改良高效液相色谱法测定血浆中顺铂磁性纳米药物的含量

目的建立高效液相色谱技术测定血浆中顺铂浓度的方法来进行药物代谢动力学的研究。方法用Waters色谱系统。色谱条件:2487双通道紫外检测器。C18色谱柱(大连依利特ODS2分析柱,250mm×4.6mm,5μm),外接菲罗门C18(4mm×4 mm保护柱)。恒温35℃,流速1.0ml·min-1,流动相水-甲醇(28∶72),Waters 1525泵,717自动取样器,进样量为20μl,Breeze色谱工作站。血浆中的顺铂经二乙基二硫代氨基甲酸钠衍生化后,用氯仿提取其产物Pt(DDTC)2,离心后直接取氯仿层进样,采用高效液相色谱仪在254 nm处测定药物浓度。结果本法能有效地测定兔血浆中的顺铂浓度。样品各组分分离良好,顺铂线性范围为0.20768-12.468 mg.L-1,相关系数r=0.9999,日间和日内变异系数均小于10%。结论该方法是一种高效、准确的检测方法,适用于顺铂药物动力学的研究。

不同有机肥处理对水稻品质和食味的影响

以华北地区主栽的11个水稻品种为材料,采用5种有机肥处理方法,探讨不同处理水稻的品质、食味情况及其相互关系。结果表明,不同有机肥处理对水稻外观品质虽没有显著影响,但有机肥处理的数值高于常规处理,其中,酒糟处理的整精米率最高,垩白粒率和垩白度最低;食味方面,蛋白质含量、直连淀粉含量、RVA特性,除味道以外的食味品尝结果不同处理间都不存在显著差异,而食味特性各项指标上各处理间存在显著差异;米糠处理在食味特性和品尝上都优于其他处理,而且蛋白质含量最低,常规处理直链淀粉含量最低。

叶酸受体介导的载顺铂磁性纳米pH敏感药物的制备及性能

【目的】制备具有叶酸受体靶向、磁靶向及pH敏感释放的载顺铂磁性纳米药物(FA-PEG-NH-N=MNPs-CDDP),为进一步研发智能靶向头颈部肿瘤药物载体奠定基础。【方法】采用化学共沉淀法制备醛基化海藻酸钠改性的四氧化三铁纳米粒(MNPs),海藻酸钠表面的羧基通过配位络合作用与顺铂连接,制备的偶联叶酸的双肼基PEG,其肼基端与海藻酸钠的醛基通过腙键连接包裹载药纳米粒,经纯化获得叶酸修饰的载顺铂磁性纳米pH敏感靶向抗癌药物(FA-PEG-NH-N=MNPs-CDDP),采用紫外分光光度计、透射电镜(TEM)、振动样品磁强计(VSM)、激光动态粒径仪等对其理化性状等进行表征,同时采用细胞铁染色、透射电镜和体外实验来评估其细胞靶向性和pH敏感释药特征。【结果】该纳米药物顺铂含量为0.773 mg/mL,铁含量约为1.908 mg/mL;透射电镜下磁核平均粒径约为(10.2±1.5)nm,激光粒度仪测得平均水动力学直径(176.6±1.1)nm,zeta电位为(-20.91±1.76)mV,最大饱和磁化强度为(16.3±0.2)emu/g,能被叶酸受体阳性细胞摄取,并能在低pH值下释放药物。【结论】该磁性纳米药物具有良好的稳定性、叶酸受体靶向性和pH敏感释药功能,为肿瘤的药物靶向转运奠定了基础。

棕色蘑菇菌丝液体培养基的优化

以棕色蘑菇MC441为试材,从5种发酵培养基中选择出最适合棕色蘑菇菌丝生长的麸皮培养基作为初始发酵培养基,并采用L9(34)正交实验对该培养基进行了优化,为棕色蘑菇产业化应用提供参考依据。结果表明:发酵培养基为麸皮120g/L、葡萄糖15g/L、蛋白胨2.0g/L。在最适条件下,棕色蘑菇的菌丝量提高到17.39g/L。

