联合应用粉防己碱与甘草酸抗肝纤维化分子生物学机制研究

目的 探讨联合应用粉防己碱 (tetrandrine,Tet)与甘草酸 (glycyrrhizinicacid ,Glz)抗肝纤维化的分子生物学机制。方法 采用四氯化碳皮下注射诱导大鼠肝纤维化模型 ,同时给予不同剂量 (5mg/kg、10mg/kg、2 0mg/kg体重 )Tet、(5 0mg/kg体重 )Glz及二者联合灌胃或腹腔注射 ,用RT PCR法检测肝组织Ⅰ型、Ⅲ型前胶原、c fos及c junmRNA表达。结果 (10mg/kg、2 0mg/kg体重 )Tet和Glz单独应用能够不同程度抑制肝纤维化大鼠肝组织Ⅰ型、Ⅲ型前胶原、c fos及c junmRNA表达 ,两种药物联合应用效果更为显著。结论 联合应用Tet与Glz能够更有效地在转录及其上游水平抑制肝脏胶原合成。

溃疡性结肠炎患者基质金属蛋白酶-2,9和抑制因子-1,2的表达及其意义

目的 在转录和蛋白水平检测基质金属蛋白酶 (MMP) 2 ,9和特异性组织抑制因子(TIMP) 1,2在溃疡性结肠炎 (UC)患者和正常志愿者肠粘膜中的表达情况及活性变化。方法 对病理证实的 2 2例UC和 2 0名健康志愿者在内窥镜下取活检 ,采用NorthernBlot和WesternBlot法分别对MMP 2 ,9及TIMP 1,2进行检测 ,并采用明胶酶谱法测定MMP 2 ,9活性。结果 MMP 2 ,9和TIMP 1在正常肠粘膜中均呈现低表达 ,在患者肠粘膜中表达显著升高 (P <0 .0 1) ,而TIMP 2在两种粘膜中的表达量无明显差别。明胶酶谱结果显示MMP 2 ,9在后者中的活性较前者中显著升高 (P <0 .0 5 ) ,且与炎症程度相关。结论 MMP 2 ,9在UC肠炎肠粘膜上皮重塑过程中具有重要作用 。

胃癌组织中骨形成蛋白4的表达

目的:研究骨形成蛋白4(bone morphogenetic protein-4,BMP-4)在胃癌中的表达及其与临床病理参数间的关系。方法:以免疫组织化学法(SP法)检测90倒胃癌及30例癌旁组织胃黏膜石蜡切片中BMP-4的表达,并分析其与临床病理参数的关系。结果:胃癌组织中BMP-4阳性表达率23.3％(21/90),癌旁组织胃黏膜阳性表达率为3.3％(1/30),两组间比较差异有统计学意义(x2=6.011,P=0.014)。此外,胃癌组织中BMP-4蛋白的阳性表达在不同性别、年龄(≥60岁或<60岁)及肿瘤大小(≥5 cm或<5 cm)的患者中无统计学差异;胃窦部的肿瘤及肿瘤浸润深、分化程度差及有淋巴结转移的胃癌患者BMP-4阳性表达率分别明显高于其他部位肿瘤及肿瘤浸润浅、分化程度高及无淋巴结转移者(P<0.05)。结论:胃癌组织中存在BMP-4的阳性表达,其表达与胃癌的恶性程度有关。

MUC-1基因在胃癌和外周血中的表达及临床意义

目的 :检测胃癌 MUC- 1的表达情况及其与临床分期和转移的相关性。方法 :应用逆转录聚合酶链反应 ( RT- PCR)和免疫组化方法检测胃癌活检标本和外周血中 MUC- 1基因和蛋白的表达水平。结果 :在 5 6例胃癌病例中 MUC- 1 m RNA阳性表达率为 48.2 % ,MUC- 1蛋白阳性表达率为 5 3.6%。临床分期中 和 期病人阳性表达率 MUC- 1 RNA为 33.3% ,MUC- 1蛋白为 40 % ,而 期病人则分别高达 65 .4%和 69.2 % ,二者差异有显著性意义 ( P<0 .0 5 )。在淋巴结转移的患者中外周血的癌细胞 MUC- 1高表达 ,阳性率为 73%。结论 :MUC- 1是一种较好反映胃癌恶性程度和转移性的肿瘤标志物。

