托吡酯对电点燃癫痫大鼠海马Caspase-3 mRNA表达的影响

目的观察托吡酯(TPM)对杏仁基底外侧核电点燃癫痫大鼠海马半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase-3)mRNA表达的影响.方法将双极电极插入大鼠左侧杏仁基底外侧核,给予慢性电刺激使大鼠达到点燃状态,观察其发作过程并记录脑电图.采用半定量RT-PCR法检测托吡酯治疗组和对照组电点燃大鼠海马组织的Caspase-3 mRNA表达.结果大鼠平均(13.50±3.99)次刺激达到点燃,记录到后发放时程在21 450～119 720 ms之间.电点燃大鼠海马Caspase-3 mRNA表达明显升高,托吡酯治疗组的Caspase-3 mRNA表达下调.结论在大鼠电点燃癫痫模型中,Caspase-3可能参与了点燃过程,托吡酯可抑制癫痫过程中神经元的凋亡.

电点燃致癎大鼠海马TNF-αmRNA表达和细胞凋亡观察

目的测定杏仁基底外侧核电点燃癫癎大鼠海马TNF-α mRNA表达和细胞凋亡情况,探讨TNF-α／ TNF-R1介导的死亡信号途经在癫癎中的作用。方法建立大鼠杏仁核点燃癫癎模型,采用半定量RT-PCR法检测电点燃大鼠海马组织的TNF-α mRNA表达,用原位末端标记法(TUNEL)检测该部位细胞凋亡变化。结果电点燃大鼠海马TNF-α mRNA表达升高,点燃大鼠海马细胞凋亡明显增多。结论在电点燃癫癎大鼠模型中,TNF-α可能参与了点燃过程,海马细胞凋亡增加,这些与癫癎发作密切相关。

血清催乳素测定对儿童发作性疾病的鉴别诊断意义

目的探讨血清催乳素(PRL)测定对儿童发作性疾病的鉴别诊断意义。方法用化学发光法测定28例癫痫患儿、21例高热惊厥患儿、16例非痫性发作患儿和15名正常对照儿血清PRL含量的改变。结果癫痫发作后平均血清PRL浓度为18.36±12.07 ng/ml,较高热惊厥组(9.79±4.20 ng/ml)、非痫性发作组(11.36±6.98ng/ml)和正常对照组(9.14±4.44 ng/mL)均升高(均P<0.05)。结论血清PRL浓度的升高可作为鉴别儿童癫痫与高热惊厥、非痫性发作性疾病的一个参考指标。癫痫发作影响下丘脑-垂体轴的功能,PRL分泌增加。癫痫发病有神经内分泌机制参与。

带教小儿神经内科临床见习医生的几点体会

见习期是医学生从学生向临床医生角色转换的开始。小儿神经内科是一门相对疑难的临床医学学科。为了提升小儿神经内科见习生的临床教学质量,本文从医学人文素质的培养、病史采集、带教的技巧和方法等方面进行了阐述。

小剂量盐酸哌甲酯治疗学龄儿童顽固性交叉擦腿动作

目的观察盐酸哌甲酯治疗学龄儿童顽固性交叉擦腿动作的疗效、用药方法、剂量及不良反应.方法将80例6～13岁顽固性交叉擦腿动作学龄患儿随机分为小剂量(L)组和大剂量(H)组.L组盐酸哌甲酯起始量5 mg/d,每3～5 d增加5 mg,总量不超过20 mg/d.H组盐酸哌甲酯起始量为10 mg/d,每3～5 d增加10 mg,总量不超过40 mg/d,两组疗程均为8～12周.结果L组服药2周内所有症状均消失,控制率达100.00%.H组控制率为94.12%,退出2例(5.88%),两组疗效无显著差异(P＞0.05).L组不良反应明显较H组少,且程度较轻,主要是纳差,多发生在开始服药2周内,表现为一过性,不影响治疗.结论小剂量盐酸哌甲酯对学龄儿童顽固性交叉擦腿动作具有良好疗效,且有较好的安全性和耐受性.

