氨基酸微量元素螯合物对草鱼肝脏和肠道健康的影响

为研究饲料中氨基酸微量元素螯合物(铁、锰、铜、锌)对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝脏和肠道健康的影响。共设置6组等氮(30%)、等脂(4.7%)实验饲料,对照组(CON)为不添加铁、锰、铜、锌4种微量元素的基础饲料,在对照组配方基础上添加无机铁(50 mg/kg)、铜(2 mg/kg)、锰(10 mg/kg)、锌(40 mg/kg)制成IT100组,用氨基酸微量元素螯合物以25%(OT25组)、50%(OT50组)、75%(OT75组)和100%(OT100组)的比例替代IT100组中无机微量元素,投喂初始体质量(40.05±0.05) g的草鱼8周。研究显示,与对照组相比,饲料中添加无机微量元素和氨基酸微量元素螯合物显著提高了草鱼肝脏的谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、微量还原型谷胱甘肽(GSH)和总超氧化物歧化酶(SOD)活性,降低了丙二醛含量(P<0.05)。OT100组显著提高了过氧化氢酶(CAT)活性,且OT75组和OT100组GPx活性和GSH含量显著高于IT100组(P<0.05)。与对照组相比,各组草鱼的肝细胞形态和肝血窦丰度趋于正常。与对照组相比,除OT25组外,其余各组的肠道绒毛高度和杯状细胞数量显著提高,且OT75和OT100组显著高于IT100组。无机微量元素和氨基酸微量元素螯合物降低了草鱼肠道细胞因子白介素-6(il-6)和白介素-1β(il-1β)基因表达量,提高了肠道紧密连接蛋白闭锁小带蛋白-2(zo-2)和claudin12基因表达量。OT75组显著提高了zo-1和occludin基因表达量,且OT75组il-1β基因表达量显著低于IT100组。综上所述,无机微量元素和氨基酸微量元素螯合物均可显著改善草鱼肠道和肝脏健康,75%氨基酸微量元素螯合物的作用效果显著优于无机微量元素。

氨基酸微量元素螯合物对草鱼生长性能、血清生化指标及微量元素沉积的影响

为研究饲料中添加氨基酸微量元素螯合物对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)生长性能、微量元素沉积及血清生化指标的影响,本试验以初始体重为(40.05±0.05)g的草鱼为研究对象,共计720尾随机分为6组,对照组(CON组)饲喂不添加微量元素的基础饲料,无机微量元素添加组(IT100组)饲喂在基础饲料中添加草鱼微量元素需要量的100%无机微量元素铜、铁、锌、锰的试验饲料,氨基酸微量元素螯合物添加组(OT25组、OT50组、OT75组和OT100组)饲喂以25%、50%、75%和100%氨基酸微量元素螯合物等比例替代IT100组饲料中无机微量元素的试验饲料,每组3个重复,每个重复40尾鱼,养殖8周。结果表明:1)不同组之间草鱼的存活率、肥满度、肝体比和脏体比没有显著差异(P>0.05)。与CON组相比,IT100组、OT75组增重率显著升高(P<0.05),而饲料系数的变化趋势则与之相反,OT50组和OT75组显著降低(P<0.05)。2)与CON组相比,IT100组、OT50组、OT75组、OT100组肠道胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性均显著升高(P<0.05),OT25组肠道的淀粉酶活性显著升高(P<0.05)。3)根据草鱼脊椎骨微量元素沉积量的二次回归方程,氨基酸微量元素螯合物内元素分别在添加水平为铜67.53%、铁58.22%、锌58.68%、锰56.07%时到达100%无机微量元素效价。4)与CON组相比,IT100组的血清中总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、尿素氮含量及谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性显著降低(P<0.05),血清补体3、高密度脂蛋白胆固醇含量和碱性磷酸酶活显著降低(P<0.05)。与CON组比较,OT各组血清甘油三酯含量均显著降低(P<0.05),OT100组血清总胆固醇、尿素氮含量及谷丙转氨酶活性显著降低(P<0.05),OT75组和OT100组血清低密度脂蛋白胆固醇含量和谷草转氨酶活性显著降低(P<0.05),OT100组血清碱性磷酸酶活性显著上升(P<0.05)。综上所述,饲料中添加适宜比例的氨基酸微量元素螯合物能提高草鱼生长性能、营养消化吸收和脊椎骨内微量元素沉积,其中75%的氨基酸微量元素螯合物替代比例为最适替代比例。

