微滴式数字PCR技术快速诊断侵袭性念珠菌病的方法建立

目的建立基于微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)技术快速检测重症患者侵袭性念珠菌感染的方法。方法基于微滴式数字PCR平台建立检测体系,设计四种念珠菌(白色念珠菌、光滑念珠菌、近平滑念珠菌和热带滑念珠菌)特异性引物探针;(1)对无模板对照(no tmplate contral,NTC)样品进行检测,确定空白限(limit of blank,LOB)范围和阳性判断值;(2)通过对阳性样本进行稀释,每个浓度梯度各进行10次重复提取检测,确定检测限(limit of detection,LOD)范围;(3)重复检测稀释后的样本,确定定量限(limit of quantitation,LOQ)范围;(4)对阳性样品进行梯度稀释,确定线性范围;(5)通过2个高低浓度的阳性样本提取检测,进行12次重复性测试,计算结果浓度对数值的变异系数(CV);(6)通过具有真菌培养结果的临床样本进行检测,评估方法可靠度。结果ddPCR检测念珠菌LOB在0~81 copies/mL之间,阳性判断值为≥3个阳性微滴;LOD为3×10^(2) copies/mL;LOQ为3×10^(2) copies/mL;不同浓度梯度检测线性范围是3×10^(2)~3×10^(7)copies/mL,相关系数为:白色念珠菌R^(2)=0.9995、光滑念珠菌R^(2)=0.9989、近平滑念珠菌R^(2)=0.9994、热带滑念珠菌R^(2)=0.999;结果浓度对数值的CV<5%,满足精密度要求;通过检测建立方法初步验证临床标本,结果与临床培养结果一致。结论ddPCR对重症患者侵袭性念珠菌感染的检测灵敏度高、重复性好,特异性高。

敲除CRFK细胞氨基肽酶N对猫传染性腹膜炎病毒复制影响的研究

猫氨基肽酶N(fAPN)参与猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)的感染过程,为研究f APN对FIPV复制的影响,本研究针对f APN第14外显子设计了1对sg RNA,将sg RNA退火后克隆至p X458质粒中,构建同时含有Cas9蛋白和sg RNA的重组质粒。重组质粒经PCR及测序鉴定正确后,瞬时转染猫肾细胞(CRFK)中,24 h后通过流式细胞仪分选带有绿色荧光的单克隆细胞。单克隆细胞经稳定传代培养后,细胞中的绿色荧光消失,对细胞进行PCR和测序,结果显示:3株单克隆细胞在f APN第14外显子有1个碱基的插入,造成移码突变,导致f APN不能正常表达,表明敲除f APN蛋白的CRFK细胞系正确构建,命名为KO-APN14。将FIPV分别感染CRFK细胞及培养20代的KO-APN14细胞,48 h后通过间接免疫荧光试验(IFA)检测FIPV N蛋白的表达;将FIPV分别感染CRFK细胞及KO-APN14细胞,在感染4 h、12 h、24 h、36 h时采用RT-q PCR分别检测FIPV N基因、视黄酸(维甲酸)诱导基因I(RIG-I)、黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)、Toll样受体3(TLR3)、干扰素β(IFN-β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)的转录水平。IFA结果显示:感染FIPV的CRFK细胞出现绿色荧光,未感染FIPV的CRFK细胞、未感染FIPV的KO-APN14细胞及感染FIPV的KO-APN14细胞均无绿色荧光;RT-q PCR检测FIPV感染各细胞后病毒N基因的转录水平,结果显示:与感染FIPV的CRFK细胞相比,感染FIPV的KO-APN14细胞能够极显著抑制FIPV N基因的转录(P<0.0001);RT-q PCR检测FIPV感染各细胞后上述各细胞因子的转录水平,结果显示:与感染FIPV的CRFK细胞相比,感染FIPV的KO-APN14细胞能够抑制RIG-I、MDA5、TLR3、IFN-β、IL-6、IL-10、TNF-α及f APN的转录。综上所述,f APN是FIPV在侵入细胞及病毒复制过程中发挥重要作用,并在FIPV引起的炎症反应过程中起关键作用。本研究为f APN在免疫炎症反应中作用的研究提供科学依据,并为培育基因编辑抗病育种猫奠定实验基础。

