抗副溶血弧菌卵黄抗体制备及其与不同血清型菌株交叉反应研究

为探索卵黄抗体对防控凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)养殖中副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)病的潜在作用,将2种血清型(O1:KUT和OUT:KUT)的3株副溶血弧菌制备成灭活疫苗,分别免疫产蛋鸡制备卵黄抗体。通过ELISA实验和试管凝集实验,评估了卵黄抗体的效价消长规律、抑菌效果和交叉反应情况。结果显示:3株副溶血弧菌均能诱导高特异性水平的卵黄抗体,抗体凝集效价和ELISA效价的消长趋势相近,均在4免后10~60 d达到卵黄抗体的效价平台期,凝集效价在1∶8以上,ELISA效价在1∶6400以上;卵黄抗体与血清型相同的其他副溶血弧菌发生强烈的交叉ELISA和交叉凝集反应,但与血清型不同的副溶血弧菌有较低的交叉ELISA反应,无交叉凝集反应。研究表明副溶血弧菌能刺激蛋鸡产生高特异性水平的卵黄抗体,对不同血清型菌株不具有交叉保护效果,可为抗副溶血弧菌卵黄抗体产品的开发与应用提供参考。

抗大口黑鲈蛙虹彩病毒卵黄抗体的制备及其间接ELISA检测方法的建立

大口黑鲈(Micropterus salmoides)蛙虹彩病毒(Largemouth bass ranavirus,LMBV)是我国大口黑鲈养殖中的常发病原,主要引起大口黑鲈病毒性溃疡病,制约其养殖业的健康发展。为探究卵黄抗体在防控LMBV中的潜在作用,利用LMBV灭活疫苗免疫蛋鸡,制备了抗LMBV卵黄抗体;通过筛选捕获物浓度、包被条件和封闭条件,建立了抗LMBV卵黄抗体的间接酶联免疫吸附测定(ELISA)检测方法;使用构建的方法,评估了LMBV灭活疫苗免疫蛋鸡后卵黄抗体的效价消减规律。结果表明,1‰(φ)β-丙内酯4℃作用72 h可完全灭活LMBV。间接ELISA反应中,每孔包被105 TCID50灭活病毒,37℃孵育2 h后,使用5%(φ)牛血清白蛋白37℃封闭2 h,可有效降低阴性对照组卵黄抗体的背景值;此外,所建立的检测方法与杂交醴弹状病毒卵黄抗体、未免疫的蛋黄提取物和空白细胞不存在交叉反应,特异性较高。LMBV灭活疫苗免疫蛋鸡约48 d可产生特异性卵黄抗体,免疫后58 d效价升高至峰值(1∶12800),峰值水平可持续至免疫后128 d。所构建的LMBV卵黄抗体检测方法,可实时监测LMBV灭活疫苗免疫蛋鸡后的特异性卵黄抗体效价水平的变化规律,确定LMBV卵黄抗体的高效免疫程序及高免蛋收集持续期,为LMBV卵黄抗体产品的开发、应用及LMBV的防治提供了新思路。

我国饭店设计存在的问题及对策研究

本文分析了我国饭店设计的现状及存在的问题,着重从人性化的设计、选用最佳团体参与设计、绿色饭店设计等几个方面对饭店设计提出了相应的对策建议。

草鱼NCCRP-1和IL-10的表达、抗体制备及组织病理变化

【目的】制备草鱼(Ctenopharyngodon idella)非特异性细胞毒性细胞受体蛋白-1(NCCRP-1)和白细胞介素-10(IL-10)的抗血清,探讨重组NCCRP-1和IL-10免疫在草鱼抗病毒感染过程中肾脏和肠病理学变化及对NCCRP-1和IL-10表达的影响。【方法】应用PCR扩增技术获得草鱼NCCRP-1和IL-10开放阅读框ORF,构建原核表达载体pET-NCCRP和pET-IL10;用表达的重组蛋白分别制备兔抗NCCRP-1和IL-10的抗血清,并采用ELISA方法测定抗血清的效价;分别用重组NCCRP-1和IL-10免疫草鱼,并用草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)GD108攻毒,感染7 d后制备草鱼肾脏和肠的病理切片,用定量PCR和western blot检测NCCRP-1和IL-10的表达。【结果】草鱼NCCRP-1和IL-10的ORF分别编码237个和179个氨基酸;草鱼NCCRP-1和IL-10的原核表达载体pET-NCCRP和pET-IL10在大肠杆菌(Escherichia coli)BL21中成功诱导表达,最优表达条件分别是0.1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)37℃诱导4 h和1.0 mmol/L IPTG 37℃诱导6 h,western blot分析表明重组表达的蛋白为目的蛋白;制备兔抗NCCRP-1和IL-10抗血清的效价均高达1∶40000,免疫和攻毒后,NCCRP-1免疫组草鱼肾脏与肠的病理变化较轻,且NCCRP-1在肾脏与肠中的表达量显著上调(P<0.05);IL-10免疫组草鱼肾脏与肠的病理变化较重,IL-10在肾脏与肠中的表达量变化不显著。【结论】外源性NCCRP-1免疫后增强了草鱼抵御GCRV-GD108感染的免疫应答,NCCRP-1对草鱼抗GCRV GD108感染效果显著;而外源性IL-10免疫后,其对草鱼抗GCRV GD108感染效果不显著。