轮状病毒性胃肠炎合并惊厥患儿临床特征分析

目的探讨儿童轮状病毒性胃肠炎合并惊厥的临床特点和预后。方法回顾性分析2010年1月至2013年12月住院治疗的轮状病毒性胃肠炎患儿的临床资料,根据病程中是否伴有惊厥,分惊厥组和无惊厥组进行比较。结果两组患儿的性别、年龄和平均住院日差异均无统计学意义(P均>0.05),惊厥家族史、既往惊厥史、入院时的血清钠离子、钙离子、乳酸、标准碳酸氢盐(SB)、实际碳酸氢盐(AB)、血清总二氧化碳(TCO2)及p H值的差异均有统计学意义(P均<0.05)。出院后电话、门诊随访,两组出院后惊厥发作的差异有统计学意义(P<0.05)。惊厥组有1例患儿(0.54%)进展为癫痫,两组患儿的生长、认知发育均无明显异常。结论轮状病毒性胃肠炎合并惊厥是一个良性的临床经过。

髓样相关蛋白MRP8/14在小鼠肺炎链球菌性脑膜炎脑损伤中的作用

细菌性脑膜炎是各种细菌侵入中枢神经系统引起的脑实质、脑膜或血管的中枢神经系统感染性疾病,而肺炎链球菌(Streptococcus Pneumoniae,SP)是目前细菌性脑膜炎最常见和最主要的致病菌之一.研究SP性脑膜炎脑损伤的发生发展机制可为寻求该疾病新的治疗手段提供初步的实验和理论依据.通过探讨髓样相关蛋白MRP8/14对小鼠脑组织中IgG,Albumin,NSE,caspase3的影响,探讨MRP8/14在小鼠肺炎链球菌性脑膜炎脑损伤中的作用.将48只1. 5~2个月健康雄性BALB/C小鼠随机分为四组:磷酸缓冲盐溶液对照组(PBS组)、MRP8/14蛋白组(MRP8/14组)、肺炎链球菌组(SP组)、肺炎链球菌+MRP8/14蛋白组(SP+MRP8/14组),每组12只;经侧脑室穿刺分别注入PBS、MRP8/14蛋白、SP混悬液、SP+MRP8/14建立动物模型.注射后6,24,48 h对小鼠进行神经行为学评分和体质量的变化率测定;处死小鼠取脑,记录脑组织含水量变化;观察不同时间点小鼠脑组织中Nissl染色阳性细胞及其数量的改变;制备脑组织匀浆,采用ELISA法测定血脑屏障通透性指标IgG,Albumin水平;采用免疫组织化学方法检测脑组织中脑损伤标志物NSE、凋亡相关蛋白caspase3蛋白的表达.结果显示,侧脑室注射6,24,48 h后,SP组小鼠与PBS组相比神经行为学评分明显降低,脑组织含水量明显增加,Nissl染色阳性神经细胞数量减少,IgG和Albumin浓度明显增加,NSE阳性细胞数明显减少,caspase3表达明显升高;SP+MRP8/14组与SP组相比神经行为学评分降低,脑组织含水量增加,Nissl染色阳性神经细胞数量减少,IgG和Albumin浓度增加,NSE阳性细胞数减少,caspase3表达升高趋势更加明显.因此,在小鼠SP性脑膜炎模型中,髓样相关蛋白MRP8/14加剧了SP性脑膜炎小鼠的临床症状、脑水肿、脑组织神经元丢失及脑损伤.

