高速水洞中超空泡稳定性与通气率定量试验研究

超空泡航行体通气规律对空泡形态控制具有重要意义。本文描述了在高速水洞中建立水下航行体通气率对超空泡形态及稳定性影响的一种试验研究方法。基于不同空化器和模型攻角条件下的空泡形态及通气率测量试验结果,总结得到无量纲通气率计算的经验表达式。通过对有、无尾翼条件下的通气率试验进行比较,初步获得尾翼对超空泡泄气的影响规律。研究结果表明,通气率需要保持在一定范围内方可获得形状稳定、边界清晰的通气超空泡。依据试验结果给出了超空泡稳定性的判别方法。

POCT仪器与全自动生化分析仪C反应蛋白检测结果的比对

目的探讨POCT仪器I-reader干式免疫分析仪与罗氏Modular PPI全自动生化分析仪测定C反应蛋白(CRP)的结果是否具有可比性。方法参照CLSI EP9-A2文件要求进行方法间的比对分析。结果两个检测系统测定CRP的精密度良好,Modular PPI与I-reader血清测定的回归方程为y=0.916x+0.442 1,r2=0.957 7。全血测定的回归方程为y=1.128 3x+2.562 4,r2=0.950 2。通过校正公式:全血CRP(校正后)=全血CRP(校正前)×(1-0.425)/(1-实测Hct)校正后,y(校正后)=0.988 3x+1.036 7,r2=0.977 2。两种检测方法间系统误差最高的是9.2%,小于1/2 CLIA'88 12.5%的要求。结论两种检测系统测定CRP的结果具有可比性,适合临床应用。患者红细胞压积异常时,通过校正公式校正,可提高结果的可比性。

血清胸苷激酶1在乳腺癌诊治中的应用

目的:探讨血清胸苷激酶1(TK1)检测在乳腺癌辅助诊断及术后化疗效果评估中的作用。方法:应用免疫印迹-增强化学发光法(ECL)检测20例健康志愿者(健康对照组)和30例乳腺癌患者(乳腺癌组)术前、术后及化疗后血清TK1水平。比较不同疾病分期下TK1水平的差异。分析术前血清TK1水平与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的关系。结果:乳腺癌患者血清TK1水平均明显高于健康对照组(P<0.05);乳腺癌患者化疗后TK1水平明显低于术前(P<0.05),但术前术后TK1水平无明显差异(P>0.05),且TK1水平与乳腺癌分期也无明显相关性(P>0.05);同时ER、PR双阳性乳腺癌患者术前血清TK1水平低于ER、PR双阴性患者(P<0.05)。结论:血清TK1水平可反映肿瘤细胞增殖,有望成为乳腺癌预后判断及病情监测的重要指标,但其确切机制及与肿瘤进展间的关系还需深入研究。

高脂血对两种方法测定血红蛋白的影响及其校正

目的观察高脂血对两种不同方法测定血红蛋白(Hb)的影响,并寻求校正高脂血干扰Hb测定的方法。方法用Sysmex XE-5000全血细胞分析仪(十二烷基磺酸钠比色法,SLS-Hb法)及SIEMENS ADVIA2120全血细胞分析仪(氰化高铁Hb测定法,HiCN法)对30份高脂血标本进行全血细胞分析,低速离心后分别用等量生理盐水和仪器配套稀释液替代上层浑浊血浆,混匀后进行Hb测定,同时根据文献报道的Hb估算公式估算Hb值。结果两种方法测定的直接测定组Hb、平均红细胞血红蛋白(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)均明显高于生理盐水组、稀释液组和估算组。结论高脂血均造成两种方法测定Hb假性升高,生理盐水或稀释液等量置换血浆能消除高脂血对Hb测定的影响,可避免高脂血因素的影响,并能对Hb比色测定结果进行校正。

