme protein 2,EtMIC2)重组枯草芽孢杆菌菌株,为研发新型鸡球虫疫苗奠定基础。首先,采用PCR及质谱分析方法鉴定食用性及饲用性菌株,然后从柔嫩艾美耳球虫基因组中扩增EtMIC2基因,通过无缝克隆技术将其克隆至pBE2-R质粒中,构建重组质粒pBE2-R-EtMIC2,并采用冰浴转化将重组质粒分别整合至两株枯草芽孢杆菌中,最后采用PCR、SDS-PAGE、Western blot进行鉴定。将重组菌株饲喂雏鸡,免疫7 d后初步检测抗体效价。结果表明:EtMIC2基因克隆成功,且成功整合于饲用性枯草芽孢杆菌基因组,目的蛋白正确表达,并分泌至胞外,将重组菌株饲喂给雏鸡后,血液中检测出EtMIC2抗体。研究成功构建了分泌表达柔嫩艾美耳球虫EtMIC2蛋白的重组枯草芽孢杆菌,且重组菌株能刺激动物产生抗体,可用于后续的抗球虫免疫保护性试验。

用RAPD技术进行鸡球虫不同种株的多态性研究

本文以随机引物成对组合的方式 ,对和缓艾美耳球虫 (Eimeria .mitis)、巨型艾美耳球虫 (E .maxima)和柔嫩艾美耳球虫 (E .tenella ) 3个种各 2个单卵囊感染纯株、E .tenella 6个抗药性表型不同的单卵囊感染纯株进行了RAPD分析 ,结果发现 ,RAPD技术能非常有效地用于上述球虫种、株间的鉴别。

鸡球虫田间混合种和柔嫩艾美球虫单一种的抗药性试验

用上海某鸡场分离的球虫田间混合种及从其中分离纯化的 4株柔嫩艾美球虫 (Eimeriatenella)单一种对常用抗球虫药的抗药性进行检测。发现该球虫田间种对氯羟吡啶 (clopidol)、马杜拉霉素 (maduramicin)、莫能菌素 (monensin)、氨丙啉 (amprolium) 4种抗球虫药已产生完全抗药性 ,对氯苯胍 (robenidine)轻度抗药 ,对地克珠利 (diclazuril)无抗药性。 4株柔嫩艾美球虫单一种对氯羟吡啶、马杜拉霉素、莫能菌素。

四项球虫抗药性判定指标的准确性评价

从指标各自的特点、评价结果的一致性、其它指标、试验总体结果和发展趋势五个方面 ,分别对上海地区鸡球虫进行抗药性监测时采用的笼饲试验的 4项判定指标进行了评述 ,认为在当前条件下 ,用抗球虫指数 (ACI)、病变记分减少率 (RL S)、相对卵囊产量 (ROP)、最适抗球虫活性百分率 (POAA ) 4项指标来综合评定球虫抗药性的方法是有效的、可靠的。比较而言 ,ROP、RL S的错判率较高 ,RL S的漏判率较高 ;POAA错、漏判率均较低 ,优于ROP、RL S。而 ACI错、漏判率均最低 。

LDMOS功率器件在T/R组件中工程化应用研究

LDMOS微波功率器件与Si双极器件相比具有输出功率大、效率高、带宽宽等特点,在军用雷达电子系统中的广泛应用也是大势所趋,与其传统应用的区别是射频脉冲工作及饱和区工作。为了实现LDMOS的大规模工程化应用,必须通过调试解决LDMOS在C类或AB类工作条件下的一致性问题,电路设计时带外抑制信号增益,通过减小感应电动势提高器件使用可靠性等设计手段实现该器件的雷达工程应用。

上海地区鸡鸭隐孢子虫病调查及人工感染试验

１９９２～１９９４年对上海地区５个鸡场、２个鸭场分别检查粪样７００份和４５０份，隐孢子虫阳性率鸡为２７％，鸭为５８％；不同日龄和不同季节其感染率存在着明显差异。经观察和测定，隐孢子虫卵囊多呈椭圆形或圆形，囊壁光滑，无微孔和极粒；内有４个月牙形子孢子，呈纵向排列；残体呈圆形且大小不等；其卵囊大小鸡的为５．４８μｍ×４．３４μｍ，鸭的为５．４７μｍ×４．５０μｍ。人工感染试验中，鸡在感染后第３ｄ排出卵囊，第６～１３ｄ达到高峰，第４０ｄ排出停止；鸭在感染后第２ｄ排出卵囊，第８～１２ｄ达到高峰，第２０ｄ排出停止，经鉴定该虫体为贝氏隐孢子虫（Ｃｒｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍｂａｉ－ｌｅｙｉ）。

不同DNA提取方法对隐孢子虫卵囊PCR检测的影响

为了提高隐孢子虫PCR检测的敏感性和效率,采用10种基因组DNA提取方法,对隐孢子虫卵囊DNA进行提取,对提取的DNA进行nested PCR扩增。经过3次重复试验,结果显示,Chelex 100法、FTA试纸法和Wizard DNAClean-Up System试剂盒法敏感性最高,能够稳定地扩增出1×102个卵囊提取的DNA,适合隐孢子虫病分子流行病学调查时大量样品DNA的提取。

