分子生物学方法在结核分枝杆菌及其耐药性检测中的价值

目的:探讨分子生物学方法在结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)及其耐药性检测中的价值。方法:以MTB标准菌株H37Rν作为对照,以单耐药及耐多药的MTB行梯度浓度稀释后作为检测样本,分析Xpert MTB/RIF法、基因芯片法、改良罗氏培养法、比例法检测MTB的准确性、最低检出限及检测周期等。结果:改良罗氏培养法和Xpert MTB/RIF法检测MTB下限均为3×102 cfu/mL,基因芯片法检出下限为3×104 cfu/mL;Xpert MTB/RIF法在3×102 cfu/mL时检测利福平耐药性存在假阳性现象,无法检测异烟肼的耐药性;Xpert MTB/RIF法检测周期≤2 h,而基因芯片法≤8 h,比例法和改良罗氏培养法检测周期在5~8周。结论:在MTB及其耐药性检测中分子生物学方法的检测周期优势明显,在最低检出限和准确性方面各有优势,因此,临床诊断中综合考虑病人的经济水平和病情危重程度,选择合适的检测方法。

高糖环境下GATA4通过调节RUNX2影响成骨细胞增殖分化的研究

目的:探讨高糖环境下GATA锌指转录因子蛋白4(GATA4)对成骨细胞增殖分化的影响,及对转录因子蛋白2(Runx2)的调控作用。方法:取MC3T3-E1成骨细胞,在高糖(25 mmoL/L)的条件下分别培养1 d、4 d、7 d、14 d,免疫印迹法(Western blotting)法检测GATA4、Runx2蛋白表达水平。将MC3T3-E1成骨细胞分为空白对照组、高糖诱导组、GATA4过表达腺病毒(Ad-GATA4)组、GATA4空载腺病毒组(Ad-eGFP)组,CCK-8法检测各组细胞的存活率,碱性磷酸酶(ALP)染色法及茜素红染色法检测细胞分化能力;Western blot法检测各组细胞GATA4、Runx2、成骨细胞特异性转录因子(OSX)、骨唾液蛋白(BSP)蛋白表达水平。共转染Ad-GATA4及Runx2干扰腺病毒(Ad-si-Runx2),将MC3T3-E1成骨细胞分为Ad-GATA4-si-Runx2组、AdGATA4-eGFP2组、Ad-eGFP-si-Runx2组、Ad-eGFP-eGFP2组及未转染组(高糖组),高糖条件下培养7 d后检测GATA4、Runx2、OSX、BSP蛋白表达水平。结果:随着高糖培养时间延长,细胞中GATA4、Runx2蛋白表达持续降低,在第7天降低至最低,选取高糖培养7 d为后续培养条件。转染Ad-GATA4后,与空白对照组比较,高糖诱导组细胞矿化结节形成较少,细胞存活率、ALP活性、GATA4、Runx2蛋白表达、OSX、BSP蛋白表达降低(P<0.05);与高糖组相比,Ad-GATA4组细胞矿化结节形成较多,细胞存活率、ALP活性、GATA4、Runx2蛋白表达、OSX、BSP蛋白表达升高(P<0.05),Ad-eGFP组与高糖诱导组相比上述指标差异无统计学意义(P>0.05)。Ad-GATA4与Ad-si-Runx2共转染后,与高糖诱导组相比,Ad-GATA4-eGFP2组细胞GATA4、Runx2、OSX及BSP蛋白表达升高(P<0.05);Ad-eGFP-si-Runx2细胞Runx2、OSX及BSP蛋白表达降低(P<0.05),GATA4蛋白表达变化差异无统计学意义(P>0.05)。与Ad-GATA4-eGFP2组比较,Ad-GATA4-si-Runx2细胞Runx2、OSX及BSP蛋白表达降低(P<0.05),GATA4蛋白表达变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论:高糖可抑制成骨细胞增殖分化,伴随GATA4、Runx2蛋白表达降低。过表达GATA4则可促进成骨细胞在高糖环境中的增殖、分化,其可能与激活Runx2表达有关。

