尿石素B对骨髓来源巨噬细胞向破骨细胞分化的调控机制

背景:尿石素B在机体免疫应答中起重要调节作用,具备抗炎、抗氧化和抗癌的特性,并能抑制Raw 264.7细胞向破骨细胞分化,但其对于骨髓来源的巨噬细胞向破骨细胞分化的具体作用及机制尚未阐明。系统性研究破骨细胞过度活化的调控机制,有助于探索新的治疗靶点,筛选研发更安全、有效的治疗药物,为阻断破骨细胞过度活化提供新思路。目的:利用骨髓来源的巨噬细胞建立体外破骨细胞分化模型,探究尿石素B对核因子κB受体活化因子配体介导破骨细胞分化的影响,并系统性分析其作用机制。方法:(1)采用CCK-8法筛选尿石素B干预骨髓来源巨噬细胞的安全工作浓度;(2)用不同浓度(0,12.5,25,50μmol/L)尿石素B干预骨髓来源的巨噬细胞向破骨细胞分化,进行抗酒石酸酸性磷酸酶染色观察破骨细胞的数目及面积大小;(3)不同浓度(0,12.5,25,50μmol/L)尿石素B干预骨髓来源巨噬细胞的破骨分化,通过实时荧光定量PCR检测破骨特异性基因的相对表达水平;(4)蛋白印迹实验观察尿石素B对骨髓来源巨噬细胞P65、ERK信号通路的影响;(5)蛋白印迹实验检测尿石素B对骨髓来源巨噬细胞的破骨分化关键转录因子活化T细胞核因子1和c-Fos的影响。结果与结论:(1)50μmol/L及以下浓度的尿石素B对骨髓来源巨噬细胞的增殖无影响,能显著抑制骨髓来源巨噬细胞的破骨分化;(2)尿石素B主要在破骨形成前中期抑制骨髓来源巨噬细胞的破骨分化;(3)尿石素B可下调骨髓来源巨噬细胞中破骨特异性基因的相对表达水平;(4)50μmol/L的尿石素B抑制骨髓来源巨噬细胞的P65和ERK磷酸化水平,进而抑制破骨细胞形成;(5)50μmol/L的尿石素B抑制骨髓来源的巨噬细胞中破骨分化关键转录因子活化T细胞核因子1和c-Fos的表达;(6)提示尿石素B通过P65/ERK信号轴下调破骨关键转录因子活化T细胞核因子1、c-Fos的表达,抑制下游破骨特异性基因的表达,从而抑制骨髓来源的巨噬细胞向破骨细胞分化。

三种大鼠椎间盘细胞提取、鉴定及在单层和微团培养中的基质表达

背景:目前获得椎间盘原代细胞的方法大多较繁琐,且缺少同时提取纤维环、终板与髓核原代细胞的相关报道,因此找到同时提取3种细胞的方法十分关键。目的:探索一种同时提取并培养大鼠来源3种椎间盘细胞(纤维环、终板与髓核)的方法,对之进行鉴定并探究单层与微团培养对细胞外基质的影响。方法:取材自3周龄雄性SD大鼠椎间盘组织,从其中分离出软骨终板、髓核与纤维环组织。针对髓核及纤维环组织,先使用0.1%链酶蛋白酶E于37℃消化30 min,然后使用0.2%Ⅱ型胶原酶消化4 h来释放其中的细胞;针对终板组织,直接使用0.2%Ⅱ型胶原酶消化4 h来释放其中的细胞。将去除消化酶后的细胞接种于含有培养基的培养皿中,并观察细胞形态;通过实时定量荧光PCR与蛋白印迹实验检测各细胞标记物的表达水平;单层或微团培养大鼠原代纤维环细胞与软骨终板细胞,并采用阿尔新蓝与番红染色检测细胞外基质的表达能力。结果与结论:①3种椎间盘细胞均在培养4 d后开始贴附在皿底,并逐渐展现出增殖的活力;培养至第8天时,3种细胞增殖显著,形态均呈梭形,其中髓核细胞中存在多囊泡的脊索样细胞;②通过实时定量荧光PCR和/或蛋白免疫印迹实验发现原代髓核细胞中K19与Car3表达较高,原代纤维环细胞中Sparc与Bgn表达较高,原代软骨终板细胞中Pth1r与Lars2表达较高;③原代纤维环、软骨终板细胞微团培养后,经阿尔新蓝与番红染色证明这种培养方式相较于单层培养能够提高细胞外基质的表达能力;④结果表明,通过此次实验方法提取并培养获得的原代椎间盘细胞形态较好并具有较高的胞外基质表达水平,这一成果有望为科研人员提供一种新的科研工具,帮助科研人员更好地理解椎间盘生物学。