强力霉素对溃疡性结肠炎大鼠治疗作用的实验研究

目的探讨强力霉素对溃疡性结肠炎(ulcerativecolitis,UC)的治疗效果及其可能作用机制。方法采用三硝基苯磺酸/乙醇灌肠诱导实验性溃疡性结肠炎大鼠模型,并分别以小剂量、中剂量和大剂量强力霉素(100mg/kg、200mg/kg和400mg/kg体重)灌肠干预2周,通过肉眼和光镜分别观察结肠组织大体损伤及黏膜病理变化,测定结肠黏膜组织髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性,原位杂交法分别检测基质金属蛋白酶2、9(MMP2、9)mRNA表达,免疫组织化学法检测Ⅳ型胶原蛋白表达。结果溃疡性结肠炎大鼠经不同剂量强力霉素干预2周后,腹泻、稀血便等症状不同程度缓解,结肠组织大体观察,黏膜糜烂、溃疡减少或消失,镜下表现为炎症病变减轻,中性粒细胞、淋巴细胞明显减少,溃疡不同程度愈合,MPO活性明显下降。MMP-2、9mRNA表达水平下调,Ⅳ型胶原蛋白降解不同程度减少。不同剂量强力霉素治疗组与模型组相比差异有显著性,且在强力霉素一定剂量范围内呈剂量依赖性。结论强力霉素对溃疡性结肠炎有明显的治疗作用,其可能的机制为抑制MMP2、9mRNA的表达,减少基底膜主要成分Ⅳ型胶原的降解,从而维持细胞外基质成分(extracellularmatrix,ECM)的代谢平衡。

端粒酶逆转录酶在原发性结肠癌中的表达

目的 探讨原发性结肠癌组织中端粒酶逆转录酶 (humantelomerasereversetranscriptase ,hTRT)的表达和端粒酶活性的关系以及在结肠癌分子生物学诊断的临床意义。方法 用免疫组化和TRAP法分别观察 5 4例原发性结肠癌组织和正常结肠组织中hTRT和端粒酶的活性 ,比较分析它们的相关性。结果 hTRT阳性率83% (4 5 / 5 4) ,端粒酶活性阳性率 85 % (4 6 / 5 4) ,在结肠癌组中 3例术前化疗病人hTRT表达呈 2例弱阳性 1例阴性 ,结肠癌淋巴结转移的hTRT阳性率达 92 % ,10例正常结肠组织均为阴性。结论 hTRT在结肠癌中具有癌细胞的特征性 ,并与端粒酶活性呈正相关。hTRT可作为结肠癌诊断的敏感的指标 。

CA^(72-4)、MGAg等多种肿瘤标志物在胃癌诊断中的应用

ＣＡ７２┐４、ＭＧＡｇ等多种肿瘤标志物在胃癌诊断中的应用陈锡美郁雅娟＊附属甘泉医院消化内科（上海，２０００６５）＊无锡市纺织产品品种研究所医院（无锡，２１４００１）关键词胃肿瘤；肿瘤标志物；早期诊断分类号Ｒ７３５．２胃癌占我国恶性肿瘤死亡的２３％，居...

尿型纤溶酶原活化素受体在大肠癌活检标本中的表达和意义

在33例大肠癌内镜活检标本中以抗配体免疫组化法检测肿瘤细胞尿型纤溶原活化素受体(Urokinase-type plasminegen activator receptor,u-PAR)的表达,同时测定C-erbB-2蛋白(P_185)分布情况。结果表明,大肠癌中u-PAR阳性率为39.3%,其中以低分化腺癌为主,占72.7%,P_185阳性率为42.4%,二者表达有高度一致性。u-PA是一种丝氨酸蛋白酶,在和肿瘤细胞膜的受体(u-PAR)结合后具有增强肿瘤细胞浸润能力的作用。应用肠镜活检标本检测u-PAR可作为大肠癌恶性程度及估计预后的一项指标。

粉防己碱抑制肝纤维化大鼠肝组织c-fos和c-jun mRNA表达

目的 探讨粉防己碱 (tetrandrine ,Tet)对肝纤维化大鼠肝组织c fos及c junmRNA表达的影响。方法 皮下注射四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型 ,同时给予不同剂量 ( 5、10、2 0mg/kg)Tet灌胃 ,采用RT PCR法检测肝组织c fos及c junmRNA的表达。结果 不同剂量Tet能不同程度地抑制肝纤维化大鼠肝组织c fos及c junmRNA的表达。 结论 Tet能有效地在转录及其上游水平抑制肝脏胶原合成 ,从而发挥抗肝纤维化作用。