不同采血管、标本处理过程以及存放时间对NSE检测结果的影响

目的探究不同采血管、标本处理过程以及存放时间对神经元特异性烯醇化酶(NSE)检测结果的影响。方法随机选取广东省中医院50例住院患者,空腹采静脉血,每份血液标本同时分装于2个试管,试管1为无添加剂干燥管(红管),试管2为促凝剂分离胶管(黄管),用罗氏E601全自动电化学发光免疫分析仪测定两管血清NSE水平。每管标本共测定3次,测定时间分别为标本采集后1、24、48h。其中1h和24h之间,标本经历了4℃保存24h、标本稍混匀和再离心的处理过程;24h和48h之间,标本只经历了4℃保存24h,随后直接上机检测NSE。结果红黄两管血清NSE水平在1h时结果,差异无统计学意义(P>0.05);红管在24h时结果的均差值及阳性率显著高于1h结果的均差值及阳性率,且差异有统计学意义(P<0.05);红管的48h结果的均差值及阳性率与24h相比,差异无统计学差异(P>0.05)。黄管标本的3次(1、24、48h)NSE测定结果的均差值及阳性率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论促凝剂分离胶管(黄管)对NSE血清测定结果的稳定性优于无添加剂干燥管(红管)。

PET32a-CDK2重组质粒的构建与表达

目的构建含有细胞周期依赖性激酶2(CDK2)的PET32a-CDK2重组质粒,利用原核表达体系表达CDK2蛋白。方法从人白细胞中提取总RNA,采用聚合酶链反应从总RNA中扩增出CDK2基因,并将其插入PET32a质粒,构建重组质粒,化学法转化大肠杆菌DH5α进行克隆。将克隆得到的PET32a-CDK2重组质粒转化入表达菌株BL21,通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导其蛋白表达,SDS-PAGE和Western-Blot鉴定蛋白表达情况。结果菌落PCR及DNA测序证实CDK2基因已正确克隆到载体中;重组质粒成功转入表达菌株BL21(DE3),SDS-PAGE和Western-Blot结果显示表达菌经IPTG诱导后表达出52 kD左右的蛋白。结论成功构建重组质粒,并且CDK2全长蛋白在原核表达菌BL21中成功表达。

骨髓源性而非脾源性树突状细胞能够诱导产生调节性T细胞

越来越多的证据表明,树突状细胞(DC)能够通过刺激CD4+T细胞产生调节性T细胞(Treg)而参与免疫耐受。本研究旨在探索骨髓源性DC(bone marrow-derived DC,BM-DC)或脾源性DC(spleen derived DC,spDC)诱导CD4+CD25+FOXP3+Treg产生的可能性。以GM-CSF和IL-4从C57BL/6小鼠骨髓前体细胞诱导产生骨髓未成熟DC(immature DC,imDC);6 d后,imDC经脂多糖(LPS)进一步刺激16 h得到成熟树突状细胞(mature DC,mDC);同时用免疫磁珠从小鼠脾脏分选得到spDC,以这3种DC分别与新鲜分离的BALB/c小鼠脾CD4+T细胞混合培养,诱导CD4+CD25+FOXP3+Treg的产生;用流式细胞仪检测CD4+T细胞中FOXP3的表达,对比分析3种DC诱导产生CD4+CD25+FOXP3+Treg的能力。结果表明:经C57BL/6小鼠骨髓imDC、mDC的刺激,BALB/c小鼠CD4+T细胞中的FOXP3表达率从(8.57±1.14)%分别提高到(15.80±1.35)%、(17.93±1.45)%(P<0.01);经spDC的刺激,BALB/c小鼠的CD4+T细胞中的FOXP3表达率则从(8.57±1.14)%下降到(3.95±0.79)%(P<0.05)。结论:体外诱导的BM-DC而非spDC能够诱导Treg的产生,具有介导免疫耐受的作用。

pPICZαA-CDK2重组质粒的构建及表达

目的:构建含有细胞周期依赖性激酶2(CDK2)的胞外分泌型pPICZαA-CDK2重组质粒,利用毕赤酵母表达体系表达CDK2蛋白。方法:从人白细胞中提取总RNA,逆转录后采用聚合酶链反应扩增出CDK2基因,并将其插入pPICZαA质粒,构建重组质粒,化学法转化大肠杆菌JM109进行克隆。重组质粒pPICZαA-CDK2转化毕赤酵母菌株GS115,甲醇诱导酵母细胞进行蛋白表达,SDS-PAGE和Western-Blot鉴定蛋白表达情况及抗原性。结果:PCR电泳及DNA测序证实CDK2基因已正确克隆到表达载体中;重组质粒转入酵母菌GS115,酵母经甲醇诱导表达后经SDS-PAGE检测发现在34000左右有条带,Western-Blot检测发现有与CDK2单抗结合蛋白。结论:成功构建重组质粒,初步判断CDK2全长蛋白在毕赤酵母中表达成功且抗原性良好。

