芋头贮藏期腐烂病病原菌的鉴定、生物学特性及防治药剂筛选

贮藏期腐烂病是芋头上发生的一种病害,严重影响芋头的产量和品质,给芋头生产造成极大的损失。为明确芋头贮藏期腐烂病病原菌种类,研究其病原菌的生物学特性,以及筛选适于防治芋头贮藏期腐烂病的药剂,作者从江苏省南通市采集病样,利用组织分离法获得病原菌,采用形态学及分子生物学手段鉴定其病原菌种类,对该病原菌在不同培养基、温度和pH值等条件下的生物学特性进行研究,并通过生长速率法测定7种杀菌剂对该病原菌的室内毒力。结果显示,南通市芋头贮藏期腐烂病病原菌为芋疫霉(Phytophthora colocasiae)。生物学特性研究表明,该病原菌最适生长条件为V8培养基,pH值为5,温度为25~30℃。7种杀菌剂室内毒力测定结果表明,双炔酰菌胺、甲霜灵、烯酰吗啉和氟吗啉对芋疫霉菌丝生长具有较好的抑制效果,其EC_(50)值分别为0.0072、0.0922、0.1200、0.6778μg/mL,其他3种霜脲氰、氟啶胺、丙森锌的抑菌效果较差,EC_(50)值分别为6.9850、22.3473、52.5193μg/mL。本研究结果可为芋头腐烂病的防治提供参考。

草莓红叶病病原鉴定及其生物学特性研究与防控药剂筛选

红叶病是一种新发现的草莓真菌病害,近年各地均有发生,给草莓生产造成严重损失。为明确草莓红叶病致病菌种类及其生物学特性,探究病原菌侵入方式,并筛选防控草莓红叶病的化学药剂,采集辽宁丹东地区的草莓红叶病样品,利用组织分离、孢子悬浮液接种、形态学与分子生物学鉴定等方法明确其病原菌种类及侵染方式,探索室内条件下温度、pH、碳源和氮源对病原菌生长的影响,测定6种杀菌剂对病原菌的毒力。结果表明:草莓红叶病的致病菌为蔷薇新拟盘多毛孢(Neopestalotiopsis rosae),可通过伤口侵入;N.rosae在25℃、pH 7.0条件下最适合生长,以可溶性淀粉、葡萄糖或蔗糖为碳源,以牛肉膏或硫酸铵为氮源;咪鲜胺、咯菌腈、吡唑醚菌酯、苯醚甲环唑和戊唑醇对N.rosae的抑制效果较好,EC50值分别为0.022 8、0.087 3、1.263 6、3.123 9和5.304 6μg·mL-1,嘧菌酯效果较差,EC50值为120.482 3μg·mL-1。这一研究为草莓红叶病的防控提供理论依据。

“水到渠成”农用增效剂对化学农药展布性和病虫害防效的影响

【目的】为明确“水到渠成”农用增效剂对化学农药展布性和田间防效的影响,从而指导其科学使用。【方法】对“水到渠成”农用增效剂加入化学农药后,药液表面张力、静态接触角、雾化与沉降效果,以及田间病虫害防效进行了研究。【结果】增效剂可有效降低药剂的表面张力,减小药液的静态接触角,并且在单位时间内药液的接触角下降幅度较大;增效剂可显著增加药液的扩散性能和在载体表面的沉积量;田间施用可增加药液对病虫害的防效,使240 g/L噻呋酰胺悬浮剂和200 g/L氯虫苯甲酰胺悬浮剂对水稻纹枯病和稻纵卷叶螟的防效分别增加了17.41%和10.23%。【结论】“水到渠成”农用增效剂可有效提高化学药剂的展布性,提高其对田间病虫害的防效。

大豆常见病害症状、病原种类及其生理分化

大豆作为我国重要油料作物,在生产中常遭受多种病害侵袭,造成产量降低,品质变劣。文章对我国大豆常见病害症状、病原种类及其生理分化进行综述,旨在增强田间大豆病害辨识度,明确病原种类及病菌生理分化特征,提高大豆病害防控技术水平,为大豆抗病育种和病害防控提供依据。

我国大豆根腐病研究进展

随着大豆-玉米复合种植模式在全国推广,大豆病害的发生严重影响大豆的产量和品质。其中,由多种病原菌引起的大豆根腐病因其分布广、危害重、病原种类多、防治困难等特点,已成为制约大豆生产的主要障碍。文章对大豆根腐病危害现状、病害症状、病原菌种类、病害发生规律及防治的研究进展进行综述与展望,以期为生产上大豆根腐病防控提供理论依据。

