基于“肺与大肠相表里”的理论探讨大黄免煎颗粒对呼吸道合胞病毒感染小鼠的治疗效果

目的:从“肺与大肠相表里”理论出发,探讨大黄对呼吸道合胞病毒(Respiratory syncytial virus,RSV)感染小鼠的治疗效果。方法:42只Balb/c小鼠随机分为空白对照组、利巴韦林组、大黄低剂量组、大黄中剂量组、大黄高剂量组、病毒对照组,每组各7只。除空白对照组外,其余组小鼠通过滴鼻感染RSV造模,灌胃给药3 d后通过Western bolt法检测小鼠肺组织中的病毒所带荧光蛋白(RSV-GFP)的表达;q-PCR检测小鼠肺组织病毒基因(RSV-G)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA的表达;苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠肺病理学形态变化;冰冻切片观察肺组织病毒荧光情况;病毒空斑法检测小鼠肺匀浆病毒滴度。结果:与病毒对照组小鼠相比,大黄低剂量组小鼠RSV-GFP蛋白表达量降低(P<0.05),差异有统计学意义;大黄各剂量治疗组的RSV-G、TNF-α mRNA相对表达量均低于病毒对照组小鼠(P<0.05),差异有统计学意义;病毒对照组小鼠肺组织出现明显病理改变,肺间质增厚,组织毛细血管淤血,肺泡壁炎细胞浸润,各治疗组病理改变均有所减轻,肺泡壁炎细胞浸润减少;大黄低剂量组、利巴韦林组与病毒对照组相比,病毒荧光强度降低;大黄低剂量组、利巴韦林组小鼠肺部病毒滴度也较病毒对照组下降(P<0.05),差异有统计学意义。结论:大黄免煎颗粒可抑制RSV在小鼠肺组织中复制,降低肺内炎症因子的表达,减轻炎症反应,提高小鼠生存质量。

大黄通过NRAV调节miR-509-3p/Rab5c轴抑制呼吸道合胞病毒的效果

目的 通过体外实验评估大黄免煎颗粒对呼吸道合胞病毒(RSV)的抑制效果,探究大黄对RSV感染过程中关键环节的影响和细胞内信号通路的调节等。方法 通过体外培养A549细胞,使用A549细胞设置空白对照组、感染对照组、-2 h组、0 h组、2 h组、4 h组、6 h组、8 h组在感染RSV的不同时间点加入大黄高剂量溶液,使用定量聚合酶链反应检测细胞内病毒基因(RSV-N)的相对量的表达,使用病毒空斑实验法测定上清病毒滴度,感染RSV 72 h后使用cck8法测定细胞活性;使用A549细胞设置感染对照组、利巴韦林组、大黄高剂量组、大黄中剂量组、大黄低剂量组,感染24 h后使用Western blot检测不同处理组RSV携带的绿色荧光蛋白(RSV-GFP)、Rab相关蛋白(Rab5c)蛋白表达水平,qPCR检测不同处理组抗病毒反应的负调负因子(NRAV)、Rab5c、RSV-N基因的相对量的表达。结果 不同浓度大黄培养A549细胞72 h后存活率比较差异有统计学意义(P<0.01),与5μg/mL比较,500μg/mL差异有统计学意义(P<0.05),不同浓度利巴韦林培养A549细胞72 h后细胞存活率比较差异无统计学意义(F=1.89,P=0.17),选取25、50、100μg/mL分别作为大黄低剂量组、大黄中剂量组、大黄高剂量组,利巴韦林处理浓度为500μmol/L;-2 h组细胞存活率较2 h、4 h、6 h、8 h组升高(均P<0.05),-2 h组细胞病毒滴度、RSV-N基因较2 h、4 h、6 h、8 h组降低(均P<0.05),且-2 h组细胞存活率、病毒滴度及RSV-N基因与0 h组比较无差异(均P>0.05);大黄高剂量组、大黄中剂量组、大黄低剂量组较感染对照组细胞的NRAV、RSV-N、Rab5c基因降低(均P<0.05)。结论 大黄可能通过降低A549细胞的NRAV水平促进miR-509-3p对Rab5c mRNA的靶向降解,降低了Rab5c的表达减缓了细胞内囊泡转运,从而发挥抑制RSV增殖的能力。

