鼻咽癌细胞系中核迁移蛋白的表达及作用

背景与目的:核迁移是真核生物生长发育和细胞功能所必需的,核迁移蛋白(nucleardistributionC,NUDC)在核迁移中起着重要作用。本研究旨在检测NUDC在鼻咽癌细胞系CNE-2、HNE-2中的表达情况,初步探讨其抗体对癌细胞活性的影响。方法:在大肠杆菌中表达GST-NUDC重组蛋白并制备其多克隆抗体,间接免疫荧光染色法明确NUDC蛋白在鼻咽癌细胞中的亚细胞定位,Westernblot确定NUDC蛋白在鼻咽癌细胞系中表达情况,MTT法检测NUDC抗体对鼻咽癌细胞生长的影响。结果:鼻咽非癌组织及鼻咽癌细胞中均有NUDC蛋白表达,且其在鼻咽癌细胞中的表达量明显高于鼻咽非癌组织。NUDC蛋白在鼻咽癌细胞中主要位于细胞质核区附近,细胞核也可见少量表达。NUDC蛋白抗体可抑制鼻咽癌细胞生长,且存在着剂量-反应关系。结论:NUDC蛋白在鼻咽癌细胞系中高度表达,且NUDC蛋白抗体在体外可抑制鼻咽癌细胞的生长。

抗氧化维生素对大鼠脂代谢及清道夫受体表达的影响

目的 : 观察不同水平的 VE、VC对 SD大鼠血脂代谢、脂质过氧化和清道夫受体( SR) m RNA表达的作用。方法 : 将诱导成高脂模型的 SD雄性大鼠分为 5个组 ,分别饲以含不同剂量的 VE( 1 5 0 mg/kg diet、35 0 mg/kg diet)、VC( 1 0 0 0 mg/kg diet、2 0 0 0 mg/kg diet)高脂饲料和阳性对照组 8w。结果 : VE组和 VC组低剂量均可降低血清中 TC、LDL- C、致动脉粥样硬化指数 ( AI)和 Apo- B及脂质过氧化物水平 ,并可升高 HDL- C、HDL - C/LDL- C,同时能抑制肺组织SR- m RNA的表达 ;而增高 VC剂量对上述指标无显著性作用。结论 : VE、VC能降低血清 TC与 LDL- C、抑制 LDL氧化和 SR- m RNA表达。

人核迁移蛋C刺激人造血干细胞增殖分化为巨核细胞研究

目的:研究人核迁移蛋C(hNUDC)促进人脐血来源的CD34+细胞增殖、分化为巨核细胞的作用。方法:使用DynalCD34体外分离系统收集人脐血CD34+细胞,无血清甲基纤维素半固体法体外培养CD34+细胞12d后,显微镜下观察hNUDC对CD34+细胞分化增殖为小、中、大巨核细胞集落的形态、数目的影响;无血清液体培养体系培养CD34+细胞10d后,流式细胞术检测hNUDC对CD34+细胞分化增殖为CD41+细胞的表达率及其DNA倍性的影响。结果:hNUDC能够明显促进CD34+细胞分化增殖形成中小型CFU-MK集落,可显著增加巨核细胞表面标志物CD41+的表达,CD41+细胞中DNA倍性显著地高于血小板生成素。结论:hNUDC对促进造血干细胞增殖和分化为巨核细胞具有重要作用。

人核迁移蛋白单克隆抗体的制备及其在人巨核细胞中的表达

目的:制备人核迁移蛋白(hNudC)的单克隆抗体(mAb)并鉴定其特性。方法:从人胎肝组织中克隆得到hNudC基因,构建重组表达质粒pET-28b/hNudC,表达带有6-His标记的重组hNudC,用纯化的重组hNudC蛋白免疫BALB/c小鼠制备mAb,用ELISA筛选抗体阳性的细胞克隆,用免疫荧光染色法及Western blot试验鉴定mAb的特异性。结果:获得2株杂交瘤细胞系2C16和2D8,其分泌的mAb的Ig亚类(型)分别为IgG1和IgM(κ),杂交瘤细胞培养上清的ELISA效价分别为1∶64和1∶32;腹水mAb的效价分别为1∶1×105和1∶5×104。mAb与重组hNudC蛋白有较强的特异性反应,免疫荧光染色和Western blot试验证明,制备的mAb可以识别人巨核系白血病细胞株Dami、Meg-01和人脐带血来源的CD41+巨核细胞中表达的hNudC蛋白。结论:成功地制备了特异性抗hNudC mAb,为研究hNudC蛋白的功能、天然分布及异常表达奠定了基础。

