恶性肿瘤联合基因治疗的实验研究

基因治疗能够在比较短的时间里从理论设想变为现实，主要是对疾病分子生物学的研究已取得了重大进展，同时发展了许多新技术、新方法。时至今日，基因治疗的研究突飞猛进，并已从实验研究及基础研究过渡到临床试用阶段。目前世界上已有二百多项基因治疗临床研究项目正在进...

中国人群主要组织相容性复合物基因多态性及其与疾病相关性的研究

人类的主要组织相容性复合物(major histocompatibility complex,MHC)又称为人类白细胞抗原系统(human leukocytc antigens,HLA)。 MHC基因位于第6号染色体短臂,分布于2—3×10~6bp长度的DNA链上。根据结构和功能,HLA抗原可分为三类。HLA-Ⅰ类抗原,主要是HLA-A,-B,-C基因产物,存在于所有有核细胞的表面,这类也是经典的组织抗原。

人类基因治疗研究的进展

人类基因治疗研究的进展陈诗书（上海第二医科大学生化教研室分子生物学实验室）人类基因治疗研究中心一、基因治疗的概念基因治疗能够在比较短的时间从理论设想变为现实，主要是对疾病分子生物学的研究已取得了重大的进展，同时发展了许多有关的新技术新方法。特别是７０...

基因治疗研究进展

基因治疗研究进展陈诗书（上海第二医科大学，上海２０００２５）关键词基因治疗载体造血细胞标记恶性肿瘤ＡＩＤＳ心血管疾病１９９６年９月２５～２９日在美国冷泉港实验室举行了基因治疗会议，交流的论文摘要有３８８篇，覆盖了当前基因治疗研究的各个方面的最新进展，...

“瘤苗”——细胞因子转导人肿瘤细胞

Ⅰ基因治疗的现状自１９９０年９月美国国立卫生研究院（ＮＩＨ）及食品药物管理局（ＦＤＡ）批准第一个腺苷酸脱氨酶缺乏－严重联合免疫缺陷症（ＡＤＡ－ＳＣＩＤ）临床基因治疗草案至今正好１０年。从美国ＪｏｈｎＷｉｌｅｙ＆Ｓｏｎｓ出版社网站１９９９年６月发布的一...

基因修饰人肝癌和胃癌“瘤苗”及实验性肿瘤联合基因治疗

恶性肿瘤基因治疗的临床研究已有10余年,但疗效尚未确定.治疗策略也不下十余种,但何种策略为佳尚无定论.目前采用的策略多数为单一基因治疗,而肿瘤的发生可能涉及多种基因及多种因素,发病过程也是多步骤的.本研究建立一种细胞因子基因工程人肝癌和胃癌细胞"瘤苗",用于经手术切除的肝癌或胃癌患者,消灭微小残存癌细胞,并预防复发转移;或用于无手术指征的患者或手术后复发患者的辅助性治疗措施.探索多种基因及因素的配合进行实验性肿瘤的联合基因治疗研究.首先克隆一系列的治疗基因,构建不同载体及调控元件;然后进行不同基因的联合治疗作用,并与放射治疗相结合;最后还筛选新的肿瘤治疗候选基因,旨在为临床提供更有效的肿瘤基因治疗策略和方案.

聚合酶链反应技术在医学研究中的应用

聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction PCR)又称体外基因扩增方法,是八十年代中期Mullis发明的一种新分子生物学技术,它能在一根试管内,将所研究的某个目的基因或某一DNA片段在数小时内扩增百万乃至千万倍,若配合适当的限制性内切酶,毋需放射性同位素辅助就可直接分析基因的结构。只要一根毛发、一个精子。

有关聚合酶链反应的若干问题

聚合酶链反应(Polymerase chain reaction,PCR),又称体外基因扩增方法,是80年代中期由mullis发明的一种新的分子生物学技术。

原发性胃癌患者HLA Ⅱ类抗原DNA多态性的初步研究

有关胃癌与宿主的关系,特别是与机体免疫系统中主要组织相容性复合物(MHC)多态性的关系,至今未见有报道。担负机体特异免疫功能的淋巴细胞在识别异己抗原和引起免疫反应的过程均需要MHC基因产物的参加。因此分析胃癌患者MHC基因的多态性是研究胃癌与宿主关系的一个重要内容,有助于了解胃癌的发病机制和分子流行病学。

实验性肿瘤的联合基因治疗研究

恶性肿瘤基因治疗的临床研究已有10余年,但疗效尚未确定.治疗策略也不下12种,但何种策略为佳尚无定论.目前采用的策略多数为单一基因治疗,鉴于肿瘤的发生可能涉及多种基因及多种因素,发病过程也是多步骤的,该研究探索多种基因及因素的配合进行实验性肿瘤的联合基因治疗研究.首先克隆一系列的治疗基因,构建不同载体及调控原件,然后进行不同基因的联合治疗作用,并与放射治疗相结合,最后还筛选新的肿瘤治疗候选基因,旨在为临床提供更有效的肿瘤基因治疗策略和方案.

