普通病房下呼吸道感染病原菌分布及耐药性研究

目的 了解普通病房下呼吸道感染病原菌谱及耐药性。方法 对 1990～ 1996年间下呼吸道感染住院患者合格痰标本行细菌学培养 ,阳性菌以 K- B法或两倍稀释法行药物敏感测定。结果 6 2 2 8个痰标本中分离细菌2 6 6 0株 ,阳性率为 39.2 9% ,其中以革兰阴性细菌为主 ,占 70 .75 %。铜绿假单胞菌、不动杆菌、肺炎杆菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌居分离菌前 5位 ,分离率分别为 18.0 8%、15 .6 %、11.73%、9.6 6 %、4.96 % ;药敏结果提示铜绿假单胞菌、不动杆菌、黄杆菌、D群非肠球菌出现多重高比例耐药。革兰阴性杆菌对头孢他啶 (头孢噻甲羧肟 )、亚胺培南、氨基糖苷类、喹诺酮类较为敏感。革兰阳性菌则对万古霉素高度敏感。结论 近年下呼吸道感染以革兰阴性杆菌为主 ,出现多重耐药。应根据药敏选择抗生素 。

白细胞介素18基因修饰的树突状细胞的表型分析及其免疫刺激活性

目的:研究IL-18基因修饰后的树突状细胞(DC)的表型和功能的变化.方法:以含IL-18基因的重组腺病毒体外转染小鼠骨髓来源的DC,RLIDS检测IL-18分泌水平,以RT-PCR检测IL-18mRNA表达,以FACS法分析其DC表型变化,采用TdR检测其MLR的变化.结果:IL-18基因修饰的DC有效分泌IL-18,可检测到IL-18mnRNA的表达,分泌上清具有诱导T细胞产生IFN-γ的作用,IL-18基因修饰的DC同种异体MLR明显增强,且仅能被IL-18抗体部分阻断,表型分析表明,IL-18基因修饰后的Ia,B7.2,ICAM-1太阳性的DC的比例明显增加.结论:IL-18基因修饰的DC可有效表达有功能的IL-18,部分表面分子表达上调,刺激同种异体T淋巴细胞增殖能力的提高,提示其抗原提星功能增强.

肺癌患者伴下呼吸道感染时细菌学与临床研究

目的 :探索肺癌伴下呼吸道感染时病原学及其意义。 方法 :研究 1985～ 1998年间肺癌伴下呼吸道感染患者细菌学特征和临床特征。结果 :(1) 2 92 8例肺癌患者伴发感染 12 11例 (4 1.36 % ) ,大细胞肺癌 (5 1.71% )和小细胞肺癌 (4 8.81% )感染发生率高于腺癌 (38.93% )和鳞癌感染 (35 .2 7% ) (P<0 .0 1) ;早期肺癌感染发生率 ( 期 8.38% , 期 18.30 % )明显低于晚期肺癌 ( 期 44 .72 % , 期 49.92 % ) (P<0 .0 1)。(2 )分离细菌 880株 ,革兰阴性细菌占 70 .91% ,绿脓杆菌、不动杆菌、肺炎杆菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌居前 5位。(3)药敏试验提示 ,绿脓杆菌、不动杆菌、黄杆菌、D群非肠球菌等出现高比例、多重耐药。革兰阴性菌对头孢噻甲羧肟、依米配能、氨基糖甙类、喹喏酮类较为敏感。革兰阳性菌则对万古霉素高度敏感。 结论 :肺癌伴下呼吸道感染与肺癌的组织类型、临床分期密切相关 ,病原以革兰阴性杆菌为主 ,且存在多重耐药 ;治疗时应根据药敏试验结果选择药物 ,同时加强综合治疗。