低鱼粉饲料中添加酶解鱼小肽对牛蛙蝌蚪生长、变态、肝脏代谢及抗氧化能力的影响

本试验旨在低鱼粉饲料中添加酶解鱼小肽,研究其对牛蛙蝌蚪生长、变态、肝脏代谢及抗氧化能力的影响。试验挑选4800尾初始体重为0.04 g左右的牛蛙蝌蚪,随机分成5组,每组3个重复,每个重复320尾牛蛙蝌蚪,分别饲喂5种不同的等氮等脂饲料,其中以15%鱼粉饲料(FM15组)为对照,另设置2个不同鱼粉水平饲料,鱼粉水平分别为10%、5%,并在每个鱼粉水平饲料中分别添加2.5%和5.0%酶解鱼小肽,分别记为F10E2.5、F10E5、F5E2.5、F5E5组,试验投喂持续65 d。结果显示:1)与FM15组相比,低鱼粉水平饲料中添加酶解鱼小肽均能提高蝌蚪的变态率和存活率,其中F10E5组牛蛙蝌蚪变态率显著提高(P<0.05)。2)与FM15组相比,除F5E2.5组外其余3组肠道脂肪酶活性均显著提高(P<0.05)。3)与FM15组相比,饲料中添加酶解鱼小肽均能显著提高肠道超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.05),此外F10E5组肠道谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性及谷胱甘肽(GSH)含量显著提高(P<0.05)。4)与FM15组比,饲料中添加酶解鱼小肽均能显著提升肠道磺基转移酶(SULT)基因相对表达量(P<0.05),此外F10E5组肠道CAT、SOD及谷胱甘肽S-转移酶(GST)基因相对表达量显著提升(P<0.05)。5)除F5E5组外,饲料中添加酶解鱼小肽均能改善肝细胞空泡化。6)与FM15组相比,饲料中添加酶解鱼小肽均能显著提高肝脏谷草转氨酶与酸性磷酸酶活性(P<0.05),此外添加5.0%酶解鱼小肽后肝脏谷丙转氨酶活性均显著提高(P<0.05)。综上所述,饲料中添加10%鱼粉和5.0%酶解鱼小肽(F10E5)能够在不影响生长的情况下,提高牛蛙蝌蚪变态率、存活率及抗氧化能力。

发酵饲料对牛蛙生长性能、肌肉营养成分及肠道菌群的影响

为研究投喂不同比例发酵饲料对牛蛙的生长性能、肌肉营养成分及肠道菌群的影响,将960只初始体重为(46.98±0.05)g的牛蛙随机分为4组,每组3个重复,每个重复80只牛蛙。4组牛蛙使用4种饲料进行投喂,具体为100%基础饲料(F1组)、75%基础饲料+25%发酵饲料(F2组)、50%基础饲料+50%发酵饲料(F3组)和100%发酵饲料(F4组)。牛蛙在网箱微流水中养殖,每日投喂2次(08:00、16:00),每日定量投喂牛蛙体重的2%~3%,投喂饲料重以干物质计算,每周依据体重及摄食情况调整投饵量,试验持续8周。结果显示:1)与F1组相比,3个发酵饲料组(F2、F3、F4组)牛蛙终末重和增重率显著增加(P<0.05),饲料系数显著降低(P<0.05);高发酵饲料组(F3、F4组)牛蛙存活率显著提高(P<0.05)。2)相较于F1组,F3、F4组牛蛙肠道脂肪酶(LPS)、淀粉酶(AMS)活性显著上升(P<0.05)。3)与F1组相比,F4组牛蛙肌肉粗蛋白质含量及必需氨基酸、非必需氨基酸、风味氨基酸、氨基酸总量均显著增加(P<0.05)。4)随着发酵饲料添加量的增加,牛蛙血清中碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和总抗氧化能力(T-AOC)呈现先上升再下降的趋势,丙二醛(MDA)含量则先下降后上升,极值均出现在F3组,且上述指标F3组与F1组之间均存在显著差异(P<0.05)。5)发酵饲料对牛蛙肠道菌群的丰富度与多样性均有影响,其中,F3组变形菌门相对丰度显著低于其他组(P<0.05),而梭杆菌门相对丰度则显著高于其他组(P<0.05)。由此可得,在本试验条件下,50%基础饲料和50%发酵饲料为最适配比,能有效提高牛蛙的生长性能,改善其肌肉品质,增强机体免疫力和抗氧化能力,且对牛蛙肠道菌群结构及稳态平衡具有正向调控作用。

