贻贝仿生涂层修饰聚合物微球固定化脂肪酶的制备及应用

为构建新型固定化酶催化体系,以聚甲基丙烯酸缩水甘油酯为载体,利用贻贝仿生技术——多巴胺/聚乙烯亚胺共沉积进行修饰,采用扫描电镜(SEM)、能谱(EDS)、Zeta电位及红外光谱(FT-IR)表征所得材料,并研究其固定化近平滑假丝酵母CICC 33470所产脂肪酶的表征及酶学性质。最佳酶固定化条件为:固定化温度为30℃,固定化pH为7.0,固定化时间为5 h,初始酶活为337.76 U/mL,载体添加量为0.2 g。固定化酶最佳反应温度为50℃,最佳反应pH为8.0,最佳反应时间为10 min,最优条件下固定化酶酶活为484.42±5.97 U/g-载体。固定化酶的稳定性明显提高,重复使用8次后,固定化酶仍有39.22%的初始酶活。进一步将固定化酶用于催化乙酰丙酸与十二醇的酯化反应,转化率可达75.94%,充分证明聚甲基丙烯酸缩水甘油酯经修饰后是固定化脂肪酶的优良载体,为未来扩大脂肪酶的应用范围提供了基础数据。

HPLC法同时测定满山红疏肝颗粒中5种有效成分含量的研究

目的:建立同时测定满山红疏肝颗粒中夏佛塔苷、田基黄苷、异槲皮苷、槲皮苷和原儿茶酸5种成分的含量的方法。方法:研究采用Agilent Zorbax SB-Aq-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸,梯度洗脱,体积流量0.8 mL/min,柱温30℃,检测波长为255 nm。结果:夏佛塔苷、田基黄苷、异槲皮苷、槲皮苷和原儿茶酸分别在浓度为0.0976~1.1712μg/mL、0.0833~0.9996μg/mL、0.0469~0.5628μg/mL、0.0374~0.4488μg/mL、0.0110~0.1320μg/mL范围内线性关系良好,有效成分在24 h内稳定性良好,重现性好,平均加样回收率分别为100.8%、100.8%,101.7%、101.3%、101.1%,RSD分别为1.1%、1.0%、0.7%、1.1%、1.3%。6批满山红疏肝颗粒中夏佛塔苷的含量在0.8869~0.9031 mg/g之间,田基黄苷的含量在0.1917~0.2034 mg/g之间,异槲皮苷的含量在0.0827~0.1052 mg/g之间,槲皮苷的含量在0.0098~0.0140 mg/g之间,原儿茶酸的含量在0.0655~0.0694 mg/g之间。结论:所建立的方法简便准确、专属性强、重现性好,为满山红疏肝颗粒建立了有效可行的质量控制体系。

壮药经典名方龙钻通痹方的药效学及临床研究进展

类风湿关节炎是广西壮族自治区常见病之一,与该地区气候温暖、热量丰富、降水充沛等特点有着紧密的联系。类风湿关节炎具有疼痛、关节变形、难治性等临床特点,严重影响人民群众的身体健康及生活质量。龙钻通痹方是壮医临床工作者提出并广泛应用于类风湿关节炎的治疗,多年临床应用疗效显著。药效学研究中证实了龙钻通痹方对于参与类风湿关节炎发病过程中的经典信号通路及核心细胞因子具有调控作用,从而达到抑制炎症、保护关节软骨、促进成骨细胞的增殖,改善骨侵蚀等。在临床应用中观察发现,龙钻通痹方联合西药、其他方剂、外治法等多元化的治疗手段,在调控炎症因子,改善炎症状态,改善患者血沉等理化指标、晨僵、关节疼痛等症状方面效果显著,并有利于缓解患者不良情绪,提高生活质量。龙钻通痹方的多组分作用于多靶点,有利于解决类风湿关节炎的多个核心问题。本文介绍龙钻通痹方治疗类风湿关节炎的药效学及临床研究进展,以期为龙钻通痹方的进一步深入研究提供参考。