0.5%地克珠利可溶性粉剂预防鸡球虫病试验

对 0 .5%地克珠利 (Diclazuril)可溶性粉剂 ,以 0 .2× 1 0 -6、0 .5× 1 0 -6、1 .0× 1 0 -63种浓度饮水预防鸡艾美耳球虫 (Eimeria)混合种人工感染 ,并用地克珠利预混剂 (商品名球佳 )以 1 .0×1 0 -6浓度饲喂作对照 ,结果发现 0 .5%地克珠利可溶性粉剂以 0 .5× 1 0 -6、1 .0× 1 0 -6两种浓度饮水预防鸡球虫病 ,具有良好的效果 ,抗球虫指数均在 1 76 .6以上 ,与地克珠利预混剂以 1 .0× 1 0 -6浓度混饲效果相当 ,证实 0 .5%地克珠利可溶性粉剂是地克珠利又一种高效预防鸡球虫病新剂型。

消毒剂对贝氏隐孢子虫卵囊活力影响的初步研究

隐孢子虫病(Cryptosporidiosis)是寄生在脊椎动物的呼吸道和胃肠道粘膜上皮微绒毛区的单细胞原虫病。严重时可导致畜禽死亡,所以近年来引起了人们的重视。隐孢子虫卵囊的抵抗力很强,很多消毒剂不能将其杀灭。Sundermann曾尝试用9种常用的消毒剂进行杀灭卵囊研究,结果发现对其影响很小或无影响。陈业矫等亦报道隐孢子虫卵囊对碘酊、次氯酸苄可尼、氯化苄可尼、氢氧化钠液具有很强的抵抗力。因而,卵囊的杀灭是防治隐孢子虫病一个不可忽视的大问题。为了寻找有效的消毒剂,作者选择了一些国内新近研制使用的消毒剂,和一些较常用的消毒剂,进行了对贝氏隐孢子虫卵囊活力影响的研究,旨在为商品化养鸡提供有效的消毒方法,保障环境免遭污染和促进养鸡业的发展。

几种检查鸡隐孢子虫病的实验室方法比较研究

作者用改良抗酸染色法,齐-尼氏染色法、金胺-酚染色法、金胺-酚改良抗酸复染法和Sheather’s蔗糖漂浮法、甘油饱和盐水漂浮法进行鸡隐孢子虫粪检比较.发现Sheather’s蔗糖漂浮是一种普查隐孢子虫卵囊的简便有效快速的方法.金胺-酚和复染法也效果较好.

人工感染鸡隐孢子虫病理变化初步研究

4日龄伊莎公鸡经口感染贝氏隐孢子虫卵囊,感染后2、4、6、8、10、12、14、16天剖杀,取法氏囊、气管、小肠进行病理组织学观察。法氏囊感染后2天,粘膜上皮就出现坏死,并有隐孢子虫卵囊附着在上皮细胞表层,滤泡内淋巴组织开始萎缩,数量减少,局部结缔组织增生。PID10～16,粘膜上皮细胞萎缩、坏死、脱落、局部有嗜酸性细胞浸润。气管在PID4时,固有膜与粘膜下层充血,粘膜表层有卵囊附着。至PID16时,粘膜上皮细胞表面仍有大量卵囊,上皮细胞坏死,局部有淋巴细胞浸润。小肠在PID6时,大量的肠绒毛断裂脱落到肠腔内,粘膜上皮表面及肠腔中均发现卵囊。PID8时,上皮细胞间出现一些嗜酸性细胞,上皮细胞部分坏死,直至PID16。

基于正态分布的T/R组件统计分析及概率预计

大批量T/R组件的幅相特性指标数据符合正态分布,为了满足T/R组件一致性,要求主要器件也要满足一定的分布。文中通过分析某项目中大批量T/R组件的数据,得到其指标的概率分布,分析了影响其一致性的关键因素,并给出了其指标的概率预测,从而得到了在满足雷达总体性能基础上实现批量T/R组件生产控制的基本要求。

哺乳类和鸟类动物隐孢子虫交叉感染试验研究

为了明确哺乳类和鸟类宿主隐孢子虫能否交叉感染，分别从鸡、兔、小白鼠、鸭、鹌鹑分离到隐孢子虫进行交叉感染。结果，从鸡分离的隐孢子虫卵囊能感染鸭、鹌鹑、麻雀，而不能感染鸽、大白鼠、小白鼠、兔，从鸭分离的卵囊能感染鸡，从兔、小白鼠分离的卵囊不能感染鸡、鹌鹑，从鹌鹑分离的卵囊不能感染兔、大白鼠、小白鼠和鸡。提示隐孢子虫在宿主纲水平上有宿主特异性。

球虫抗药性检测方法评述

抗药性是药物预防鸡球虫病的主要障碍 ,鸡球虫抗药性的检测方法主要包括笼饲试验法 (鸡体测定法 )、鸡胚试验法、细胞培养法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法、同工酶测定法、PCR测定法等 ,本文对上述各种检测方法及其判定标准进行了综述。