转人-α-干扰素基因草鱼饲喂大鼠的安全性研究

为研究转人 -α-干扰素基因草鱼的食用安全性 ,以转人 -α干扰素基因草鱼肉糜饲喂大鼠 ,在 30 d内对试验鼠进行了临床观察 .试验结束时 ,对试验鼠进行了血液学检测、解剖学观察和组织学检查 .结果表明 ,饲喂转人 -α干扰素基因草鱼肉糜的大鼠临床表现正常 ,血液学指标。

重组Hu-IFN-α基因在草鱼中的整合和表达

采用显微注射法将人α干扰素(HuIFNα)重组基因转入草鱼Ⅰ～Ⅱ细胞期的受精卵,然后对转化培育出的草鱼个体提取血液总DNA进行PCR和Southern杂交检测及ELISA检测,以研究重组基因在受体基因组上的整合和表达情况。实验结果显示:HuIFNα重组基因能整合在草鱼基因组上,但其整合是随机的,整合位点没有固定区域,而且整合在受体草鱼基因组上的HuIFNα基因的表达率较低,表达水平在个体间有很大差异。大部分转基因个体外源基因表达水平集中在39～74pg/mL之间,表达最高个体HuIFNα浓度为1450pg/mL。

水产养殖专业综合实习平台改革对大学生能力提高效果初探

实践教学是高校应用型人才培养中的重要内容,而水产养殖专业综合实习平台改革,即校内外实践平台综合创新体系构建将整合学校、企业及社会众多资源,为培养优秀创新性应用型人才奠定基础,湖南农业大学水产养殖专业在校内外实践平台综合创新体系的构建中,在其制度体系、课程体系、教学指导团队体系、基地体系、科研创新实践体系以及考核评价体系的构建等方面开展了一些有益探索,并取得一些初步的效果,学生的专业技能、创新意识得到加强;学习积极性提高;就业和创业观念不断更新,适应社会的能力加强,社会和企业对毕业学生的认可和满意度高;学生的综合素质提高得以初步显现。

赤眼鳟TRAF6基因的cDNA克隆及其应对GCRV的免疫表达特性

为研究赤眼鳟(Squaliobarbus curriculus)肿瘤坏死因子受体相关因子6基因的结构特性及其应对GCRV的免疫表达特性,采用RACE技术获得了赤眼鳟TRAF6基因的cDNA全长(共2 621 bp),其中包含5′端非编码区50 bp,开放阅读框1 629 bp,3′端非编码区942 bp;该基因编码542个氨基酸,推导的蛋白质相对分子质量为61670,理论等电点为6.01。SMART结构分析结果显示,TRAF6基因编码的蛋白包含1个RING结构域、2个锌指结构域、1个螺旋卷曲结构域和1个MATH结构域。系统进化树分析结果表明,赤眼鳟TRAF6与团头鲂TRAF6的亲缘关系最近。实时荧光定量PCR结果显示,TRAF6在赤眼鳟的12种组织中均有表达,其中在肝脏中的表达量最高,在中肠中的表达量最低;经GCRV感染后,赤眼鳟脾脏和头肾中TRAF6均呈波动上调趋势,在24 h达到峰值,表明TRAF6参与了赤眼鳟抗GCRV的免疫应答反应。

麦瑞加拉鲮与露斯塔野鲮生物学特性的比较研究

使用传统的形态学测定方法对麦瑞加拉鲮鱼简称麦鲮可数可量性状进行测定,并采用饲养实验与调查研究相结合的方法对其形态特征、生长习性、食性、繁殖等生物学特性进行了初步研究,旨在为麦鲮鱼的进一步研究和推广提供一定的科学依据。结果表明:麦鲮与露斯塔野鲮有一定的种群差别,但其生长快、食性杂等生物学特性使其在池塘养殖增添混养品种和提高经济效益方面具有极大的推广前景。

“中科三号”异育银鲫肝胆综合症治疗一例

一、基本情况2011年7月11日起,湖南省益阳市大通湖区沙堡洲天泓渔业股份有限公司千亩湖养殖基地陆续出现＂中科三号＂异育银鲫大量死亡现象,经现场诊断与解剖化验确认为异育银鲫肝胆综合症。通过连续和及时治疗,在对症用药下,病情第2天就得到了有效控制。