125例不孕症RT-3D-HyCoSy时发生造影剂逆流的影响因素分析

目的:分析不孕症女性经阴道实时三维超声子宫输卵管造影(real-time three-dimensional hysterosalpingo-contrast sonography,RT-3D-HyCoSy)时发生造影剂逆流的影响因素,为造影剂逆流防治提供参考。方法:收集2022年1月至2023年9月于我院接受RT-3D-HyCoSy检查的125例不孕症患者的病例资料,根据是否发生造影剂逆流将其分为造影剂逆流组(n=21)及造影剂未逆流组(n=104),单因素及多因素Logistic回归分析RT-3D-HyCoSy时发生造影剂逆流的危险因素。结果:造影剂逆流组患者不孕类型为继发、有宫内手术史、有子宫腺肌症、有异位妊娠史、有附件包块、有子宫畸形、中重度造影剂推注压力、子宫内膜厚度≤3.5mm、输卵管阻塞、造影时间为经期后≤5d的占比高于造影剂未逆流组,差异均有统计学意义(P均<0.05);继发型不孕(OR=2.088,95%CI=1.119~3.893,P=0.021)、有异位妊娠史(OR=2.061,95%CI=1.136~3.739,P=0.018)、子宫内膜厚度≤3.5mm(OR=2.319,95%CI=1.186~4.533,P=0.014)、输卵管阻塞(OR=2.109,95%CI=1.259~3.531,P=0.005)为不孕症女性RT-3D-HyCoSy时出现造影剂逆流的危险因素(P<0.05)。结论:继发型不孕、异位妊娠史、子宫内膜厚度≤3.5mm及输卵管阻塞是不孕症女性RT-3D-HyCoSy检查时发生造影剂逆流的危险因素;临床需重点关注合并上述危险因素不孕症RT-3D-HyCoSy检查时造影剂逆流的预防。

基于RNA-seq的生孢噬纤维菌新转录本预测及生物信息学分析

利用RNA-seq技术,对不同碳源条件下培养的生孢噬纤维菌CX11进行新转录本预测,实时荧光定量PCR结果表明测序数据可信度较高。共发掘新转录本1298个,其中371个新转录本在不同碳源比较组合中差异表达(p<0.05),差异转录本数目与碳源的复杂度成正相关。共有19个新转录本在滤纸和葡萄糖比较组合中的差异倍数超过8倍,且在其他比较组合中差异倍数明显降低,推测这些新转录本与滤纸的前期降解密切相关。GO功能分析显示437个新转录本获得注释,有机物代谢过程、碳水化合物衍生物结合、氧化还原酶活性、水解酶活性等功能显著富集,原位酶活测定结果表明水解酶活性富集合理可信。KEGG通路分析表明,共有296个新转录本富集到氨基酸生物合成、次级代谢产物生物合成、碳代谢、氧化磷酸化、ABC转运蛋白、群体感应等30条代谢通路中。

正交试验法优选五味珍菊片提取工艺

本文以优选五味珍菊片的提取工艺作为五味珍菊片的研发基础。方法:以总黄酮提取量、总蒽醌提取量为指标,开展正交试验,考察加水量、提取时间、提取次数对水提工艺的影响,以及相对密度、醇沉浓度、醇沉时间对醇沉工艺的影响。结果:五味珍菊片最优制备工艺条件为加入12倍量的水,提取3次,每次1.5 h,将水提液浓缩至相对密度1.080~1.129(60℃),醇沉浓度为65%,醇沉时间24 h。结论:经优化选出的提取工艺合理稳定,具有易操作、可控性好、重复性好的特点,可为五味珍菊片的开发提供理论依据。

生孢噬纤维菌内切葡聚糖酶的异源表达及CBM6对其酶学性质的影响

内切葡聚糖酶是纤维素酶系的重要组分之一,但大部分内切葡聚糖酶酸碱耐受性较差。为挖掘新型内切葡聚糖酶,本研究从生孢噬纤维菌CX11基因组中克隆了一个内切葡聚糖酶基因Sm_1350。该基因大小为2 196 bp,编码732个氨基酸,编码蛋白包含一个分泌信号肽、GH5催化结构域、6家族碳水化合物结合模块(CBM6)和一个C末端结构域(CTD)。利用实时荧光定量PCR技术对Sm_1350在不同碳源条件下的相对表达水平进行了分析,结果表明,Sm_1350在纤维二糖和滤纸培养基中的表达水平均显著高于在葡萄糖培养基中的表达水平,推测其在CX11降解纤维素过程中发挥一定作用。本研究构建了Sm_1350及其3种截短突变体,分别为Sm_1350、Sm_1350-GH5-CBM6、Sm_1350-GH5和Sm_1350-CBM6,并在大肠杆菌中进行异源表达。结果表明,去除CTD结构域明显提高了目的蛋白的可溶性表达水平。以CMC为底物时,Sm_1350-GH5-CBM6与Sm_1350-GH5酶活力分别为(7 000.00±50.00)U/g和(2 542.73±35.03)U/g,表明去除CBM6降低了Sm_1350-GH5对可溶性多糖的水解能力。酶学性质分析结果显示,Sm_1350-GH5-CBM6与Sm_1350-GH5均有较好的pH稳定性,去除CBM6结构域只改变了Sm_1350-GH5的最适温度,对最适pH以及温度稳定性没有产生影响。此外,Sm_1350-CBM6具有较强的几丁质结合能力,在蛋白纯化方面具有良好的应用前景。

