DNA条形码技术在蛇类鉴别中的应用

从NCBI中GenBank数据库下载蛇类细胞色素b基因(Cytb)序列7329条,以MT765098.1序列为标准进行对比和修剪,获得蛇类Cytb序列4665条。对蛇类Cytb序列进行核苷酸饱和度、遗传多样性、种内和种间遗传距离计算,构建系统发育树。结果表明,基于Kimura–2–Parameter模型,蛇类平均种内遗传距离为3.3%,普遍小于6.7%,而平均种间遗传距离为19.96%,普遍高于9.3%,说明蛇类物种间遗传距离存在较大差异。根据蛇类物种间遗传距离,识别出蛇类23个物种的亚种,Pareas和Hydrophis属物种含有复合体,Atractus dunni、A.iridescen和A.occidentali互为姐妹物种。

鬼针草提取物对PRRSV诱导炎症反应的抑制作用

为研究鬼针草提取物(BPE)对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)诱导炎症反应的抑制作用,以非洲绿猴胚胎肾细胞(Marc-145)为研究对象,将其分为4个不同浓度(100、200、400和800μg/mL)BPE处理组、空白对照组和病毒对照组,通过观察细胞病变(CPE)和CCK-8法测定PRRSV感染后的细胞活力;实时荧光定量PCR(qPCR)检测BPE对PRRSV诱导Marc-145细胞IL-6、IL-8和TNF-α mRNA相对表达量的影响;将21日龄断奶仔猪分为空白组、病毒对照组、鬼针草高剂量组、中剂量组和低剂量组,空白组和病毒对照组饲喂基础日粮,给药组待仔猪出现临床症状后分别饲喂添加量为0.4%、0.8%和1.2%BPE的基础日粮,分别于第7、14、28天分离血清,使用ELISA试剂盒检测IL-6、IL-8和TNF-α含量,qPCR检测PRRSV载量,第28天剖检并采集肺脏进行组织病理学观察。结果显示,BPE可改善PRRSV诱导Marc-145细胞产生的病变,提高Marc-145细胞活力,有效降低PRRSV诱导的IL-6和TNF-α mRNA相对表达量;BPE能够降低攻毒仔猪血清中的炎症因子含量和PRRSV载量;肺脏组织病理学观察结果显示,病毒对照组仔猪的肺脏呈现典型的间质性肺炎,肺泡壁增厚,成纤维细胞增生,有大量炎性细胞浸润,肺中可见散在大小不一的出血灶,而各给药组仔猪肺脏的病理组织学变化有所改善。结果表明,BPE可通过抑制PRRSV诱导的炎症因子产生,降低PRRSV对仔猪肺脏的损伤。本试验结果可为鬼针草用于猪繁殖与呼吸综合征的临床治疗提供参考。

茶树精油纳米乳剂的制备及其质量评价

为了制备稳定性高的茶树精油(tea tree oil, TTO)纳米乳剂,并评价制备的TTO纳米乳剂的质量,试验采用高能剪切法制备TTO纳米乳剂,根据伪三元相图确定TTO纳米乳剂的最优配方。对采用最优配方制备的TTO纳米乳剂进行外观性状观察,采用染色法进行类型鉴定,使用pH计测定pH值,通过透射电子显微镜观察表面形貌,使用激光粒度仪测定粒径和电位,并考察其稳定性,利用二倍稀释法测定TTO纳米乳剂和TTO对巴氏杆菌和沙门氏菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果表明:TTO纳米乳剂的最优配方为12.95%蓖麻油聚氧乙烯醚(EL-40)、6.5%聚乙二醇400(PEG-400)、8.33%TTO、72.22%纯化水。采用最优配方制备的TTO纳米乳剂为水包油(O/W)型乳剂,平均pH值为8.32,平均粒径为15.7 nm,表面电位为(-4.29±0.26)mV。将TTO纳米乳剂加水按1∶20~1∶120稀释,静置24 h后观察无分层或沉淀现象;4 000,6 000,8 000,10 000 r/min分别离心20 min后,纳米乳剂的外观性状无变化,也无沉淀、分层等现象产生。在不同温度(-20℃、4℃、25℃、40℃、60℃、80℃)下处理30 min后,其外观无明显变化,且60℃加热后其外观更透明,80℃加热后出现分层现象;在4℃下放置30 d后观察,无任何异常变化。用pH值为5,6,7,8,9的水溶液将TTO纳米乳剂分别按1∶100、1∶1 000、1∶10 000稀释后静置24 h观察,无沉淀或絮状物等产生。TTO纳米乳剂对巴氏杆菌和沙门氏菌的MIC值分别为39.65 mg/mL、29.74 mg/mL,优于未纳米乳化的TTO(对巴氏杆菌和沙门氏菌的MIC值均为49.57 mg/mL)。说明TTO纳米乳剂能够解决TTO易挥发、难溶于水等问题,制备的TTO纳米乳剂具有纳米级粒径且尺寸均一,稳定性强,易于储存,易溶于水,具有良好的抑菌性。

