P2X7R过表达的巨噬细胞MSU晶体诱导痛风炎症反应过程中IL-1β、TNF-α、NLRP3表达观察

目的观察嘌呤能受体P2X配体门控离子通道7的配体(P2X7R)过表达白血病细胞诱导分化的巨噬细胞单钠尿酸盐(MSU)晶体诱导痛风炎症反应过程中NOD样受体家族3(NLRP3)蛋白、IL-1β、TNF-α表达情况。方法取人单核细胞白血病细胞系THP-1,并随机分为过表达组、空白组、模型组、对照组;过表达组和空白组分别转染P2X7R过表达质粒、空白载体质粒,转染5 d,将过表达组、空白组、模型组THP-1细胞用100 ng/mL的PMA刺激3 h后分化为巨噬细胞,另将MSU晶体用氢氧化钠溶解配制成浓度为100μg/mL的MSU乳糜状悬液加入培养液中孵育6 h;对照组正常培养。分别采用RT-PCR法和Western blot法测算巨噬细胞P2X7R mRNA、蛋白,ELISA法检测巨噬细胞上清液IL-1β、TNF-α,Western blot法测算巨噬细胞NOD样受体家族3(NLRP3)蛋白。结果与对照组比较,过表达组、空白组、模型组P2X7R mRNA和蛋白相对表达量升高,细胞上清液IL-1β、TNF-α水平升高,细胞NLRP3蛋白相对表达量升高(P均<0.05);与模型组、空白组比较,过表达组P2X7R mRNA、蛋白相对表达量升高,细胞上清液IL-1β、TNF-α水平升高,细胞NLRP3蛋白相对表达量升高(P均<0.05)。结论P2X7R过表达白血病细胞诱导分化的巨噬细胞MSU晶体诱导痛风炎症反应过程中IL-1β、TNF-α、NLRP3表达增加,IL-1β、TNF-α水平升高可能通过激活NLRP3蛋白来实现。

溶质载体家族2成员12干预尿酸诱导肾小管细胞的损伤

背景:近年来,由嘌呤代谢紊乱引起的高尿酸血症的发病率不断增加,可诱导炎症反应并导致肾损伤。目的:探讨溶质载体家族2成员12(solute carrier family 2 member 12,SLC2A12)在高尿酸相关肾损伤中的作用和机制。方法:将肾小管细胞(HK2细胞)分为5组:HK2组、HK2+尿酸组、HK2+尿酸+NC组、HK2+尿酸+siSLC2A12组、HK2+尿酸+siSLC2A12+MK-2206组。用尿酸处理HK2细胞后转染siRNA SLC2A12,再通过MK-2206处理抑制AKT表达。采用CCK-8检测细胞增殖能力,TUNEL检测细胞凋亡情况,qRT-PCR和Western blot检测纤维化因子以及AKT/FOXO3a途径相关因子的表达,酶联免疫吸附实验检测细胞上清液中炎性细胞因子水平。结果与结论:①与HK2组比较,HK2+尿酸组细胞增殖能力降低,细胞凋亡增多,HK2+尿酸+siSLC2A12组细胞增殖能力进一步降低,凋亡细胞进一步增多;与HK2+尿酸+siSLC2A12组比较,HK2+尿酸+siSLC2A12+MK-2206组细胞增殖能力升高,凋亡细胞减少;②与HK2组比较,HK2+尿酸组细胞中结缔组织生长因子、α-平滑肌肌动蛋白、转化生长因子β表达升高,HK2+尿酸+siSLC2A12组3种因子表达进一步升高;与HK2+尿酸+siSLC2A12组比较,HK2+尿酸+siSLC2A12+MK-2206组3种因子表达有所下降;③与HK2组比较,HK2+尿酸组p-AKT、FOXO3a、p-FOXO3a表达升高,HK2+尿酸+siSLC2A12组p-AKT表达进一步升高,而FOXO3a、p-FOXO3a表达下降;与HK2+尿酸+siSLC2A12组比较,HK2+尿酸+siSLC2A12+MK-2206组p-AKT表达下降,FOXO3a、p-FOXO3a表达升高;④与HK2组比较,HK2+尿酸组白细胞介素6、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α分泌水平升高,HK2+尿酸+siSLC2A12组白细胞介素6、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α水平进一步升高;与HK2+尿酸+siSLC2A12组比较,HK2+尿酸+siSLC2A12+MK-2206组白细胞介素6、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α水平下降;⑤结果表明,SLC2A12可能通过激活FOXO3a途径抵抗尿酸诱导的肾小管纤维化及炎症反应,从而保护高尿酸血症诱导的肾脏损伤。