叶酸受体在鼻咽癌组织中的表达及其意义

目的:研究叶酸受体在人鼻咽癌组织中的表达情况,了解其与肿瘤临床和病理特征间的关系,为进一步研发叶酸受体靶向头颈部肿瘤药物载体奠定基础。方法:分别通过免疫组织化学SP法和RT-PCR法检测鼻咽癌组织中的叶酸受体(FRα)和FRαm RNA的表达情况,结合临床参数进行分析。结果:鼻咽癌组织中FRα水平和FRαm RNA水平均高度表达。结论:叶酸受体表达与鼻咽癌的发生、发展有重要关系。叶酸受体可作为鼻咽癌靶向治疗的分子靶点,并为鼻咽癌的早期诊断及靶向治疗提供重要依据。

有机栽培处理对水稻产量及其构成要素的影响

研究不同处理条件下,不同水稻品种在产量及其构成要素方面的表现,为栽培方式和配套品种的科学选用提供理论依据。本试验以华北地区主栽的11个品种为材料,采用5种不同的处理方法,分别讨论不同品种不同处理条件下,产量及其构成要素的情况及其相互关系。结果表明,不同有机栽培处理方式对水稻的产量有较大影响,有机栽培处理的理论产量和实际产量皆低于常规处理,而无显著性差异。产量构成要素方面,单位面积穗数只有米糠处理显著低于常规处理;而结实率恰恰相反,米糠处理显著高于常规处理。

有机栽培处理对水稻生长特性的影响研究

为研究不同处理条件下不同品种水稻在生长特性方面的表现,为栽培方式和配套品种的科学选用提供理论依据,试验以华北地区主栽的11个水稻(Oryza sativa L.)品种为材料,采用5种不同的处理方法,分别讨论不同品种不同处理条件下水稻株高、叶色、分蘖的变化情况。结果表明,不同有机栽培处理方式对水稻的生长特性有较大影响,有机栽培处理的水稻株高和分蘖皆显著低于常规处理,而叶色与常规处理相比无显著差异。

恶性肿瘤靶向化疗药物载体及应用

绝大多数抗癌药物的毒副作用都很大 ,全身化疗受到限制 ,而靶向化疗以其疗效确切、毒副反应低等特点已显示出良好的应用前景。要使药物选择性地到达靶部位 ,其关键是载体。现就靶向化疗药物载体的种类、作用机制、优缺点及应用情况作一简要介绍。

热休克蛋白DnaK在大肠杆菌中的克隆与表达

PCR扩增了热休克蛋白DnaK(HSP70)基因,将其连接到pBAD Directional TOPO载体上,构建了重组表达质粒,转化至One ShotTOP 10中的大肠杆菌Top 10中,经阿拉伯糖诱导获得重组蛋白。通过Western blot验证,表明该目标蛋白具有与鼠抗DnaK单抗特异结合的抗原活性,说明表达的重组蛋白为Hsp70,该研究为进一步探讨Hsp70的生物学功能和作用机制奠定了基础。

鼓室硬化患者中耳黏膜及硬化灶组织病理学特点

目的了解鼓室硬化患者中耳黏膜及硬化灶的组织病理学特点,以进一步了解鼓室硬化的发病机理。方法取68例鼓室硬化患者中耳不同位置的黏膜及硬化灶标本,分两组,一组68例予福尔马林固定,苏木精-伊红染色后于光镜下检查,另一组12例于电镜下观察。结果鼓室黏膜内大量肉芽组织增生并炎症细胞浸润,黏膜下层见纤维化;硬化灶内可见密集的玻璃样变性的胶原纤维束和大量散在分布的钙化区,在某些区域还可见无血管的肉芽组织。电镜下见纤维细胞不规则变形、伸长、退变,嗜锇细胞质含有小囊泡及大量大小不等胶原纤维束,核周的胞浆内有聚集线粒体,胞内的小体中见大量富含高密度电子的钙质沉着,为纤维细胞的变性线粒体或溶酶体。结论鼓室硬化患者中耳黏膜及硬化灶组织病理学表现为结缔组织纤维化、玻璃样变性、钙化。电镜下见胶原纤维显著增生,在纤维样变性的细胞内可见有富含电子的钙质沉着。