NLRP3炎症小体在PRRSV调控机体炎症中的作用

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是一种严重危害猪类养殖业的病毒,引起了广泛关注,炎症作为机体对PRRSV感染的主要反应之一,在病毒感染过程中发挥重要作用。NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体作为一种重要的细胞内炎症调节机制,在PRRSV感染中扮演着不可忽视的角色。本文重点综述NLRP3炎症小体对PRRSV感染机体炎症的调控作用,并探讨其在PRRSV防控中的潜在应用价值,为PRRSV感染的机制和治疗研究提供参考。

神东煤显微组分与基本结构特征研究

对神东煤显微组分及其反射率分布特征进行了详细阐述.利用工业分析和元素分析结果及结构经验公式,研究了神东煤的结构特征与煤岩组成的关系.利用13C-NMR对神东煤显微组分进行了分析测试.结果表明,神东煤显微组分及其亚组分具有各自不同的反射率分布范围,煤中低反射率的惰质组含量较高.挥发分、氢含量、氮含量和氢碳比随惰质组含量的增加而下降,碳含量、芳碳率和缩合环数随惰质组含量的增加而增加.13C-NMR测得镜质组和惰质组的芳碳率分别为0.67和0.81.

图像法测定煤岩组分反射率工作曲线的建立与应用

基于图像分析的煤岩自动测试系统测定煤岩组分反射率的理论依据是物质的反射率值与图像的灰度值呈正比关系,工作曲线的建立是测定显微组分反射率的前提。系统分析了图像法测定反射率的原理、测试流程、原理公式,并利用煤岩自动测试系统进行建立工作曲线的试验研究和验证,分析工作曲线的最大量程和反射率的分辨能力,提出在实际测试中工作曲线的选择原则。工作曲线的斜率、最大量程、分辨能力均可通过改变显微镜照明强度和显微数码照相机曝光时间两种方式调整。256级灰度值的显微数码照相机满足图像法测定反射率的精度要求。反射率自动测试系统与传统的光度计法的测试结果的平均值和直方图对比性强。

神东煤液化残渣显微组分的特征与分类研究

在PSU处理能力为0．1t／d的小型连续液化装置上对神东煤进行了加氢液化试验，对其液化残渣进行了显微光学研究。结果表明，在液化过程中，原料煤中的壳质组和镜质组全部转化，惰质组部分转化，在残渣中可见未反应的惰质组，同时在残渣中出现中间相小球体和半焦等新生组分。矿物质大量富集，并基本保持煤中原有的形态特征。THF处理后残余惰质组反射率在2．0％～3．8％，略高于煤中高反射率惰质组反射率，煤中高反射率惰质组是残余惰质组的主要来源。

焦炭光学组织与煤、焦质量关系研究

分析了现行焦炭光学组织分类标准存在的问题,焦炭光学组织的常用研究方法,惰质组在焦化过程中的活性,焦炭光学组织的形成与镜质组反射率分布的关系,焦炭光学组织与焦炭质量的关系。