辛伐他汀对糖尿病脑梗死患者血清内皮素-1、一氧化氮、循环内皮细胞的影响及时效关系

目的观察不同给药时间的辛伐他汀对糖尿病脑梗死患者血清内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)、循环内皮细胞(CEC)的影响。方法采用随机对照研究,将入选的168例糖尿病脑梗死患者分为4组,对照A组给予安慰剂20 mg、每早1次,对照B组给予安慰剂20 mg、每晚1次,治疗A组给予辛伐他汀20 mg、每早1次,治疗B组给予辛伐他汀20 mg,每晚1次,总疗程24周,分别测定治疗前、后血清ET-1,NO,CEC的变化。结果与治疗前比较,对照A、对照B组血清ET-1,NO,CEC均无变化(P>0.05)。与治疗前比较,治疗A组、治疗B组血清ET-1水平均下降,且A组下降更明显(P<0.05);治疗A组、治疗B组血清NO水平均升高,且A组升高更明显(P<0.05);治疗A组、治疗B组血清CEC含量明显下降,且A组下降更明显(P<0.05)。结论辛伐他汀可调节糖尿病脑梗死患者血清ET-1,NO,CEC水平,且晨起服药效果优于晚间服药效果。

腹部推拿对非酒精性脂肪肝病患者脂联素及肿瘤坏死因子-α的影响

目的:研究血浆脂联素水平及血清肿瘤坏死因子-α含量与非酒精性脂肪肝的相关性,探讨腹部推拿对非酒精性脂肪肝病患者脂联素水平及肿瘤坏死因子-α含量的影响。方法:选择非酒精性脂肪肝患者97例作为研究对象,按随机数字表法随机分为治疗组与对照组。对照组患者在饮食、运动指导的基础上,加用水飞蓟宾葡甲胺片200 mg口服,每日3次,疗程共30 d。治疗组在饮食、运动指导的基础上,加用腹部推拿1次/d,疗程共30 d。治疗前后测定血浆脂联素水平及血清肿瘤坏死因子-α含量。结果:与对照组相比,治疗组血浆脂联素水平升高明显,两组比较差异有显著性(P<0.05);与对照组相比,治疗组血清肿瘤坏死因子-α含量下降明显,两组比较差异有显著性(P<0.05);结论:腹部推拿治疗非酒精性脂肪肝病有效,可能是通过升高血浆脂联素、降低血清肿瘤坏死因子-α含量实现的。

辛伐他汀对糖尿病脑梗死患者糖化血红蛋白、血管内皮功能的影响及时效关系

目的观察不同给药时间的辛伐他汀对糖尿病脑梗死患者糖化血红蛋白、血管内皮功能的影响。方法将入选糖尿病脑梗死患者168例随机分为4组,对照A组给予安慰剂20 mg,每早1次,对照B组给予安慰剂20 mg,每晚1次,治疗A组给予辛伐他汀20 mg,每早1次,治疗B组给予辛伐他汀20 mg,每晚1次,总疗程24周,分别测定治疗前、后肱动脉血流介导舒张功能及糖化血红蛋白的变化。结果与治疗前比较,对照A、B 2组肱动脉内径、血管内皮功能、糖化血红蛋白水平均无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05);与治疗前比较,治疗后A组、B组肱动脉内径均扩大,血管内皮功能改善,差异有统计学意义(P<0.01);A组、B组治疗后比较,A组肱动脉内径扩大及血管内皮功能改善优于B组,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,治疗后A组、B组糖化血红蛋白水平有升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论辛伐他汀具有改善血管内皮功能的作用,且晨起服药效果优于晚间服药效果,同时长期服用辛伐他汀可能影响糖尿病患者血糖控制水平。

泄浊解毒方对溃疡性结肠炎大鼠TLR2/IκB-α/IL-1β信号通路的影响

目的:观察泄浊解毒方对溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠TLR2/IκB-α/IL-1β信号通路的影响。方法:将大鼠随机分为正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组、泄浊解毒方小剂量组、泄浊解毒方大剂量组,除正常组外其余各组小鼠采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇混合溶液灌肠复制溃疡性结肠炎大鼠模型,观察经药物处理后各组大鼠结肠组织TLR2、IκB-α和血清IL-1β的表达。结果:泄浊解毒方可明显减少UC模型大鼠结肠组织TLR2、IκB-α和血清IL-1β的表达。结论:泄浊解毒方对大鼠溃疡性结肠炎有良好的治疗作用,其作用机制可能与调节TLR2/IκB-α/IL-1β信号通路有关。

从气机升降学说探究胃癌前病变的炎性微环境

胃癌前病变(PLGC)是指慢性萎缩性胃炎伴不完全型肠上皮化生和中重度不典型增生,其发生、发展与其炎性微环境密切相关。而中医学痰、浊、瘀、毒是人体内环境重要的代谢产物,也是人体的最终致病因素,影响着人体气机的升降出入。因而,探讨气机的升降出入与PLGC的炎性微环境的相关性并得出相应的治则,可为PLGC的基础研究及临床治疗提供新思路。