杏仁基底外侧核电点燃癫痫模型的制作及观察

为了探讨杏仁基底外侧核电点燃癫痫模型的制作及意义,我们把双极电极插入大鼠左侧杏仁基底外侧核,给予慢性电刺激使大鼠达到点燃状态,观察其发作过程、行为改变并记录脑电图.结果发现29只接受刺激的大鼠,达到点燃的有24只,8.29±5.31次刺激出现5级痫样发作,10.87±3.44次刺激达到点燃,没有因抽搐发作而致死的点燃大鼠.脑电图记录到后发放时程在32.05～51.65 s之间.行为观察发现点燃大鼠比对照组易激惹.说明杏仁基底外侧核电点燃大鼠癫痫模型便于从行为、脑电图等多方面进行观察,是研究人类癫痫机制、药物治疗和预防的良好工具.

托吡酯和ACTH治疗婴儿痉挛的疗效比较

观察促肾上腺皮质激素 (ACTH)和托吡酯 (Topiramate)两种药物对 32例婴儿痉挛的疗效。结果 :ACTH和托吡酯两种药物疗效没有差别 ,但使用ACTH者有 2例合并难以控制的感染 ,而使用托吡酯者没有严重的不良反应。认为托吡酯控制痉挛发作效果满意 ,且较ACTH安全。

托吡酯长期治疗儿童癫癎部分性发作疗效及耐受性的观察

目的 观察托吡酯长期治疗儿童癫疒间 部分性发作的疗效、耐受性及安全性。方法 对 86例癫疒间 部分性发作的患儿给予托吡酯加用或单药治疗 ,起始剂量为 0 5～ 1 0mg/ (kg·d) ,分 2次口服 ,每周增加0 5～ 1 0mg/ (kg·d) ,经过 8周加量期及 18个月稳定期 ,观察其疗效、耐受性及安全性。结果 86例患儿完成加量期后 ,总有效率为 6 1 6 % ,控制率为 37 2 %。稳定期 6、12及 18个月时总有效率分别为 6 8 6 %、81 9%及86 4 % ,控制率分别为 4 6 5 %、5 9 0 %及 6 0 5 % ,稳定期 12及 18个月时总有效率及控制率与加量期比较差异有显著性 (均P <0 0 5 )。不良反应多发生在治疗初期 ,为一过性轻～中度嗜睡、厌食等。在稳定期 18个月时仍有 78例 (90 7% )坚持服用托吡酯。结论 托吡酯对儿童癫疒间 部分性发作的长期治疗 。

苏州地区儿童肺炎链球菌脑膜炎39例临床特征和血清型分析

目的:分析苏州地区儿童肺炎链球菌脑膜炎及死亡病例的血清型和临床特征,寻找降低儿童肺炎链球菌脑膜炎发病率和死亡率的对策。方法:对苏州大学附属儿童医院2011年1月—2016年12月收治97例化脓性脑膜炎患儿中39例肺炎链球菌脑膜炎菌株进行血清学分型,对其临床特征和实验室结果进行统计分析。结果:97例化脓性脑膜炎患儿脑脊液培养出致病菌依次为:肺炎链球菌39例(40.2%),无乳链球菌19例(19.6%)和大肠埃希菌18例(18.6%)等;总病死率为19.6%(19/97),按照病死率高低依次为:肺炎克雷伯菌60.0%(3/5),肺炎链球菌35.9%(14/39)和大肠埃希菌11.1%(2/18);肺炎链球菌脑膜炎死亡组体温>40°、早期纳差、早期嗜睡、休克、弥散性血管内凝血、急性肾损伤、呼吸衰竭、抽搐和昏迷的发生显著高于存活组(P<0.05);肺炎链球菌组分别有17.9%和15.4%出现并发症硬膜下积液和脑积水;肺炎链球菌组首次抗生素使用与药敏结果符合率为20.0%(6/30);39例肺炎链球菌脑膜炎患儿肺炎链球菌疫苗率为0.0%,7价肺炎链球菌疫苗和13价肺炎链球菌疫苗覆盖肺炎链球菌组血清型分别为82.1%和92.3%,对死亡组血清型覆盖率分别是85.7%和92.9%。结论:肺炎链球菌是苏州地区6个月以上儿童化脓性脑膜炎的首要病原体;早期识别高热、纳差和嗜睡等危重症状态及合理选择抗生素对改善肺炎链球菌脑膜炎预后具有重要意义。门诊抗生素选择对肺炎链球菌敏感率低及我国肺炎链球菌疫苗接种率低,是肺炎链球菌脑膜炎高病死率的重要原因。期望通过接种13价肺炎链球菌结合疫苗降低肺炎链球菌脑膜炎的发生率和病死率。