9例鼓室体副神经节瘤的临床及病理分析

【目的】总结鼓室体副神经节细胞瘤的临床及病理学特点,分析其误诊原因。【方法】分析检查9例鼓室副神经节瘤病例的临床表现、影像资料、病理切片、免疫组织化学检查。【结果】9例患者中,入院诊断为慢性中耳炎的为4例,误诊约为44.44%;表现有耳鸣及听力下降的均为88.89%(8/9);免疫组化分析嗜铬蛋白A(CgA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)均为阳性表达。【结论】鼓室体副神经节细胞瘤在临床上容易误诊,需综合分析临床特点、充分利用辅助检查方可提高诊断的诊断准确性;CgA、NSE表达可作为其免疫组化诊断的特异性标志。

特异性免疫治疗变应性鼻炎疗效的动态评估及其对哮喘的影响

【目的】探讨变应性鼻炎患者特异性免疫治疗(SIT)效果及其在防治支气管哮喘中的意义。【方法】对167例螨过敏的持续性变应性鼻炎患者,进行免疫治疗,检测各治疗时期患者血清总免疫球蛋白E(TIgE)、特异性免疫球蛋白E(SIgE)和嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)浓度,并评估其过敏症状的变化。【结果】变应性鼻炎特异性免疫治疗后症状改善(P<0.01);儿童变应性鼻炎SIT效果较成人好(P<0.01)。此外,观察期满3年的49例接受系统免疫治疗的患者与未系统治疗患者23例发现,前者继发哮喘的几率低于后者,两者比较差异有统计学意义(P<0.01);对合并有哮喘的AR患者经SIT后,哮喘症状体征有改善;患者血清TIgE、SIgE和ECP在SIT治疗后水平逐渐降低。【结论】对儿童变应性鼻炎患者有明确变应原者,免疫治疗应予以考虑;检测患者血清TIgE、SIgE和ECP可了解SIT的疗效;对变应性鼻炎进行SIT对防治哮喘有重要意义。

重组复合纤维对高脂血症大鼠脂代谢的影响

目的 : 研究不同剂量水平的重组复合纤维 ( AFC)对高脂血症大鼠脂代谢的影响 ,从分子水平探讨 AFC降脂机制 ,寻找安全剂量。方法 : 断乳 SD大鼠 60只 ,雌雄各半 ,经高脂饲料诱导成高脂血症模型后 ,按体重和血浆总胆固醇均衡的原则分为 5组 ,以高脂饲料和正常饲料为对照组 ,其余三组分别饲以不同水平 ( 5%、1 0 %、2 0 % )的重组复合纤维 ,观察重组复合纤维对大鼠血清、肝脏胆固醇及粪胆汁酸代谢的影响 ,应用半定量逆转录聚合酶链反应 ( RT- PCR)观察肝脏Apo- AI基因表达的情况。结果 : ( 1 ) 2 0 %的重组复合纤维可显著降低大鼠的体重 ;( 2 )不同剂量水平的重组复合纤维均可显著降低大鼠的血浆总胆固醇 ( TC)和肝脏胆固醇 ( LCH)水平 ,2 0 % AFC的作用最强 ;( 3)大鼠粪胆汁酸的含量与 AFC的剂量水平成反比例 ;( 4 )高剂量水平的重组复合纤维可显著促进肝脏 Apo- AI基因的表达 ,而低剂量水平的重组复合纤维不能刺激其表达。结论 : 各剂量水平的重组复合纤维均具有长期稳定的降脂效果 ,高剂量水平的重组复合纤维降脂作用最强。肝脏载脂蛋白 - AI基因表达增加可能是重组复合纤维降脂机制之一。