埃索美拉唑对胃食管反流病患者症状和生活质量的影响

目的:探讨埃索美拉唑对胃食管反流病(GERD)患者症状和生活质量的影响.方法:采用前瞻、随机、阳性对照研究,将经内镜或24 h食管pH监测明确诊断的78例GERD患者随机分为标准剂量的埃索美拉唑(20 mg,2次/d,po)组和加倍剂量的奥美拉唑(20 mg,2次/d,po)组,每组39例.2组分别治疗8 wk,比较2组症状控制、RE内镜下有效率和愈合率、生活质量等区别.结果:共76例患者完成试验.埃索美拉唑组和奥美拉唑组各有1例RE因违反试验方案退出.4 wk和8 wk两组症状总积分治疗后均明显下降,但两组间差异无统计学意义.埃索美拉唑组和奥关拉唑组使NERD症状积分下降程度不如RE患者,但埃索美拉唑组使NERD患者症状积分下降优于奥美拉唑组(P<0.01);两组在烧心和胸痛缓解率上差异明显(78.3%vs 45.5%,64.3%vs 37.5%,均P<0.05),在反酸、咽下困难上无明显差异:4 wk和8 wk对RE内镜有效率和愈合率差异明显(4 wk:88.8%vs 59.3%,80.0%vs 51.9%;8 wk:96.0%vs 70.4%,88.0%vs 63.1%,均P<0.05),埃索美拉唑组患者活力和社会功能疗效明显(92.5±5.7 vs 85.3±7.1,85.2±4.6 vs 76.8±6.5,均P<0.05).结论:标准剂量的埃索美拉唑较加倍剂量的奥美拉唑更有效的控制GERD患者(尤其是RE患者)的临床症状,改善活力和社会功能相关的生活质量.

塞来昔布增强胃癌化疗药物疗效的机制研究

目的研究塞来昔布(特异性环氧合酶-2抑制剂)增强胃癌化疗药疗效的分子机制。方法以3个浓度(10、50、150mmol.L-1)塞来昔布干预胃癌细胞BGC-823株48h,用RT-PCR法观察用药前后多药耐药(MDR)相关基因如MDR1、多药耐药相关蛋白(MRP)和谷光甘肽-S-转移酶π(GST-π)基因的表达变化。结果胃癌细胞BGC-823株存在内在多药耐药性,表现为有MRP和GST-π表达、无MDR1表达。塞来昔布干预后,MRP和GST-π均有不同程度下降(P<0.05或P<0.01)。结论塞来昔布可通过抑制MDR相关基因如MRP和GST-π起化疗增敏剂作用。

肥胖与大肠腺瘤关系的临床及分子机制

目的:初步了解肥胖人群患大肠腺瘤的危险性,并进一步深入探讨肥胖与大肠肿瘤的关系及其防治.方法:选择2006-12/2007-12在我院行结肠镜检查的患者539例,分为大肠腺瘤组(n=250)和正常对照组(n=289),测量身高、体质量、腰围及臀围,利用多因素Logistic回归进行相关性分析;从大肠腺瘤组中选择4例病理为管状腺瘤或绒毛管状腺瘤的大肠息肉组织,2例BMI>24kg/m2,WC>85cm;2例BMI<24kg/m2,WC<85cm,进行信号通路功能芯片基因筛查.结果:肥胖或腹型肥胖(以BMI和WC划分)患大肠腺瘤的调整后OR值分别为2.48(95%CI:1.19-5.20,P=0.016)和1.75(95%CI:1.15-2.66,P=0.009),其中男性调整后的OR值分别为4.10(95%CI:1.26-13.31,P=0.019)和1.70(95%CI:1.00-2.88,P=0.019),以BMI划分的超重组差异无统计学意义;以WHR划分的腹型肥胖在各种分析中均无统计学意义.基因芯片杂交结果显示,两组差异表达的基因共23个,其中BMI>24kg/m2组比BMI<24kg/m2组表达上调有6个,下调有17个,脂肪细胞因子Foxa2表达上调,IL-8和Leptin表达下调.结论:肥胖或腹型肥胖与大肠腺瘤的发生存在显著相关性,肥胖男性的患病风险明显大于女性;患大肠腺瘤肥胖人群的腺瘤组织中存在一些异常表达的因子.