猪圆环病毒2型感染PK-15细胞中外泌体的鉴定及其对细胞增殖和凋亡的影响

旨在分离感染PCV2的PK-15细胞分泌的外泌体,探讨其在PCV2感染淋巴细胞中的作用。提取PCV2感染PK-15细胞上清液中的外泌体,利用透射电镜观察外泌体形态、纳米颗粒跟踪分析测定外泌体粒径、Western blot检测外泌体标记蛋白分子(CD81、TSG101);PKH67标记外泌体后检测细胞对外泌体的摄取;提取PCV2-外泌体基因组,检测PCV2 Rep和Cap基因;利用间接免疫荧光试验检测PCV2-外泌体感染PK-15细胞后PCV2病毒定位;通过绝对定量PCR检测PCV2-外泌体对淋巴细胞的感染率;利用CCK-8法检测淋巴细胞增殖;利用Annexin V-FITC/PI检测淋巴细胞凋亡率。透射电镜和外泌体粒径分析结果显示,PK-15细胞分泌的外泌体为双层膜的囊泡,直径30~200 nm;Western blot结果显示PK-15细胞分泌的外泌体存在特异性标记蛋白CD81和TSG101;外泌体摄取试验结果显示PCV2-外泌体能够被细胞摄取;PCR结果表明PCV2-外泌体基因组中含有PCV2 Rep和Cap基因;间接免疫荧光结果显示,与PCV2直接感染相比,PCV2-外泌体感染的淋巴细胞中,PCV2病毒拷贝显著升高,差异明显(P<0.01),外泌体裂解后感染淋巴细胞能力与PCV2病毒无显著差异;PCV2-外泌体可显著抑制淋巴细胞增殖(P<0.01或P<0.05);PCV2-外泌体显著提高淋巴细胞凋亡率。PCV2感染PK-15细胞的外泌体中携带病毒基因,感染淋巴细胞后使细胞增殖降低和细胞凋亡增加。

热应激致Hsc70出入核与细胞凋亡的关系

旨在探讨热应激对H9c2心肌细胞构成型HSP70(constitutive or cognate HSPs,Hsc70)出入核及细胞凋亡的影响。以42℃作为热应激模型温度,通过转染Hsc70siRNA抑制Hsc70表达,Western blot检测细胞质和细胞核内Hsc70表达,ELISA检测细胞培养液LDH浓度,Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡。结果表明,正常H9c2心肌细胞质Hsc70表达量较高,细胞核中表达量很低,细胞质和细胞核Hsp72表达量非常低。热应激后细胞质Hsc70表达量无显著差异,而细胞核Hsc70热应激30和100min后极显著升高(P<0.01),热应激240min后开始降低;细胞质和细胞核Hsp72热应激后显著升高(P<0.05或P<0.01)。Hsc70抑制表达后,细胞质Hsc70水平显著降低,热应激后Hsc70入核明显减少,但仍然有入核现象;Hsc70抑制表达对细胞质和细胞核Hsp72表达无显著影响。与热应激组相比,热应激+Hsc70siRNA组LDH表达量呈升高趋势,热应激100min两组出现显著差异(P<0.05);Hsc70抑制表达后H9c2细胞在热应激后更容易发生凋亡,而且在热应激30和100min内,两组之间存在显著差异(P<0.05)。结果提示,热应激可诱使Hsc70出入细胞核,Hsc70抑制表达后热应激诱导Hsc70入核显著降低,细胞损伤加重,细胞凋亡升高。

禽白血病病毒J亚群诱导蛋鸡群多种肿瘤

2009年8月,山东泰安某海兰褐商品蛋鸡场,开产后产蛋率只有60%～70%,31周龄时,死亡率突然增加,最高达20%。患病鸡经大体剖检、病理组织学、PCR和免疫组织化学检测确诊为J亚群禽白血病。病理组织学检测发现送检鸡除了髓细胞瘤外,还存在明显的纤维肉瘤、组织肉瘤、腺癌和血管内皮瘤等肿瘤。纤维肉瘤单独存在,组织肉瘤、腺癌和血管内皮瘤分别和髓细胞瘤混合存在,本文详细描述了各肿瘤的组织学特点。ALV-J从肉种鸡传向商品蛋鸡后引起肿瘤谱扩展的原因和机制值得进一步研究。

神东煤不同显微组分加氢液化性能及转化规律

研究了450℃下神东煤不同煤岩显微组分的加氢液化性能,从动力学角度探讨了其转化规律.结果表明:神东煤镜质组和壳质组的转化速率为惰质组的近2·6倍,镜质组和壳质组生成油和沥青烯的速率为惰质组的近2·9倍.未反应煤中主要是惰质组,镜质组和壳质组转化为油及沥青烯的比例高于惰质组.