维生素E和β胡萝卜素对巨噬细胞氧化修饰低密度脂蛋白的影响

目的 : 研究维生素 E(VE)、β胡萝卜素 (βC)对巨噬细胞 (MΦ )介导的低密度脂蛋白 (LDL)氧化修饰能力的影响。方法 : 于培养成熟的 MΦ中分别加入不同剂量的 VE(40、1 0 0、2 0 0 μmol/L)和 βC(0 .5、1 .0、2 .0 μmol/L) 37℃孵育 2 4 h,通过测定培养物上清液中硫代巴比妥酸反应物 (TBARS)、荧光物质 (Lipofusin)、LDL电泳迁移率 (Rf)及共轭二烯 (Dienes)的形成 ,反映LDL的氧化修饰程度。结果 : 体外补充 VE可以显著降低培养物上清液中 TBARS、荧光物质以及共轭二烯的形成 ,明显抑制 LDL的电泳迁移率 ,随剂量增大作用加强 ;βC低剂量组 (0 .5μmol/L)可显著降低培养物上清液中 TBARS、荧光物质以及共轭二烯的形成 ,明显抑制 LDL的电泳迁移率 ,其余各组无明显影响。结论 : VE、βC均可抑制 MΦ介导 LDL氧化修饰的能力 ,并具一定的量效关系 ,提示在 MΦ氧化修饰 LDL的可调节因子中 。

优化复合膳食纤维对小鼠消化吸收作用研究

[目的]探讨优化复合膳食纤维产品对小鼠消化吸收的作用。[方法]将动物随机分为空白对照组、低、中、高剂量组4组,经口给予不同剂量的优化复合膳食纤维10d,每天测定各组体重增加量和进食量。10d后,测定食物利用系数、小肠推进率、小肠吸收等评价指标。[结果]各剂量组的小鼠体重与空白对照组相比略有减低,但差异无统计学意义;中、低浓度的优化复合膳食纤维能显著地促进小白鼠的摄食量、食物利用系数和吸收功能(P﹤0.05);高浓度的膳食纤维对小白鼠的摄食量、食物利用系数和吸收功能影响与对照组差异无统计学意义;各浓度的膳食纤维均可显著增加小白鼠的小肠推进率(P﹤0.05)。[结论]适当的浓度的优化复合膳食纤维产品能明显增强小白鼠的小肠吸收能力。

血小板CD62p在突发性聋治疗中的意义

目的 根据血小板细胞黏附分子CD6 2p的变化 ,为突发性聋患者的治疗提供有用的指标。方法 15 6例突发性聋患者血小板CD6 2p采用流式细胞仪测定 ,将血小板CD6 2p≥ 2 %患者分别施以基础治疗 (低分子右旋糖甙 +ATP +CoA +地塞米松 )和基础治疗 +溶栓 (巴曲酶 ) ,观察 2种方案的疗效 ,同样血小板CD6 2p <2 %患者亦施以两种治疗方案观察其疗效。结果 在血小板CD6 2p≥ 2 %组中 ,基础治疗有效率为 6 0 5 % ,基础治疗 +溶栓治疗的有效率为 84 6 % ,两者之间差异有显著性。而在血小板CD6 2p <2 %组中 ,基础治疗和基础治疗 +溶栓的有效率分别为 6 5 0 %、71 8% ,差异无显著性。结论 检测突发性聋患者CD6

重组复合纤维对高脂血症大鼠肝脏结构和消化道功能的长期影响

目的 为研究不同剂量水平的AFC对高脂血症大鼠肝脏结构和消化道功能的长期影响。方法 将断乳SD大鼠6 0只 ,经高脂饲料诱导成高脂模型后 ,按体重和血浆总胆固醇均衡的原则分为 5组 ,以高脂饲料和正常饲料为对照组 ,其余3组分别饲以不同水平 (5 %、10 %、2 0 % )的重组复合纤维(AFC) ,观察AFC对大鼠消化道功能以及肝脏的病理切片的影响。结果 各剂量组AFC均可显著降低大鼠的摄食 ;2 0 %剂量水平的AFC可增加粪重 ,而 5 %、10 %AFC却可减轻粪重 ;与高脂对照组相比 ,不同剂量水平的AFC均可显著降低大鼠血浆GPT、GOT水平 ;各组肝重均显著低于高脂对照组 ,并呈剂量 反应关系 ;2 0 %剂量水平的AFC可使小肠壁重量增加 ,而 5 %、10 %AFC可减轻小肠壁重量 ;2 0 %剂量水平的AFC可造成大鼠肝脏混浊肿胀和脂肪变性。结论 提示 ,长期摄入中低剂量的AFC对肝脏、消化道没有损伤 ;高剂量水平的AFC却对机体有一定的副作用。