科研训练与思政教育相结合的实验教学初改革

以医学免疫学“酶联免疫吸附试验”为例,进行实验教学改革。将现代免疫学前沿科研知识融入实际实验教学中,构建“入门式”科研训练教学模式;将思政教育贯穿在实验教学的设计和组织实施中,与科研训练有机结合。通过在教学设计、教学安排、组织形式、考核机制及效果反馈等方面初步探索出思政教育与科研训练的结合点,探索思政教育与科研训练结合的新型实验授课模式。过程中不仅能加深医学生对知识的理解,更能培养医学生的科研素养和创新能力,潜移默化对医学生的职业素养、道德品质等进行价值塑造。

雨课堂在人体寄生虫学课程中的预警分析及应用研究

目的:探索雨课堂在人体寄生虫学教学中的预警及应用效果。方法:选取我校2个班作为研究对象,随机分为试验组和对照组,试验组采用基于雨课堂的线上线下混合式教学方法,对照组采用传统教学方法。依据阶段性测试成绩进行学习预警,分析预警效果;对比不同教学方法下学生成绩的差异;采用问卷调查的方法检测雨课堂的应用效果。结果:通过聚类分析对成绩不理想的一类学生进行学习预警,经过努力期末理论考试成绩平均分高于60分;试验组理论平均成绩明显高于对照组,具有统计学意义的差异(t=4.25,P<0.01);雨课堂平台使用满意度为85.7%,学习效果满意度为78.6%。结论:基于雨课堂的学习预警在教师与学生教与学过程中效果佳;线上线下混合式教学较传统教学效果优;雨课堂的使用受到大多数教师和学生的好评,能在一定程度上提高学生的学习成绩。

铜绿假单胞菌鞭毛基因fliI的敲除对其鞭毛形成及生物膜生成的影响

目的探讨铜绿假单胞菌鞭毛相关基因fliI的缺失对其鞭毛生长、生物膜形成及运动能力的影响。方法应用Red同源重组技术构建铜绿假单胞菌鞭毛相关基因fliI的缺失株,通过菌落形态观察、动力试验、生物膜检查以及扫描电镜菌体观察等比较fliI基因缺失后对铜绿假单胞菌活力的影响。结果与原始菌株比较,fliI缺失株的菌落迁徙能力减弱,细菌运动能力下降,生成的生物膜附着能力下降;但fliI基因缺失株仍有鞭毛存在。结论铜绿假单胞菌fliI基因的缺失不影响其鞭毛的形成,但可使得其运动能力减弱和生物膜产生受抑,可能导致其致病性降低。

P2X7受体/NLRP3轴对痛风急性发作的调控作用机制研究

目的 探究P2X7受体/NLRP3轴在痛风急性发作小鼠模型中的调控作用机制。方法 将C57小鼠随机分为5组:对照组(注射生理盐水,8只)、模型组(构建痛风小鼠模型,8只)、C组为NLRP3抑制剂组(模型动物鞘内注射NLRP3抑制剂,8只)、D组为P2X7抑制剂组(模型动物鞘内注射P2X7抑制剂,8只)、E组为P2X7抑制剂+NLRP3激活剂组(模型动物鞘内注射P2X7抑制剂+NLRP3激活剂组,8只)。造模结束称质量后处死小鼠,取各组小鼠的静脉血和肝肾组织。使用ELISA试剂盒检测促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α表达情况;Western blot检测小鼠肠组织中NLRP3、IL-1β、ASC、Caspase-1、P2X7相关蛋白的表达情况。结果 与对照组比较,模型组小鼠IL-1β、IL-6、TNF-α表达提高(P <0.05),NLRP3、ASC、Caspase-1、P2X7蛋白表达水平增加(P <0.05);与模型组比较,抑制NLRP3表达,IL-1β、IL-6、TNF-α表达降低(P <0.05);与模型组比较,抑制P2X7表达,IL-1β、IL-6、TNF-α、P2X7与NLRP3的表达降低(P <0.05);与模型组比较,抑制P2X7表达,同时过表达NLRP3,IL-1β、IL-6、TNF-α表达无统计学意义(P> 0.05);NLRP3、ASC、Caspase-1降低,P2X7表达增加(P <0.05)。结论 P2X7受体/NLRP3轴能够促进痛风急性发作小鼠模型的炎症作用,可作为药物研发的重要靶点,对疾病的治疗具有参考意义。