泌尿道支原体检测及药敏结果分析

目的：分析支原体（Mycoplasma ）在泌尿生殖道的分离及检出情况。方法：应用珠海丽珠试剂股份有限公司生产的试剂盒对709例送检标本进行支原体（解脲脲原体＋人型支原体）培养和药敏试验，将支原体数量≥104 CCU作为阳性判断标准。结果：在709份标本中，检出支原体共376份，检出率为53.0％。解脲脲原体（Ureaplasma urealyticum，Uu）、人型支原体（Mh）和Uu联合Mh的阳性率分别为49.6％（352例）、1.4％（10份）和2.0％（14份）；其中男性支原体培养阳性率为23.3%，女性支原体培养阳性率为55.0%，女性明显高于男性（P〈0.05）。Uu对多西环素和米诺环素敏感率最高，分别为96.4%和97.8%,耐药率最高的是氧氟沙星（52.5％），其次是罗红霉素（42.2％）。结论：在支原体导致的非淋球菌尿道炎中，主要由Uu引起，女性感染率高于男性；临床治疗应首选多西环素、米诺环素、克拉霉素。

超敏C-反应蛋白、同型半胱氨酸及D-二聚体联合检测在冠心病诊断中的临床价值

目的：探讨超敏C-反应蛋白（hs-CRP）、同型半胱氨酸（Hcy）、D-二聚体（D-D）联合检测对冠心痛（CHD）诊断的临床价值。方法：选取2013年2-105本院心血管内科冠心痛患者组63例并与30例正常对照组，进行对比分析。结果：冠心痛组hs-CRP、Hcy、D-D水平明显升高，与对照组比较，差异显著（P〈0．05）。结论：hs-CRP、Hcy、D-D是冠心痛的独立危险因素，其联合检测对冠心痛诊断具有重要的临床应用价值。

Biosystems A25全自动特定蛋白分析仪测定尿蛋白肌酐比的性能评价

目的 :对Biosystems A25全自动特定蛋白分析仪测定尿蛋白肌酐比(albumin-creatinine ratio,ACR)项目进行性能评价。方法:参考美国临床和实验室标准协会系列文件和相关文献,结合实际工作对尿白蛋白(UAlb)、尿肌酐(UCr)项目的准确度、精密度(批内、批间)、交叉污染率、最大检测线性验证及不同系统间比对(本室原有的生化分析仪日立-7600测定的尿肌酐)进行评价。结果:准确度验证,相对偏差分别为5.08%、10.74%,小于厂家声明的偏差(尿白蛋白≤10%,肌酐≤15%);批内精密度变异系数(CV)分别为3.30%、1.09%,批间精密度变异系数(CV)分别为7.21%、3.38%,均小于厂家声明的精密度(批内CV≤7.00%、批间CV≤10.00%);交叉污染率分别为0.17%、0.00%,符合携带污染率≤10.00%的要求;以理论值为X轴,仪器测定值为Y轴,UAlb的线性回归方程为Y=1.0105X+10.140(a=0.9653,R2=0.9937),UCr的线性回归方程Y=0.9442X-0.0652(a=0.9442,R2=0.9998),二者估算线性范围分别可达1176.12mg/L和24.74mmol/L,大于要求规定的800mg/L和8.84mmol/L;不同系统间比对UCr,以日立-7600测定值为X轴,A25测定值为Y轴,进行线性回归得到Y=0.8540X+0.9304(R2=0.9909),要求R2>0.975,两者相关性良好。结论:用Biosystems A25全自动特定蛋白分析仪测定ACR项目各项性能验证指标均合格,可用于临床标本检测。