杏仁核点燃癫痫大鼠nNOS的表达及抗癫痫药物的影响

目的建立大鼠杏仁基底外侧核电点燃模型,测定大鼠海马nNOS的表达情况并观察常用抗癫痫药物对nNOS表达的影响,探讨癫痫的可能发病机制及常用抗癫痫药的药理作用。方法把双极电极插入大鼠左侧杏仁基底外侧核,给予慢性电刺激使大鼠达到点燃状态。设立空白对照组、手术对照组、电点燃癫痫组及托吡酯、丙戊酸钠、卡马西平治疗组,采用半定量RT-PCR法检测各组大鼠海马组织nNOS mRNA的表达,并用免疫组织化学法检测各组大鼠海马组织中nNOS的表达。结果杏仁核点燃癫痫组大鼠海马组织中nNOS较空白及手术对照组明显升高,经药物治疗后的nNOS表达出现明显下调,其中托吡酯组与其他两个药物组相比nNOS表达增高,差异具有显著性。免疫组化结果表明nNOS定位于神经元胞浆,癫痫组及托吡酯治疗组的强阳性表达率高于对照组及其他治疗组。结论杏仁核点燃癫痫大鼠海马组织nNOS表达明显增加,提示nNOS可能参与了杏仁核点燃癫痫的形成过程;抗癫痫药物明显减少了nNOS的表达,有利于保护正常的神经细胞功能。

电点燃癫痫大鼠海马白细胞介素-6的表达

目的通过测定杏仁核电点燃癫痫大鼠海马白细胞介素6(IL-6)表达情况,探讨IL-6变化规律及其作用。方法把双极电极插入大鼠左侧杏仁基底外侧核,给予慢性电刺激使大鼠达到点燃状态,观察其发作过程并记录脑电图。采用半定量RT-PCR法检测电点燃大鼠海马IL-6 mRNA表达并设药物治疗组对照观察。结果大鼠平均经(13.50±3.99)次刺激达到点燃状态,记录到的后发放时程在21 450～119 720 ms之间。电点燃大鼠海马IL-6 mRNA表达升高。结论癫痫大鼠海马IL-6 mRNA表达升高,可能参与了点燃过程。

儿童急性脱髓鞘脑病的临床探讨

目的：探讨儿童急性脱髓鞘脑病的临床特征和诊治过程以提高确诊率。方法回顾性分析近5年收治的50例儿童急性脱髓鞘脑病的临床资料。结果50例患儿中以头痛、呕吐起病20例，以视觉障碍起病12例，以情绪障碍起病15例，全身无力、精神差起病8例，惊厥发作起病6例，行走困难、感觉障碍起病5例。经治疗急性期明显好转45例，无效5例、治疗中断8例。缓解再复发7例，死亡2例。结论儿童急性脱髓鞘脑病临床表现复杂多变，容易误诊漏诊。要及时诊断，尽早治疗、坚持用药。