幽门螺杆菌临床分离株耐药特点分析

目的:探讨幽门螺杆菌(H pylori)对常用抗生素的耐药特点.方法:将来自不同患者的胃镜活检标本分别涂布接种幽门螺杆菌培养基后37℃微需氧环境下培养96 h,得61株H pylori临床分离株.对其采用Kirby-Bauer法行甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林、呋喃唑酮4种抗生素药敏试验,并分析其特点.结果:H pylori临床分离株对甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林、呋喃唑酮4种抗生素的耐药率分别为54.1%,37.7%,41.0%和45.9%.4种抗生素耐药率比较无统计学差异(P>0.05).甲硝唑耐药存在性别差异(P=0.037).甲硝唑、克拉霉素、阿莫西林耐药与患者用药史相关(P= 0.028;P=0.034;P=0.005).4种抗生素耐药与患者疾病类型及年龄无关(P>0.05).结论:4种抗生素耐药率均较高.耐药率与用药史相关,与疾病类型及年龄未见相关性.

香连联合埃索美拉唑治疗非幽门螺杆菌相关难治性消化性溃疡

目的:探讨香连联合埃索美拉唑治疗非幽门螺杆菌相关难治性消化性溃疡的疗效和安全性。方法:47例非幽门螺杆菌相关性难治性溃疡接受埃索美拉唑治疗(埃索美拉唑组),另外47例接受埃索美拉唑+香连治疗(埃索美拉唑+香连组)。评价两组药物对患者临床症状、内镜下溃疡改善和安全性。结果:共有90例难治性消化性溃疡患者完成试验(每组45例)。埃索美拉唑+香连组在中上腹痛、上腹饱胀、症状总积分、内镜缓解率和愈合率上优于埃索美拉唑组(P<0.05),而在反酸、嗳气和烧心上两组差异无统计学意义(P>0.05)。安全性上二者亦无显著差异(P>0.05)。结论:香连联合埃索美拉唑可有效治疗非幽门螺杆菌相关性难治性消化性溃疡,香连为该类溃疡的辅助治疗提供了新的选择。

抗PIWIL2蛋白多克隆抗体的制备、鉴定及初步应用

目的:制备兔抗人PIWIL2(P-element-induced wimpy testislike 2,或称HIWI2)的多克隆抗体,并鉴定其特异性,初步探讨其在人正常及肿瘤组织中的分布。方法:人工合成特异性PIWIL2多肽,以马来酰胺活化匙孔血蓝蛋白(Keyhole limpet hemocyanin,KLH)为载体构建多肽免疫原,致敏大白兔,制备兔抗人PIWIL2多克隆抗体。亲和层析法纯化抗体,ELISA和Western印迹鉴定特异性,人组织芯片行PIWIL2的免疫组化研究。结果:通过构建PIWIL2多肽-KLH载体复合物致敏大白兔,制备出兔抗人PIWIL2蛋白多克隆抗体。ELISA及Western印迹证实兔抗人PIWIL2抗体可特异性识别PIWIL2多肽。人组织芯片免疫组化染色显示,PIWIL2在肿瘤细胞的表达具有组织特异性,大多数正常和癌组织的平滑肌细胞胞质中呈阳性染色。结论:成功制备出兔抗人PIWIL2多克隆抗体,为后续研究奠定了基础。

热休克蛋白在胃黏膜保护中的作用

热休克蛋白在细胞的正常发育和多种应激状态下维持细胞的稳定性具有重要的作用.热休克蛋白有多个家族,他们的细胞内定位和功能各不相同.胃黏膜细胞常常受到食物、酒精、氧化物及幽门螺杆菌感染的刺激,胃黏膜细胞在这些应激状态下会加速热休克蛋白的合成.热休克蛋白表达在转录和翻译两个水平上进行调节.蛋白质缺乏、肾上腺素能神经功能减退将减弱其表达,而迷走神经功能的削弱会增强热休克蛋白的表达;除此之外多种外源性因素也会影响其表达.热休克蛋白对于应激性溃疡的预防、胃黏膜细胞凋亡的抑制均有一定的保护作用.本文综述了主要的热休克蛋白分子的特性、胃黏膜细胞中热休克蛋白的表达诱导、调节以及在胃黏膜保护中的作用,并探讨了热休克蛋白诱导剂作为胃黏膜保护剂的可能性.