安徽省冬小麦发育期农业干旱发生风险分析

客观准确的干旱风险评估是各级政府进行生产布局、制定防灾与减灾决策的依据。利用安徽省78个气象台站1971-2006年逐日气象要素观测资料,以累积湿润指数为干旱指标分析了各地冬小麦发育期内干旱发生的风险度以及对产量的影响。结果表明:从地区分布看,冬小麦发育期内干旱发生风险自南向北逐渐增大,淮北大部处于重度风险以上,江淮大部基本无风险;从冬小麦发育阶段看,以灌浆-成熟期的旱灾风险最大,拔节-抽穗期次之,返青-分蘖期最小;从年际变化看,虽然各区旱灾风险的变化趋势不同,但2000年后均明显增大,近年来的加重趋势值得关注。冬小麦产量损失与干旱发生时段密切相关,小麦拔节-灌浆期发生干旱时减产最重;同时旱灾的持续时间越长、强度越大,损失越重。

安徽省秋季连阴雨发生规律及对秋收秋种的影响

本文利用安徽省75个台站1966-2005年9月上旬-11月中旬逐日降水、日照资料,分区域、分时段统计了连阴雨的特征量,分析其时空变化规律和对秋收秋种的影响。结果表明:秋收期山区的连阴雨多于平原、南部多于北部;长连阴雨年型频率分布为山区多于平原、北部略多于南部;主要特征量的高频次和较大值随年代有加重的趋势,尤其是沿淮淮北更为明显,造成秋收作物大幅减产。秋种期各特征量地理分布规律同秋收期;时间分布与秋收期相反,秋种期连阴雨对秋播秋种的影响较小。

初诊2型糖尿病患者血管内皮功能受损的超声评价

目的利用高频超声探讨内皮舒张功能与初诊2型糖尿病(DM)之间的相关性及预测动脉粥样硬化(AS)的价值。方法超声测量50例DM患者行肱动脉血压计袖带阻塞前后及舌下含服0.5 mg硝酸甘油前后肱动脉内径及颈动脉内-中膜厚度(IMT),并与实验室检查结果进行相关性研究,将各项数据进行统计学分析。结果 DM组肱动脉EDD、EID内径变化率均低于对照组(P<0.01,P<0.05);DM组颈动脉IMT较对照组明显增加(P<0.01);糖尿病组TC、LDL-C水平高于对照组(P<0.01)。结论应用肱动脉EDD、EID,颈动脉IMT联合检查技术,可判断初诊糖尿病患者血管内皮舒张功能受损并预测AS进展情况,是敏感、有效、无创的方法。

均匀色空间下红葡萄酒颜色量化分级研究

以宁夏贺兰山东麓产区2012年和2013年瓶储陈酿的13个红葡萄酒样品为材料,采用紫外可见分光光度法和国际照明委员会推荐的CIE L*a*b*均匀色空间参数,来量化葡萄酒的颜色指数,初步研究均匀色空间下红葡萄酒颜色的量化分级。数据量化结果表明:在标准光源D65下,所测试的红葡萄酒色相分为3级,紫红、胭脂红、宝石红;彩度分为5级,灰、淡、中、浓、鲜艳;明度分为5级,中等、稍亮、较亮、亮、明亮。建立CIE L*a*b*下的模型:Ry CX(1-5)LX(1-5)、Rz CX(1-5)LX(1-5)、Rb CX(1-5)LX(1-5),试验表明13种酒样分布在Ry C5+L2+、Ry C4+L3+、Rz C4+L2+、Rz C3+L3+、Rz C3+L4+、Rz C2+L4+、Rb C2+L4+、Rb C+L5+以上8级。

