高通量测序分析高血压伴或不伴牙周炎大鼠牙龈mRNA差异

目的基于高通量测序(next generation sequencing,NGS)技术分析高血压大鼠伴或不伴牙周炎状态下牙龈组织中的差异mRNA,旨在为高血压伴牙周炎的防治提供实验基础。方法获得动物实验伦理委员会批准,通过给予含8%(w/w)NaCl的高盐饲料建立高血压大鼠模型,使用3-0的无菌丝线结扎大鼠下颌第一磨牙建立牙周炎大鼠模型,分为正常对照组(N组)、高血压组(H组)和高血压伴牙周炎组(PH组),测量血压、心率、牙槽骨吸收量和牙槽骨中破骨细胞数量;取3组牙龈组织进行NGS,分析组间差异基因表达;H组和PH组间所有差异基因行基因功能(gene ontology,GO)富集分析,行京都基因与基因百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析,行蛋白相互作用网络(protein-protein interaction,PPI)筛选关键基因;免疫组织化学验证关键通路中的关键基因在各组的表达,酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)分析关键基因在各组全身循环中的表达。结果实验终点(第11周)时,H组和PH组的血压均高于N组(P<0.001),但PH组的血压与H组比较无统计学意义,3组心率无统计学差异。Micro-CT显示PH组下颌第一磨牙的釉牙骨质界(cemento-enamel junction,CEJ)到牙槽骨嵴顶(alveolar bone crest,ABC)距离较N组和H组增加,牙槽骨中破骨细胞数量多于N组和H组(均P<0.0167)。3组的共同差异基因为0个,H组和PH组牙龈组织共235个差异基因,相较于H组,在PH组有P-选择素(P-selectin,SELP)、角蛋白16(keratin 16,KRT16)和S100钙结合蛋白A9(S100 calcium binding protein A9,S100A9)等137个上调基因,以及FK506结合蛋白5(FK506 binding protein 5,FKBP5)、介体复合体亚基22(mediator complex subunit 22,MED22)和含锌指和BTB域16(zinc finger and BTB domain containing 16,ZBTB16)等98个下调基因。H组和PH组差异基因的GO分析结果提示,主要富集的生物学过程(biological processes,BP)为白细胞迁移,主要的细胞成分(cellular component,CC)为胶原三聚体复合物,主要的分子功能(molecular functions,MF)为细胞外基质结构的构建;H组和PH组差异基因的KEGG信号通路主要富集于细胞因子之间受体相互作用、白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)信号通路中。通过PPI分析筛选出4个作用于高血压状态下牙周炎的关键基因,包括白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、Ⅰ型胶原α1(collagen type I alpha 1,COL1α1)、趋化因子配体1(chemokine ligand 1,CXCL1)。与N组和H组比较,IL-1β和TNF-α在PH组牙龈组织及全身血清中的表达均上调(P<0.0167)。结论高血压伴牙周炎或不伴牙周炎时的差异mRNA为IL-1β和MMP-9以及差异信号通路为IL-17和TNF-α信号通路,为今后进一步研究高血压伴牙周炎的分子调控机制提供了实验基础。

广西地区64例人免疫缺陷病毒感染及艾滋病感染患者口腔病损的临床观察

目的了解广西人免疫缺陷病毒感染及艾滋病感染(HIV/AIDS)患者口腔病损状况,为我国HIV/AIDS人群口腔疾病的防治提供依据.方法以经广西区疾病控制中心确诊为HIV/AIDS患者64例为调查对象,由专业人员采集病史,进行口腔专科检查,并将详细记录的结果与世界卫生组织艾滋病感染口腔表征协作中心制定的艾滋病口腔表征分类及诊断标准相比较.结果64名HIV/AIDS患者,年龄范围为5月～64岁,平均年龄36.1岁,其中男53人,女11人.48名有口腔主诉,以口干、疼痛、吞咽困难为主;口腔表现为口腔念珠菌病39例、口干症20例、口腔溃疡11例、艾滋病相关的牙周病7例、单纯疱疹病毒感染口炎6例、带状疱疹3例、口腔毛状白斑2例、卡波济肉瘤和淋巴节炎各1例.结论口腔念珠菌病是HIV/AIDS患者最常见的口腔表征,多数患者伴有口干、唾液分泌减少.口腔溃疡患病率与正常群体相比没有提高,但是溃疡严重程度增加.提示HIV/AIDS患者常伴有口腔表征,并且部分口腔表征出现较早.