腹部推拿治疗非酒精性脂肪肝疗效分析

目的:观察腹部推拿治疗非酒精性脂肪肝的疗效。方法:随机选取100例非酒精性脂肪肝患者,54例为治疗组,46例为对照组。对照组在饮食、运动调理的基础上,加用护肝药物治疗。治疗组在饮食、运动调理的基础上加用腹部推拿治疗。结果:治疗组显效率和总有效率均优于对照组(P<0.05)。结论:使用腹部推拿治疗有助于提高非酒精性脂肪肝的临床疗效,且无不良反应,安全性高。

通利三焦针法联合血府逐瘀汤治疗失眠67例临床观察

失眠为临床常见病、多发病，随着现代社会各种压力的剧增及老龄化趋势的加速，该病发病率呈明显上升趋势，严重危害人类健康［1］。探索失眠的成因及寻找有效的治疗手段成为目前临床亟待解决的问题。2010-06-2012-08，我们采用通利三焦针法联合血府逐瘀汤治疗失眠67例，并与地西泮片治疗53例对照观察，结果如下。

泄浊解毒方对溃疡性结肠炎模型大鼠结肠黏膜Toll样受体蛋白的影响

目的:观察泄浊解毒方对溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠结肠黏膜Toll样受体(TLR)蛋白的影响。方法:采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇混合溶液灌肠复制溃疡性结肠炎大鼠模型。实验设正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组和泄浊解毒方小、大剂量组,分别处理与给药后,观察各组大鼠结肠组织TLR2、TLR4蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠TLR2、TLR4均显著升高;与模型组比较,泄浊解毒方各剂量组和柳氮磺胺吡啶组TLR2、TLR4明显降低;而泄浊解毒方大剂量组TLR2、TLR4蛋白表达,泄浊解毒方小剂量组TLR2蛋白表达亦明显低于柳氮磺胺吡啶组。结论:泄浊解毒方对大鼠溃疡性结肠炎有良好的治疗作用,其作用机制可能与调节Toll样受体蛋白有关。

农村高中学生数学合作学习的现状调查

1问题提出普通高中《数学课程标准（实验）》中多处论及合作学习,如（1）课程基本理念中强调,倡导积极主动、勇于探索的学习方式：学生的数学学习活动不应只限于接受、记忆、模仿和练习,高中数学课程还应倡导自主探索、动手实践、合作交流、阅读自学等学习数学的方式.（2）教学建议中强调,教学中应鼓励学生积极参与教学活动,包括思维的参与和行为的参与.既要有教师的讲授和指导,也要有学生的自主探索与合作交流.

膀胱内血块误诊为肿瘤1例

患者,女性,31岁.因血尿、尿痛3天来院就诊.3天前无明显诱因出现全程肉眼血尿,并见血块,伴有尿痛,无发热、腰痛及膀胱刺激征.妇检:下腹部压痛明显,耻骨上方触及一如孕3月子宫大小包块.B超检查:

泄浊解毒方对溃疡性结肠炎大鼠Toll样受体4/核因子-κB信号通路的影响

目的:观察泄浊解毒方对溃疡性结肠炎大鼠Toll样受体4/核因子-κB信号通路的影响并探讨其作用机制。方法:实验设正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组、泄浊解毒方小剂量组、泄浊解毒方大剂量组,除正常组外采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇混合溶液灌肠复制溃疡性结肠炎大鼠模型,灌服相应药物后后观察各组大鼠结肠组织Toll样受体4及核因子-κB表达。结果:泄浊解毒方各剂量组大鼠Toll样受体4及核因子-κB表达均明显低于模型组;泄浊解毒方大剂量组Toll样受体4及核因子-κB表达明显低于柳氮磺胺吡啶组。结论:泄浊解毒方对大鼠溃疡性结肠炎有良好的治疗作用,其作用机制可能与调节Toll样受体4/核因子-κB信号通路有关。

泄浊解毒方对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织NF-κBp65及ICAM-1表达的影响

目的观察泄浊解毒方对溃疡性结肠炎大鼠NF-κBp65及ICAM-1的影响并探讨其作用机制。方法2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)/乙醇混合溶液灌肠制备溃疡性结肠炎大鼠模型,实验设空白组、模型组、柳氮磺胺吡啶组、中药泄浊解毒方低、高剂量组;观察大鼠结肠病理形态学改变及CMDI评分,运用免疫组化染色(SP法)检测NF-κBp65、ICAM-1表达。结果泄浊解毒方能明显降低大鼠结肠CMDI评分,降低NF-κBp65、ICAM-1的表达。结论泄浊解毒方对大鼠溃疡性结肠炎有良好的治疗作用,其作用机制可能与降低NF-κBp65与ICAM-1的表达有关。