小麦磷脂酶Dδ基因的克隆及表达分析

磷脂酶D(Phospholipase D,PLD)是植物体内重要的信号转导酶。为了深入了解小麦PLD基因功能,利用同源克隆的方法从普通小麦扬麦158中克隆出TaPLDδ基因后进行序列分析,同时对TaPLDδ基因在不同组织及不同胁迫条件下的表达模式进行分析。结果表明,TaPLDδ基因编码区长为2 589bp,编码862个氨基酸,等电点为6.93,分子量约为97kDa。氨基酸序列分析显示,TaPLDδ基因编码的氨基酸序列含有N端C2结构域及两个保守的HKD活性中心。预测分析表明,TaPLDδ蛋白属于亲水性稳定蛋白,在细胞质中合成后,不进行蛋白转运;其二级结构包含27.49%的α-螺旋、19.14%的延伸链、6.73%的β-转角和46.64%的不规则卷曲。不同物种间TaPLDδ蛋白的同源性分析比较表明,TaPLDδ与谷子、玉米和拟南芥的PLDδ氨基酸序列之间具有高度的保守性,且与乌拉尔图小麦、二穗短柄草和水稻PLDδ亲缘关系密切。此外,qRT-PCR分析表明,TaPLDδ在叶、根、茎、花和种子中均有不同程度表达,并受ABA、NaCl和PEG诱导表达增强,推测该基因参与小麦渗透胁迫应答。以上这些研究结果为进一步研究TaPLDδ的生物学功能奠定了基础。

改良原子吸收光谱法测定组织中载顺铂磁性纳米药物中的顺铂含量

目的建立改良组织消化和原子吸收光谱测定组织中铂浓度的方法。方法应用岛津原子吸收光谱系统,条件:AA-6300型原子吸收分光光度计、GFA-Ex7i石墨炉、ASC-6100自动进样器、铂元素空心阴极灯,含载顺铂磁性纳米药物的组织烘干后经硝酸和双氧水水浴消化后直接采用原子吸收光谱仪在265.9nm处测定。结果各不同组织顺铂线性范围均是54～283.5μg.L-1,相关系数r均大于0.999,日内变异系数均小于5%,日间变异系数均小于10%。结论采用改良原子吸收光谱法可高效、准确的检测湿化消化法处理的组织样本中铂元素的含量,该改良方法适用于顺铂药物动力学的研究。

面神经减压术治疗颞骨外伤性面瘫

目的探讨颞骨外伤性面瘫的手术处理及术后面神经功能恢复情况。方法对38例因颞骨外伤致面瘫而行面神经减压手术的完整病例资料进行回顾性分析。28例乳突上鼓室径路,4例颅中窝径路,6例颅中窝-乳突联合径路,随访6～24个月,以House-Brackmann(H-B)分级法作为疗效评估标准。结果38例面神经功能均有不同程度恢复,47%恢复至H-BⅡ级以上,79%恢复至Ⅲ级以上;在伤后3个月内和受伤3个月后行减压手术者,功能恢复至H-BⅡ级以上分别为65%和28%,差异有统计学意义(P<0.01)。结论颞骨外伤伴面瘫患者,面神经减压是一种有效的治疗手段,手术应尽早实施,外伤后3个月内手术面神经功能恢复较好。

胆脂瘤型中耳炎并发面神经麻痹的临床诊治体会

目的探讨胆脂瘤型中耳炎并面瘫的手术处理及术后面神经功能恢复情况。方法回顾性分析该院1998年1月～2008年6月36例因胆脂瘤型中耳炎并面瘫而行面神经减压手术的完整病例资料,33例行开放式乳突根治术,3例行闭合式乳突根治术,随访2年,以House-Brackmann(H-B)分级法作为疗效评估标准。结果 34例面神经骨管不同程度破坏,大部分位于水平段(22例),锥曲段4例,垂直段3例,水平段与锥段同时受损4例,水平段、锥段、垂直段全部受损仅1例。36例面神经功能均有不同程度恢复,80%恢复至H-BⅡ级以上,92%恢复至Ⅲ级以上。结论胆脂瘤型中耳炎并面瘫,面神经减压是一种有效的治疗手段,手术应尽早实施,面瘫后1个月内手术面神经功能恢复较好。