参予免疫识别和反应的分子

一、前言近年来由于分子生物学向生命科学各领域的迅速渗透,使当今免疫学的研究从免疫现象的描述过渡到分子水平的探讨。最近,美国波士顿Tufts大学R.

医学生化的十年变迁

中国生物化学学会成立至今已经十年了。十年来,我国医学生化的面貌也发生了巨大的变化。在此我想通过一个最基层的单位——第二医科大学生物化学教研室来反映这10年来我国医学领域中生化的变迁。我们教研室的变化大致可以分成三个阶段。在党的开放政策的指引下,中国生物化学学会成立后即大力组织和促进国内外学术交流。当时各国外宾频繁来做学术报告,我们总是力争能够获得一张入场券,如饥如渴地听取国外的科技发展,分子生物学的新成就更是令人神往,但总感到这些内容高不可攀。至于有关基因的结构和表达,更是奥秘无穷,看不到,摸不着。这种感觉的产生是由于我们长期被人为地与世隔绝所造成的。

“瘤苗”细胞因子基因转导人肝癌和胃癌细胞的研究

国际上获准进行临床实验的人类疾病基因治疗方案已达596个,我国通过国家批准的基因治疗方案仅5项,3项是肿瘤治疗方案,绝大部分临床试验方案只处在工期试验和Ⅱ期试验阶段,其中处在工期试验占66.3%,处在Ⅰ/Ⅱ期阶段的有21%,处在Ⅱ阶段11.4%,进入Ⅱ/Ⅲ期和Ⅳ期的试验方案只占1.4%.可见,目前基因治疗尚处于早期治疗阶段.

PA317产生高滴度带有人TNF-α基因逆转录病毒的研究

逆转录病毒介导的基因转移技术要过渡到临床应用,主要解决如何使病毒载体具有高滴度而不具有复制活性。本文旨在探索建立一种合适的方法,能产生高滴度而且是安全的逆转录病毒载体。采用带有人肿瘤坏死因子基因的LXSN载体转染PA317包装细胞,建立产病毒的包装细胞株,结果表明:病毒载体滴度受包装培养液体积和胎牛血清浓度影响;包装细胞在32℃产生的病毒滴度比37℃高,而且比较稳定。产病毒包装细胞和被感染的靶细胞经PCR分析显示,被转染和被转导的细胞都有病毒基因的整合,而且包装细胞不会产生具有复制活性的逆转录病毒,因此能进一步用于临床研究。

弓形虫基因组文库的建立、特异克隆的筛选和弓形虫病的DNA诊断

首次建立弓形虫人株(ZS_2株)基因组文库,筛选出一个弓形虫特异DNA片段的克隆。对该克隆的DNA片段(1.1kb)进行了限制性内切酶图谱分析。应用Southern印迹法及斑点印迹法检测,结果示同位素^(32)P标记的该克隆DNA片段能与弓形虫DNA、人工感染弓形虫幼猪白细胞和胸腺DNA、弓形虫感染病人DNA杂交,但不与正常人、正常幼猪外周血白细胞、正常小鼠脾脏、恶性疟原虫、肺孢子虫、pBR322的DNA杂交。斑点杂交检测低限为100个弓形虫或500pg弓形虫DNA。该探针已成功地应用于多种弓形虫感染病例的检测,为弓形虫病提供了一个特异、灵敏的DNA诊断方法。

用多聚酶链反应诊断弓形虫病

根据本实验室筛选出的弓形虫(ZS_2株)特异DNA克隆片段的部分顺序分析的数据,设计并合成特异的寡核苷酸引物对,建立多聚酶链反应诊断弓形虫病的方法。不同来源的弓形虫株和7例畸形胎儿DNA经体外基因扩增,扩增产物经电泳检测,均出现特异的扩增条带。对42例肝炎综合症的婴儿和33例不良生育史的孕妇的外周血白细胞DNA检测,分别为6例和4例阳性。50例正常人外周血白细胞DNA检测均为阴性。对扩增产物进行Southern印迹分析,以^(32)P标记克隆的弓形虫特异DNA片段为探针,能与阳性病例特异的扩增条带杂交,而不与阴性样品的扩增产物杂交。本法并与其它检测方法的结果相比较,具高度特异、敏感且快速的优点。