基于科研范式变革的实验动物资源创新发展

实验动物是支撑生命科学和生物医药等领域科技创新的重要基础科研条件之一。随着科研范式的变革,准确把握科学前沿和国家重大需求,进一步凝练实验动物资源创制与发展中的难点和疑点,对加快推动实验动物新品种/新品系开发和动物模型创制与发展具有重要意义。本文梳理了我国实验动物资源建设和应用情况,就应对新形势下的科研范式变革中存在的主要问题进行了深入探讨,展望了我国实验动物资源发展新动向,以期为实验动物新资源研究开发提供新视角。

敲除CRFK细胞氨基肽酶N对猫传染性腹膜炎病毒复制影响的研究

猫氨基肽酶N(fAPN)参与猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)的感染过程,为研究f APN对FIPV复制的影响,本研究针对f APN第14外显子设计了1对sg RNA,将sg RNA退火后克隆至p X458质粒中,构建同时含有Cas9蛋白和sg RNA的重组质粒。重组质粒经PCR及测序鉴定正确后,瞬时转染猫肾细胞(CRFK)中,24 h后通过流式细胞仪分选带有绿色荧光的单克隆细胞。单克隆细胞经稳定传代培养后,细胞中的绿色荧光消失,对细胞进行PCR和测序,结果显示:3株单克隆细胞在f APN第14外显子有1个碱基的插入,造成移码突变,导致f APN不能正常表达,表明敲除f APN蛋白的CRFK细胞系正确构建,命名为KO-APN14。将FIPV分别感染CRFK细胞及培养20代的KO-APN14细胞,48 h后通过间接免疫荧光试验(IFA)检测FIPV N蛋白的表达;将FIPV分别感染CRFK细胞及KO-APN14细胞,在感染4 h、12 h、24 h、36 h时采用RT-q PCR分别检测FIPV N基因、视黄酸(维甲酸)诱导基因I(RIG-I)、黑色素瘤分化相关基因5(MDA5)、Toll样受体3(TLR3)、干扰素β(IFN-β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)的转录水平。IFA结果显示:感染FIPV的CRFK细胞出现绿色荧光,未感染FIPV的CRFK细胞、未感染FIPV的KO-APN14细胞及感染FIPV的KO-APN14细胞均无绿色荧光;RT-q PCR检测FIPV感染各细胞后病毒N基因的转录水平,结果显示:与感染FIPV的CRFK细胞相比,感染FIPV的KO-APN14细胞能够极显著抑制FIPV N基因的转录(P<0.0001);RT-q PCR检测FIPV感染各细胞后上述各细胞因子的转录水平,结果显示:与感染FIPV的CRFK细胞相比,感染FIPV的KO-APN14细胞能够抑制RIG-I、MDA5、TLR3、IFN-β、IL-6、IL-10、TNF-α及f APN的转录。综上所述,f APN是FIPV在侵入细胞及病毒复制过程中发挥重要作用,并在FIPV引起的炎症反应过程中起关键作用。本研究为f APN在免疫炎症反应中作用的研究提供科学依据,并为培育基因编辑抗病育种猫奠定实验基础。

