基质细胞衍生因子1修饰左旋聚乳酸多孔微球促进软骨细胞增殖和组织形成

背景:二维培养条件下的软骨细胞增殖及表型维持受限,多孔微球作为支架材料可提供三维培养环境,以更好地模拟体内生长条件。基质细胞衍生因子1是有强趋化效力的稳态细胞因子,能够促进细胞的黏附与增殖。目的:明确接枝基质细胞衍生因子1左旋聚乳酸多孔微球对软骨细胞生物学特性及软骨组织形成的影响。方法:(1)体外验证不同质量浓度基质细胞衍生因子1对兔软骨细胞增殖、迁移、表型维持的影响。(2)采用复乳法制备左旋聚乳酸多孔微球,利用碳二亚胺法将基质细胞衍生因子1接枝于左旋聚乳酸多孔微球上,通过酶联免疫吸附实验及孵育基质细胞衍生因子1特异荧光抗体验证接枝情况。(3)将兔软骨细胞分别接种于左旋聚乳酸多孔微球、接枝基质细胞衍生因子1左旋聚乳酸多孔微球上,检测细胞增殖与黏附。(4)在裸鼠背部皮下分别植入甲基丙烯酰胺基明胶-软骨细胞复合体(对照组)、左旋聚乳酸多孔微球-甲基丙烯酰胺基明胶-软骨细胞复合体(多孔微球组)、接枝基质细胞衍生因子1左旋聚乳酸多孔微球-甲基丙烯酰胺基明胶-软骨细胞复合体(多孔微球修饰组),8周后取材,分别进行组织学染色与成软骨相关基因qRT-PCR检测。结果与结论:(1)相较于0,1 000 ng/mL基质细胞衍生因子1,500 ng/mL基质细胞衍生因子1可促进软骨细胞的增殖与迁移,提升软骨细胞内Ⅱ型胶原、弹性蛋白、增殖细胞核抗原、Bcl-2 mRNA表达;(2)基质细胞衍生因子1成功接枝于左旋聚乳酸多孔微球上,接枝率为93.75%;(3)相较于左旋聚乳酸多孔微球,接枝基质细胞衍生因子1左旋聚乳酸多孔微球可促进软骨细胞的增殖、黏附;(4)裸鼠皮下植入8周后,相较于对照组、多孔微球组,多孔微球修饰组具有更明显的软骨陷窝结构、更丰富的软骨特异性基质和Ⅱ型胶原沉积,弹性蛋白、Ⅱ型胶原、增殖细胞核抗原、Bcl-2 mRNA表达升高。结果表明:接枝基质细胞衍生因子1左旋聚乳酸多孔微球有利于软骨细胞的黏附、增殖、表型维持以及体内软骨组织形成。

电子线联合A型肉毒毒素在胸壁瘢痕疙瘩切除术后的应用效果探讨

目的:探讨电子线联合A型肉毒毒素应用于胸壁瘢痕疙瘩切除术后的作用效果。方法:2018年9月-2020年6月,笔者科室收治胸壁瘢痕疙瘩患者106例共106处,采用随机分组法分为观察组和对照组,每组53例,两组均先手术切除瘢痕,观察组术后采取早期电子线放射、A型肉毒毒素联合治疗,对照组术后只接受早期电子线放射治疗,比较两组治疗效果。结果:观察组治愈率和有效率均显著高于对照组,且观察组满意度评分高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:在胸壁瘢痕疙瘩治疗上,手术切除结合早期电子线、A型肉毒毒素联合治疗比术后单纯应用早期电子线照射治疗效果更好,患者满意度高,在临床上可用于胸壁瘢痕疙瘩的治疗。

睑结膜入路去睑袋眶隔脂肪纳米化回植对泪沟畸形及黑眼圈的疗效研究

目的:探讨睑结膜入路去睑袋眶隔脂肪纳米化回植对泪沟畸形及黑眼圈的临床疗效。方法:对2018-2020年笔者医院的25例眼袋突出伴轻、中度泪沟畸形及黑眼圈的患者,对其经睑结膜入路去睑袋,适量切除眶隔脂肪,将切除的眶隔脂肪用纳米脂肪转换器制成纳米脂肪,并将其用27G注脂针回植于泪沟和黑眼圈区域,观察其临床效果。结果:对所有患者进行随访,术后6个月,患者泪沟畸形等级量表评分与术前相比降低,其差异具有统计学意义(P<0.05),患者黑眼圈区域的L*值增大,其差异具有统计学意义(P<0.05),a*值、b*值无明显变化,其差异无统计学意义(P>0.05),有2例患者术后出现皮肤瘀斑、1例出现结膜充血,所有患者均无严重并发症出现,患者满意率为92%。结论:睑结膜入路去睑袋眶隔脂肪纳米化回植可有效治疗无明显皮肤松弛的眼袋、轻中度泪沟畸形及黑眼圈的年轻患者。

稳定表达PDCoV-S和RBD蛋白的293T细胞系构建与免疫原性评价

为构建稳定表达猪δ冠状病毒(PDCoV)S和RBD蛋白的293T细胞系,获得PDCoV S和RBD蛋白。本研究将优化合成的PDCoV S蛋白全长基因及其RBD的表达质粒进行双酶切鉴定,将重组质粒pLV-S-Puro、pLV-RBD-Puro、psPRX2、pMD2.G同时转染293T细胞中进行慢病毒包装,收集上清感染293T细胞,经嘌呤霉素初筛得到的多细胞克隆,进一步通过终点稀释法筛选获得稳定表达PDCoV S和RBD蛋白的单克隆293T细胞系,通过Western blot检测蛋白表达,用纯化的PDCoV S和RBD蛋白分别免疫BALB/c小鼠,对重组蛋白进行免疫原性检测。结果表明,稳定表达PDCoV S和RBD蛋白的293T细胞系构建成功,获得了重组慢病毒,纯化PDCoV S和RBD重组蛋白均可以诱导小鼠产生较高的IgG抗体(S:1.2;RBD:0.9),中和抗体水平分别达1∶128和1∶64。本研究构建的293T细胞系能稳定表达PDCoV S和RBD蛋白,为进一步研制PDCoV亚单位疫苗奠定了基础。

相似形改良旋转皮瓣的临床应用体会

目的探讨相似形改良旋转皮瓣修复外伤创伤、褥疮、肿物切除术等原因导致的皮肤缺损的效果。方法自2014年3月至2019年5月,哈尔滨医科大学附属第四医院整形美容科收治因头面部外伤、褥疮、色素痣、肿物切除后导致皮肤缺损的27例(缺损27处)患者,采用相似形改良旋转皮瓣修复,术中彻底切除病变组织后,设计相似形改良旋转皮瓣,在适当层次充分游离组织形成皮瓣后修复创面。结果所有患者术后均无血运障碍,皮瓣成活,切口均一期愈合,局部未见明显变形,患者对修复效果满意。结论采用相似形改良旋转皮瓣修复皮肤缺损具有皮瓣成活率较高,不破坏局部原有生理弧度,瘢痕长度较短,局部张力较小,瘢痕不明显,修复效果良好的特点。