银杏叶提取物对热应激致鸡心肌细胞氧化损伤的保护作用研究

本试验旨在研究银杏叶提取物(Ginko biloba extract,GBE)对热应激致鸡心肌细胞氧化损伤的保护作用。取12日龄AA肉鸡心脏制备鸡原代心肌细胞,向原代心肌细胞培养板中分别加入0、5、10、50、100、150 mg/mL GBE,CCK-8试剂盒检测心肌细胞存活率;将原代心肌细胞以1×104个/孔接种于96孔板,培养48h,分别加入0、5、10、50、100、200、500、1 000μg/mL GBE,Hoechst 33258检测心肌细胞凋亡率,确定最适GBE浓度。42℃热应激处理(0、0.5、1、2和4h)建立心肌细胞损伤模型,ELISA试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)、细胞丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量,以及超氧化物歧化酶(SOD)活性;Western blotting检测Hsp72蛋白表达。结果显示,高浓度GBE具有细胞毒性,50、100、150mg/mL GBE能极显著抑制细胞生长(P<0.01),50μg/mL GBE能够极显著提高细胞增殖率(P<0.01)。热应激后细胞发生凋亡,细胞内MDA、LDH含量增加,SOD活性、GSHPx含量减少,产生氧化损伤;GBE可以降低热应激时细胞LDH和MDA的含量,增加SOD活性和GSH-Px的含量,热应激2、4h,GBE处理效果明显。此外,GBE可增加心肌细胞中Hsp72蛋白的表达。综上所述,GBE能降低热应激状态下心肌细胞的氧化损伤,其机制可能与提高抗氧化酶活性及提高Hsp72的表达有关。

光度计测定镜质体反射率工作曲线的建立与应用

为了优化配煤,提高镜质体反射率测试精度,以MSP UV-VI2000型光度计为例,介绍了测定镜质体反射率的原理和测试流程。推导出了测定反射率的通用公式和专用公式。对2种公式进行比较发现:专用公式需要校准设备,过程繁琐。通用方法具有普遍适用的特点,其基本步骤为人工读数,做曲线,计算反射率值,绘制直方图。根据公式,分析了工作曲线的最大量程,反射率的分辨能力。重点比较分析了不同斜率的2条光度计工作曲线以及在测试过程中如何选择工作曲线。最后提出了光度计测定镜质体反射率应遵循的原则。

应用型本科院校《动物病理学》课程教学改革探索与实践

以应用型人才培养的实施为切入点,构建产教融合、注重实践的动物病理学教学课程改革方案,利用"产学研"基地、新媒体辅助技术等手段,采取"以赛促学"、"双师同课"等方式,从课程目标、教学模式、教学方法、实践教学、考核评价方面进行探索和实践,为应用型地方本科院校动物医学专业课程改革提供参考。

一例犬埃里希氏体病的诊断与治疗

为了对一例犬的埃里希氏体病进行诊断与治疗,采用临床检查、血常规检查、血液生化检查、IDEXX 4Dx测试板检查、电解质检查和血涂片检查等方法对犬埃里希氏体进行确诊。结果表明：在患犬的耳廓、背部皮肤发现蜱虫,四肢等多处皮肤糜烂,有出血倾向;红细胞、白细胞数量降低,碱性磷酸酶活性升高,球蛋白含量升高;IDEXX 4Dx测试板检测犬埃里希氏体呈阳性;血涂片检测在单核细胞中发现包涵体。说明该犬所患疾病为犬埃里希氏体病,经驱虫、输血、消炎、保肝等治疗后该患犬康复出院。

煤的发热量与水分、灰分的关系研究

利用煤的发热量计算公式分析并推导了发热量与水分、灰分之间的关系,得出了三者之间的关系方程。利用该方程可回归出同一矿井煤的发热量与水分、灰分的关系方程。

关于深化文化体制改革的若干思考

建设中国特色社会主义文化,是建设中国特色社会主义、实现社会主义现代化的一项重要任务。在经济全球化和中国加入世界贸易组织的背景下,中国的文化发展面临着新的机遇和挑战,要抓住机遇,迎接挑战,加快文化事业的发展,就必须深化文化体制的改革。本文拟就文化体制改革的有关问题做一点粗浅的探讨。 一、深化文化体制改革的背景与改革目标 在我国入世的谈判中。

试论社会主义土地的准商品性

一、社会主义社会中的土地不是商品在关于社会主义土地性质的讨论中,有的同志提出了经过人类耕种和改良、或经过多年劳动加工的非原始状态的土地(建筑地段)是劳动产品,具有价值的观点,(本文引述并加以讨论的观点,请参见陈秀华同志的文章《社会主义建筑地段性质初探》,载《中国房地产》1984年第1期;《论建筑地段的商品性》,载《江汉论坛》1985年第9期)并以此作为社会主义土地是商品的立论根据,这种观点是值得商榷的.