中小城市文化品牌建设与传播研究——以信阳市为例

城市文化品牌是城市内在文化底蕴与外在城市形象的综合体现。城市需要通过打造自身的独特“名片”,增强其形象特征,突出其发展优势,进而提升该城市在社会层面的知名度与认可度。信阳市作为独具地域文化特色的中小城市,在城市文化品牌建设与传播方面开展了一些实践探索。为了更好地推进城市文化品牌建设与传播,与信阳市类似的中小城市在城市文化品牌建设与传播上还应把握“三个转向”:传播内容视频化转向,进行故事性影像传播;传播方式多元化转向,开展交互式整合传播;传播渠道平台化转向,打造本土化传播圈层,实现城市文化品牌建设由内而外的全面升级。

省级主流媒体微信视频号的创新传播策略探析——以河南卫视为例

短视频作为一种移动化、碎片化、通俗化的信息传播方式,正逐步渗透到日常生活的各个场景中。近年来,以河南卫视为代表的省级主流媒体开始利用微信视频号的超强社交属性和传播势能,让传统主流媒体的内容推广和多元传播呈现裂变之势,富有时代性地创新探索与全新尝试。以河南卫视微信视频号为例,具体分析我国省级主流媒体微信视频号的创新传播策略,即打造独特定位与优质内容,引导社会主流价值回归;塑造平台型媒体架构,达成传播效果最大化;以内容为圈层媒介,培育用户关系资源。

新媒体视野下品牌公益广告的营销运作策略研究

伴随着传播环境与营销环境的变化,品牌逐渐将公益广告营销纳入其经营战略体系,这也将会成为品牌长远发展的关键环节。本文对新媒体视野下品牌公益广告及其营销运作概况进行梳理,通过具体的案例进一步分析当前品牌公益广告及营销运作的创新策略,以期为品牌取得良好的营销成效提供思路。

智能语音生态下中国传媒产业的应对策略

智能音箱产业的发展正在深刻改变用户获取新闻信息、娱乐信息和知识信息的方式,在媒体融合的国家战略背景下,中国传媒业积极融入智能语音生态成为战略必需。本文重点解析中国智能音箱产业发展的现状与问题,以及技术和用户驱动下智能音箱的传播创新,并由此提出了智能语音生态下中国传媒产业的应对策略。

木聚糖酶TgXyn2的酶学特性研究

目的:本研究旨在发掘和研究一种新的低温酸性内切-1,4-β-木聚糖酶TgXyn2并研究其酶学特性,为其在食品等轻工业生产中的实际应用提供理论依据。方法:利用pCold-TF表达质粒在大肠杆菌中异源表达,纯化后检测其酶学特性,并通过同源建模分析其三维结构。结果:该酶的最适温度为35℃,最适pH为5.0,K_(m)为1.287μmol L^(−1),V_(max)为2.083μmol min^(−1)mg^(−1);同源建模结果表明,TgXyn2由2个反向平行的β-折叠和1个α-螺旋构成,是典型的糖苷水解酶GH11家族木聚糖酶。结论:本文研究的TgXyn2具有良好的酶学特性,在食品等行业具有较好的应用潜力。

公园城市理念下太原市城市生态建设初探

公园城市的理念为城市生态建设提供了理论依据,也带来新思路与新挑战。文章基于公园城市发展理念,梳理公园城市内涵,结合相关研究与案例,分析太原市在公园城市背景下的相关建设情况,并提出公园城市规划建设新思路,为太原市生态建设提供参考。

智慧旅游视角下基于ISM方法的游客景点选择影响因素研究

随着"互联网+"的发展,智慧旅游逐步成长。旅游市场竞争逐渐激烈,旅游产品的开发十分必要。文章采用ISM方法构建模型,发现游客选择景点的影响因素中最深层次的是景点类型;其次是景点密集程度与最佳旅游时间;再次是基础服务性信息;最后是住宿情况。对模型进行实证检验,发现该模型仅适用于在职人员,而学生群体表现出明显差异性。对研究内容以及成果进行总结后提出两点建议:对在职人员的景点宣传,可以依据上述模型层次进行递推推荐;由于学生群体表现较大的差异性,应该为学生群体提供个性化景点宣传。满足消费者旅游需求,将"互联网+"与旅游业进一步结合,推动智慧旅游的发展。