四维子宫输卵管超声造影在宫外孕保守治疗后输卵管通畅性评估中的应用

目的探讨四维子宫输卵管超声造影(4D-HyCoSy)在评估宫外孕保守治疗后输卵管通畅性中的应用价值。方法选取2016年1月至2018年6月于安徽中医药大学第一附属医院因宫外孕保守治疗,血β绒毛膜促性腺激素(β-HCG)恢复正常3个月后行4D-HyCoSy评估输卵管通畅性的患者38例,收集患者的临床资料和造影结果,其中18例造影检查诊断异常患者选择腹腔镜通液(LC)检查。结果 4D-HyCoSy检查38例患者38条患侧输卵管诊断通畅19条(50%),通而不畅11条(28. 9%),不通8条(21. 1%); LC检查18例患者18条患侧输卵管诊断通畅2条(11. 1%),通而不畅10条(55. 6%),不通6条(33. 3%); 18例患者4D-HyCoSy与LC结果比较,2种方法一致性较好(Kappa=0. 832,P=0. 000)。结论 4D-HyCoSy用于宫外孕保守治疗后输卵管通畅性评估,诊断准确率高、灵敏度高,具有较高的临床应用价值。

五味珍菊片薄层鉴别研究

目的探究和建立五味珍菊片中决明子、葛根、菊花和枸杞子主要成分的薄层色谱定性鉴别法,为制定该片剂质量标准提供研究依据。方法以橙黄决明素、葛根素、绿原酸为对照品,决明子、葛根、菊花和枸杞子为对照药材,采用薄层色谱法(TLC)对五味珍菊片中的菊花、决明子、葛根和枸杞子进行薄层定性鉴别,并对其耐用性进行考察,观察其批次间的影响。结果确定五味珍菊片中决明子、葛根、菊花和枸杞子的展开条件分别为石油醚(60~90℃)∶丙酮=5∶4、三氯甲烷-甲醇-水=7︰2.5︰0.25、二甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水=1∶6∶1∶0.5∶0.5、苯-乙酸乙酯-甲酸=6∶4∶0.2,阴性无干扰,图谱可见橙黄决明素、葛根素、绿原酸及其对照药材在其相对位置均显示相同的颜色斑点,且斑点清晰,该方法具有良好的耐用性。结论该鉴别方法操作简便易行,重复性好,可作为五味珍菊片的薄层鉴别方法,控制其质量标准。

肝豆状核变性合并脾功能亢进患者脾切除前后入肝血管血流变化的超声评价

目的:观测肝豆状核变性(HLD)肝硬化合并脾功能亢进患者脾切除前后入肝血管(肝动脉、门静脉)血流动力学改变情况。方法:应用彩色多普勒超声分别检测46例HLD脾切除患者术前和术后7 d和14 d入肝血管的血流参数,分析血流动力学参数改变情况。结果:脾切除术后7 d,门静脉主干内径、右支管腔内径均缩小,右支最大流速减慢,与术前比较差异均有统计学意义(P<0.05～P<0.01);术后14 d,门静脉右支最大血流速度明显较术后7 d上升(P<0.01);术前、术后7 d和14 d,门静脉主干和右支管腔内径差异均无统计学意义(P>0.05)。术前、术后7 d和术后14 d右肝动脉峰值血流速度差异均有统计学意义(P<0.01),而阻力指数变化差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:HLD肝硬化合并脾功能亢进患者脾脏切除术后,入肝血管血流变化显著。

淮河流域南部作物生长季农业气候资源特征分析

为了提高农业气候资源利用率、降低农业生产风险、确保粮食安全,利用淮河流域南部33个站点1971—2015年逐日气象资料,采用Mann-Kendall突变检测和气候倾向率方法,分析淮河流域南部主要粮食作物生长季的农业气候资源时空分布特征。结果表明,(1)作物生长季45 a热量资源均呈北少南多,山区多于平原的空间分布,淮北北部、东部以及西部的部分地区热量资源增加相对缓慢,淮北西北部和东北部局部以及沿淮中部为显著增加区。冬小麦Triticum aestivum生长季上世纪90年代末增暖趋势更加显著,夏玉米Zea mays和一季稻Oryza sativa生长季的增暖趋势则在本世纪00年代中期达到极显著趋势。(2)初霜日呈北早南迟、平原早山区迟的分布特点,随年代有推迟趋势;终霜日的时空分布与初霜日相反,使得无霜期呈增加趋势,初终霜日在本世纪00年代中期的推迟、提前趋势更加显著。(3)作物生长季45 a降水量均呈明显的纬向分布(北少南多),气候倾向率呈微弱的增减趋势,随年代变化趋势不明显,但波动较大。冬小麦生长季降水变率除山区明显偏小外,其他差异不明显,2000年以前呈增加趋势,其后大多年份基本稳定在15%左右;夏玉米和一季稻生长季降水变率呈西部大中东部小、平原大山区小的分布特点,2005年以前呈增加趋势,其后呈下降趋势。(4)作物生长季45 a辐射资源呈北多南少、西部和山区少的分布特点,大部分站点的气候倾向率呈下降趋势,其中西部地区下降速率高于其他地区;冬小麦生长季辐射资源下降趋势不明显,年代际间变化不大;夏玉米和一季稻生长季下降趋势明显,本世纪00年代以后更加显著。