草鱼呼肠孤病毒GCRV 096 VP7蛋白的表达及免疫原性

【目的】研究草鱼呼肠孤病毒(grass carp reovirus, GCRV)096 vp7基因的原核和真核表达及其编码蛋白的免疫原性。【方法】应用RT-PCR技术获得GCRV 096 vp7基因,构建GCRV 096 vp7基因原核表达载体pET-VP7,用原核表达的GCRV 096 VP7蛋白免疫草鱼(Ctenopharyngodon idellus)15 d后,用GCRV 096和GCRV GD108分离株对其攻毒,检测GCRV 096 VP7的免疫原性。构建GCRV 096 vp7基因真核表达载体p EGFP-N3-VP7,分析其在草鱼CIK细胞中的表达。【结果与结论】GCRV 096 vp7基因的开放阅读框ORF (GenBank登录号为JN206665)为831 bp,编码276个氨基酸。成功构建GCRV 096 vp7基因原核表达载体pET-VP7,并在大肠杆菌BL21中诱导表达成功;最优表达条件是0.2 mm/L IPTG、28℃下表达5 h,通过HisTrap HP柱纯化融合蛋白,Western blot分析结果表明,所表达的蛋白为目的蛋白。经免疫及GCRV攻毒后,GCRV 096(Ⅰ型)免疫组vp7基因的表达水平降低(P <0.05),而GCRV GD108(Ⅱ型)免疫组vp7基因的表达无显著差异,表明GCRV 096 VP7蛋白对GCRV096具有良好的免疫效果,但对GCRVGD108无明显的免疫效果。成功构建GCRV096vp7基因真核表达载体pEGFP-N3-VP7,Western blot分析结果表明,GCRV 096 VP7蛋白在草鱼肾(CIK)细胞中成功表达。

放下手机

智能手机对高中生来说是一件工具,可以帮他们获得更多的学习资源和休闲娱乐资源,同时也会让他们把时间过度消耗在游戏、影视、购物和网络社交等事情上,严重影响学习生活和现实人际交往,对高中生的终生发展会产生消极影响.因此,学校为杜绝手机的消极影响,禁止学生带手机进校园.

替罗非班治疗超时间窗后循环脑梗死患者临床疗效及安全性研究

目的 探讨替罗非班治疗超时间窗后循环脑梗死(PCCI)患者临床疗效及安全性。方法 选取2018年4月—2020年4月医院收治的超时间窗PCCI患者142例,以随机数表法均分为研究组、对照组,各71例。对照组给予强化抗血小板聚集、降脂药物治疗,研究组在对照组的基础上另给予替罗非班治疗,两组治疗后均随访6个月。比较两组神经功能及临床疗效,统计两组患者血液流变学及凝血功能指标变化及情况,记录治疗期间药物安全性及近期预后状况。结果 两组治疗后的美国国立卫生院卒中量表(NIHSS)评分均低于治疗前(P<0.05),研究组治疗后的NIHSS评分低于对照组(P<0.05)。研究组总有效率高于对照组(P<0.05)。两组治疗后的血浆黏度、全血高切黏度、全血低切黏度均低于治疗前(P<0.05),且研究组治疗后的上述指标均低于对照组(P<0.05)。两组治疗前后的血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血酶时间(APTT)、血小板计数(PLT)水平对比差异均无统计学意义(P>0.05)。两组总不良反应发生率对比差异无统计学意义(P>0.05)。研究组近期预后良好率高于对照组(P<0.05)。结论 替罗非班治疗超时间窗PCCI患者可明显减轻神经功能损伤,增强治疗效果,改善血液流变学状况,稳定凝血功能,改善近期预后,且安全性良好。

商业银行提升线上渠道经营能力对策探究

随着数字化转型步伐的不断推进,以支付宝和微信支付为代表的线上支付平台市场占有率不断提升,率市场化的放开挤压了银行存贷差的利率空间,让商业银行急需打破传统,谋求新的线上渠道赢利模式,以适应新形式的变化。本文主要通过对商业银行线上渠道发展带来的机遇、面临的挑战进行全面分析,进而探究商业银行线上渠道发展对策,进一步为商业银行线上渠道业务发展提供方法指引。

第三方支付对商业银行中间业务的影响及对策探究

近年来,第三方支付行业势如破竹迅速崛起,逐渐成为时代的新名片,与此同时,商业银行的中间业务面临着巨大挑战。本文结合第三方支付的发展现状,分析商业银行中间业务在第三方支付平台的冲击下带来的影响,并据此进一步进行对策探究,希望以此推动商业银行和第三方支付的优势互补,实现双方的共同发展。