实验动物弓形虫荧光定量PCR检测方法的建立及应用

目的建立实验动物弓形虫TaqMan探针实时荧光定量PCR检测方法,并对其进行初步应用。方法通过比对美国国家生物技术信息中心(NCBI)发表的弓形虫各毒株序列,选取其529 bp重复序列保守区域设计引物探针,建立弓形虫的荧光定量PCR方法。随后对方法的特异性和敏感性进行检验;取浓度为10^(6)~10^(2)copies/μL 10倍系列稀释的质粒标准品,每个浓度做3个平行,重复检测3次,计算组内和组间变异系数,评估方法的重复性和稳定性;用建立的荧光定量PCR方法及国标推荐的PCR方法检测14份犬组织样品和66份猪全血样品,以评估此方法在实际应用中的检测能力。结果建立的弓形虫荧光定量PCR方法在10^(8)~10^(1)copies/μL范围Ct值与质粒浓度呈线性关系,标准曲线Slope为-3.285,R^(2)值为1,扩增效率为10^(1).663%。可检测到的弓形虫最低浓度为10^(1)copies/μL;与其他14种实验猪常见病原不发生交叉反应;重复检测10^(6)~10^(2)copies/μL质粒标准品,组内变异系数小于1.21%,组间变异系数小于0.62%。用建立的弓形虫荧光定量PCR方法和国标PCR方法对14份犬组织样品和66份猪全血样品进行检测,结果显示,弓形虫荧光定量PCR方法和国标PCR方法检测的阳性率分别为10%(8/80)和7.5%(6/80),阳性符合率达到100%。结论建立的弓形虫荧光定量PCR方法可以有效地检测弓形虫,为实验动物弓形虫日常监测提供良好的方法。

鹌鹑实验动物化简史及相关研究进展

鹌鹑是一种重要的生产和实验用家禽,可按照实验动物标准进行实验动物化。文章总结了鹌鹑实验动物化简史及当前与实验动物领域密切相关的研究进展,包括分类学地位和驯化、常用的品种品系及资源、无菌鹌鹑培育、近交系鹌鹑培育、实验室饲养健康管理和资源保存,并对实验鹌鹑的应用前景进行了展望。

煤矿井下钻探远程支持技术及其应用前瞻

为提升钻探工艺技术信息化程度,进一步提高业务水平、服务效率和企业管理水平,提出以煤矿井下钻探技术为理论支撑,基于网络有线、无线传输等建构煤矿井下钻探技术远程支持服务体系,开发出基于该远程支持服务体系的煤矿井下钻探技术远程服务平台系统。平台的功能实现由5个模块组成,包括慕课视频点播模块、远程故障维修模块、远程技术支持模块、消息推送模块、信息安全模块。通过基于“端对端”的钻探技术标准化培训平台和基于浏览器/B/S架构的钻探技术装备远程指导系统,为施工现场提供了故障诊断、技术查询、可视化维修等技术支持,使煤矿井下钻探技术服务更高效、更及时,有力提高了服务效率,降低了人工成本,更有效地提升了钻探工艺服务信息化程度,为钻探设备的智能化发展赋能。

兔多杀性巴氏杆菌和兔出血症病毒双重PCR检测方法的建立及初步应用

为建立兔多杀性巴氏杆菌(Pm)和兔出血症病毒(RHDV)的双重PCR检测方法,本研究根据Pm kmt1基因和RHDV VP60基因保守区域,设计2对特异性引物,经PCR分别扩增Pm kmt1基因和RHDV VP60基因保守区域,构建重组质粒pMD-Pm和pMD-RHDV,并经菌液PCR和测序鉴定后作为重组质粒标准品。经各反应条件优化后初步建立了检测Pm和RHDV的双重PCR方法。反应条件优化结果显示,该方法的最适退火温度为59℃,扩增kmt1和VP60基因的最优引物浓度均为0.5μL(10μmol/L)。对Pm和RHDV及其他病原包括兔源支气管败血波氏杆菌、产气荚膜梭菌等20种相关病原的特异性试验结果显示,除Pm和RHDV有特异性扩增条带外,其余相关病原均无扩增条带,特异性较强。将两种重组质粒标准品分别10倍倍比稀释并等体积混合后作为模板,经该双重PCR方法扩增。结果显示,该方法对pMD-Pm的检测限为17.9拷贝/μL,对pMD-RHDV的检测限为1260拷贝/μL,敏感性较高;对两种病原的DNA和cDNA混合物的批内和批间重复性试验结果均一致,重复性较好。对100份临床患病兔肺脏样品的检测结果显示,Pm和RHDV的阳性率分别为13%(13/100)和7%(7/100),二者混合感染率为37%(37/100),与已报道的Pm和RHDV单一PCR方法的检测结果均一致。表明该方法检测的准确性较高,可以用于临床样品的检测。本研究建立的同时快速检测Pm和RHDV的双重PCR方法为临床这两种病的诊断提供了技术支持。