人工耳蜗植入在大前庭水管综合征患者中的应用

目的探讨大前庭水管综合征患者人工耳蜗植入方法及手术前后听力评估和术后言语康复效果。方法回顾性分析2005~2008年于我科确诊的大前庭水管综合征22例行人工耳蜗植入患者的临床资料,所有患者均经乳突面隐窝进路行人工耳蜗植入,并将其中22例患者植入后听力情况与22例耳蜗发育正常的人工耳蜗植入者(对照组)进行比较。结果22例大前庭水管综合征患者有3例术中出现严重井喷,15例术中耳蜗钻孔后见外淋巴液出现不同程度的波动,异常情况共占81.8%,但术中电极完全插入耳蜗,术后无面瘫及脑脊液漏现象发生,术后听阈与耳蜗结构正常植入患者无明显区别。经过超过半年的言语康复训练,所有患者的听力及言语能力均有不同程度提高。结论人工耳蜗适用于大前庭水管综合征患者,术前应进行全面的听力学及影像学评估。

人工耳蜗植入在Mondini畸形患者中的应用

目的探讨Mondini畸形患者人工耳蜗植入术特点及术后言语康复效果。方法回顾性分析2000～2008年于我科确诊的12例Mondini畸形行人工耳蜗植入患者的临床资料,所有患者均经乳突面隐窝进路行人工耳蜗植入术,并将此12例患者植入后听力情况与另12例耳蜗发育正常的人工耳蜗植入者进行比较。结果 12例Mondini畸形患者中10例术中出现井喷,2例术中耳蜗钻孔后见外淋巴液出现不同程度的搏动,但术中电极植入顺利,术后无面瘫及脑脊液漏现象发生,术后听阈与耳蜗结构正常植入患者无明显区别。经过1年以上的言语康复训练,所有患者的听力及言语能力均有不同程度提高。结论人工耳蜗植入可以作为伴有Mondini畸形的双侧极重度感音性聋患者恢复听觉功能的手段。

鼓室硬化镫骨固定的手术疗效分析

目的分析不同手术方法治疗鼓室硬化镫骨固定的疗效。方法回顾性分析1992～2004年于我科手术且资料完整的鼓室硬化镫骨固定病例56例(62耳),按Wielinga分型Ⅲ型40耳;Ⅳ型22耳,其中镫骨撼动术15耳(Ⅲ型12耳、Ⅳ型3耳)、全人工听骨赝复物(tatolossicular replacement prosthesis,TORP)重建听骨链25耳(Ⅲ型16耳、Ⅳ型9耳)、自制Teflon小柱活塞型人工镫骨(Piston)重建听骨链22耳(Ⅲ型14耳、Ⅳ型8耳)。术后随访1～5年,分析患者言语频率(0.5、1、2kHz)平均纯音气导阈值及气骨导差,应用SPSS13.0软件包进行统计分析。结果鼓室硬化Ⅲ型、Ⅳ型患者术前言语频率平均纯音气导阈值及气骨导差差异无统计学意义(P>0.05);镫骨撼动组、TORP组、Piston组术前3组病例平均纯音气导阈值及气骨导差差异无统计学意义(P>0.05);术后1、3、5年3组病例平均纯音气导阈值及气骨导差差异有统计学意义(P<0.01);术后5年Piston组在纯音气导阈值及气骨导差方面疗效优于TORP组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论鼓室硬化镫骨固定无论锤、砧骨固定与否,最好去除锤骨头及砧骨,予人工听骨重建听骨链,镫骨足板造孔术是安全的,而且疗效稳定。