TBL教学在牙周黏膜临床教学中的应用及效果评估

目的:以团队为基础的学习(Team-based learning,TBL)是目前国外推荐应用于临床前期或临床课程教学的主要教学方法之一。本文就TBL教学在牙周黏膜病学理论学习末期的病例教学中的应用进行探索和总结。方法:2006级口腔本科72名学生纳入本研究,并按照前期考试成绩分为8个团队。利用TBL程序设计教学,具体流程为先行个别测试,,再将学生分为8个团队进行以团队为基础的学习讨论后再行测试,并汇报总结。分别统计TBL教学前后的成绩并进行分析。同时,设计问卷调查学生对TBL教学的看法和满意度等并进行分析。结果:个别测试平均分6.03分,团队学习后测试平均分9.24分(满分10分),分值较前提高32.1%,成绩差别有统计学意义(P<0.01)。问卷调查表明:85%以上的同学认为TBL教学有助于提高其诊断技术和团队合作素质等,有必要在今后的课程中继续使用。98.5%的同学对本次课程表示满意。结论:TBL教学应用于牙周黏膜病教学,有助于提高教学效果,培养学生临床思维和加强团队协作。

2型糖尿病患者罹患口腔假丝酵母菌感染危险因素的Logistic回归分析

目的通过多因素分析,筛选出与2型糖尿病患者伴发口腔假丝酵母菌感染密切相关的指标,建立预测方程,分析2型糖尿病患者口腔假丝酵母菌感染的危险因素。方法选择140例2型糖尿病患者,记录性别,年龄,病程,吸烟史,空腹血糖值及系统并发症(包括肾病、神经病变和高血压);并对患者进行口腔检查,记录口腔卫生状况、口腔黏膜情况及义齿修复情况。运用标准含漱浓缩法检测患者口腔假丝酵母菌的检出率和负载量,并采用CHROMagar显色培养基进行初步生物分型。应用Logistic回归分析方法研究2型糖尿病患者口腔假丝酵母菌感染与上述11项临床指标之间的关系。结果140例2型糖尿病患者中有69例检出口腔假丝酵母菌,检出率为49.3%,检出的假丝酵母菌菌种以白假丝酵母菌为主。以上述11项临床指标作为自变量,口腔假丝酵母菌感染发生与否作为因变量,进行Logistic回归分析,建立Logistic回归方程,方程的总判断率为82.1%。经回归分析,空腹血糖值、口腔卫生状况和黏膜干燥是2型糖尿病患者伴发口腔假丝酵母菌感染的危险因素。结论空腹血糖值、口腔卫生状况、黏膜干燥是2型糖尿病患者伴发口腔假丝酵母菌感染的危险因素;通过回归方程得出的概率值可为2型糖尿病患者口腔假丝酵母菌感染的预测及口腔护理保健提供参考。

口腔癌前病变、口腔鳞癌3p、9p染色体微卫星位点杂合性缺失研究

目的 探讨 3p、9p微卫星分析在口腔粘膜癌前病变中的改变及应用价值。 方法 应用PCR为基础的微卫星分析技术 ,选取人正常口腔粘膜 (8例 )、口腔白斑 (31例 )及口腔鳞状细胞癌 (2 2例 )标本 ,分析分别位于3p(D3S6 5 9)、9p(D9S16 1、D9S15 7、D9S171)上四位点微卫星的改变。 结果 在正常口腔粘膜 (NOM )及单纯上皮增生组均未见等位基因的改变。在口腔鳞癌 (OSCC)组中 12 / 2 2 (5 4.5 % )存在至少一个位点的杂合性缺失 (LOH) ,异常增生组中 6 / 2 3(2 5 .1% )存在至少一个位点的LOH。还观察到这几个位点均存在一定频率的微卫星不稳定性(MI)。OSCC组 9/ 2 2观察到MI,达 40 .9% ,异常增生组中达 2 1.9%。结论 3p、9p上可能存在与口腔鳞癌相关的抑癌基因。 3p、9p上这四位点的改变可能系口腔鳞癌发生的早期分子事件。本研究提示该四位点微卫星不稳定性在一部分口腔癌发生中起一定作用。