实验用荣昌猪SLA-1等位基因鉴定及分子遗传特征分析

旨在明确实验用荣昌猪SLA遗传背景,深入研究SLA-1分子相关的抗原递呈和免疫应答机制,本研究对27头荣昌猪采集抗凝血,分离外周血淋巴细胞,提取总RNA,设计特异性引物对SLA-1基因进行RT-PCR扩增、克隆和测序,对获得序列的分子特征进行分析。结果显示,荣昌猪中共获得11个SLA-1等位基因,其中,9个为新等位基因,全部获得GenBank登录号和ISAG SLA命名委员会官方命名,SLA-1^(*)24:01等位基因在该群体中频率最高。SLA-1基因编码区全长1086 bp,存在127个核苷酸多态位点,非同义单核苷酸多态性位点数高于同义单核苷酸多态性位点数。核苷酸多样度为0.0449,单倍型多样度为1,平均核苷酸差异数为48.782,G+C含量为64.9%。SLA-1基因编码的361个氨基酸中,有75个氨基酸变异位点;第2和第3外显子编码区多态性最高,且第2外显子区域的氨基酸变异程度高于第3外显子区,组成抗原肽结合槽6个口袋的33个关键氨基酸位点中,11个在人与荣昌猪之间高度保守,与β2-微球蛋白结合的19个关键氨基酸位点中,10个保持一致,CD8分子与MHC结合的关键氨基酸位点中,只有225(Thr/Ser)和228(Thr/Met)位点不同。同源性和系统进化树分析表明,SLA-1^(*)10:03和SLA-1^(*)18:03分别与人HLA-A^(*)02:01和HLA-A^(*)11:01等位基因的同源性最高,荣昌猪与亚洲野猪、巴马小型猪和融水小型猪等亚洲猪种具有较近的亲缘关系。本研究成功获得了中国地方猪种荣昌猪SLA-1基因,发现其具有极为丰富的多态性,为揭示荣昌猪的SLA遗传背景和开展异种移植研究奠定了遗传学基础。

猪氨基肽酶N病毒结合受体核心区对TGEV在ST细胞中复制影响的研究

为研究与猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)结合的猪氨基肽酶N(pAPN)受体核心区对TGEV复制以及细胞功能的影响,本研究检索并分析pAPN与TGEV的结合位点,结果显示,敲除pAPN aa668~aa963对其酶活性无影响。因此,利用CRISPR/Cas9技术构建pAPN与TGEV结合位点敲除细胞系,经PCR和western blot鉴定结果显示,正确构建一株敲除pAPN aa668~aa963的ST细胞系,即敲除pAPN 15-21外显子,命名为KO-ST-15。采用CCK-8和细胞划痕方法检测KO-ST-15细胞的增殖和细胞迁移活性,结果显示,敲除pAPN 15-21外显子对ST细胞增殖和迁移活性均无显著影响。利用RT-qPCR和IFA检测KO-ST-15感染TGEV后病毒复制拷贝数和N蛋白的表达,结果显示,敲除pAPN 15-21外显子可极显著抑制TGEV在ST细胞系中的复制(P<0.001)。利用RT-qPCR检测KO-ST-15感染TGEV后炎症相关基因转录水平变化,结果显示,TGEV感染后KO-ST-15中的IL-6、IL-8和NLRP3(NOD-like receptor protein 3)mRNA转录水平无显著变化,但RIG-I和MDA5的转录水平显著上调(P<0.05)。上述结果首次表明,敲除pAPN15-21外显子能够极显著抑制TGEV在ST细胞中的复制,但细胞KO-ST-15的正常生理功能无变化,TGEV不能进入敲除pAPN 15-21外显子的细胞中引起炎症反应,该结果为进一步培育抗病育种猪提供参考依据和候选方案。