拮抗放线菌2-1-2F的鉴定及其对黄瓜枯萎病的防效

为获得可高效防控黄瓜枯萎病的生防放线菌,采用梯度稀释和平板对峙法从蔬菜根际土壤中筛选到1株对黄瓜枯萎病菌Fusarium oxysporum f.sp.cucumerinm(FOC)有较强拮抗作用的放线菌2-1-2F;经形态学和分子生物学鉴定,确定菌株2-1-2F为弗吉尼亚链霉菌Streptomycesvirginiae。其能产生蛋白酶、β-葡聚糖酶和几丁质酶,不产生嗜铁素和纤维素酶,且菌株2-1-2F产生的发酵滤液活性易受环境条件影响。菌株2-1-2F发酵菌液对黄瓜有明显的促生作用,可诱导黄瓜体内防御酶活性和抗性相关物质含量增加,并于处理后1~7 d内达最大值。菌株2-1-2F在黄瓜根部有较强的定殖能力,42 d后在土壤中仍可达10^(6)cfu/g;其对黄瓜枯萎病的预防和治疗效果分别达48.98%和34.01%。

3种不同型号植保无人机施药对水稻几种病虫害的防治效果

为明确不同型号植保无人机施药在水稻病虫害防治上的应用效果,开展了田间施用高、低浓度的2种药剂的表面张力、不同载面接触角、田间雾化效果及对病虫害的防效测定。结果表明:同种药剂浓度越高,其表面张力越小,也越容易在载面上展布;大疆T30和极飞P80对药液的雾化效果总体好于大疆T10,对病虫害的田间防效大疆T30略好于极飞P80;除对纹枯病外,2种机型的病虫害田间防效都极显著好于大疆T10。综上,大疆T30和极飞P80适用于田间水稻病虫害的防控。

不同抗性水稻品种响应纹枯病菌侵染的代谢组差异分析

利用气相色谱-飞行时间串联质谱(GC/TOF-MS)检测抗纹枯病品种(YSBR1)YS和感纹枯病品种(Lemont)LE接种纹枯病菌(Rhizoctonia solani Kühn)后的代谢组差异,以探究水稻抗纹枯病机制。结果表明:R.solani侵染后,YS和LE分别有82和75个差异代谢物(DAM)的含量升高;相对于LE,YS中存在更多的氨基酸类差异代谢物,其中合成抗病因子(水杨酸、乙烯、木质素、叶绿素和γ-氨基丁酸)的氨基酸及其衍生物受诱导水平明显高于LE。结果提示YS对纹枯病的较强抗性可能与其自身特有的代谢产物尤其是抗病因子相关的氨基酸及其衍生物密切相关。

水稻纹枯病菌胞壁降解酶的产生及致病作用

水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solaniKühn)在改良的Marcus培养液中能产生多聚半乳糖醛酸酶(PG)、纤维素酶(Cx)、果胶甲基半乳糖醛酸酶(PMG)、多聚半乳糖醛酸反式消除酶(PGTE)和果胶甲基反式消除酶(PMTE)5种胞壁降解酶,其中PG、Cx和PMG活性较高,而PGTE和PMTE活性很低。病菌产生胞壁降解酶的最佳条件是:在pH5培养液中28℃下静置培养6 d。病菌接种水稻叶鞘后也能显著产生PG、Cx和PMG等胞壁降解酶,并且病斑外侧褪绿部酶活最高,平均为对照(健康部)的3.4倍;其次是褐色部,酶活总量平均为对照的2.9倍;病斑中央枯白部酶活较低,但明显高于对照。这一结果提示,在病菌侵染和扩展过程中胞壁降解酶起重要作用。果胶酶(PG、PMG)和纤维素酶(Cx)无论是单独处理还是混合处理,对水稻叶鞘都具有显著地损伤细胞膜和浸渍组织的作用。

水稻内生联合固氮细菌的分离、种类及对水稻的促生长作用

从江苏省扬州、南通、常州和徐州等地的水稻根、茎和种内分离获得了内生细菌276个菌株。以乙炔还原法测定,其中234个菌株具有联合固氮活性,占供试菌株总数的84.8%。根据乙炔还原活性(ARA)大小,将水稻内生固氮细菌分为3类:强固氮活性[ARA>100μmol·(h·mL)^(-1)]菌株,占总数的2.1%;中等固氮活性[ARA为1～100μmol·(h·mL)^(-1)]菌株,占总数的81.2%;弱固氮活性[ARA≤1μmol·(h·mL)^(-1)]菌株,占总数的16.7%。5个强固氮活性菌株经转管培养20代后,其固氮能力表现稳定。经形态学和生理生化试验,固氮活性强且稳定的菌株J115和G161鉴定为阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae).其ARA分别为20 987.820 0和9 212.313 0μmol·(h·mL)^(-1)。通过菌液蘸根和喷雾接种,这2个菌株均能促进水稻幼苗的生长,水稻苗期叶绿素含量、地上部干物质量和株高分别增加6.9%～17.1%、16.7%～31.0%和15.3%～20.4%。