白介素12基因修饰的树突细胞疫苗治疗自发性转移性肺癌

背景与目的:对转移性肺癌的治疗已进行了大量研究,但仍缺乏有效的治疗方法。本研究目的是探讨白介素12(IL-12)基因修饰的树突细胞(DC)疫苗对自发性转移性肺癌的治疗作用。方法:小鼠足垫注射3LLLewis肺癌细胞,建立自发性转移性肺癌模型,经IL-12基因修饰、3LL特异抗原多肽Mut1体外致敏DC疫苗(DC-IL-12/Mut1)皮下免疫2次,观察荷瘤鼠肺重量、肺表面转移结节数量、存活期及相应免疫指标的变化,组间差异行t检验,生存期行时序检验。结果:与对照组(DC-LacZ/Mut1)相比,DC-IL-12/Mut1组肺重量轻、肺表面转移结节数量少、存活期长(P<0.01),细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性和NK活性增强(P<0.01)。结论:IL-12基因修饰的DC疫苗对自发性转移性肺癌有明显的治疗作用,其可能机理是诱导特异性CTL和增强NK活性。

IL-18基因修饰增强肿瘤抗原多肽致敏的树突状细胞体内诱导的抗肿瘤免疫反应

目的 :研究肿瘤抗原多肽致敏的白细胞介素 18(IL 18)基因修饰的树突状细胞体内诱导的抗肿瘤免疫反应。方法 :①以Lewis 3LL肺癌细胞特异性抗原肽mut1冲击致敏IL 18基因修饰的骨髓来源的树突状细胞 (DC IL 18 mut1) ,每次用其 1× 10 5 只皮下免疫小鼠 2次 ,然后测定脾细胞的NK活性及CTL杀伤活性 ;②以DC IL 18 mut1每次 2× 10 5 只皮下免疫 1次 ,然后再以 5× 10 53LL细胞攻击 ,在诱导及效应阶段分别以单抗阻断不同免疫成份 ,观察肿瘤的生长。结果 :以DC IL 18 mut1皮下免疫后可诱导出比DC mut1等免疫组更高水平的 3LL肺癌细胞特异性CTL ,并使NK活性明显增加 ;单抗体内阻断实验提示在DC IL 18 mut1免疫诱导阶段 ,CD4 + T细胞和抗原共刺激分子、IFN γ均起到重要作用 ,而效应阶段CD8+ T、IFN γ、NK起作用 ,而CD4 + T则是非必需的。结论 :DC IL 18 mut1皮下免疫后可诱导高水平的抗肿瘤免疫活性 ,其机理与抗原有效提呈、特异性CTL诱导、NK活性增加以及CD4 + 、CD8+ T、NK细胞、IFN γ参与密切相关。

院内下呼吸道感染病原菌分布及耐药性研究

目的 了解普通病房下呼吸道感染病原菌谱及耐药性。方法 对１９９０ ～１９９６ 年间下呼吸道感染住院患者合格痰标本行细菌学培养，阳性菌以ＫＢ 法或２ 倍稀释法行药物敏感测定。结果 ①６ ２２８ 个痰标本中分离细菌２ ６６０ 株，阳性率为３９ ．２９ ％ ，其中以革兰阴性细菌为主，占７０ ．７５ ％ 。绿脓杆菌、不动杆菌、肺炎杆菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌居分离菌前５ 位，分离率分别为１８ ．０８ ％ 、１５ ．６ ％ 、１１ ．７３％ 、９ ．６６ ％ 、４ ．９６ ％ 。②药敏结果提示绿脓杆菌、不动杆菌、黄杆菌、Ｄ 群非肠球菌出现多重高比例耐药。革兰阴性杆菌对头孢塞甲羧肟、伊米配能、氨基甙类、喹诺酮类较为敏感。革兰阳性菌则对万古霉素高度敏感。结论 近年院内感染的下呼吸道感染以革兰阴性杆菌为主，出现多重耐药。应根据药敏结果选择抗生素，必要时联合应用。