大黄对呼吸道合胞病毒抑制作用的研究

目的探究在A549细胞中大黄对呼吸道合胞病毒复制的影响及在感染后调节自噬的作用。方法本研究为实验研究,采用呼吸道合胞病毒Long株感染人非小细胞肺癌系A549细胞,构建呼吸道合胞病毒感染细胞模型。使用A549细胞设置感染对照组、利巴韦林组、大黄低剂量组、大黄中剂量组、大黄高剂量组,在感染呼吸道合胞病毒和大黄处理24 h后,使用免疫印迹法检测细胞内病毒荧光蛋白(RSV-GFP)、微管相关蛋白1A/1B-轻链3(LC3)蛋白表达的相对水平,定量聚合酶链反应检测细胞内病毒基因(RSV-N)基因的相对量的表达。在感染呼吸道合胞病毒和大黄处理72 h后,使用CCK8法测定细胞活性,病毒空斑实验法测定上清病毒滴度。设置入胞感染对照组、入胞大黄组;吸附感染对照组、吸附大黄组;灭活感染对照组、灭活大黄组,在感染呼吸道合胞病毒和大黄处理24 h后,使用定量聚合酶链反应检测细胞内病毒基因(RSV-N)基因的相对量的表达,在感染呼吸道合胞病毒和大黄处理72 h后,使用CCK8法测定细胞活性。结果(1)不同浓度的大黄培养A549细胞72 h后存活率比较有统计学意义(P<0.001),与5 mg/L比较,500、1000 mg/L均有统计学意义(均P<0.05),10、25、50、100 mg/L均无统计学意义(均P>0.05),不同浓度利巴韦林培养A549细胞72 h后存活率比较无统计学意义(F=1.02,P=0.442);结果显示对于A549细胞100 mg/L大黄为最高安全剂量,本实验选取25、50、100 mg/L分别作为大黄低剂量组、大黄中剂量组、大黄高剂量组处理浓度,利巴韦林处理浓度为500μmol/L。(2)大黄低剂量组细胞存活率较感染对照组[(81.43±1.51)%比(37.07±1.59)%]升高、大黄中剂量组细胞存活率较大黄低剂量组[(89.06±1.23)%比(81.43±1.51)%]升高、大黄高剂量组细胞存活率(99.84±1.45)%、利巴韦林组(97.41±1.60)%较大黄中剂量组(89.06±1.23)%升高(均P<0.05)。(3)5组细胞RSV-N基因表达量及上清中的病毒滴度比较差异均有统计学意义(F值分别为41.04、123.50,均P<0.001);利巴韦林组(0.66±0.03)、大黄高剂量组(0.60±0.02)、大黄中剂量组(0.74±0.01)较感染对照组(1.00±0.00)细胞中RSV-N基因表达量下降(均P<0.05),利巴韦林组(0.23±0.10)、大黄高剂量组(0.25±0.10)、大黄中剂量组(0.60±0.14)、大黄低剂量组(0.80±0.14)较感染对照组(1.03±0.16)细胞上清中的病毒滴度下降(均P<0.05),且利巴韦林组病毒滴度与大黄高剂量组比较差异无统计学意义(P>0.05)。(4)5组细胞中RSV-GFP、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白的表达水平比较均有统计学意义(F值分别为42.29、48.72,均P<0.001),大黄低剂量组细胞RSV-GFP较感染对照组降低、大黄中剂量组RSV-GFP较大黄低剂量组降低、大黄高剂量组RSV-GFP较大黄中剂量组降低(均P<0.05),利巴韦林组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ(3.34±0.29)、大黄高剂量组(2.81±0.35)、大黄中剂量组(2.93±0.15)、大黄低剂量组(2.73±0.14)较感染对照组(1.00±0.00)升高(均P<0.05),且利巴韦林组RSV-GFP、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ与大黄高剂量组比较差异无统计学意义(P>0.05)。(5)在RSV完成入胞后加入大黄通过CCK8检测细胞存活率,qPCR检测RSV-N基因的表达量。入胞大黄组细胞存活率较入胞感染对照组[(94.79±3.55)%比(39.66±2.25)%]升高、入胞大黄组细胞RSV-N基因较入胞感染对照组[(0.04±0.01)比(1.00±0.00)]降低(t值分别为26.24、166.30,均P<0.001),吸附大黄组细胞存活率较吸附感染对照组[(65.31±2.06)%比(38.62±0.96)%]升高、吸附大黄组细胞RSV-N基因较吸附感染对照组[(0.40±0.07)比(1.00±0.00)]降低(t值分别为20.35、14.85,均P<0.001),灭活大黄组细胞存活率较灭活感染对照组[(54.10±2.49)%比(33.10±1.18)%]升高、灭活大黄组细胞RSV-N基因较灭活感染对照组[(0.11±0.02)%比(1.00±0.00)%]降低(t值分别为13.20、74.33,均P<0.001)。结论大黄可降低呼吸道合胞病毒N基因在A549细胞中的表达,同时上调LC3Ⅱ/LC3Ⅰ抑制RSV-GFP蛋白在细胞内的表达。