糖尿病并发急性脑梗死患者他汀类药物依从性影响因素分析

目的探讨糖尿病并发急性脑梗死患者服用他汀类药物依从性的影响因素。方法自制调查问卷,对玉田县医院168例糖尿病并发急性脑梗死患者2年内服用他汀类药物依从性进行调查。结果服药依从性佳者占24.05%,服药依从性差者占68.75%;在单因素中,年龄、文化程度、药物相关知识、自我保健意识、经济原因、用药监督、病程均影响服药依从性,差异有统计学意义(P<0.05)。结论糖尿病并发急性脑梗死患者服用他汀类药物依从性偏低,与多种因素有关,应针对其影响因素进行相关的健康指导,提高服药依从性,减少并发症。

辛伐他汀联合阿司匹林治疗脑梗死96例

目的观察辛伐他汀联合阿司匹林治疗脑梗死的疗效及安全性。方法选取2013年1月至2014年3月收治的191例脑梗死患者,随机分为观察组(96例)和对照组(95例)。观察组采用辛伐他汀联合阿司匹林治疗,对照组仅采用阿司匹林治疗。结果两组患者治疗1年后美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分均较急性期结束时明显降低,观察组急性期结束时为(11.14±1.25)分,治疗12个月后为(4.99±1.38)分(u=32.362,P<0.001);对照组分别为(10.88±1.44)分和(7.88±0.98)分(u=16.787,P<0.001),观察组治疗后NIHSS评分明显低于对照组(u=16.700,P<0.001);观察组12个月内脑梗死复发率为10.42%,明显低于对照组的21.05%(χ2=4.080,P=0.043),脑梗死复发严重程度轻于对照组(Z=-2.032,P=0.042);观察组患者不良反应发生率为1.04%,对照组为1.05%,组间差异无统计学意义(P=1.000)。结论患者脑梗死发生后,应用辛伐他汀联合阿司匹林治疗方案较单用阿司匹林可进一步促进神经功能缺损恢复,降低脑梗死复发率,同时无明显不良反应,是一种安全有效的治疗方法。

借助高考试题 培养换元思想

突出思想方法的考查历来是数学高考的一大特色，《考试说明（数学）》中明确指出：数学思想和方法的考查是对数学知识在更高层次上抽象和概括的考查，考查时必须要与数学知识相结合，通过数学知识的考查，反映考生对数学思想和方法的理解．本文试就2010年各地高考试题，分析数学换元思想及方法的运用，以培养数学教与学过程中的换元思想，提高数学教与学的效益，真正实施有效教学．

倒序叠加法在数学解题中的运用

这种求和方法通常称为“倒序叠加法”，其不仅在与等差数列相关的问题中有巧妙的运用，而且在高中数学的很多解题中都有不俗的表现．

辛伐他汀治疗糖尿病并发急性脑梗死的疗效及安全性分析

目的探讨糖尿病并发急性脑梗死患者服用不同剂量辛伐他汀的治疗效果及安全性。方法 168例糖尿病并发急性脑梗死患者,随机给予3种不同剂量辛伐他汀,即小剂量组(10 mg/d)、一般剂量组(20 mg/d)、大剂量组(40 mg/d)治疗24周,比较各组疗效和不良反应(ADR)。结果不同剂量的辛伐他汀均可改善糖尿病并发急性脑梗死患者神经功能评分,且一般剂量组及大剂量组明显优于小剂量组(P<0.05)。治疗期间,总ADR发生率为16.7%,以胃肠道反应、转氨酶增高、肌痛为主,ADR发生率随剂量增大而增加,在不同剂量间差异有统计学意义(P=0.021)。结论辛伐他汀治疗糖尿病并发急性脑梗死效果肯定,但随服用剂量的增加,随剂量的增大,ADR发生率升高,但多数症状轻微,临床中应根据病情适量使用更安全。

颈动脉粥样硬化的发生率及其危险因素

目的 探讨颈动脉粥样硬化的发生率及其与危险因素的关系。方法 以 340例年龄在 2 9～ 90岁的患者为研究对象 ,采用彩色多普勒超声仪检测颅外段颈动脉 ,并与多项相关的因素进行对比分析。结果 颈动脉粥样硬化的检出率为5 8.2 %,颈动脉粥样硬化组高血压病、缺血性脑血管病、糖尿病的发生率高于非硬化组 ,年龄、收缩压、载脂蛋白B、血浆黏度、红细胞聚集指数亦高于非硬化组 ,颈动脉粥样硬化与吸烟、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、C -反应蛋白水平无显著相关。结论 颈动脉粥样硬化的患病率较高 ,年龄、高血压是主要的危险因素。