抗原肽致敏白介素12基因修饰的树突状细胞免疫治疗转移性肺癌

目的 探讨肿瘤多肽致敏的白介素 12 (IL 12 )基因修饰的树突状细胞 (DC)对自发性肺转移癌的治疗作用。方法 小鼠足垫注射 3LLLewis肺癌细胞建立自发性肺转移癌模型 ,经骨髓来源的IL 12基因修饰、3LL特异抗原多肽Mut1体外致敏DC(DC IL 12 Mut1)皮下免疫 2次 ,观察荷瘤鼠肺脏质量、肺表面转移结节、存活期的变化及相应免疫指标等变化 ,实验分8组 ,组间差异行t检验 ,生存期行时序检验。结果 与对照病毒组 (DC LacZ Mut1)及未处理DC组相比 ,DC IL 12 Mut1组肺脏质量最轻 (P <0 .0 1)、肺表面转移结节最少 (P <0 .0 1)、存活期最长 (P <0 .0 1) ,其诱导CTL活性 (P <0 .0 1)和NK活性 (P <0 .0 1)最显著。结论 MHCⅠ类限制性肿瘤抗原多肽致敏的IL

不动杆菌对小鼠的致病性研究

目的：为了解不动杆菌的致病性及其在免疫缺陷和混合感染中的毒力。方法：通过测定不动杆菌对小鼠ＬＤ（５０）观察其在免疫缺陷和混合感染中ＬＤ（５０）变化。结果：（１）２０株不动杆菌的ＬＤ（５０）范围从１０６～１０９ｃｅｌｌｓ／ｍｏｕｓｅ。（２）随机取６株不动杆菌，测定对已被环磷酰胺免疫损伤的小鼠的ＬＤ（５０）均有不同程度的下降（ｐ＜０．０５）。（３）不动杆菌在分别与绿脓杆菌、大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌的混合感染中使这些细菌的ＬＤ（５０）均下降（ｐ＜０．０５）。结论：不动杆菌毒力较小，但对免疫抑制动物毒力相对增强，在混合感染中有增强其他致病菌毒力的作用。对其机制尚待进一步研究。

小鼠T-bet基因重组腺病毒载体的构建及制备

目的构建小鼠T-bet基因重组腺病毒。方法采用RT-PCR方法从小鼠脾脏活化的T淋巴细胞中扩增的cD-NA序列,并将其克隆至穿梭质粒pShuttle-CMV中,形成转移质粒,酶切线性化后,与超螺旋腺病毒骨架质粒pAdEasy-l以电穿孔的方法共转化大肠杆菌BJ5183进行同源重组,经酶切鉴定筛选正确重组子,以线性化重组质粒转染293细胞,制备重组腺病毒小鼠T-bet重组腺病毒AdT-bet,最后以PCR及Western blot方法鉴定T-bet的表达。结果感受态大肠杆菌BJ5183细菌内同源重组24h后共获得35%阳性重组质粒克隆,经酶切获得一个30kb的大片段和一个4.5kb的小片断。该质粒转染293细胞后获得的重组腺病毒可高效表达T-bet,纯化后病毒滴度为2.0×1011PFU/mL。结论应用细菌内同源重组法成功快捷构建了含小鼠T-bet基因的重组腺病毒,所获得的AdT-bet可进一步应用支气管哮喘等疾病的基因治疗研究。

金黄杆菌致下呼吸道感染的病原学和临床研究

目的 探讨金黄杆菌属致下呼吸道感染的病原学和临床特征。方法 研究 5 2例金黄杆菌属致下呼吸道感染的临床资料 ,采用平板稀释法测定常用抗菌药物对该菌株的最低抑菌浓度 ,测定金黄杆菌对小鼠的半数致死量(LD50 )。结果 5 2例中 >6 0岁者 36例 ,全部病例均有基础疾病 ,主要为慢性阻塞性肺疾病、恶性肿瘤 ,38 5 %为混合感染 ,临床症状及X线表现缺乏特异性 ;药敏试验提示该菌耐药性广 ,头孢哌酮 /舒巴坦、氧氟沙星、环丙沙星、复方磺胺甲唑及哌拉西林为相对敏感抗菌药物 ;2 0株菌株的LD50 范围为 4 11× 10 6/～ 5 6 8× 10 8/小鼠 ,提示该菌属的毒力相对较弱。结论 金黄杆菌属毒力较弱 ,其所致下呼吸道感染多发生于有基础疾病、免疫力低下、长期使用抗菌药物的老龄患者 ,细菌耐药率高 ,临床表现缺乏特征性 。

