益生菌VSL#3对DSS大鼠结肠炎TLR4-NF-κB通路的调节作用

目的阐明益生菌VSL#3对硫酸葡聚糖钠(DSS)诱导结肠炎大鼠TLR4-NF-κB通路的影响,深入探讨VSL#3对结肠黏膜炎症免疫调控机制。方法将33只Sprague-Dawly大鼠(SD大鼠)分为正常组、DSS造模组以及益生菌治疗组。5%DSS溶液自由饮用一周,构建溃疡性结肠炎模型。观察和评价大肠黏膜的组织学损伤,计算DAI评分以及病理学评分;使用real-time PCR检测结肠组织TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-1βmRNA的表达水平;Western-Blot检测TLR4、NF-κB蛋白的表达水平;应用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清中TNF-α和IL-1β的表达。结果益生菌治疗组DAI评分、病理学评分均低于DSS造模组(P<0.05);益生菌治疗组大鼠结肠组织中TLR4、NF-κB、TNF-α、IL-1β的mRNA水平与DSS造模组相比表达下调,差异具有统计学意义(P<0.05);与DSS造模组相比,益生菌治疗组SD大鼠结肠组织TLR4、NF-κB p65蛋白水平下调,血清TNF-α、IL-1β表达水平降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论益生菌VSL#3可能是通过抑制TLR4-NF-κB通路,发挥其抑制免疫,减轻炎症反应的作用,从而达到治疗溃疡性结肠炎的目的。

16S rRNA序列测定结肠腺瘤性息肉与肠道菌群的相关性分析

目的探讨作为结肠癌癌前病变的结肠腺瘤性息肉(CAP)中肠道菌群的改变特征。方法随机收集2017年11月至2018年4月在昆明医科大学第一附属医院进行结肠镜检查的结肠腺瘤性息肉患者(CAP组)30例和无腺瘤息肉的健康个体(HC组)30名。通过内镜下电凝电切治疗,收集CAP患者的腺瘤组织和健康志愿者(HC)的肠黏膜组织,提取基因组DNA,对细菌16S rRNA基因V3~V4区进行扩增,通过Illumina MiSeq平台进行序列测定,实验结果使用秩和检验(Wilcoxon检验)进行比较法分析。结果CAP患者的腺瘤组织中肠道菌群α多样性高于健康肠黏膜组织(Chao指数、Ace指数P<0.01)。门水平分析中,CAP组中拟杆菌门(FC=0.38)的丰度显著降低(P<0.01);属水平分析中,拟杆菌属(FC=0.32)、埃希菌属(FC=0.57)、瘤胃球菌属(FC=0.42)、Blautia(FC=0.27)、Dorea(FC=0.57)在CAP组中丰度降低(P<0.05);假单胞菌属(FC=2.43)、乳球菌(FC=2.84)、土芽孢杆菌属(FC=2.07)和不动杆菌属(FC=2.36)丰度升高(P<0.05)。结论与HC肠黏膜组织相比,CAP患者腺瘤组织中菌群的丰度和多样性存在显著的差异,表明腺瘤性息肉患者黏膜中菌群存在失衡现象。这种肠道微环境的失衡,对研究结肠腺瘤性息肉的发生和发展具有重要意义。

高毒力肺炎克雷伯菌研究进展

肺炎克雷伯菌(KP)为常见的医院获得性和社区获得性感染病原菌,近年来肺炎克雷伯菌所致的肝脓肿患者例数逐渐增加,且多伴随肝外感染,故得到了广泛关注。这种引起肝脓肿的肺炎克雷伯菌具有较高毒力以及高黏液特性,易导致健康个体感染,因此将其定义为高毒力肺炎克雷伯菌(hvKP)。高毒力肺炎克雷伯菌感染的临床特点、对抗菌药物的敏感性以及分子生物学特性,均不同于传统的肺炎克雷伯菌(cKP),故对高毒力肺炎克雷伯菌的毒力基因进行研究有助于明确该细菌的致病机制,有助于尽早诊断和治疗该细菌导致的感染,有效改善高毒力肺炎克雷伯菌感染者的预后。

肠道菌群及其代谢产物与结肠腺瘤性息肉相关性的研究进展

结肠癌(colorectal cancer,CRC)是常见的消化道恶性肿瘤,其发病率和病死率都极高。从结肠息肉发展到结肠癌一般需要10~15年,且大多遵循息肉-腺瘤-癌症的发展过程,结肠腺瘤性息肉(colorectal adenomatous polyps,CAP)被认为是结肠癌的癌前病变。有研究显示肠道菌群的改变与肠道腺瘤性息肉样变及癌症的发生发展有密切的相关性。根据肠道菌群在不同病理状态下的富集程度,可以进一步分析其与结肠病变之间的关系。本文就肠道菌群的构成,CAP患者粪便和腺瘤组织中肠道菌群富集的改变,以及肠道菌群代谢产物对CAP患者的影响等内容进行综述,为结肠腺瘤性息肉的早期诊断和治疗提供依据。

阴沟肠杆菌blaNDM-1基因敲除株的构建及其生物学特性

目的构建阴沟肠杆菌blaNDM-1基因敲除株，并探讨blaNDM-1基因缺失对阴沟肠杆菌生物学特性的影响。方法采用Red同源重组技术构建阴沟肠杆菌blaNDM-1敲除株并通过PCR和RT-qPCR法进行验证，对原始菌株和blaNDM-1敲除株进行药敏试验、生长曲线绘制和体外竞争试验。结果PCR、DNA测序和RT-qPCR表明成功构建阴沟肠杆菌blaNDM-1敲除株。药敏试验显示原始菌株对亚胺培南、美罗培南和厄他培南均耐药，而blaNDM-1敲除株对其均敏感；原始菌株和基因敲除株在LB液体培养基中具有相似的增殖曲线；两者体外竞争试验的竞争指数值为0．69。结论Red同源重组技术可用于阴沟肠杆菌基因的敲除，且blaNDM-1基因对阴沟肠杆菌的耐药性及竞争力都有影响。