水温对虹鳟血液学指标影响的初步研究

采用显微记数法和使用日立7170A全自动生化分析仪及贝克曼CX-3电解质分析仪,检测水温14℃、19℃和23℃时虹鳟血液红细胞数量和血清有机成分与无机微量元素的含量或活性。结果表明:水温14—23℃范围内,虹鳟红细胞数量随水温上升急剧减少;血清中谷丙转氨酶活性随水温上升而升高,谷草转氨酶活性随水温上升先升高后降低;血清中总蛋白、球蛋白含量随水温上升而增加,白蛋白、血糖和总胆固醇含量随水温上升先增加后减少,甘油三酯含量随水温上升而减少;血清中铜元素含量变化比率大,钾、磷、钙、镁、钠、氯、铁元素含量变化不显著。分析了虹鳟在温水环境中生化因子变化规律,为冷水性鱼类虹鳟温水驯化和基因工程技术提供可借鉴的技术资料。

典型养殖湖泊大通湖软体动物的时空分布格局

研究于2008年12月至2009年10月按季度对大通湖水质及软体动物资源监测,并通过纵向比较,探讨了集约化养殖对大通湖水域环境及软体动物群落的影响,以期为其渔业可持续发展提供理论依据。结果显示,大通湖水质全年呈碱性(8.62±0.07),具有较高的还原性[(?88.40±9.10)mv],属富营养水体。软体动物共计5科15种,梨形环棱螺(Bellamya purificata)、河蚬(Corbicula fluminea)和圆顶珠蚌(Unio doug lasiae)是主要优势种。软体动物平均密度和生物量具有明显的时空差异,时间上呈现由春夏季到秋冬季逐渐升高的趋势,空间上整体呈现由东北向西南逐渐递减的趋势。典范对应分析表明氧化还原电位、pH、溶氧、水深、电导率和水温与大通湖软体动物时空变化的关系最显著。与1960年相比,大通湖水体碱性显著增强(7.0—7.5 vs 8.4—8.8),电导率增加了9倍(0.25—0.27 vs 2.17—2.56 mS/cm),环境类型由氧化型转变为还原型。湖区喜好水草(白旋螺、光亮隔扁螺、萝卜螺)与流水生境(德氏狭口螺、湖沼股蛤、橄榄蛏蚌)的物种消失,软体动物优势种群呈现由双壳类向腹足类演替的特征。生境破坏和过度捕捞是大通湖软体动物资源面临的最大威胁,也是湖区渔业可持续发展所面临的核心问题。

人α-干扰素基因在转基因草鱼中的表达

为提高草鱼对出血病的抗性 ,采用显微注射法 ,将克隆在鲤 β-肌动蛋白基因启动子下游的人 α-干扰素基因转移到草鱼受精卵中 ,获得了大量转基因个体 .抽取转基因鱼血浆 ,以酶联免疫吸附法检测了转基因草鱼中人α-干扰素基因的表达情况 .从 6 72尾转基因草鱼中检测出 15 8尾有 α-干扰素的表达 ,阳性率为 2 3.5 1% ,其中表达水平最高个体血浆中α-干扰素质量浓度为 145 0 pg/ m L .

脆肉鲩肌肉营养特性分析

采用生化分析方法对来自同一个养殖场的脆肉鲩和普通草鱼的肌肉营养成分 (水分、粗蛋白质、粗脂肪、粗灰分、氨基酸、钙和磷 )进行分析。通过与其他鱼类的营养成分比较 ,评估了脆肉鲩的营养价值。结果表明 :脆肉鲩和普通草鱼肌肉中的营养成分在组成上是一致的。在含量上存在着差异 ,脆肉鲩肌肉粗蛋白质含量比普通草鱼肌肉高 2 2 % ;粗脂肪含量是普通草鱼的 14 0 % ;氨基酸总量比普通草鱼、黄鳝、鳜鱼、黄颡鱼、万安玻璃红鲤、青鱼和团头鲂都要高 ,其中谷氨酸含量更是达到 3 93% ,远远超过对照组鱼类。

大鲵细菌性败血症病原分离及生物学特性研究

利用湖南润孚生物工程公司大鲵人工养殖场10尾具有典型症状的患病大鲵,从体表病灶和体内器官肠、胃、肝、脾、肾等共分离得到9株细菌。通过人工感染试验、细菌形态观察和生理生化实验对其进行鉴定,结果显示引起该养殖场大鲵发病的病原为嗜水气单胞菌。通过回归感染试验发现,其中一菌株对大鲵的致病力很强,死亡率达到100%。药物敏感性试验结果显示,菌株对环丙沙星、头孢曲松、头孢他啶、头孢孟多、头孢哌酮、庆大霉素、头孢西丁药物相对比较敏感,而对克林霉素、头孢唑林、甲硝唑和复方新诺明具有耐药性。