增殖细胞核抗原及Ki-67在口腔白斑和鳞癌中的表达及其相关性

目的 :比较研究增殖细胞核抗原 (PCNA)和Ki 67在口腔癌前病变中的表达。方法 :选取人正常口腔粘膜 (NOM ) (8例 )、口腔白斑 (LK) (3 1例 )及口腔鳞状细胞癌 (OSCC) (2 2例 )标本 ,同时用LSAB法染色PCNA和Ki 67表达 ,分析增殖活性。用SPSS 9.0统计软件分析各组间各指标的差异、PCNA指数和Ki 67指数的相关性。结果 :在NOM上皮及单纯增生上皮内 ,PCNA阳性细胞散在分布于上皮基底层细胞 ,统计学分析二者无差异。在异常增生上皮各组中 ,随着增生程度的病理分级的增加 ,PCNA阳性细胞数增加 ,分布从基底层向表层增加。且不同增生程度各组间统计学上有显著性差异。在高分化鳞癌中 ,主要分布在癌巢周围及肿瘤浸润前沿区域。Ki 67与PCNA分布特征类似 ,但其指数普遍低于PCNA指数。Pearson相关系数r =0 .79,二者呈线性正相关。结论 :PCNA及Ki 67与口腔粘膜增殖异常有关 ,其增殖指数与增生程度平行 ,且二者本身呈线性相关。

口腔扁平苔藓患者唾液中亚硝酸根的测定及其意义

目的 :探讨口腔扁平苔藓 (OLP)患者唾液中一氧化氮 (NO)水平的变化。方法 :采用示波极谱法测定了 6 0例OLP患者 (糜烂型 30例、光滑型 30例 )唾液中NO2 -浓度 ,按性别及年龄 2∶1配对 ,同期收集 30例健康志愿者唾液为对照组。并以浓度Χ唾液流量计算唾液NO2 -产出。结果 :所得数据表明 :糜烂型OLP组唾液NO2 -浓度 2 2 .6 9± 15 .0 3μmol/L ,显著高于健康对照组 (10 .74± 7.98μmol/L) (P <0 .0 5 )与光滑型OLP组 (11.5 5± 6 .5 2 μmol/L) ,P <0 .0 0 2。结论 :本研究中发现OLP患者唾液NO2 -水平上调 ,这种差异主要在于糜烂型OLP患者。推论NO可能在OLP发病及发展中起一定作用。

LL37多肽及其mRNA在口腔扁平苔藓病损表达研究

目的:探讨LL37在口腔扁平苔藓(oral lichen planus,OLP)病损中的表达及在OLP疾病机制中的作用。方法:采用免疫组织化学技术(IHC)和逆转录聚合酶链式技术(RT-PCR)检测25例OLP患者的病变黏膜组织和7例健康对照黏膜组织中LL37蛋白及其mRNA的表达。结果:IHC结果显示,LL37在所有样本中均呈阳性胞质染色,主要表达于棘层和淋巴细胞。25例OLP组口腔病损黏膜均呈强阳性染色,较之健康口腔黏膜组中LL37为弱阳性染色,差异具有显著性(P<0.05);RT-PCR检测结果显示,所有样本均检测出LL37的cDNA电泳条带,健康口腔黏膜组中仅呈微弱表达,而OLP组病损黏膜上皮LL37表达明显增强。结论:LL37可能因炎性诱导呈上调表达而参与OLP的发生发展过程。

口腔扁平苔藓癌前状态及癌变研究

口腔扁平苔藓(OLP)癌前性质引起广泛关注,WHO已将其列入癌前状态。本文就OLP癌前状态及癌变相关研究及可能的分子病理机制、治疗等作一简要综述。

口腔颌面部深部真菌感染

口腔颌面部深部真菌感染主要有组织胞浆菌病、芽生菌病、副球孢子菌病、球孢子菌病、曲霉病、隐球菌病、毛霉菌病。有的是地方性,部分是机会性感染。它们往往是免疫受损的早期表征。目前,国内外报道尚不多见,部分原因在于临床医生对其认识不够,但是其早期正确诊断治疗对患者全身情况及预后具有特别重要的意义。本文就这些深部真菌感染的微生物学、主要临床表现及治疗作一简要综述。

一氧化氮在口腔疾病中的研究现状与展望

一氧化氮（ＮＯ）作为一种空气污染物质闻名已久，近十年来它在生物学和病理生理学方面的作用使它受到广大学者的关注。目前已知多种组织细胞可以产生ＮＯ［１，２］，包括中枢及外周神经系统、皮肤［３］、粘膜［４］等组织细胞。ＮＯ在口腔疾病中的作用的研究尚集中在动...