新形势下商业银行员工行为管理对策探究

员工是商业银行生存与发展的基石,员工行为包括员工的行为规范、心理状态和职业操守等多个方面,随着经济形势的发展和内外部环境的不断变化,商业银行员工行为均在不断发生变化,特别是当前外部环境复杂多变,各种内部管理、员工自身、外部环境及相互之间的因素交织在一起,员工行为方面老问题屡禁不止、新问题又层出不穷,当前商业银行员工行为管理普遍面临重重压力,抓好员工行为管理,加强合规文化建设,是商业银行当前管理工作的重中之重。本文以商业银行员工行为管理为切入点,分析了当前形势下商业银行员工行为管理的现状、问题,并对下一步员工行为管理对策进行胃探究。

基于核心素养的高中英语阅读教学分析

在高中英语阅读教学中,实施以核心素养为基础 的阅读教学分析,能够为提高英语阅读教学效果,促进学生的 英语核心素养提升带来支持。笔者结合实践教学经验,在文中 从英语语言能力、学习能力、思维品质和文化意识四个方面对 高中英语阅读教学工作的开展予以探讨。

TBL模式下案例分析法在神经内科护理教学中的应用

探究神经内科护理教学中采用TBL模式下案例分析法的应用效果。方法 依据随机数字表法对本院2022年1月-2022年11月接收的60名神经内科实习护生分组(各组30例)探究,对照组采用传统教学模式,观察组采用TBL模式下案例分析法,观察两组考核结果评分、自我学习能力评分、综合能力评分、教学质量评分、满意度。结果 两组对比,观察组考核结果评分更高,数据差异明显(P<0.05);两组对比,观察组自我学习能力评分更高,数据差异明显(P<0.05);两组对比,观察组综合能力评分更高,数据差异明显(P<0.05);两组对比,观察组教学质量评分更高,数据差异明显(P<0.05);两组对比,观察组满意度更高,数据差异明显(P<0.05)。结论 神经内科护理教学中,TBL模式下案例分析法可提高实习护生护理综合能力,同时有助于教学质量的提高,可推广。

思维导图在信息技术中考复习中的应用

自2010年宁夏将信息技术纳入中考以来,信息技术学科备受教师、学生和家长的关注。但分析近年考试成绩可知,信息技术考试选择题和判断题一直是学生得分的薄弱环节。那么,在实际教学中,教师如何让复习课变得生动有效?思维导图作为教学工具可引导学生归纳梳理知识点,分类强化学习,收到较好的学习效果。

医护一体化护理应用于超急性期脑梗死患者静脉溶栓中的效果

探讨对超急性期脑梗死行静脉溶栓治疗的患者实施医护一体化护理的临床效果。方法:纳入45例超急性期脑梗死患者为研究对象,均行静脉溶栓治疗,研究开展时间在2021年1月至6月,根据入院时间的先后顺序,将2021年1月至3月收治的22例患者纳入对照组,实施常规护理;2021年4月至6月收治的23例患者纳入实验组,实施医护一体化护理,比较两组护理效果。结果:实验组治疗前卒中量表(NIHSS)评分、Barthel指数(BI)评分、进食评估问卷调查工具-10 (EAT-10)和血栓评分与对照组相比无明显区别(P>0.05);实验组治疗后NIHSS评分、EAT-10评分和血栓风险评分均低于对照组,BI评分高于对照组(P<0.05)。结论:医护一体化护理可以减轻行静脉溶栓治疗的超急性期脑梗死患者的神经损伤程度,在预防血栓形成的同时进一步提高患者的自理能力,临床护理效果显著。

安全管理模式在神经内科介入治疗患者管理中的应用研究

分析安全管理模式在神经内科介入治疗患者管理中的应用效果。方法 研究了我院收治的50例神经内科介入治疗患者,分别实施常规护理管理以及安全管理的模式,对两组护理的效果进行研究,比较两组患者的护理疗效。结果 观察组患者的平均住院时间更短,患者的生活质量及对安全知识的掌握程度更高,患者的护理质量的评判指标优于对照组,同时观察组患者的总体满意度得到大大的提升,满意度为96%,明显优于对照组采用常规护理的72%。结论 在神经内科介入治疗患者中,采取安全管理的模式,相较于普通的常规护理,能够进一步分析在患者住院期间可能出现的诸多不安全的因素,对患者进行安全管理,在神经内科中开展病情变化的评估,及时的对患者的家属开展健康教育的内容,使患者及其家属能够了解在治疗过程中存在的各种风险隐患,进一步提高医护人员的职业水平和能力,是互换之间的关系,得到广泛的改善,也具有十分重要的意义,在医院方面意义十分重大。