大黄对呼吸道合胞病毒感染小鼠的疗效研究

目的:探究大黄对呼吸道合胞病毒(RSV)感染小鼠的疗效。方法:本研究为实验研究。4~6周龄SPF级雌性Balb/c小鼠42只,采用RSV Long株感染Balb/c小鼠,构建RSV感染动物模型。采用简单随机化法将42只Balb/c小鼠分为6组,每组7只,根据人与动物药物剂量换算方法确定给药剂量。按给予药物情况不同命名为正常对照组(生理盐水)、病毒对照组(生理盐水)、利巴韦林组(利巴韦林45 mg/kg)、大黄低剂量组(大黄35 mg/kg)、大黄中剂量组(大黄70 mg/kg)、大黄高剂量组(大黄105 mg/kg),除正常对照组外滴鼻感染RSV持续2 d,灌胃给药3 d。灌胃结束后,禁食12 h,处死小鼠取肺叶。苏木精-伊红染色检测小鼠肺组织的病理变化,冰冻切片检测组织中病毒荧光变化,蛋白质印迹法检测肺组织内呼吸道合胞病毒携带的绿色荧光蛋白(RSV-GFP)表达水平,病毒空斑实验法测定组织匀浆病毒滴度。实时荧光定量聚合酶链反应检测组织内病毒基因(RSV-N)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因表达水平。结果:(1)正常对照组小鼠肺组织结构清晰完整肺泡壁较薄,血管周围未见炎细胞浸润性现象,病毒对照组小鼠肺组织出现明显病理改变,间质增厚,组织毛细血管淤血,肺泡壁炎细胞浸润,利巴韦林组、大黄低剂量组、大黄中剂量组、大黄高剂量组较病毒对照组病变程度均有减轻。利巴韦林组、大黄低剂量组病毒荧光强度与病毒对照组比较降低。(2)5组小鼠RSV-GFP表达水平和病毒滴度比较差异均有统计学意义(F值分别为134.00、36.25,均P<0.001)。大黄中剂量组(0.67±0.06)、大黄高剂量组(0.71±0.08)RSV-GFP表达水平较病毒对照组(1.00±0.00)低(均P<0.05),利巴韦林组(0.25±0.02)、大黄低剂量组(0.25±0.03)RSV-GFP表达水平均较大黄中剂量组(0.67±0.06)、大黄高剂量组(0.71±0.08)低(均P<0.05),且利巴韦林组RSV-GFP与大黄低剂量组比较差异无统计学意义(P>0.05)。利巴韦林组(0.36±0.08)、大黄低剂量组(0.39±0.06)的病毒滴度较病毒对照组(1.00±0.00)、大黄中剂量组(0.82±0.06)、大黄高剂量组(0.86±0.15)低(均P<0.05),且利巴韦林组(0.36±0.08)与大黄低剂量组(0.39±0.06)病毒滴度比较差异无统计学意义(P>0.05)。(3)5组小鼠RSV-N和TNF-α基因表达水平比较差异均有统计学意义(F值分别为115.40、14.75,均P<0.001);大黄低剂量组(0.39±0.09)、大黄中剂量组(0.56±0.02)、大黄高剂量组(0.73±0.04)RSV-N基因表达水平均较病毒对照组(1.00±0.00)低(均P<0.05),利巴韦林组(0.26±0.02)RSV-N基因表达水平均较大黄低剂量组(0.39±0.09)、大黄中剂量组(0.56±0.02)、大黄高剂量组(0.73±0.04)低(均P<0.05),利巴韦林组(0.41±0.04)、大黄低剂量组(0.48±0.08)、大黄中剂量组(0.65±0.15)、大黄高剂量组(0.61±0.15)TNF-α基因表达水平均较病毒对照组(1.00±0.00)低(均P<0.05)。结论:大黄可以抑制RSV感染小鼠的病毒复制和炎性因子的过度表达,减轻肺部炎性病理改变。