经鼻内镜手术治疗鼻腔鼻窦骨源性良性肿瘤——附14例报告

目的探讨经鼻内镜手术治疗鼻腔鼻窦骨源性肿瘤的可行性及手术技巧。方法回顾性分析1998年6月-2012年5月经鼻内镜手术治疗的14例鼻腔鼻窦骨源性肿瘤的临床资料。所有患者均于术前行鼻窦高分辨CT（HRCT）检查,确定肿瘤的位置和侵犯范围。手术均在全身麻醉下进行,经鼻内镜手术11例,鼻内镜辅助鼻外径路手术3例。其中行肿瘤彻底切除9例,部分切除5例。结果所有患者术后平均随访5年7个月。2例侵及眶内及前颅窝的骨化纤维瘤患者分别于术后2个月和8个月复发,接受第2次手术后1例病变基本控制,目前仍在随访中,另1例去外院接受了第3次鼻颅脑联合手术再复发,仍在观察中;1例骨母细胞瘤患者采用经鼻经额联合径路内镜手术,但侵入前颅窝相当于鸡冠处的肿瘤仍有残留,术后2年患者因左侧眶内及颅内肿物复发去外院行开颅手术后失访;其余患者随访至今未见复发。所有病例均未发生其他严重并发症。结论鼻腔鼻窦骨源性肿瘤局限于鼻腔鼻窦者经鼻内镜手术可彻底切除;但当肿瘤破坏颅底突入颅腔或肿瘤侵及颈内动脉、视神经等重要结构时,单纯内镜下肿瘤不易彻底切除,需多学科的联合手术或其他辅助治疗。

先天性内耳畸形患者人工耳蜗植入的临床体会

目的探讨先天性内耳畸形重度或极重度感音神经性聋患者人工耳蜗植入方法及术后言语康复效果。方法回顾性分析1998～2007年于我科行人工耳蜗植入295例患者的临床资料,其中前庭水管扩大25例,Modini畸形9例,共同腔畸形5例。所有患者均采用澳大利亚Nucleus24型人工耳蜗。对大前庭水管综合症患者,4例采用Nucleus 24R(ST)型植入体,8例采用Contuor型24R,10例采用Contuor Advance24R,其余病例均采用Nucleus24M型直电极植入体。结果25例大前庭水管综合征患者有3例术中出现井喷,15例术中耳蜗钻孔后见外淋巴液出现不同程度的波动;另有4例Mondini畸形及2例Common cavity畸形亦出现严重井喷,但所有内耳畸形患者术中电极插入均顺利,术后无面瘫及脑脊液漏现象发生,术后听阈与耳蜗结构正常植入患者无明显区别。经过半年以上的言语康复训练,所有患者的听力及言语能力均有不同程度提高。结论人工耳蜗适用于内耳畸形患者,但对耳蜗未发育或内听道听神经缺失患者除外,术前全面的听力学及影像学评估至关重要。

慢性化脓性中耳炎合并迷路瘘管诊治体会(附32例报告)

目的探讨慢性化脓性中耳炎并发迷路瘘管的临床特征及其手术治疗方法。方法回顾分析我科2000—2007年收治的32例(36耳)手术证实的慢性化脓性中耳炎伴迷路瘘管患者的临床资料。其中有眩晕史者24例(75.0%),诉耳鸣者28例(87.5%),瘘管试验阳性12例(37.5%)。对于小于2mm的骨性半规管瘘,在彻底清除病变后予肌筋膜覆盖。对瘘管大于2mm者,如迷路瘘管处病变难以清除,予保留一薄层胆脂瘤基质,行开放式乳突根治术;如能彻底清除病变者,予带筋膜的耳屏软骨片封闭瘘管,外面再覆盖一层肌筋膜。对瘘管破坏严重者,在彻底清除病变的同时行半规管阻塞术。22耳行开放式乳突根治术后I期行鼓室成形术,14耳行改良乳突根治术。结果胆脂瘤型28耳,骨疡型8耳;瘘管位于外半规管30耳(83.4%),上半规管3耳(8.4%),两者同时有瘘管1耳(2.7%),鼓岬部瘘管2耳(5.5%);面神经骨管破坏致神经裸露16例,3例位于垂直段,7例位于水平段,同时合并有面神经水平段或锥曲段骨管部分缺损6例。30例患者于术后1～12天内(平均3.5天)眩晕缓解。2例行半规管填塞者,术后16天眩晕逐渐缓解。术后纯音测听平均骨导阈值(0.5kHz、1kHz、2kHz和4kHz),12耳与术前相同,较术前下降10～20dB者16耳,较术前下降20dB以上者8耳。随访3月～6年,眩晕无复发。结论前庭症状存在与否,瘘管试验是否为阳性,以及影像学的改变等都不是术前确诊迷路瘘管的可靠指标,术中探查所见是确诊迷路瘘管最重要的依据。手术方法的选择及对瘘管区病变的处理应根据瘘管的部位、大小及患者听力状况和术者的手术经验而定。