组织蛋白酶D与基质金属蛋白酶-9在口腔鳞癌的表达

目的探讨组织蛋白酶D(CD)与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在人类口腔鳞癌(OSCC)中的表达意义。方法采用免疫组织化学SP法检测76例OSCC组织与20例癌旁正常口腔黏膜的CD与MMP-9水平。结果CD和MMP-9在OSCC中的阳性表达率分别为81.6%和77.6%,显著高于癌旁正常口腔黏膜(P<0.01)。两者均与OSCC浸润深度和淋巴结转移密切相关,浸润越深,其表达越强(P<0.05);有淋巴结转移的病例,其阳性率明显高于无转移者(P<0.05);MMP-9表达还与组织分化程度密切相关,分化程度越低,其表达越强(P<0.05)。OSCC组织中CD和MMP-9表达具有一定的一致性。结论CD和MMP-9的阳性表达与OSCC的侵袭转移有关。

安徽省油菜主要发育期预报业务化模型研究

为了满足现代农业气象业务服务的需求,为各级政府决策部门和农业生产者及时、合理地开展田间管理和农业生产提供科学依据,在江苏省农科院研发的油菜发育期预报模型的基础上,利用安徽省1982—2005年甘蓝型油菜发育期资料和相对应的气象资料,运用数理统计方法,建立了安徽省油菜主要发育期区域预报模型;并依据天气预报,预测油菜开花期和成熟期。经模拟回代、试报和业务应用,结果显示:油菜开花期和成熟收获期实际观测值与模拟值的相关系数在0.8～0.9,平均绝对误差在2～3天;2006—2009年试报结果与实际值的绝对误差平均在3天左右。本研究对预测安徽省油菜的生育期进程提供了理论支持,并在2011年业务应用中效果较好,完全可以满足业务需求。

纤维素糖化技术的瓶颈与酶活表征

纤维素作为自然界广泛存在的一种可再生资源,是重要的可替代工业原料,因此,纤维素糖化技术研究始终是人类关注的热点问题。针对天然纤维素生物降解研究中所面临的关键性问题,借鉴淀粉糖化技术的研究思路,比较和探讨了影响纤维素生物降解的技术瓶颈和真纤维素酶活性的表征,提出了纤维素生物转化和纤维素酶筛选的新途径。

经阴道二维超声、三维容积超声及血流显像在脱出型黏膜下肌瘤诊断中应用价值

目的:探讨经阴道二维超声(2D-TVS)、三维超声(3D-TVS)容积成像及血流显像(3D-DUS)在脱出型黏膜下肌瘤诊断及起始部定位中的价值。方法:临床可疑脱出型黏膜下肌瘤并决定手术治疗病人57例,均行2D-TVS检查,术前再行3D-TVS检查。以手术病理结果为金标准,比较2种方法的诊断准确率。并根据手术结果,将脱出型黏膜下肌瘤病人作为确诊组,非肌瘤性病变病人作为疑似组,比较2组病人的“低回声为主”“Ⅰ形蒂部结构”等声像图特点。结果:经手术病理确诊脱出型黏膜下肌瘤34例,宫颈息肉20例,宫颈癌、子宫内膜癌、宫颈肌瘤各1例。2D-TVS和3D-TVS诊断灵敏度分别为88.2%、94.1%,差异无统计学意义(P>0.05);特异度分别为54.5%、86.4%,3D-TVS特异度高于2D-TVS(P<0.05);一致性百分率分别为75%、91%。在2D-TVS的低回声为主、“Ⅰ”形蒂部结构、丰富条状血流和3D-TVS的“梨形”团块及3D-DUS的蒂部条束状血流方面,确诊组病人检出率均高于疑似组(P<0.05~P<0.01)。结论:2D-TVS与3D-TVS均能检查脱出型黏膜下肌瘤,但后者诊断特异度高于前者;2D-TVS、3D-TVS及3D-DUS显示的瘤体形态及血流的声像图特征可以作为诊断及鉴别诊断指标,提高诊断准确率,减少误诊及漏诊。