中老年合唱团的嗓音调查与分析

目的调查中老年合唱团员的嗓音状况,探讨合唱对中老年人嗓音、心理、体格的影响。方法对88名中老年合唱团员进行喉部检查、最长发声时间测定、嗓音声学检测,随访三年,并将嗓音声学分析结果与嗓音正常的中青年组(对照组)对照分析。结果88名中老年合唱团员未检出明显喉部衰老征象;声时检测高于国内报导同龄人的声时参数,而与中青年对照组声时参数无显著性差异(P≥0.05);嗓音声学分析两组无显著性差异(P≥0.05),观察三年,累积出现轻度嗓音疲劳者4人(占4.55%),演唱水平有较明显提高。结论中老年合唱有利保持嗓音不衰,经过合理训练仍可提高歌唱水平,并能增进心理、体魄健康。

天眩清治疗眩晕、耳鸣的临床观察

目的 观察天眩清注射液对周围性眩晕、神经性耳鸣的治疗效果。方法 眩晕患者120例,耳鸣患者80例,各随机分为实验组及对照组,按观察项目、评定标准进行系列临床观察。结果 两实验组病例中,眩晕者总有效率93.3％,耳鸣者总有效率77.5％。结论 天眩清注射液对周围性眩晕、神经性耳鸣有显著疗效,为一种安全有效的制剂。

咽异感症的病因诊断

目的 对咽异感症患者进行全面的病因检查 ,以提高对此症的认识 ,减少误诊、漏诊。方法 对186例主诉咽异感症的患者进行认真的病史询问 ,系统地做咽喉部、邻近器官及相关的全身检查、治疗、观察 ,做出最后诊断。结果 186例患者中 ,病因为咽部炎性疾病占 61.3 % ,咽喉部肿瘤占 12 .4% ,邻近器官疾病占9.7% ,颈部疾病占 3 .2 % ,消化系统疾病占 5 .9% ,非器质性疾病占 7.5 %。结论 咽喉部感觉异常 ,常非单一疾病 ,而是多种疾病引起的咽喉症状 ,认真检查病因 。

组胺H4受体在变应性鼻炎中的表达及临床意义

【目的】探讨新型组胺H4受体(H4R)在变应性鼻炎(AR)中的表达及临床意义。【方法】变应性鼻炎(AR)组73例,正常对照(N)组30例,用Western蛋白印迹法(Westernblot)及实时定量荧光聚合酶链反应(Real-timePCR)检测两组对象外周血单个核细胞(PBMC)中H4R的蛋白及基因表达。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测AR组患者外周血血清白细胞介素4(IL-4)及白细胞介素12(IL-12)的含量,分析H4RmRNA表达含量与IL-4、IL-12以及二者比值的关系。【结果】AR患者PBMC中H4R的蛋白表达和mRNA表达都显著高于正常对照组。AR患者H4R的mRNA表达量与IL-4的表达呈正相关(r=0.71,P<0.01),与IL-12的表达呈负相关(r=-0.50,P<0.01),与IL-4/IL-12比值亦有显著的相关性(r=0.75,P<0.01)。【结论】H4R的表达与AR的发病有相关关系,AR患者H4R的表达升高可能参与了Th1/Th2平衡失调的免疫过程。