ZDY4500LK全流程自动钻机研制与应用研究

为提高煤矿井下钻机施工安全性、提升钻孔效率、降低工人劳动强度,设计开发了一种基于六轴机械手自动加卸钻杆的一体式钻孔机器人及控制方法,解决了煤矿井下机器人伺服电机控制系统防爆问题。整机采用一体式结构,运输尺寸小,变幅装置灵活可靠,可以实现150 m左右钻孔的全自动钻进施工。介绍了该钻机的主要技术特征及系统参数、关键技术,以及在淮南张集矿的工业性试验情况。试验结果表明,ZDY4500LK钻机结构设计合理,双机协同控制系统运行可靠,实现了全自动钻进施工,促进了钻探装备技术自动化、智能化的发展。

NFE2L2基因突变促进食管鳞状细胞癌发生发展的初步研究

背景与目的食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)是我国主要的食管癌病理类型,大量研究表明ESCC的发生主要与抑癌基因的失活相关。核转录因子E2相关因子(nuclear factor erythroid 2-like2,NFE2L2)在多种肿瘤中发生功能增强性突变,但少有研究关注NFE2L2在ESCC中的功能机制。本研究旨在探究NFE2L2在ESCC中的突变情况及其功能分子机制。方法从组学原始数据归档库(Genome Sequence Archive,GSA)中下载获取课题组前期研究中663例ESCC的全基因组测序数据,分析NFE2L2基因在ESCC中的突变频率,基于突变情况将ESCC患者分为NFE2L2突变组和NFE2L2未突变组。采用Kaplan-Meier法对两组患者进行生存分析,采用多因素Cox回归方法分析ESCC患者不良预后的危险因素。构建过表达空载、野生型NFE2L2和突变型NFE2L2食管鳞癌细胞株,通过体外细胞迁移和侵袭实验检测NFE2L2突变对肿瘤细胞迁移侵袭能力的影响。从全转录组学测序数据中鉴定NFE2L2突变组和NFE2L2未突变组的差异表达基因,同时对差异表达基因进行GSEA和KEGG富集分析。结果在663例ESCC中,有43例发生NFE2L2基因突变,突变总频率为6.5%。NFE2L2突变组患者的总生存率低于NFE2L2未突变组(P<0.01)。多因素Cox回归分析显示,NFE2L2基因突变是ESCC患者不良预后的独立危险因素(P<0.01)。与空载对照相比,过表达野生型NFE2L2株抑制了肿瘤细胞转移侵袭能力(P<0.01),过表达突变型NFE2L2株在一定程度上削弱了该抑制作用,R569H突变类型促进食管鳞癌细胞的迁移与侵袭(P<0.05)。结合全转录组测序数据进一步分析发现,NFE2L2突变通过促进细胞周期运转、抑制干扰素反应、增强谷胱甘肽代谢等信号通路促进ESCC的发生和发展,其中影响谷胱甘肽合成相关基因GCLM、G6PD、PGD和SLC7A11等在NFE2L2突变患者组的mRNA表达水平均明显高于NFE2L2未突变组(P<0.05)。结论NFE2L2基因突变通过影响细胞周期、抑制干扰素反应和增强谷胱甘肽代谢促进ESCC的发生与转移,NFE2L2基因突变是ESCC患者不良预后的独立危险因素。