上皮间质转化影响神经母细胞瘤侵袭及转移的机制研究进展

神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)是儿童常见的异质性高、生长迅速且容易转移的恶性肿瘤之一。上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是恶性肿瘤细胞侵袭和转移的重要过程。近年来越来越多的研究显示,中医药对恶性肿瘤细胞EMT过程的抑制作用显著。本文就涉及EMT的相关信号通路、中医药对恶性肿瘤细胞EMT的影响及机制、EMT与NB侵袭及转移关系的进展进行综述。

家长言行对幼儿劳动价值观的影响——基于农村大班幼儿的NVivo分析

使用NVivo质性研究软件,以24名农村大班幼儿为研究对象,了解家庭教育对幼儿劳动价值观的影响。研究发现,家长不良言行、对劳动的偏见是影响幼儿劳动价值观的主要因素,易使儿童产生消极负面的劳动观。以此建议,帮助家长树立正确劳动观,“内外力”相结合,使幼儿主动参与家庭劳动,采用积极言语塑造幼儿正向劳动认知,培养幼儿良好劳动行为。

基于128层螺旋CT探究芪参丹芍颗粒加减对冠心病心绞痛患者左心功能的影响

目的:基于128层螺旋CT(MSCT)探究芪参丹芍颗粒加减对冠心病心绞痛患者左心功能的影响。方法:选取2020年6月~2022年6月确诊的92例冠心病心绞痛患者进行前瞻性研究,使用92个密封不透明信封进行简单随机化分组为对照组(46例,给予阿托伐他汀钙片治疗)和观察组(46例,在阿托伐他汀钙片+芪参丹芍颗粒加减治疗)。比较两组临床疗效及不良反应发生情况;观察两组治疗前后中医证候积分、血脂指标(TC、TG、LDL-C、HDL-C);采用128层MSCT评估两组患者治疗前后左心功能[舒张末期容积(EDV)、收缩末期容积(ESV)、每搏输出量(SV)、射血分数(EF)]。结果:与对照组治疗后比较,观察组治疗总有效率较高,中医证候积分较低,TC、TG、LDL-C指标较低,HDL-C指标较高,EDV、ESV指标较低,SV、EF指标较高,以上差异均有统计学意义(P<0.05);两组治疗期间不良反应发生率比较无明显差异(P>0.05)。结论:芪参丹芍颗粒加减治疗冠心病心绞痛效果显著,能够改善患者中医证候积分,改善血脂及心功能情况,且安全性良好。

裴斯泰洛齐劳动教育思想及对当代学前教育的启示

裴斯泰洛齐是西方教育史上首位将“教育与生产劳动相结合”这一思想付诸实践的人,在实验过程中得出劳动教育体系综合化、内容生活化、方法直观化、过程要素化、形式多样化、行为德育化六种劳动教育思想。给予学前阶段开展劳动教育六种启示:多元整合培养幼儿全面发展、生活实践是劳动教育的基石、直观教学助力幼儿劳动认知发展、分解与练习是幼儿掌握劳动技能的关键、增添劳动种类激发幼儿劳动兴趣、道德实践塑造良好劳动行为习惯。裴斯泰洛齐的劳动教育思想为当下我们开展幼儿劳动教育提供了宝贵的启示。

民事诉讼预决效力法律论与认识论的二元框架——新《证据规定》第10条的解释论

学理和实务上对于预决效力的性质、作用与范围,一直存在较大争议。2019年新《证据规定》第10条对预决效力规范进行了修订,为我国预决效力理论发展提供了一个新的出发点,也有助于规范司法实务。对比新《证据规定》第10条与《民诉法解释》第93条可知,有必要区分法院裁判确认的基本事实之预决效力与非基本事实之预决效力,两种事实判断对于另诉法官进行证据评价与事实认定的影响不同。在体系性解释新《证据规定》第10条的基础上,应将预决效力置于法律论与认识论二元框架下加以理解,澄清其在构成要件与法律后果两方面的要求与内涵,以弥补民事诉讼裁判效力理论体系的薄弱点。

西北地区数字经济与经济高质量发展协同效应与动态演进预测

基于2013~2022年西北五省面板数据构建数字经济与经济高质量发展双系统指标体系,对二者的耦合协调度进行测度,通过核密度估计方法以及Markov链模型完成两者的协同效应检验及动态演进预测。研究发现,2013~2022年西北地区数字经济与经济高质量发展之间联系密切,但二者协同效应较低,大多处于中度或轻度失调状态且地区之间发展不平衡,各省份耦合协调度水平不稳定,当考虑空间因素后,省份自身的耦合协调水平会受到其他耦合协调水平的影响。提出因地制宜推进产业数字化、数字产业化,加强对数字和信息科技的理解和普及,注重经济发展的系统性和可持续性等建议,以期助力西北地区经济发展。