鼻息肉患者总IgE与嗜酸粒细胞阳离子蛋白分析

目的观察总 IgE(TIgE)与嗜酸粒细胞阳离子(ECP)在鼻息肉患者血浆与组织中的水平,探讨 IgE介导的 I 型变态反应在鼻息肉发生、发展和复发中的作用。方法采用 UniCAP-100E 免疫荧光定量分析系统,检测40例鼻息肉患者(实验组)及7例鼻中隔偏曲患者(对照组)的外周血与组织匀浆上清液中 TIgE 及 ECP 水平。结果鼻息肉患者组织匀浆上清液中 TIgE 和 ECP 水平明显高于对照组(P 均<0.01)和外周血(P 均<0.01);且鼻息肉患者组织上清液中的 TIgE 和 ECP(r=0.462)及外周血 TIgE 和 ECP(r=0.318)水平分别呈正相关。鼻息肉患者外周血中 TIgE 和 ECP 水平与对照组相比差异无显著性(P 均>0.05)。结论鼻息肉是以嗜酸性粒细胞浸润为特征的疾病过程,IgE 介导的 I 型变态反应在鼻息肉形成过程中发挥一定作用。

电子鼻咽喉镜在小儿心脏-声带综合征诊断中的应用

目的探讨电子鼻咽喉镜在小儿心脏-声带综合征诊断中的重要性和应用价值。方法应用电子鼻咽喉镜对63例伴有声音嘶哑、呛咳或呼吸困难的先天性心脏病(简称先心病)患儿进行检查。其中超声心动图检查显示室间隔缺损35例,动脉导管未闭8例,房间隔缺损2例,室间隔缺损并动脉导管未闭5例,室间隔缺损并房间隔缺损3例,室间隔缺损并主动脉缩窄3例,完全性肺静脉异位引流5例,右心室双出口并室间隔缺损2例。结果电子鼻咽喉镜检查结果显示,左侧声带麻痹53例(84.1%),右侧声带麻痹3例(4.8%),双侧声带麻痹7例(11.1%)。检查过程中无一例发生严重并发症。结论电子鼻咽喉镜为心脏-声带综合征的诊断、治疗、术后护理及预后判断提供了可靠依据,具有重要的临床意义。

晚期喉癌切缘组织流式细胞仪参数及PCNA表达的研究

目的:探索细胞增殖活性在晚期喉癌组织周围的变化规律,确定合理的晚期喉癌安全切缘。方法:用流式细胞仪及免疫组化检测晚期喉癌患者喉癌组织(A组)、癌旁0.5cm(B组)、1.0cm(C组)、2.0cm(D组)处组织细胞的DNA异质性、DNA含量、增殖指数及PCNA表达。结果:异倍体率:喉癌组织、0.5cm、1.0cm、2.0cm处组织分别为70.4％、14.8％、0、0。A与B组和B与C组间均有显著性差异;DI值:A、B、C对组分别为1.61±0.52、1.08±0.38、1.03±0.31、1.02±0.13,A与B组和B与C组间均有显著性差异;PI值(％)分别为26.06±6.73、12.27±3.78、11.37±2.86、11.01±1.92从组与B组间有显著性差异,但B组与C组、C组与D组间均无显著性差异;SPF值(％)分别为22.38±6.15、11.17±3.92、10.81±3.37、10.55±3.06,免疫组化PCNA指数(％)分别为67.8±12.25、12.76±4.36、11.33±3.25、10.89±3.13。结论:从晚期喉癌组织向周围正常组织移动过程中,肿瘤细胞的增殖指标、DNA含量逐渐趋向正常,于癌周0.5cm处接近正常,于1.0cm处基本正常;晚期喉癌旁0.5cm可作为手术的基本安全切缘,1.0cm可作为理想安全切缘。

对eIF4E与bFGF在喉鳞癌中表达的研究

目的 :通过检测eIF4E与bFGF在喉鳞癌 (LSCC)中的表达 ,探讨二者与喉鳞癌的关系及其相互之间的内在关系。方法 :采用免疫组织化学法检测 5 2例喉鳞癌组织 ,2 0例喉黏膜不典型增生组织 ,30例喉良性增生组织及 10例正常喉黏膜组织中eIF4E与bFGF基因蛋白的表达情况。结果 :免疫组织化学法结果示 :eIF4E与bFGF在喉鳞癌中表达的阳性率分别为 10 0 .0 %、82 .7% ,均显著高于对照组。bFGF的高表达与颈淋巴结转移相关。结论 :过度表达的eIF4E是喉鳞癌恶性改变及判断其恶性程度的一个分子标志 ;bFGF的过度表达与喉癌的生长、转移及恶性程度相关 ;二者在喉癌中的表达具有相关性 。