水稻纹枯病菌毒素提纯及其组分初步分析

用不同方法提取的水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)毒素活性有显著差异,但紫外扫描图谱(最大吸收波长约220 nm)相似,表明其可能为同类物质。其中,以乙醚萃取法获得的粗毒素对水稻胚根伸长的抑制率最高,达94.63%,接种水稻叶鞘后可产生典型的纹枯病症状。将乙醚萃取法提取的粗毒素经2次Sephadex G-75凝胶柱层析纯化,收集活性峰而获得精毒素。薄层色谱(TLC)分析表明,该毒素为糖类物质。高效液相色谱(HPLC)检测显示,该毒素至少有4个特殊吸收峰,表明可能有4种组分。经红外光谱(IR)分析,该毒素含有N-H(或O-H)、C=O、C-N(或C-O)等基团。气质联用(GC-MS)检测表明,该毒素含有葡萄糖、N-乙酰氨基甘露糖和蔗糖,而不含苯甲酸、苯乙酸及其衍生物。

抗白粉病黄瓜品种的叶片组织结构及其生理生化

为明确不同黄瓜品种对白粉病的抗性机制,采用组织切片和田间接种的方法,从近130份种质中筛选出高抗(GY14A、GY4)、中抗(津春4号、津优30号)、中感(W12757、仪黄)、高感(DE843、平望乳瓜)黄瓜品种各2份,并对8份黄瓜品种的形态结构与抗性生理生化进行研究。结果表明,高抗品种叶片组织结构紧凑,栅栏组织排列整齐、紧密,且细胞壁较厚;而高感品种则细胞壁较薄,叶片组织间出现大量空隙;中抗和中感品种虽具清晰的栅栏组织,但空隙较大,说明叶片组织细胞的排列整齐和紧密度以及细胞壁的厚度与黄瓜品种对白粉病的抗性密切相关。病原菌接种后,抗性品种体内防御酶活性上升速度与幅度都明显高于感病品种,且过氧化物酶(POD)同功酶谱带较深,H2O2积累较慢。另外,抗性品种叶片中可溶性蛋白质含量明显高于感病品种,而可溶性糖含量则明显低于感病品种,还原糖含量无明显差异。

江苏水稻恶苗病病原菌研究

从江苏13个地区采集677份水稻恶苗病标本,分离获得548个单孢菌株。参照Booth分类系统,这些菌株被鉴定为6种镰刀菌,其中串珠镰刀菌(Fusarium monilif orme)占60.8%,其他分别为雪腐镰刀菌(F.nivale)、半裸镰刀菌(F.semitectum)、禾谷镰刀菌(F.graminearum)、砖红镰刀菌(F.lateritium)和尖孢镰刀菌(F.oxysporum)。不同地区病害样本上镰刀菌种类及其比例存在一定差异。接种试验表明,串珠镰刀菌是水稻恶苗病的主要致病菌,其他镰刀菌均不能引起典型的徒长症状或不致病。

油菜菌核病菌抗腐霉利菌株的生理生化特性及抗药机制初步分析

通过室内紫外线和药剂诱导,获得多株高抗腐霉利油菜菌核病菌(Sclerotiniasclerotiorum)突变体。与野生亲本菌株相比,抗性突变株(EC50>800μg/mL)在高糖(>40g/L蔗糖)和高盐(>5g/LNaCl)培养基上生长缓慢,表明对高渗透压比较敏感;菌丝相对电导率较高,显示细胞膜透性增大,胞内电解质渗出较多。试验还发现,在含药培养液中,亲本菌株菌丝内甘油大量合成和积累,增加462.45%,而抗药突变株甘油含量仅稍有增加或有所下降,说明抗腐霉利突变株对外界渗透压的调节能力较低。根据已报道组氨酸激酶(HK)基因序列设计特异引物,经PCR扩增和测序,获得油菜菌核病菌HK基因保守区域序列1605bp。抗、感腐霉利菌株HK基因保守区域在第45位、第81位和第625位碱基不同,但编码的氨基酸一致。因此,油菜菌核病菌对腐霉利的抗性及抗药菌株的高渗敏感性与HK基因保守区域碱基突变无关。