前清蛋白定量检测限和功能灵敏度的评价及临床应用

目的对Roche Modular P全自动生化分析仪检测前清蛋白(PA)的空白限(LoB)、检测限(LoD)、定量检测限(LoQ)以及功能灵敏度(FS)进行评价。方法参照美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP-17A文件,将空白样品生理盐水及系列低浓度样品在Roche Modular P全自动生化分析仪上进行检测确定该方法的空白限、检出限和定量检测限。依据国内通用方法确定功能灵敏度。结果 PA的空白限为16.35mg/L,检测限为18.23mg/L,定量检测限暂无法评价,功能灵敏度为25.00mg/L。结合其可报告范围的低值,确定其临床的报告范围及报告方式。结论建立了PA在Roche Modular P全自动生化分析仪上检测的定量检测限,为临床诊断和治疗提供了更有价值的信息,对不同评价的方法进行比较,明确了不同方法实际应用的优点以及局限性。

尿轻链在检测系统性红斑狼疮肾脏损伤中的应用

目的评估尿轻链在系统性红斑狼疮(SLE)肾脏损伤中的诊断价值。方法选取临床诊断为SLE的患者39例,结合肾脏损伤情况,分为两组:肾脏损伤组(LN组,n=20)与非肾脏损伤组(非LN组,n=19)。采用散射免疫比浊法原理检测尿免疫球蛋白κ轻链(kapU)、尿免疫球蛋白λ轻链(lamU)以及尿免疫球蛋白G(Ig-GU)、尿微量白蛋白(mALbU),尿α1-微球蛋白(α1-MU)、尿α2-微球蛋白(α2-MU)、尿转铁蛋白(TrfU),比较两组患者尿轻链水平并分析其与其他指标间的相关性。结果 SLE患者LN组kapU为55.90(33.73,216)mg/L,高于非LN组的6.21(5.41,15.30)mg/L,差异有统计学意义(P<0.001);SLE患者LN组lamU为30.30(19.43,92.10)mg/L,高于非LN组的3.24(2.56,4.75)mg/L,差异有统计学意义(P<0.001);SLE患者LN组的其他指标的检测结果都高于非LN组,差异有统计学意义(P<0.001);相关分析显示,kapU与lamU呈高度相关(rs=0.94,P<0.001);尿轻链kapU、lamU与α1-MU呈高度相关(rs=0.95,rs=0.90,P<0.001);kapU、lamU与β2-Mg相关(rs=0.74,rs=0.68,P<0.001);kapU、lamU与IgGU、mALbU、TrfU相关(rs=0.81,rs=0.67,rs=0.73和rs=0.89,rs=0.77,rs=0.81,P<0.01)。结论尿轻链kapU、lamU可以作为评价SLE肾脏损伤的指标,尤其作为肾小管损伤的评价指标。

Sysmex XE-5000全自动血细胞分析仪在浆膜腔积液细胞计数中的应用

目的探讨血细胞分析仪在浆膜腔积液细胞计数中的应用。方法采用Sysmex XE-5000全自动血细胞分析仪体液模式和手工显微镜检查法对85例浆膜腔积液样本进行细胞计数。结果手工法与仪器法比较,浆膜腔积液中的单一核细胞、多核细胞的差异均无统计学意义(P>0.05),二者白细胞、红细胞的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Sysmex XE-5000全自动血细胞分析仪具有简便、稳定、准确的优点,但其在浆膜腔积液细胞计数中的应用不能完全代替手工显微镜检查法。

尿素参考方法的建立及其在正确度评价中的应用

目的:建立血清尿素参考方法,评价不同检测系统尿素测量结果的正确性。方法:根据美国CDC推荐尿素参考方法复现本实验室参考方法,与5个尿素测量常规检测系统进行方法间比对,运用改良的Blant-Altman图形法评价各常规系统与参考方法测量结果的一致性。结果 :参考方法总不精密度<1.5%,测定SRM909c相对偏倚为0.74%。所有5个常规系统测定结果与参考方法高度相关(r>0.999 8),各常规系统与参考方法测量结果的回归方程分别为:Y=1.011 4X-0.037 5,Y=0.982 9X+0.008 1,Y=0.995 9X-0.011 9,Y=0.932 2+0.071 7,Y=0.953 1X-0.043 3,其中X和Y分别代表参考方法与常规系统的测量结果。与参考方法比较,干式生化系统(系统4、5)表现出较明显的负偏倚,而其他系统与参考方法结果一致。结论:尿素参考方法在实验室已复现且性能符合要求,应重视干式生化系统尿素测定结果与参考方法间存在的差异。