烧碱系统耦合高盐废水资源化应用研究

对传统高盐废水零排放技术路线进行了介绍,并提出依托氯碱企业的产业优势,发展烧碱耦合高浓盐水零排放资源化利用的运行模式和优势。

基于高温熔盐储热系统的电加热器对比及分析

熔盐蓄热储能可以保持稳定的电力输出被光热电厂广泛采用,而熔盐电加热器是熔盐储换热系统的主要设备之一。为了探究熔盐储能系统中熔盐电加热器的选型问题,以某厂3×50MW容量熔盐储能项目为研究对象,分析电阻式、电极式及电感式三种技术路线的原理、特点、经济性、运行维护以及优缺点,总结三种技术路线的利弊,为光热发电厂熔盐罐的电加热系统设计选型提供一定参考和借鉴。

平坦地区基地规模风力发电机组选型的初步分析

随着现代风电技术的发展日趋成熟,大容量机组的安装可以降低风电场的建设成本。针对市场上目前的主流机型,在平坦地形区域内,选取单机容量7.5 MW及以上的风力机组进行发电量和经济性测算。结果表明:轮毂高度和叶轮直径相同的条件下,单机容量越小,发电量和年利用小时数越高;单机容量相同的条件下,叶轮直径越大,发电量和年利用小时数越高;单机容量和叶轮直径相同的条件下,轮毂越高,发电量和年利用小时数越高。大容量的风力发电机组总投资较少;同一机型不同轮毂高度的机型随着轮毂高度增加,度电成本降低。

脊髓损伤后勃起功能障碍的临床研究进展

脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)后与勃起相关的自主神经及躯体神经受损,引起不同程度的勃起功能障碍(erectile dysfunction, ED)。中医学称为阳痿,认为主要由外感六淫、情志内伤、房事不节、肝经郁热等引起,虚实夹杂,多从肾论治;针灸、温针灸、电针疗法、小针刀、中药治疗等是常用且行之有效的治疗方法。目前西医学多使用5型磷酸二酯酶抑制剂,海绵体药物注射、负压勃起装置等手段治疗。通过查阅文献及资料,对该病中、西医的认识及治疗方法进行阐述,以期为临床应用提供依据。

早发性卵巢功能不全遗传学病因及管理策略研究进展

早发性卵巢功能不全(POI)的特征为女性在40岁之前卵巢功能减退、早衰、激素水平紊乱,是导致女性不孕的主要原因之一。POI具体病因尚不完全明确,目前临床认为包括遗传性、自身免疫性、感染性或医源性等因素。其中,遗传性病因占所有患者的20%~25%。确定POI精确致病基因一直具有挑战性,且已知的致病基因在POI致病机制中也未完全阐明,而了解潜在分子机制对预防和早期诊断POI至关重要。因此,本文就POI遗传学研究进展对目前已知的POI致病基因和针对致病基因的治疗方法作一综述。

构建“地方感”:乡村幼儿园教师队伍建设的情感地理逻辑

地方感是乡村幼儿园教师“引得来、留得住、教得好”的重要保障。从地方认同、地方依恋以及地方依赖三个维度构建地方感的分析框架,对H县15名乡村幼儿园教师进行调查分析,结果表明:乡村幼儿园教师与地方之间缺乏情感联结,呈现出淡薄的地方感,主要表现为:乡土归属感不足、乡村文化认同感缺失、乡土疏离感强烈、乡村教育热情淡化。地方感作为乡村幼儿园教师扎根乡村教育与厚植乡村教育情怀的根基,其重塑需要有效发挥各方合力,即培养积极个体空间,深化乡村幼儿园教师的地方认同;营造和谐环境空间,增进乡村幼儿园教师的地方依恋;建立健全政策空间,形塑乡村幼儿园教师的地方依赖。