中国小肠结肠炎耶尔森菌流行现状及其研究进展

小肠结肠炎耶尔森菌在我国分布广泛,存在一定的地域、人群、时间等流行病学差异。随着我国分子流行病学的发展,许多基于分子、核酸水平的新技术及新方法不断被运用在小肠结肠炎耶尔森菌的病原生物学研究中。本文针对目前我国小肠结肠炎耶尔森菌的人群间、动物间及不同时间、地区间的流行病学差异、病原生物学研究、主要分子分型及毒力基因研究进行综述。

基础医学实验师资培养方案优化与能力提升

基础医学是为其他医学类专业奠定良好医学基础知识的一大类专业的综合体,随着我国基础医学教育和研究水平的提高,对高校基础医学实验教师队伍的建设水平提出了更高的要求。文章对基础医学实验教师队伍培养方案优化过程中的常见问题进行探讨,并以新疆医科大学为例应用了基础医学实验师资培养的优化方案,提出基础医学实验教师队伍培养的改革对策及建议,从而达到基础医学整体教育及研究进程加速发展的目的。

以切片平台建设提升实验教师岗位胜任能力

依托切片中心平台为基础,加强形态学实验教师的切片制作基本功,拓展形态学科实验教学的内部交叉,是提升医学类院校综合实力的良好契机。通过收集、整理和分析2013年前后形态学实验教师的发展和岗位胜任力培养效果,以此说明实验教师的切片制作能力、教学能力、科研能力以及职业素养等能力对实验教师岗位胜任力的重要性。

基础医学教辅队伍建设的现状调查与对策研究

文章采用调查问卷的方式对新疆某高校基础医学教辅队伍建设基本状况进行研究,研究内容包括:实验教师人员基本信息、职业的一般认识、发展方面存在的问题认识等进行调查研究,经调查研究发现(1)实验教师队伍存在人员结构需优化;(2)对实验教学重视程度不够;(3)实验系列发展存在限制;(4)实验系列教师培养机制不完善等问题。针对于此在分析问题的基础上提出了高等医学实验教师队伍能力提高的策略与建议。

疫情期间线上混合式教学对学生学习医学微生物学课程学习动机的影响研究

疫情期间高校采取“停课不停学”的教学理念,通过线上授课的方式开展教学。文章针对学生在传统教学中医学微生物学课程学习动机中存在问题,通过线上混合式教学的方法改进和实施。包括雨课堂、虚拟仿真平台、中国慕课大学平台的使用,以及形成性评价的加入为教师及时调整上课内容及进度提供了有力的帮助。同时对提高学生学习动机有着积极的影响。

某高校基础医学教师隐形流失的影响因素及工作满意度分析

基础医学作为医学的根基在其发展和应用中有着不可替代的作用,但基础医学的师资短缺和流失的状况情况却令人堪忧。全国大部分医学院校的基础医学教师呈现明显不足的现状,这与基础医学教师的显性流失和隐形流失有着莫大的关系。在人员配比合适的情况下,隐形流失确是影响教学质量,关乎学校发展的潜在不利因素。通过对基础医学专业的164名教师进行问卷调查,分析了基本信息和问卷回答,从基础医学教师是否存在隐性流失、流失意向、流失动机及择业动机和工作满意度等方面多维度分析了师资隐形流失的现状和原因。