重症肺炎患者中性粒细胞胞吐作用的改变

目的 研究重症肺炎患者中性粒细胞的功能改变。方法 采用免疫化学法测定 32例重症肺炎患者中性粒细胞胞吐作用和氧化酶反应的变化 ,并与健康对照组比较。结果 重症肺炎患者血液中性粒细胞的基础和PMA刺激的胞吐作用均明显下降 (P <0 .0 1) ;重症肺炎患者的基础和PMA刺激的反应性氧属 (ROS)产生明显增加 ;重症肺炎患者肺部中性粒细胞释放乳铁蛋白、髓过氧化物酶 (MPO)和ROS增加 ,PMA刺激后相似 ;肺炎的严重性与血液中性粒细胞释放乳铁蛋白呈负相关。结论 重症肺炎患者中性粒细胞胞吐作用明显受损 ,与预后相关。

不动杆菌的生物分型与抗菌谱分型

不动杆菌的生物分型与抗菌谱分型陈吉泉罗文侗修清玉颜泽敏杜子萍不动杆菌是非发酵糖革兰阴性球杆菌，为重要的院内机会致病菌，在普通培养基上易生长，但生化反应相对惰性，难以确定不同菌株的流行病学关系［１］。长期以来由于缺乏简单有效的分型方法，阻碍了该菌的进一...

T-bet重组腺病毒调节哮喘小鼠辅助性T细胞1型/2型免疫平衡

目的研究静脉注射T-bet重组腺病毒(AdT-bet)对小鼠哮喘模型过敏性气道炎症及辅助性T细胞1型/2型(Th1/Th2)免疫失衡的影响。方法随机将36只C57BL/6小鼠分为AdT-bet治疗(A)组、模型对照(B)组、正常对照(C)组。以卵蛋白、氢氧化铝免疫建立哮喘模型,A组激发前尾静脉注射1×10~8 pfu/100μL的AdT-bet,各组激发后进行肺泡灌洗分析细胞组分,分离肺T淋巴细胞测定细胞因子分泌水平,以流式细胞仪检测CD3^+、CD4^+T细胞比例及表达γ-干扰素(IFN-γ)和白细胞介素(IL)-4、IL-5的比例,比较各组肺组织学改变。结果A组与B组相比:①明显抑制抗原激发后气道内嗜酸性粒细胞的浸润(0.004±0.003比0.221±0.067,P<0.01);②明显抑制肺T淋巴细胞产生IL-4[(22±12)pg/mL比(170±28)pg/mL]、IL-5[(16±13)pg/mL比(330±30)pg/mL],增加了IFN-γ[(2100±360)pg/mL比(60±50)pg/mL]的产生,差异均有统计学意义(P值均<0.01);③肺T淋巴细胞CD4^+IFN-γ%及IFN-γ^+/IL-4^+明显升高(P值均<0.01),而CD4^+IL-4^+%明显下降(P<0.01);④明显抑制哮喘鼠气道内及肺泡内的过敏性炎症反应。结论激发前静脉应用AdT-bet对哮喘小鼠过敏性气道炎症有明显的防治作用,其机制可能与表达的T-bet上调Th1/Th2比值,从而调整了免疫平衡有关。