胎盘多肽对儿童病毒性脑炎细胞免疫指标的影响

目的观察胎盘多肽对病毒性脑炎患儿细胞免疫指标的影响。方法将60例病毒性脑炎患儿随机分为观察组和对照组,每组各30例。两组均予抗病毒及对症治疗,在此基础上观察组加用胎盘多肽进行治疗,比较两组患儿治疗前后外周血T细胞亚群(CD3+、CD4、CD8、CD4/CD8)变化,以及红细胞免疫指标检出水平及各项红细胞指数,包括红细胞C3b受体(RBC-C3bR)、红细胞免疫复合物(RBC-ICR)、红细胞免疫亲和力受体(FEER)。结果经治疗后,观察组患儿的CD8水平低于对照组[(20.25±4.25)%比(27.55±5.62)%];观察组患儿的CD3+、CD4水平及CD4/CD8比值[(46.81±4.52)%、(38.37±2.82)%、(1.89±0.21)]均高于对照组[(42.30±5.06)%、(32.05±3.45)%、(1.16±0.31)],两组相比,差异有统计学意义(P<0.05);经治疗后,观察组和对照组患儿治疗前后RBC-C3bR、RBC-ICR、FEER及红细胞电泳指数、红细胞聚集指数、红细胞刚性指数均有改善,而观察组患儿较对照组改善更明显[(12.93±0.81)、(6.29±1.51)、(50.45±3.34)、(5.75±1.03)、(8.07±1.05)、(4.86±0.39)比(10.06±0.72)、(8.93±1.76)、(43.85±2.93)、(7.53±1.20)、(10.52±1.22)、(6.53±0.60)],两组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论胎盘多肽可明显改善病毒性脑炎患儿的细胞免疫功能状态。

单纯疱疹病毒性脑炎研究进展

单纯疱疹病毒性脑炎（HSVE）是严重的中枢神经系统感染性疾病，由单纯疱疹病毒（HSV）原发感染引起，导致严重的后遗症及较高的死亡率。现就该病的病原体、致病机制及治疗等相关研究进展做一综述。

B7同源体3上调肺炎链球菌脑膜炎小鼠NSE和S100bmRNA的表达

目的探讨B7同源体3(B7H3)对肺炎链球菌(SP)脑膜炎引起的脑损伤作用。方法以BALB/C小鼠为研究对象,通过侧脑室注射建立SP脑膜炎动物模型,48只实验动物被分为4组:生理盐水组(CON组),B7H3蛋白组(B7H3组),SP组,SP+B7H3组。术后18、48、72h,小鼠被行神经行为学评分,麻醉后颈椎脱臼处死,冰上断头取脑,制备脑组织匀浆,运用实时-PCR法,检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S100bmRNA的表达。结果 B7H3组的神经行为学评分与CON组比较,差异无统计学意义(P>0.05);SP组明显低于CON组(P<0.05);SP+B7H3组较SP组更进一步降低(P<0.05)。B7H3组和CON组的NSE、S100bmRNA相对表达量差异无统计学意义(P>0.05);不同时间点SP组NSE、S100bmRNA相对表达量高于CON组(P<0.05);SP+B7H3组NSE、S100bmRNA相对表达量与SP组比较,各时间点更进一步升高(P<0.05)。结论 B7H3在SP诱导的小鼠脑膜炎中,上调NSE、S100b的基因表达,促进了脑膜炎病情的进展。