识别不同亚型鸭甲型肝炎病毒VP0蛋白单克隆抗体的制备及表位鉴定

为制备鸭甲型肝炎病毒(DHAV)VP0蛋白的单克隆抗体(MAb),本实验经PCR扩增DHAV-1和DHAV-3的VP0基因并克隆至原核表达载体pMAL-c5x中分别构建重组质粒pMAL-c5x-DHAV1-VP0和pMAL-c5x-DHAV3-VP0。重组质粒均经PCR和测序鉴定正确后转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,采用IPTG诱导表达,并经亲和层析的方法纯化后,采用SDS-PAGE检测两个重组蛋白的表达与纯化效果。SDS-PAGE结果显示,分别在约70 ku处出现目的条带,且纯化后的条带较单一。表明两种重组VP0蛋白(DHAV-1 rVP0和DHAV-3 rVP0蛋白)均获得了表达,且纯化效果均较好。采用纯化的DHAV-1 VP0和DHAV-3 VP0蛋白交叉免疫BALB/c小鼠4次,并在冲击免疫后3 d收获小鼠脾淋巴细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,采用间接ELISA方法筛选能够稳定分泌DHAV-1 VP0及DHAV-3 VP0蛋白抗体且MBP蛋白抗体为阴性的杂交瘤细胞株,采用试剂盒鉴定MAb的亚类。结果显示,获得了针对DHAV-1及DHAV-3 VP0蛋白的MAb 1H10,且其为IgG1亚型,轻链为κ链。将构建的表达DHAV-1及DHAV-3 VP0蛋白的重组真核表达质粒经PCR和测序鉴定正确后分别转染HEK293T细胞,24 h后以该MAb作为一抗,分别采用western blot和间接免疫荧光试验(IFA)鉴定。结果显示,转染两种重组质粒的细胞均在35 ku处出现特异性条带,且细胞中均出现特异性绿色荧光,而转染空载体的对照细胞无该条带和绿色荧光。表明制备的MAb可以用于western blot和IFA鉴定DHAV-1和DHAV-3 VP0蛋白的表达。通过对VP0基因截短表达并采用western blot鉴定其识别的抗原表位,并对该表位的氨基酸序列与NCBI数据库中VP0蛋白的氨基酸序列比对。结果显示,MAb 1H10识别的线性表位为VP0蛋白的184LRTNTEIDL192,该表位与不同年代和不同地域分离的DHAV-1及DHAV-3 VP0蛋白相应氨基酸序列的同源性均为100%。表明该抗原表位在不同DHAV分离株中的保守性很高。本研究为DHAV检测方法的建立及具有广谱保护性表位疫苗的设计提供实验参考。

兔源多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌和肺炎克雷伯菌多重PCR检测方法的建立

目的建立兔源多杀性巴氏杆菌(Pm)、金黄色葡萄球菌(Sa)和肺炎克雷伯菌(Kp)的多重PCR方法。方法本研究参考Pm kmt1基因、Sa nuc基因和Kp kh1基因的保守区域,设计3对特异性引物,以温度梯度PCR法确定最适退火温度(Tm),采用控制单一变量法优化引物浓度,构建kmt1、nuc和kh1基因的重组质粒标准品pMDPm、pMD-Sa和pMD-Kp,确定最小检测量;以兔源支气管败血波氏杆菌和产气荚膜梭菌等9种病原体核酸样本确定多重PCR法的特异性;通过批间和批内实验验证其重复性;经检测疑似感染的临床样本与已报道的检测方法进行比较,评估其临床应用效果。结果最适退火温度为54.5℃;扩增kmt1和nuc基因的引物最适浓度均为1μL(10μmol/L),扩增kh1基因的引物最适浓度为0.5μL(10μmol/L);pMD-Pm最低检测限为20.6 copies/μL,pMDSa最低检测限为18.2 copies/μL,pMD-Kp最低检测限为23.2 copies/μL,表明其灵敏性高;该方法仅对Pm、Sa和Kp有特异性扩增条带,对其他病原体均无扩增条带,表明特异性较强;批间和批内检测结果一致,表明重复性较好;经临床样本检测Pm、Sa和Kp单独的阳性率分别为62.92%、25.84%和49.43%,与已报道的检测方法结果一致。结论本研究成功建立了一种能够同时快速检测兔源多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌和肺炎克雷伯菌的多重PCR方法。