利用RGA-PCR方法进行水稻抗瘟基因分子标记

用28对RGA引物对LTH近等基因系品种进行PCR扩增,其中11对引物扩增出特异性条带。将扩增到的33个特异性片段回收并进行重扩增,有11个片段产生单一条带。选择2个片段HS-1和HS-19进行探针标记。经Southern杂交发现,探针HS-1在含有Pi-ta2抗瘟基因品种F-128-1、NO4中有特异杂交信号,表明该片段可能与抗瘟基因Pi-ta2连锁或是其一部分。对特异性片段HS-1进行克隆、测序,全长为478bp,与Mago等从水稻中克隆的一个抗病基因同源序列RGA29有95%同源性。

水稻内生枯草芽孢杆菌对稻瘟病菌和稻恶苗病菌的抑制作用

自水稻茎和根内分离获得的枯草芽孢杆菌J215和G87菌株培养菌液和滤液对稻瘟病菌和稻恶苗病菌具有较强的抑制作用。其培养菌液（10～9cfu/ml）稀释2～100倍时,对稻瘟病菌和稻恶苗病菌菌丝生长抑制分别为83.6%～91.0%和60%左右;培养滤液稀释2倍时抑制率达52.4%～75.4%。细菌培养滤液处理能破坏病菌菌丝形态,使稻瘟病菌菌丝细胞膨大、细胞壁破损、原生质外渗、菌体崩溃;但对稻恶苗病菌菌丝损坏较轻,主要使菌丝细胞膨大、生长缓慢。另外,细菌培养滤液稀释10倍时对稻瘟病菌分生孢子形成和萌发的抑制分别达85%和95%以上;对稻恶苗病菌分生孢子形成和萌发的抑制率分别为90%和60%以上。

油菜菌核病菌对腐霉利的抗性诱变及抗药菌株的生物学特性

从江苏省镇江市和扬州市采集菌核病植株的茎，从中分离获得油菜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum）单菌核菌株。32个野生型菌株药剂敏感性（EC50）频率分布数据显示，病菌对腐霉利的敏感基线EC50值为0．1981±0．0220μg／mL，MIC（最小抑菌浓度）值为1．1±0．1595μg／mL。实验未发现田间抗腐霉利菌株。通过室内紫外线和药剂诱导，获得多株高抗腐霉利突变体（EC50〉1000μg／mL）。这些抗性突变株经转管培养5～20代后抗药性稳定。它们对同类药剂异菌脲和有机磷类甲基立枯磷也表现高抗，但对苯并咪唑类多菌灵敏感。与野生型敏感菌株相比，抗腐霉利突变株菌丝生长较慢，对油菜茎秆和叶片的致病力均较弱。

灰葡萄孢抗二甲酰亚胺类杀菌剂研究进展

综述了灰葡萄孢对二甲酰亚胺类杀菌剂抗性的产生及现状,抗性菌株的生物学特性、生理生化特性以及抗药性机制,并就灰葡萄孢对二甲酰亚胺类杀菌剂抗性研究进行了展望。

10种药剂对西葫芦白粉病的田间防效

白粉病是西葫芦生产上的重要病害,为筛选出西葫芦白粉病防控药剂,通过田间试验比较了10种新型杀菌剂对西葫芦白粉病的防效。试验结果表明,400 g/L氯氟醚菌唑悬浮剂20 g/667 m^(2)、42%苯菌酮悬浮剂20 g/667 m^(2)、40%环丙唑醇悬浮剂10 g/667 m^(2)和20%吡噻菌胺悬浮剂30 g/667 m^(2)对西葫芦白粉病均有较好防效,且持效期较长,第2次药后7、14、21 d,上述4种药剂的防效均在90%以上。说明这些药剂可用于田间西葫芦白粉病的防控。

水稻多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因(Ospgip1)原核表达及编码产物生物信息学分析

据GenBank及相关文献提供的序列,从水稻基因组DNA中扩增出930 bp的Ospgip1基因完整开放阅读框。原核表达Ospgip1基因,表达产物能显著抑制水稻纹枯病菌菌丝生长及其多聚半乳糖醛酸酶活性。生物信息学分析表明,OsPGIP1为分子量32.8 kDa、pI 7.26的疏水蛋白,主要位于细胞壁(55.6%),信号肽切点位于第17和18位氨基酸之间。在N端和C端各有4个半胱氨酸残基,形成3个二硫键(第56和63位、第278和298位、第300和308位氨基酸)。以α-螺旋、β-折叠和不规则盘绕等为主要结构原件,具有典型的富含亮氨酸重复(LRR)结构。相比其他植物的PGIP,OsPGIP1缺少第7个LRR。在空间上9个LRR形成类似凹陷或裂隙结构,可能是其与病原菌多聚半乳糖醛酸酶互作的活性位点区。