气管内应用白介素2重组腺病毒免疫治疗肺转移癌

目的 研究气管内应用白介素 2 (IL 2 )重组腺病毒 (IL 2generecombinantadenovirus,AdIL 2 )对实验性肺转移癌的治疗作用。方法 ①小鼠气管内滴入AdIL 2 ,ELISA法测定局部及外周血IL 2及相关因子的水平。②C5 7BL/ 6小鼠尾静脉注射Lewis肺癌 3LL细胞建立肺转移癌模型 ,观察气管内应用AdIL 2对实验性肺转移癌的治疗作用 ,包括肺转移结节、动物存活期、生存率变化等 ,并比较自然杀伤活性 (Naturalkiller,NK)和特异性细胞毒 (CytotoxicTlymphocytes,CTL)活性的变化。结果 ①气管应用AdIL 2后肺灌洗液中测到IL 2且高于外周血水平 ,对照组肺灌洗液及外周血中的水平明显低于实验组 (P <0 .0 1)。②气管内滴入AdIL 2对实验性肺转移癌有治疗作用 ,可使肺转移结节减少、动物的生存期延长及存活率升高 ,同时对NK、CTL活性有增强作用 (P <0 .0 1)。结论 气管内应用IL 2重组腺病毒可有效表达并对实验性肺转移癌有治疗作用 。

CpG脱氧寡核苷酸对抗原致敏性小鼠气道反应的影响

目的 :探讨以非甲基化胞嘧啶 -鸟嘌呤 ( Cp G)脱氧寡核苷酸 ( ODN)治疗支气管哮喘的免疫抑制作用。 方法 :以卵白蛋白 ( OVA)免疫 C5 7BL / 6小鼠建立支气管哮喘模型 ,致敏阶段腹腔注射 Cp G ODN,以不含 Cp G序列的 ODN及生理盐水作对照 ,观察应用 Cp G ODN对支气管哮喘形成、气道过敏性免疫反应的影响。结果 :应用 Cp G ODN组与对照组相比 :( 1)明显抑制抗原激发后气道内嗜酸粒细胞的浸润 ( P<0 .0 1) ;( 2 )明显抑制肺内 IL-4、IL-5产生 ,增加 IL-12、IFN-γ的产生 ;( 3)明显抑制抗原诱导的气道反应性的增高 ;( 4 )明显抑制外周血总 Ig E及抗原特异性 Ig E的水平。结论 :致敏阶段应用 Cp G ODN对抗原诱导的气道过敏反应有明显的抑制作用 ,可阻断支气管哮喘的形成 ,这种抑制作用部分与 IL-12、IFN-γ的产生增加有关。

T-bet重组腺病毒对哮喘小鼠Thl/Th2免疫平衡的调节

目的探讨静脉应用T-bet重组腺病毒(AdT-bet)对哮喘模型小鼠过敏性气道炎症及Th1/Th2免疫失衡的影响。方法36只C57BL/6小鼠随机分为AdT-bet治疗组(A组)、模型对照组(B组)、正常组(C组)。以卵蛋白(OVA)、氢氧化铝免疫建立哮喘模型,A组激发前尾静脉注射100μL的AdT-bet(1×108PFU/μL),各组激发后肺泡灌洗分析细胞组份,分离肺淋巴细胞测定细胞因子分泌水平,以流式细胞仪检测CD3+、CD4+T细胞比例及表达IFNγ和IL-4的比例,比较各组肺组织学改变。结果静脉应用AdT-bet组与对照组相比①可明显抑制抗原激发后气道内嗜酸性粒细胞的浸润(P<0.01);②明显抑制肺淋巴细胞产生IL-4、IL-5,增加了IFNγ的产生;③肺脏淋巴细胞CD4+IFNγ+百分比及IFNγ+/IL-4+明显升高(P<0.01),而CD4+IL-4+百分比则明显下降;④明显抑制哮喘鼠气道内及肺泡内的过敏性炎症反应。结论激发前静脉用AdT-bet对哮喘小鼠过敏性气道炎症有明显的防治作用,其机制可能与表达的T-bet上调Thl/Th2比值,从而调整了免疫平衡有关。