SLC2A9基因rs7349721位点多态性及基因—环境交互与痛风易感性的关系

目的探讨SLC2A9基因rs7349721位点多态性及基因—环境交互与痛风易感性的关系。方法选取314例痛风男性患者(痛风组)和507例健康体检男性(对照组),采集受试者外周静脉血,采用PCR法检测SLC2A9基因rs7349721位点多态性。采用Logistic回归分析法及叉生分析法分析不同临床病理特征对痛风发病的影响,不同遗传模型痛风易感性及基因—环境的相乘、相加交互作用。结果痛风组SLC2A9基因rs7349721位点AA、AT基因型及等位基因型A分布低于对照组,TT基因型及等位基因型T分布高于对照组(P均<0.05)。血尿酸、血糖、舒张压为痛风发病的危险因素(P均<0.05,OR均>1.00),规律运动为痛风发病的保护因素(P<0.05,OR<1.00)。加性遗传模型中TT为痛风发病的危险因素OR=1.73,95%CI为1.14~2.63,隐性遗传模型中AA+AT为痛风发病的保护因素OR=0.66,95%CI为0.49~0.89。SLC2A9基因rs7349721位点AT+TT基因型与规律运动在相加和相乘交互模型中均为痛风发病的保护因素(P<0.05,OR<1.00)。结论SLC2A9基因rs7349721位点多态性与痛风易感性存在关联,且不同遗传模型与规律运动对痛风易感性存在交互作用。

SLC2A9基因rs13137074位点双荧光素酶报告系统的构建及其对基因活性的影响

目的构建该实验室定点突变联合双荧光素酶报告系统,并通过该系统了解rs13137074基因位点突变对葡萄糖易化转运蛋白-9(SLC2A9)基因转录活性的影响。方法采用定点突变法对rs13137074基因位点进行点突变,并通过双酶切的方式连接构建双荧光素酶报告系统质粒。随后通过细胞转染及荧光素酶检测等方法确定突变位点对SLC2A9基因转录活性的影响程度。结果rs13137074基因位点突变成功;质粒转染过程中Lipofectamine 3000终水平为1.5μL/mL,转染时间为48 h时效果最佳;rs13137074位点发生突变时可导致SLC2A9基因转录活性下降23.60%。结论人群血尿酸水平可能受SLC2A9基因调控区rs13137074位点单核苷酸多态性的影响。

ABCG2基因rs2231142位点基因多态性与痛风易感性的关系

目的探讨ABCG2基因rs2231142位点基因多态性与痛风易感性的关系。方法选择293例男性痛风患者纳入痛风组,500例男性健康体检者纳入对照组。观察两组ABCG2基因rs2231142位点基因多态性。分析痛风发病的危险因素,不同遗传模型与痛风易感性的关系,以及基因与环境的相乘交互作用和相加交互作用。结果痛风组ABCG2基因rs2231142位点GT、TT基因型频率及等位基因T频率高于对照组,GG基因型、等位基因G频率低于对照组(P均<0.05)。高尿酸血症、高血糖和高密度脂蛋白是痛风发病的危险因素(P<0.05,OR>1.00),规律运动是痛风发病的保护因素(P<0.05,OR<1.00)。不同遗传模型中,TT基因型均表现为痛风的危险因素(加性模型OR=3.36,95%CI 2.18~5.19;显性模型OR=3.50,95%CI 2.55~4.81;隐性模型OR=5.18,95%CI 3.45~7.78)。ABCG2基因rs2231142位点GT+TT基因型与规律运动在相乘和相加模型中均存在交互作用,表现为痛风发病的保护因素(P<0.05,OR<1.00);TT基因型与规律运动仅在相加模型中表现出交互作用,表现为痛风发病的危险因素(P<0.05,OR>1.00)。结论ABCG2基因rs2231142位点基因多态性与痛风易感性间存在关联,等位基因T为痛风发作的危险因素且与规律运动间存在交互作用。

医学形态学综合实验课程体系的建设和应用

利用融合性课程的优势,在进行合理安排设计型实验的基础上,将医学形态学综合实验作为形态学课程学习和机能学学科学习的纽带。同时,利用比较医学优势,实验室配备相应的人体标本和组织病理切片,进行横向比较研究,培养学生的独立思考、动手能力和创新能力。"以疾病为基础,以学生为中心,服务学生"为宗旨,建立医学形态学综合实验课程,并完善其平台建设和构建课程体系。