B7同源体3经Toll样受体2依赖性机制增强肺炎链球菌脑膜炎小鼠的炎性反应和病理损伤

目的探讨B7同源体3(B7-H3)对肺炎链球菌(SP)脑膜炎大鼠的炎性反应和血脑屏障完整性的影响及其机制。方法经小鼠侧脑室穿刺注入SP悬液,制备脑膜炎模型。野生型鼠分5组,分别为PBS组、SP组、SP+B7-H3组、SP+同型单抗组、SP+B7-H3阻断性单抗组。Toll样受体2基因剔除(TLR2-KO)鼠分3组:PBS组、SP组、SP+B7-H3蛋白组。术后6 h、18 h、30 h,麻醉其下眼眶采血法收集血清,取脑组织,制备脑组织匀浆。ELISA检测其血清TNF-α、IL-6、IL-1β和单核细胞趋化因子蛋白-1(MCP-1)水平以及脑组织匀浆中血清蛋白(Albumin)和IgG水平。结果 1.ELISA检测野生型鼠血清SP组、SP+B7-H3组注射18 h后TNF-α、IL-6和MCP-1的表达及30 h后TNF-α、IL-6、IL-1β和MCP-1的表达均较PBS组显著升高(Pa<0.05);SP+同型单抗组与SP组比较,各时间点各炎性因子的表达差异均无统计学意义(Pa>0.05);SP+B7-H3组注射18 h后MCP-1的表达及30 h后TNF-α和IL-6表达均显著高于SP组[(42.010±3.883)ng.L-1 vs(29.620±3.830)ng.L-1;(37.550±3.232)ng.L-1 vs(24.570±2.377)ng.L-1;(66.160±5.766)ng.L-1 vs(48.630±4.418)ng.L-1,Pa<0.05];SP+B7-H3阻断性单抗组注射30 h后,TNF-α和IL-6的表达均显著低于SP组[(18.680±1.798)ng.L-1 vs(24.570±2.377)ng.L-1;(37.180±3.150)ng.L-1 vs(48.630±4.418)ng.L-1,Pa<0.05]。2.ELISA检测脑组织匀浆:SP组、SP+B7-H3组注射18 h、30 h后Albumin、IgG的表达较PBS组均显著升高(Pa<0.05);SP+同型单抗组与SP组比较,各时间点Albumin、IgG的表达差异均无统计学意义(Pa>0.05);SP+B7-H3组注射18 h、30 h后脑组织匀浆Albumin的表达及30 h后脑组织匀浆IgG的表达均显著高于SP组[(59.090±4.184)μg.g-1vs(35.450±4.256)μg.g-1;(59.890±4.701)μg.g-1 vs(43.790±3.508)μg.g-1;(36.220±2.775)μg.g-1 vs(25.440±2.620)μg.g-1,Pa<0.05]。3.SP+B7-H3阻断性单抗组注射后18 h、30 h Albumin的表达及30 h IgG的表达显著低于SP组[(20.590±1.720)μg.g-1 vs(35.450±4.256)μg.g-1;(28.650±3.063)μg.g-1 vs(43.790±3.508)μg.g-1;(17.380±1.595)μg.g-1 vs(25.440±2.620)μg.g-1,Pa<0.05]。3.TLR2-KO鼠血清和脑组织匀浆的ELISA检测显示:SP+B7-H3组较SP组各监测指标的表达在任何时间点的差异均无统计学意义(Pa>0.05)。结论 B7-H3通过TLR2依赖性机制促进SP诱导的脑膜炎小鼠的炎性反应和血脑屏障的破坏。

小鼠B7-H3对T细胞的体外正性协同刺激作用

小鼠B7-H3作为协同刺激分子的生物学功能至今尚未明确。本文拟通过构建小鼠B7-H3基因的真核表达载体,获取稳定表达小鼠B7-H3基因的细胞株,并进一步通过体外实验研究其对T淋巴细胞体外活化及功能的调节作用。作者运用RT-PCR技术从小鼠肝脏组织中获得全长小鼠B7-H3基因,并构建真核表达载体pIRES2-B7-H3,转染仓鼠细胞株(CHO)。经过G418抗性筛选和亚克隆,获得稳定表达B7-H3的基因转染细胞,并经RT-PCR、Western-blot及流式细胞术方法鉴定细胞的表达,采用CCK8、酶联免疫吸附试验(ELISA)等方法分析基因转染细胞对T细胞的增殖和IL-2、IFN-γ的分泌。本文成功克隆和构建了稳定表达小鼠B7-H3的基因转染细胞B7-H3/CHO,该细胞株和T细胞共培养能有效促进T细胞的增殖,增强其IL-2、IFN-γ的分泌。小鼠B7-H3在T细胞活化过程中可能发挥正性协同作用。