血清氨基末端脑钠肽前体浓度变化与肺动脉高压的关系

目的通过检测成人先天性心脏病介入封堵术前术后血清氨基末端脑钠肽前体(NT-pro BNP)浓度,探讨血清NT-pro BNP浓度与肺动脉高压(PAH)的关系,为肺动脉高压的诊断、病情程度的评估和预后判断提供依据。方法将2012年1月至2013年6月在四川省绵阳市中心医院成功行封堵术的先天性心脏病患者106例作为观察组,20例表观健康者为对照组。依据肺动脉平均压将观察组分为三组:无PAH组(n=52)、轻度PAH组(n=18)、中重度PAH组(n=36)。所有患者术前均行右心导管检查,测定右房压、右室压、肺动脉收缩压、肺动脉平均压、全肺阻力。同时测定患者术前术后血清NT-pro BNP浓度,并对结果进行分析。结果在行封堵手术前,观察组血清NT-pro BNP浓度明显高于对照组(P<0.05),各观察组血清NT-pro BNP浓度为中重度PAH组>轻度PAH组>无PAH组,各组之间差异均有统计学意义(P<0.05)。各观察组的肺动脉平均压、肺动脉收缩压和全肺阻力与血清NT-pro BNP浓度呈正相关,其相关系数分别为0.887(P=0.000)、0.921(P=0.000)和0.844(P=0.000)。在行封堵手术后,观察组血清NT-pro BNP浓度明显低于手术前,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血清NT-pro BNP浓度可以作为PAH的诊断、反映病情程度及判断预后的指标之一。

5590例临床血清标本抗核抗体检测结果分析

目的探讨抗核抗体（ANA）和ENA抗体谱在就诊患者中的阳性分布趋势及对自身免疫性疾病（AID）的临床意义。方法采用间接免疫荧光法（IIF）和欧蒙印迹法检测5 590例患者血清标本中的ANA和ENA抗体谱,并对检测结果进行回顾性分析。结果 5 590例患者血清标本中,检出ANA阳性1 256例,阳性率为22.47%。女性阳性率为（1 030/3 645）28.26%,男性阳性率为11.62%（226/1 945）,差异有统计学意义（P〈0.01）。不同年龄组间ANA阳性率,21~50岁组（23.77%）和〉50岁年龄组（23.87%）,与≤20岁年龄组（11.95%）相比较,差异有统计学意义（P〈0.01）。ANA单一型荧光模式以核颗粒型（46.50%）、核均质型（17.83%）等为主,混合型荧光模式以核颗粒型/核均质型（5.25%）为主。5 590例患者血清标本中ENA抗体谱检测阳性者1 288例,阳性率23.04%,大多数为二种或二种以上抗体同时阳性。阳性抗体中阳性率最高的是抗SS-A（45.89%）、抗Ro-52（40.30%）、抗nRNP/Sm（19.33%）等。结论 ANA和ENA抗体谱联合检测具有互补性,可提高自身抗体检出率,对AID的诊断和治疗有重要意义。

新生儿真菌血流感染临床特点及危险因素分析

目的 分析新生儿真菌血流感染的病原菌、耐药情况及相关危险因素,为临床治疗提供参考。方法 对2016年1月-2017年12月本院新生儿病房收治的4 276例患儿进行回顾性研究,分析真菌血流感染临床特点。结果 4 276例新生儿住院患者中,血培养共检出真菌21例,主要为白色念珠菌9株（42. 9%）,其次为热带念珠菌5株（23. 8%）,药敏结果显示对常用抗真菌药物较敏感。单因素Logistic回归分析显示,早产儿、低出生体质量儿、气管插管、抗菌药物使用时间和中心静脉置管时间与真菌血流感染的发生有关（P 〈0. 05）;多因素Logistic回归分析表明,真菌血流感染的独立危险因素主要有早产儿和低出生体质量儿（P 〈0. 05）。结论 新生儿真菌血流感染病原菌以念珠菌为主,对常用抗真菌药物敏感性较高;早产儿和低出生体质量儿是新生儿真菌血流感染发生的高危人群。

系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血T淋巴细胞亚群的变化及其临床意义

目的:研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血T淋巴细胞亚群的变化及其临床意义。方法:采用流式细胞术对50例患者和30例健康体检者外周血中的T淋巴细胞亚群的变化进行检测。结果:与正常对照相比,活动期SLE患者CD3+CD4+细胞数明显降低(p<0.05),CD3+CD8+细胞数明显升高(P<0.05),CD3+CD4+/CD3+CD8+比值显著降低(P<0.01)。结论:活动期SLE患者淋巴细胞亚群存在异常,其是SLE发病的重要机制之一。