转Hu-IFN-α基因草鱼的分子验证及抗性研究

采用显微注射法将人α-干扰素抗病基因转移到草鱼受精卵中 ,获得转基因群体 ,通过 PCR及 Southern杂交对转基因草鱼进行分子水平的检测 ,以进一步验证外源人α-干扰素是否整合入草鱼基因组 .结果表明 ,外源人α-干扰素抗病基因已整合入草鱼基因组中 .采用腹腔注射法 ,对转基因鱼进行草鱼出血病病毒接种攻毒试验 。

中国大鲵Dmrt基因DM结构域的克隆及序列分析

Dmrt基因家族是一个与性别决定相关的基因家族,该家族成员共有一个具有DNA结合能力的保守基序-DM结构域。为了进一步探讨该家族在系统进化中的保守性,本研究通过简并PCR技术,扩增并克隆了中国大鲵(An-drias davidianus)基因组中的DM结构域。序列分析显示,中国大鲵基因组中存在Dm rt基因的DM结构域。其核酸序列与猕猴、青鳉、人、小鼠、牛、热带爪蟾相应Dm rt基因DM结构域的相似性分别为91%、92%、92%、89%、91%、84%。其蛋白序列与上述物种的相似性均为91%,表现为4个氨基酸的变异,即第19、34、36和45位的精氨酸分别由半胱氨酸、谷胱酰胺、色氨酸和谷胱酰胺所取代。这些氨基酸的变化对其蛋白总体的三维构型没有显著影响。聚类分析结果表明,不同进化地位物种的Dm rt基因DM结构域编码序列存在高度的同源性,显示Dm rt基因在系统进化上的高度保守。

洞庭湖瓦氏黄颡鱼的形态与生长及繁殖特性

瓦氏黄颡鱼是一种长江流域广泛分布的小型经济鱼类 ,现已成为广大养殖者乐于接受的重要新兴养殖对象 .为探明其基础生物学特性 ,给养殖生产提供技术指导 ,采用基础生物学研究方法 ,对洞庭湖瓦氏黄颡鱼的外部形态、年龄和生长、繁殖力等生物学特性进行了初步研究 .结果表明 :洞庭湖瓦氏黄颡鱼鳍的特征为 D.2 ,6～ 7;A .2 0～ 2 6 ;P.1,7～ 9.其体长 (L,cm)和体重 (W,g)关系方程为 W=0 .0 4 1L2 .92 .生长方程为 :Lt=2 2 .76 [1-e- 0 .32 7( t+ 1 .1 94 ) ],Wt=378.3[1- e- 0 .32 7( t+ 1 .1 94 ) ]3,该鱼的绝对繁殖力为 5 76～ 8346粒 ,相对繁殖力平均为 6 1.6粒 / g.绝对繁殖力与体长的关系符合 F=5 .111L2 .6 1 7.

水产专业“学研产”实践教学模式的建立与应用

针对传统实践教学模式在学生创新能力与综合技能培养上的不足,结合新世纪水产专业人才培养要求,本试验较系统地建立并初步应用“学研产实践教学”模式,将专业实践教学内容重新分配到各教学环节。

西洞庭湖区养殖水体浮游植物调查与水质评价

于2008年8月对湖南省西洞庭湖区40个典型养殖水体的浮游植物和水质理化指标进行了调查与分析。结果表明,40个养殖水体中共发现浮游植物67属101种,优势种类为铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)、银灰平裂藻(Merismopedia glauca)、卷曲鱼腥藻(Anabaena circinalis)、水华鱼腥藻(Anabaena flos-aquae)、小席藻(Phormid-ium tenue)、十字藻(Crucigenia apiculata)、二形栅藻(Scenedesmus dimorphus)、四尾栅藻(Scenedesmus quadricauda)、集星藻(Actinastrum hantzschii)、卵形隐藻(Cryptomonas ovata)、羽纹脆杆藻(Fragilaria pinnata)、简单舟形藻(Navicula simplex)、尖针杆藻(Synedra acus)。浮游植物平均密度高达3.19×107个/L,变动范围9.46×104～1.32×109个/L。浮游植物密度与蓝藻密度存在良好的相关性,相关系数达到0.940(P<0.0001)。Shannon-Wiener多样性指数(H′)的变化范围为1.00～3.74。利用浮游植物细胞密度和多样性指数作为水体状况评价指标,初步评价表明,对于人工养殖水体而言,采用半精养模式的水体污染程度相对最轻。