超敏cTnT、超敏cTnI、CK-MB质量和CK-MB活性诊断AMI的灵敏度、特异度以及准确度分析

目的 评价超敏肌钙蛋白T（cTnT）、超敏肌钙蛋白I（cTnI）以及肌酸激酶同工酶质量（CK-MBmass）和肌酸激酶同工酶活性（CK-MB活性）检测在诊断急性心肌梗死（AMI）中的灵敏度、特异度以及准确度,为临床选择适当的诊断AMI指标提供依据.方法 按不同的采血时间点,采用电化学发光法、化学发光法以及透射比浊法测定AMI组、稳定型心绞痛（SAP）组与健康对照组的血清超敏cTn和CK-MB水平,并对结果进行统计学分析,计算各指标的灵敏度、特异度以及准确度.结果 在0、3、6h不同的采血时间点,超敏cTnT诊断AMI的敏感度分别是62.89％、95.88％、100％,特异度分别是98.76％、98.76％、98.76％,准确度分别是79.21％、97.19％、99.44％;超敏cTnI诊断AMI的敏感度分别是72.16％、96.91％、98.76％,特异度分别是98.76％、97.53％、97.53％,准确度分别是84.27％、97.19％、98.31％;CK-MB质量诊断AMI的敏感度分别是27.00％、63.92％、92.78％,特异度分别是92.59％、90.12％、88.89％,准确度分别是55.62％、75.84％、91.01％;CK-MB活性诊断AMI的敏感度分别是28.86％、71.13％、93.81％,特异度分别是87.65％、83.95％、81.48％,准确度分别是55.62％、76.97％、88.20％.结论 超敏cTn诊断AMI的灵敏度、特异度和准确度明显高于CK-MB质量和CK-MB活性;超敏cTn应用于AMI的诊断和鉴别诊断,可以大大提高急性AMI的早期诊断率.

血液标本采集送检和退检原因分析对分析前质量控制的影响

目的为有效提高检验结果的准确性，探讨血液标本分析前质量控制的主要影响因素，加强检验科分析前质量控制，提高检验质量和效率。方法随机抽取ICU、妇科、儿科等9个临床科室990份血液标本，统计标本采集一接收时间间隔和对分析2011年1076份不合格标本退检原因。结果9个临床科室的血液标本采集一接收平均间隔时间为4—38min，2011年血液标本退检率为0．07％，退检原因约50种。结论正确采集与及时送检血液标本，能减少不合格标本的产生，有效提高检验结果的准确性。

狼疮性肾炎患者Th1、Th17及Th22细胞亚群的变化及临床意义

目的研究狼疮性肾炎（LN）患者外周血辅助性T细胞1（Th1）、辅助性T细胞17（Th17）和辅助性T细胞22（Th22）及其细胞因子干扰素一1（IFN一1）、白细胞介素17（IL－17）和白细胞介素22（1L－17）的表达情况及其临床意义。方法流式细胞术检测20例LN患者组和20例健康对照组外周血中Th1、Th17和Th22细胞比例；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中相关细胞因子IFN－1、IL－17及IL－22水平，并进行相关性分析。结果相较健康对照组，LN组外周血中Th17细胞比例增高（P〈0．05），Th22细胞比例减低（P〈0．05），而Th1细胞比例无差异（P〉0．05）；LN组血清中IL－17水平增高（P〈0．05），IL－22水平减低（P〈0．05），而IFN－γ水平无差异（P〈0．05）；Th17细胞比例分别与血清IL－17、系统性红斑狼疮疾病活动指数（SLEDAI）呈正相关（r=0．721，P〈0．05；r=0．225，P〈0．05），而Th22细胞比例与血清IL－22水平呈正相关（r=0．489，P〈0．05）与SLEDAI评分无相关性（r=0．241，P〉0．05）。结论Th17及Th22在LN患者中异常表达可能导致患者自身免疫功能紊乱，促进疾病病理损伤。

体育院校球类项目专修学生竞技动机的调查分析

对体育院校球类项目专修学生的竞技动机现状进行调查,结果表明:男运动员在感性体验测度上的分数高于女运动员;隔网对抗类项目在社会认可、竞技水平提高和感性体验上的分数低于同场对抗类项目;中期训练运动员在社会认可、竞技水平提高、感性体验和努力取向上的分数高于短期训练的运动员,在社会认可,竞技水平提高和娱乐上的分数也高于长期训练的运动员。