胃癌发生部位的转变趋势(附527例分析)

本文对我院1976～1990年胃镜检查发现并经病理证实的527例胃癌患者作回顾性分析。根据发现的时间顺序分为2组。第1组(1976～1983年)237例,第2组(1984～1990年)290例。结果发现贲门癌的发生率第2组(76例,26.21％)高于第1组(43例,18.14％)(P<0.05)。且贲门加胃底癌的发生率两组相比也有显著差异(1组:20.68％,2组:31.03％,P<0.05)。从近端到远端,女性患者逐渐增多,尽管贲门癌在男女比两组间差异不显著(P>0.05),但女性患者发病率似有上升趋势。

注射用尼扎替丁治疗消化性溃疡出血205例

目的:研究注射用尼扎替丁治疗消化性溃疡出血的疗效及安全性.方法:采用多中心、随机、双盲、阳性药物平行对照研究.将2008-09/2009-12收集的205例经胃镜证实的消化性溃疡出血患者随机分为两组,试验组102例给予尼扎替丁0.1g,每日3次,对照组103例给予法莫替丁20mg,每日2次,连续5d.结果:共有201例患者可供疗效评价.试验组的临床显效率为85.0%,总有效率为99.0%,对照组的临床显效率为82.2%,总有效率为98.0%,两组间差异无统计学意义(P>0.05).两组不良反应主要为白细胞减少、转氨酶轻度升高和贫血(P>0.05).结论:注射用尼扎替丁是治疗消化性溃疡合并上消化系出血有效且安全的药物.

人PIWIL3特异性抗体的制备和PIWIL3蛋白在肿瘤组织中的分布

目的:制备人Argonaute家族中PIWIL3蛋白的特异性抗体,并检测其在人多种肿瘤组织中的表达和分布。方法:根据序列同源性和多肽免疫性,利用内部多肽选择数据库选择最佳的多肽免疫原合成多肽,再与KLH结合用于免疫;免疫所得的抗血清经多肽包被的凝胶进行亲和层析纯化,酶联免疫吸附分析技术(ELISA)检测纯化后抗体与多肽的结合能力,Westernblot检测抗体对相应蛋白的结合能力。人肿瘤组织芯片检测该蛋白在多种肿瘤组织的表达和定位。结果:成功制备特异性人PIWIL3蛋白多克隆抗体。ELISA和Westernblot检测均表明该抗体具有很好的结合能力。肿瘤组织芯片检测到PIWIL3蛋白在人星形细胞神经胶质瘤和脑脊膜瘤胞质中表达。结论:应用内部多肽选择数据库可以得到最佳的多肽免疫原,以区分亚家族中其他有高度序列同源性的蛋白,成功制备出纯度和结合能力均较好的特异性人PIWIL3抗体,对研究人类特定肿瘤的发病具有潜在的应用价值。

VEGFR-3在胃癌细胞、血管及淋巴管内皮的表达及与转移的关系

目的研究血管内皮生长因子受-体3(vascular endothelial growth factor receptor-3,VEGFR-3)在胃癌细胞、血管内皮及淋巴管内皮的表达及其与转移的关系。方法取50例胃癌手术切除的新鲜组织一块,对半切开后于相邻面切片,一块采用免疫组化染色法检测VEGFR-3和VEGF-C表达,另一块采用5′-核苷酸酶-碱性磷酸酶双重染色法染色淋巴管和血管作对比,观察VEGFR-3在胃癌细胞、血管内皮以及淋巴管内皮的表达,分别以MVD和LVD代表微血管密度和淋巴管密度。结果淋巴管内皮、血管内皮及部分(38%)胃癌细胞均可表达VEGFR-3蛋白。胃癌细胞VEGFR-3表达与VEGF-C表达、淋巴管浸润、淋巴结转移及静脉浸润有关(P<0.05)。VEGFR-3在血管内皮的表达(MVD)与静脉浸润和远处转移有关(P<0.05),而在淋巴管内皮的表达(LVD)则与VEGF-C表达、淋巴管浸润和淋巴结转移有关(P<0.05)。结论胃癌组织VEGFR-3不同定位的表达在胃癌血道转移和淋巴道转移过程中发挥了双重作用。