鸡传染性支气管炎病毒S1基因免疫对鸡的保护作用

将鸡传染性支气管炎病毒肾型 Ｔ 株 Ｓ１ 基因ｃ Ｄ Ｎ Ａ 连接于ｐｃ Ｄ Ｎ Ａ３ 的 Ｈｉｎｄ Ｉ Ｉ Ｉ与 Ｂａ ｍ Ｈ Ｉ位点之间构建含有 Ｃ Ｍ Ｖ 启动子及 Ｂ Ｇ Ｈｐｏｌｙ Ａ 信号序列的鸡传染性支气管炎病毒 Ｓ１ 蛋白真核表达质粒。实验证明， Ｓ Ｐ Ｆ 鸡肌注免疫后血清 Ｉｇ Ｇ 抗体逐渐升高，至第３５ 日龄左右达到高峰，攻毒后血清 Ｉｇ Ｇ 抗体先下降而后升高，血清 Ｉｇ Ｇ 抗体升高幅度不及 Ｉ Ｂ 油苗免疫组。质粒 Ｄ Ｎ Ａ 免疫鸡攻毒后有４０ ％ 的鸡可耐过强毒的攻击，说明 Ｓ１ 基因在体内获得了表达并使鸡产生了一定的免疫力。

创新土地合作模式 打造富民强村新路径——莒南县代彬土地股份专业合作社的实践与成效

乡村要振兴,产业必振兴。推进产业振兴,土地是基础,如何在有限的土地上创造更多的产出价值,是摆在所有农业从业者面前的一个挑战。山东省临沂市莒南县道口镇赫马岭村探索土地股份合作模式,成立赫马岭村代彬土地股份专业合作社,倡导全村农户以土地入股,既可以通过土地规模种植优化整合资源,又可以依托统一经营提升农业生产效率,实现了农户和村集体双增收,有力地推动了乡村产业发展。

医学院校大学生学习倦怠及相关因素探析

目的调查医学院校大学生的学习倦怠现状,探讨其相关因素,旨在为缓解医学院校大学生学习倦怠提供相关对策。方法采用一般情况调查表和大学生学习倦怠量表对分层随机选取的新乡医学院471名大学生进行施测。结果医学院校大学生中,学习倦怠总体平均分男生高于女生(P<0.05);不同年级和不同专业医学院校大学生在学习倦怠总体平均分及其各维度的得分上,差别均无统计学意义(P>0.05);不同家庭所在地、不同学习成绩的医学院校大学生在学习倦怠总体平均分上比较,差别均有统计学意义(P<0.01,P<0.001)。结论医学院校大学生存在一定程度的学习倦怠,其中男生、城镇学生和学习成绩差的大学生,其倦怠程度更高,应对其进行积极干预。

实验动物新型垫料的研究Ⅰ．蒲草的生物学特性及吸水、吸氨、保暖性能测定

蒲草表面光洁，质地柔软。通气组织蓬松，呈海绵状，约占据整个横切面的４／５．１ｇ蒲草２４Ｌ吸水４．０８±０．０８ｇ，高于刨花（吸水量２．９５±０．６４ｇ，Ｐ＜０．０５）和玉米棒芯（吸水量２．７６±０．２１ｇ，Ｐ＜０．０１）。贮放一年后蒲草吸水（吸水量４．３５±０．２５，Ｐ＞０．０５）性能不受影响。小鼠饲养实验结果，换笼后第４天及第７天蒲草垫料笼内氨浓度分别为７．３８±０．７２，１４．１０±０．６７ｍｇ／ｍ３，略低于刨花组（氨浓度分别为７．６５±２．２６，１４．４５±０．９３ｍｇ／ｍ３，Ｐ＞０．０５），显著低于玉米棒芯组（氨浓度分别为１０．０８±０．６８，１８．９９±１．４１ｍｇ／ｍ３，Ｐ＜０．０１）。在室温１４．４±２．１℃下，小鼠离巢５，１０，１５ｍｉｎ后巢内余温分别为１７．８±０．７，１６．７±１．３，１５．３±２．６℃，均略高于刨花组和玉米棒芯组。

鸡IL-2基因的克隆及序列测定

根据已发表的鸡白细胞介素２（ＩＬ２）基因序列设计引物，用ＲＴＰＣＲ方法从新城疫病毒感染的雏鸡脾淋巴细胞培养物中扩增出鸡的ＩＬ２基因ｃＤＮＡ，并进行序列测定，为进一步表达鸡ＩＬ２并深入研究其功能奠定了基础。