根向复位瓣在附着龈宽度不足患牙的牙冠延长术中的应用

目的:评价根向复位瓣在附着龈宽度不足的患牙牙冠延长术中的应用效果。方法:纳入需行牙冠延长术但附着龈宽度不足的患牙17颗,术中采用根向复位瓣法对牙龈瓣进行复位,记录手术前和术后6个月龈缘到牙体断端的距离、附着龈的宽度等指标并进行比较和评价。结果:术前17颗患牙牙体缺损边缘均位于龈下,术后6个月16例(94.11%)缺损边缘均暴露在龈缘冠方,龈缘根向位移距离(3.88±0.49)mm;17颗患牙附着龈宽度术前为(2.35±0.61)mm,术后6个月为(2.65±0.49)mm(P>0.05)。结论:牙冠延长术可以有效暴露牙体缺损边缘,为牙体缺损创造修复条件,避免切除过多角化龈导致附着龈宽度变窄。

牙周基础治疗前后慢性牙周炎患者龈沟液中β-防御素2及白细胞介素-1β表达水平的变化研究

目的:探讨慢性牙周炎患者牙周基础治疗前、后龈沟液(GCF)中β-防御素2(HBD-2)及其与白细胞介素-1β(IL-1β)表达水平的关系。方法:选择慢性牙周炎患者10例为慢性牙周炎组,按纳入标准选取20位点分别在牙周基础治疗前及治疗后1个月分别收集GCF并记录临床指标。以牙周健康者12例的24位点GCF为健康对照组。GCF采集后记录采集点出血指数(BI)和探诊深度(PD)。采用酶联免疫吸附法测定GCF中HBD-2及IL-1β含量。结果:健康对照组GCF中HBD-2表达水平高于慢性牙周炎组(P<0.05);慢性牙周炎组牙周基础治疗前、后HBD-2表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。牙周基础治疗前,慢性牙周炎组IL-1β的表达水平高于健康对照组(P<0.001),慢性牙周炎组牙周基础治疗后IL-1β表达水平低于治疗前。牙周基础治疗后,BI、PD均较治疗前小(P<0.001)。与HBD-2、IL-1β表达水平无关(P>0.05)。结论:慢性牙周炎患者牙周基础治疗后GCF中IL-1β的表达水平较治疗前低,GCF中HBD-2在牙周基础治疗前、后表达水平无差异;与GCF中的HBD-2、IL-1β表达水平无关。

牙周炎患者基础治疗前后龈沟液中褪黑素、IL-1β水平的变化及临床意义

目的:检测分析牙周炎患者龈沟液中褪黑素、IL-1β水平的变化与牙周临床指标的关系。方法:用ELSIA法检测牙周炎患者牙周基础治疗前及治疗6周后龈沟液中褪黑素、IL-1β水平,分析褪黑素、IL-1β与探诊深度(PD)、探诊出血(BOP)、附着丧失(CAL)的相关性。结果:牙周基础治疗前,牙周炎患者龈沟液中褪黑素、IL-1β水平均高于治疗后(P<0.05)。治疗前褪黑素水平与PD、BOP均呈正相关(r=0.465,r=0.736),IL-1β水平与PD、BOP也均呈正相关(r=0.350,r=0.541),褪黑素水平与IL-1β水平呈正相关(r=0.442);治疗后褪黑素、IL-1β水平与各项牙周指标无相关性(P>0.05)。结论:牙周炎患者龈沟液中褪黑素水平与牙周炎症严重程度具有相关性。牙周治疗对龈沟液中褪黑素表达水平有明显影响。