针药并治联合生物反馈治疗产后血虚型慢性功能性便秘临床观察

目的:观察针药并治联合生物反馈疗法治疗产后血虚型慢性功能性便秘的临床疗效。方法:选择2018年8月~2020年8月80例产后血虚型慢性功能性便秘患者作为研究对象,按随机数字表法分为观察组和对照组。对照组接受生物反馈疗法治疗,观察组在对照治疗基础上予四物汤加味口服及毫针刺足三里、三阴交、合谷、天枢穴。比较两组临床疗效及治疗前后Bristol粪便性状量表、症状自评量表(PACSYM)、盆底肌力评分。结果:观察组治疗总有效率明显高于对照组(P<0.05),且治疗后Bristol粪便性状、PAC-SYM评分及盆底肌力方面均优于对照组(P<0.05)。结论:针药并治联合生物反馈疗法治疗产后血虚型慢性功能性便秘疗效显著。

硅胶吸附处理含高浓度硝酸根的含铀工艺废液

利用硅胶对铀的吸附作用,实现了对同时含高浓度硝酸根及微量铀的放射性废液中铀的回收。利用模拟废液进行静态实验,研究了溶液pH值、铀初始浓度、硝酸盐浓度及硅胶比表面积对吸附效果的影响。结果表明:溶液pH值增大有利于硅胶对铀的吸附;而溶液中铀初始浓度的升高会使铀在硅胶上的吸附效率降低;pH值为8.1时的吸附过程符合Freundlich等温吸附模型;硝酸根在硅胶上不吸附,且对铀的吸附几乎无影响;具有较大比表面积的硅胶有利于铀的吸附。利用实际工艺废液进行的动态柱实验结果表明,当pH值为8.1时,硅胶对铀的吸附容量可达22.3mg/g。吸附在硅胶上的铀可被1mol/L的硝酸溶液淋洗下来,解吸效率达近100%。

超滤-反渗透-连续电渗析组合工艺处理含铀工艺废水

采用超滤-反渗透-电渗析组合工艺处理球形燃料元件制造过程中产生的含铀工艺废水。实验分别研究了以上3个单元在废水处理中的除盐、去污效果。结果表明,经过除氨预处理后,工艺废水由超滤-反渗透-电渗析组合工艺处理,工艺废水中硝酸根的去除率几乎达到100%,有机物的去除率为90%以上,处理量约为1.5-2.8 L/h。

广州市老年体检人群健康状况

目的了解2010~2014年广州地区老年居民的健康状况。方法对2010~2014年中山大学孙逸仙纪念医院体检中心进行健康体检的16 056名老年人的体检结果进行分析,整体统计各异常检出率,并对各年龄组异常检出率及不同性别各异常情况进行对比。结果老年人常见疾病检出率由高到低前15位分别为甲状腺结节60.5%、血脂异常53.2%、白内障51.2%、骨质疏松(OP)48.2%、高血压48.1%、前列腺增生46.3%、超重40.0%、维生素D缺乏38.0%、尿常规异常32.9%、慢性咽炎31.6%、空腹血糖偏高31.6%、幽门螺杆菌感染30.4%、心肌缺血27.4%、脂肪肝24.6%、高尿酸血症22.4%。按照不同年龄组间对比,除幽门螺杆菌感染、尿常规异常、慢性咽炎及脂肪肝外,其余11种疾病的发病率均随年龄的增加而显著增加(P<0.05)。除前列腺增生为男性患者所特有外,甲状腺结节、OP、超重、维生素D缺乏的男性检出率均显著低于女性(均P<0.05);白内障、空腹血糖偏高、心肌缺血、脂肪肝、高尿酸血症的男性检出率显著高于女性(均<0.05)。血脂异常、高血压、尿常规异常、慢性咽炎、幽门螺杆菌感染的检出率差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论广州市老年体检人群常见病发病率较高,在老年人常见疾病的组成中,代谢相关性疾病所占比例较高,定期开展健康体检对早期发现隐匿性疾病意义重大。

含氨放射性废水吹脱法除氨研究

采用吹脱除氨工艺,对高温气冷堆燃料元件二氧化铀核芯颗粒生产中产生的含氨工艺放射性废液进行了除氨处理研究。分析了废水pH、加碱量、加热和吹脱时间等因素对吹脱除氨效果的影响,于80℃、吹脱3h后,废液的除氨效率可超过95%。对除氨后的废液体系进行了阴离子交换树脂吸附铀的静态实验,结果表明,树脂对铀吸附容量较未除氨时有明显提高。