创意显微摄影在组织学及病理学教学中的应用

"组织学、病理学创意显微摄影大赛"为当代大学生在组织学与胚胎学、病理学课程学习中的发散思维和新颖解读提供了展示平台。本次研究对大赛实施过程及结果进行了描述和反思,旨在激发学生创新观察潜能,提高学生自主学习和教学效果的同时,为今后开展顺应时代发展的多元化教学活动提供一定的参考。

病理解剖学绘图比赛的实践分析

病理解剖学是生命医学类的重点基础性学科,其中实验教学是理论教学的实践与拓展。为提升实验教学质量,调动学生积极性,新疆医科大学形态中心连续四年开展病理解剖学绘图比赛。本文结合病理解剖学绘图比赛的整个实践过程及学生反馈调查,分析绘图比赛对课程学习的意义和成效,反思比赛中存在和发现的问题,为今后开展更有利的教学活动提供参考。

痛风患者NLRP3基因多态性观察

目的观察痛风患者的NLRP3基因多态性,并分析其与痛风易感性的相关性。方法267例痛风患者及448例健康对照者,采集静脉血,PCR法检测NLRP3基因。结果痛风患者NLRP3基因rs3806268位点基因型为CC、CT、TT的分别是177、81、9例,等位基因C、T的频率分别为81.5%(435/534)、18.5%(99/534);健康者分别为289、146、13例,等位基因频率分别为80.8%(724/896)、19.2%(172/896)。痛风患者NLRP3基因rs3806268位点基因型为GG、GA、AA的分别是59、118、90例,等位基因G、A频率分别为44.2%(236/534)、55.8%(298/534);健康者分别为104、238、106例,等位基因频率分别为49.8%(446/896)、50.2%(450/896)。痛风患者NLRP3基因rs10754558位点基因型为GG、GC、CC的分别是48、135、84例,等位基因G、C频率分别为43.3%(231/534)、56.7%(303/534);健康者分别为95、234、119例,等位基因频率分别为47.3%(424/896)、52.7%(472/896),痛风及健康者NLRP3基因rs3806268位点基因型和等位基因频率间差异有统计学意义(P均<0.05)。rs3806268位点在加性模型中AA基因型相对于GG基因型以及在隐性模型中AA基因型相对于GG+GA基因型均表现为痛风的保护因素,能降低痛风的发病风险(OR分别为0.58、0.61,95%CI分别为0.41~0.84、0.44~0.85)。结论痛风患者NLRP3基因rs3806268位点基因型以CC为主,等位基因C频率较高。NLRP3基因rs3806268位点基因多态性与痛风易感性有关,rs3806268位点突变可能是痛风的保护性因素。

URAT1基因多态性与维吾尔族高尿酸血症的交互作用研究

目的探索人尿酸盐转运子基因(URAT1)rs3825018、rs505802和rs524023位点基因多态性与维吾尔族高尿酸血症(HUA)的交互作用。方法选取2014年11月～2016年12月在新疆乌鲁木齐市某附属医院健康管理中心参加健康体检的维吾尔族2340例作为研究对象,并根据尿酸水平分为HUA组(n=986)与对照组(n=1354)。测量研究对象的身高、体重、腰臀围、血压等一般指标,并收集其禁食12 h后的静脉血液标本,检测血尿酸、肌酐、葡萄糖、总胆固醇和三酰甘油等生化指标及URAT1基因rs3825018、rs505802和rs524023位点基因多态性。结果 HUA组与对照组的URAT1基因rs3825018、rs505802和rs524023位点等位基因及基因型频率分布比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。遗传模型分析发现,无论是否调整年龄和性别,rs3825018、rs505802和rs524023三个多态性位点在三个遗传模型中均与维吾尔族HUA无显著相关(95%CI跨越1)。交互作用结果显示,维吾尔族女性携带rs505802位点突变在相加模型中存在负交互作用(S=-0.146,P<0.05)。结论URAT1基因rs3825018、rs505802和rs524023位点突变可能不会影响维吾尔族HUA的易感性,维吾尔族女性携带rs505802位点突变可能会在一定程度上降低发生HUA的风险。