静脉注射T-bet重组腺病毒对小鼠过敏性气道炎症的抑制作用研究

目的探讨静脉应用T-bet重组腺病毒(AdT-bet)对哮喘小鼠过敏性气道炎症的作用。方法48只C57BL/6小鼠随机均分为AdT-bet处理组(A组)、AdLacZ处理组(B组)、PBS处理组(C组)和正常对照组(D组),每组12只。A、B、C组采用卵蛋白(OVA)和氢氧化铝建立哮喘模型,于第19天激发前分别静脉注射50μlAdT-bet(108pfu)、AdLacZ、PBS。第26天测定肺泡灌洗液(BALF)中的细胞组分和IL-4、IL-5、IFNγ浓度,测定血浆IgE水平,观察肺组织病理学变化及GATA-3表达。结果A组BALF中的嗜酸性细胞(EOS)、IL-4、IL-5分别为0.6%±0.2%、6.8±3.7pg/ml、12.5±4.8pg/ml,明显低于B组(分别为20.9%±6.8%、92.4±23.0pg/ml、56.5±11.8pg/ml)和C组(分别为20.8%±6.7%、90.4±22.8pg/ml、57.3±12.2pg/ml)(P<0.01),而A组的IFNγ水平(720.0±50.0pg/ml)则明显高于B组(13.3±3.6pg/ml)和C组(12.3±5.0pg/ml)。A组血浆中总IgE(38.8±9.5μg/ml)及OVA特异性IgE(19.2±4.8U/ml)水平显著低于B组(分别为66.9±10.2μg/ml、35.2±7.8U/ml)和C组(分别为68.6±9.6μg/ml、36.1±8.5U/ml)(P<0.01)。肺组织病理学观察提示B组和C组GATA-3表达明显增加,支气管平滑肌肥厚,黏膜充血、水肿,炎性细胞浸润,管腔内可见黏液栓,而A组GATA-3的表达明显减少,炎症性反应明显减轻。结论静脉应用AdT-bet可抑制哮喘鼠IL-4、IL-5的合成,增强IFNγ的表达,抑制EOS在气道内的炎性浸润及血浆中IgE水平,其机制可能与AdT-bet增强Th1型反应,抑制GATA-3表达,从而抑制Th2型免疫反应有关。

不动杆菌致呼吸机相关肺炎的临床特点

目的探讨不动杆菌所致呼吸机相关肺炎穴VAP雪的临床特点。方法采集45例由不动杆菌所致呼吸机相关肺炎患者下呼吸道及呼吸机通气环回路标本,对分离菌株以纸片法行药物敏感试验。结果45例患者中年龄>60岁者31例;平均通气穴17±11雪d,5d后发生VAP者占73.3%。全部患者均有基础疾病,其中最常见的为呼吸系统疾病穴37.8%雪、神经系统疾病穴22.2%雪和外伤穴22.2%雪。28.9%为混合感染。临床表现为发热、呼吸道脓性分泌物、肺部实变。X线主要以双下肺野斑片状阴影为主,病死率37.8%。分离菌株耐药率高,存在多重耐药,较敏感抗生素为多粘菌素、亚胺配南、米诺环素、氧氟沙星、阿米卡星等。结论不动杆菌所致VAP患者基础疾病多,临床表现缺乏特异性,病情严重,病死率高,细菌耐药性广,临床应早期获得病原学诊断、选用敏感抗生素、加强呼吸环路的消毒。

综合性医院老年肺结核临床分析

目的了解综合性医院老年人肺结核发病的临床特点。方法对64例60岁以上老年肺结核患者的临床资料进行研究,分析其基础疾病、起病和临床特征等。结果本组64例老年肺结核患者有以下几个特点:1.基础疾病多,73.4%者有基础疾病,其中主要为糖尿病、COPD、心血管疾病、肿瘤等;2.起病不典型,午后低热、盗汗等结核中毒症状不典型;3.临床症状不典型,主要表现为咳嗽、咳白痰、咯血、胸闷、发热、乏力、纳差等,发热仅占32.8%;4.患者营养状况差,有贫血者35.9%,存在电解质紊乱者28.1%,患者存在低蛋白血症者32.8%;5.既往有结核病史者多,占56.3%;6.误诊率高,主要为肺炎(41.4%)和肺癌(42.2%)。结论近年来老年结核病疫情严重,临床症状不典型,误诊率高,临床上应及早诊断及治疗。