流式细胞术积分系统对骨髓增生异常综合征的诊断价值

目的评估流式细胞术及流式细胞术积分系统(FCSS)对骨髓增生异常综合征的诊断价值。方法收集2014年1月至2019年8月初诊MDS患者资料41例,非MDS患者20例,并对其数据进行统计分析。结果MDS与非MDS患者进行比较,原始细胞、单核细胞比例均显著增加(均P<0.05),原始细胞群比例在MDS-MLD、MDS-EB1、MDS-EB2亚型间逐渐升高,在MDS-MLD与MDS-EB1、MDSMLD与MDS-EB2、MDS-EB1与MDS-EB2亚型间比较差异均有统计学意义(均P<0.05),粒细胞在MDS-MLD与MDS-EB2、MDS-EB1与MDS-EB2亚型间比较差异均有统计学意义(均P<0.05),淋巴细胞、有核红细胞群比例亚型间比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。当FCSS≥2分时,FCSS对MDS诊断的特异性为90.25%,敏感性为85.40%。结论应用流式细胞术及FCSS对诊断MDS有很大的临床意义,且实用性强。

重组人白介素1受体Ⅰ型细胞外基因在毕赤酵母的表达

目的构建白介素1受体Ⅰ型细胞外基因(可溶性白介素1受体Ⅰ型,sIL-1RⅠ)的pPICZαA-sIL-1RⅠ重组表达载体,利用毕赤酵母表达技术表达sIL-1RⅠ蛋白。方法采用RT-PCR技术扩增基因sIL-1RⅠ,经酶切连接构建重组质粒pPICZαA-sIL-1RⅠ,转化E.coliStb13;阳性克隆经测序成功后,把pPICZαA-sIL-1RⅠ重组质粒电转入毕赤酵母菌株GS115,PCR对阳性克隆进行鉴定,以及对GS115转化子表型筛选。确定表型后,对重组菌株进行甲醇诱导蛋白表达。提取菌体蛋白和上清液进行Westernblotting检测以鉴定蛋白表达属于菌内表达还是分泌表达。结果 pPICZαA-sIL-1RⅠ重组质粒构建成功;pPICZαA-sIL-1RⅠ成功电转入酵母菌GS115;转化子表型筛选结果为甲醇诱导缓慢型Muts;对培养上清和菌体蛋白进行Westernblotting检测结果:上清没有检测到蛋白,在菌体内检测到蛋白。结论成功运用毕赤酵母表达体系表达sIL-1RⅠ蛋白,为sIL-1RⅠ的研究和应用提供实验基础。

基于LASSO回归的多发性骨髓瘤诊断模型的建立

目的利用常见的实验室指标构建多发性骨髓瘤(MM)的诊断模型,以提高现有检验指标的诊断效能。方法回顾性分析2015年1月至2022年1月在广东省中医院确诊的MM患者96例(病例组),随机选取85例健康体检者作为对照组。常见相关实验室指标17个:血清免疫球蛋白M(IgM)、血清免疫球蛋白G(IgG)、血清免疫球蛋白A(IgA)、血清β_(2)-微球蛋白(β_(2)-MG)、校正血清钙、血清清蛋白(ALB)、血清球蛋白(GLB)、清蛋白与球蛋白比值(A/G)、血清碱性磷酸酶(ALP)、血清肌酐(Cr)、白细胞计数(WBC)、中性粒细胞计数(NEUT)、淋巴细胞计数(LYMT)、中性粒细胞计数与淋巴细胞计数比值(NLR)、红细胞计数(RBC)、血红蛋白(Hb)、血小板计数(PLT)。对病例组和对照组两组的17个检验指标数据进行统计分析,通过LASSO回归算法筛选出系数不为0的检验指标,再进行Logistic回归分析以及受试者工作特征(ROC)曲线分析。结果通过LASSO回归,筛选出系数不为0的指标4个,分别为IgM、NLR、Hb和ALB。再对这4个指标进行二元多因素Logistic分析,结果显示回归模型为Y=18.008-4.329IgM+1.374NLR-0.067Hb-0.240 ALB。该回归模型曲线下面积为0.987,灵敏度为96.9%,特异度为95.3%。结论该诊断模型对MM的诊断具有重要价值。