强迫症患者儿童期被忽视及追求完美与强迫症严重程度的相关性研究

目的探讨强迫症患者儿童期被忽视、追求完美与强迫症严重程度的关系以及儿童期被忽视的中介作用。方法选取2011年12月—2012年11月在新乡医学院第二附属医院治疗的强迫症患者76例,采用耶鲁-布朗强迫症状量表(Y-BOCS)、儿童期被忽视量表(CNS)、中文Frost多维度完美主义问卷(FMPS)进行评估,采用层次回归法和依次检验回归系数法评估和检验儿童期被忽视在追求完美与强迫症严重程度之间的中介作用。结果Y-BOCS评分为(19.4±2.6)分、CNS评分为(104.0±6.6)分、FMPS评分为(111.3±4.6)分。Y-BOCS评分与CNS评分呈正相关(r=0.409,P<0.001);Y-BOCS评分与FMPS评分呈正相关(r=0.364,P=0.001);CNS评分与FMPS评分呈正相关(r=0.295,P=0.010)。层次回归分析结果显示,追求完美通过儿童期被忽视的中介作用对强迫症严重程度产生间接影响,中介效应值约为:0.097/0.267=36.3%。结论儿童期被忽视的程度越高,强迫症程度越严重。追求完美除对强迫症严重程度有直接影响外,还通过儿童期被忽视对强迫症严重程度产生间接影响。

蒲草垫料对小鼠繁殖及仔鼠生长发育的影响

探讨蒲草垫料对小鼠繁殖及仔鼠生长发育的影响。小鼠连续产仔３胎，随着胎次的增加，母鼠分娩间隔及产后母体重略有增加，但各胎次实验组与对照组间无显著差异（Ｐ＞０．０５）。Ｆ１ａ、Ｆ１ｂ、Ｆ１ｃ平均产仔数、存活仔数、仔鼠初重及１－３周龄仔鼠重、仔鼠存活数实验组与对照组相近（Ｐ＞０．０５）。离乳仔鼠雄性比为１．０３－１．０８。Ｑ系数随着胎次的增加略有下降，在３８．１－２０．０之间，但实验组与对照组差异不大。Ｆ１ｂ仔鼠前１０周周增重实验组与对照组无显著差异（Ｐ＞０．０５）。Ｆ１ｂ小鼠交配繁殖２胎，Ｆ２ａ，Ｆ２ｂ各项指标实验组与对照组无显著差异（Ｐ＞０．０５）。Ｆ２ａ仔鼠前１０周周增重实验组亦与对照组相近（Ｐ＞０．０５）。说明蒲草垫料既不影响小鼠的繁殖机能，也不影响仔鼠的生长发育，是一种优质的新型实验动物垫料。

蒲草垫料水浸出物、醇浸出物、醚浸出物的急性毒性试验及小鼠饥饿试验研究

小鼠在正常状况下仅有撕咬垫料行为，在饥饿状态下少量嚼食薄草垫料，但不引起小鼠中毒。急性毒性试验表明，蒲草的水浸出物，醇浸出物，醚浸出物的ＬＤ５０分别大于蒲草２２．４、１５．７、１９．６ｇ／ｋｇ体重，灌胃后小鼠行为、反应正常，无中毒症状。４日后处死剖检结果，脏器亦无病变。大鼠经皮肤涂抹浸出物（每次剂量分别相当于蒲草７６．０、５３．３、６６．７ｍｇ／ｃｍ２，重复３次）后，无全身中毒症状，涂抹部位无临床上肉眼可见病变。兔滴眼试验（每次剂量分别相当于蒲草１２８．５、９０．２、１１２．７ｍｇ／ｋｇ体重，重复３次）证明，眼无临床上肉眼可见病变。大鼠经口及兔经皮试验亦得到相同结果。说明蒲草垫料的三种浸出物对动物无毒害作用。