402名南宁民办幼儿园学龄前儿童龋病状况调查

目的了解南宁市民办幼儿园3～7岁学龄前儿童乳牙龋患病及治疗情况。方法随机抽取南宁市3所民办幼儿园402名3～7岁儿童为对象,其中男214名,女188名,按照第3次全国口腔健康流行病学调查诊断标准进行口腔检查后,提取龋病情况资料,包括患龋率、龋均、龋面均、龋坏充填率等进行统计学分析。结果受检儿童中,261例发现明确龋坏,总患龋率为64.93%,龋均3.56,龋面均6.11,龋坏充填率0.84%。其中3～、4～、5～、6～7岁年龄段人数分别为111、133、108、50例,患龋人数(率)分别为53(47.75%)、89(66.92%)、80(74.07%)和39(78.00%);龋均分别为2.23、3.17、4.86和4.7。统计分析表明患龋率随年龄增大而增高,差别具有统计学意义(χ2=22.34,P<0.001)。结论南宁市民办幼儿园3～7岁儿童乳牙患龋状况严峻,患龋率高,龋坏充填率低。

自酸蚀和全酸蚀树脂粘结剂对石英纤维桩固位力影响的比较研究

目的:比较自酸蚀和全酸蚀树脂粘结剂对石英纤维粘结后粘结强度的差异,为临床合理选择粘结剂提供实验依据。方法:选用正常人离体上颌中切牙16颗,经体外完善根管预备并完成根管充填后,于邻面釉牙骨质界水平截断并预备桩道,然后分别包埋在自凝塑料柱内固定。16颗离体牙被随机分成两组,每组各8例,分别用自酸蚀和全酸蚀树脂粘结剂粘结石英纤维桩于牙根桩道内,用力学试验机以1mm/min速度牵拉纤维桩,记录纤维桩与牙根脱离时的最大载荷并进行t检验统计分析。结果:自酸蚀树脂粘结剂石英纤维桩组的粘结强度(246.48N±103.58N)高于全酸蚀粘结剂石英纤维桩组(30.46N±5.41N),完全随机设计资料的t检验显示P<0.01,两者差异有显著性。结论:自酸蚀树脂粘结剂石英纤维桩的粘结强度明显优于全酸蚀石英纤维桩粘结剂。

人类β-防御素2在口腔扁平苔藓病损中表达的研究

目的探讨口腔扁平苔藓(OLP)患者病损中的人类β-防御素2(hBD-2)的表达,以分析hBD-2在OLP发病机制与上皮抗感染免疫中的作用。方法采用免疫组织化学技术(IHC)和反转录聚合酶链式技术(RT-PCR),检测25例OLP病损组织、7例对照组织中hBD-2多肽的表达,并进行分析。结果 hBD-2在所有样本中均出现了阳性胞浆染色,健康口腔黏膜组中hBD-2蛋白为弱阳性染色,与呈强阳性染色的OLP组差异有统计学意义(P<0.05);RT-PCR检测结果显示,所有样本均出现了hBD-2的cDNA电泳条带,在健康口腔黏膜组中呈微弱表达,在OLP组织中表达明显增强,差异有统计学意义(P<0.05)。结论健康口腔黏膜组织也有少量hBD-2表达,提示其作为机体先天性免疫的组成部分,在维持口腔黏膜健康上具有一定作用。在OLP的病理过程中hBD-2可能呈炎性诱导上调表达而参与了OLP的免疫发病过程。

制霉菌素在义齿软衬材料中抗菌性研究

目的探讨在软衬材料中加入抗真菌药物制霉菌素后对材料抗菌性的影响。方法实验选用了梅卡硅橡胶室温固化软衬材料、COESOFT软衬材料、日进软衬材料、上海软衬垫等四种材料,抗真菌药物制霉菌素分别按0%,3%,6%,9%(W/W)药物/试件比例加入各种材料中,分别制成标准试件。通过培养方法监测对白色念珠菌标准株的抗菌性及时相关系。结果在4种材料中,加入制霉菌素试件对念珠菌的抑制性能较之同种未加入制霉菌素者后均增加,具有统计学差异。不同材料中加入药物后,其抗菌性有一定的时间差异,但都在第6～8天后抗菌性明显减低。6%W/W药物材料比例试件测试结果与9%差异无统计学意义,与无药物材料和3%比较,抗菌效果增加。结论无论何种材料,药物浓度均与念珠菌生长抑制作用相关,而随着时间的推移,高浓度药物的材料对念珠菌生长抑制作用衰退较慢,但一定时间后,药物作用无明显差异,6%W/W药物材料比例即可达到有效抑菌作用。在软衬材料中加入制霉菌素可作为暂时性软衬材料短期使用时预防义齿性口炎的积极措施。