断尾对兰州大尾羊脂肪细胞结构和脂肪代谢相关基因表达的影响

旨在观察断尾对兰州大尾羊尾部脂肪细胞数量、结构以及皮下脂肪、大网膜脂肪、尾部脂肪、肾周脂肪和背最长肌脂肪代谢相关基因表达的影响,明确断尾引起脂肪沉积重新分布后,脂肪细胞和各脂肪沉积部位脂肪代谢相关基因表达的变化,为阐明断尾对脂尾型绵羊脂肪代谢调控的分子机理提供参考。选择5日龄[(3.79±0.12)kg]单羔兰州大尾羊羔羊18只,随机分为对照组(C组)和试验组(T组),每组9只羔羊,试验组羔羊采用橡皮圈结扎法断尾。试验羊2月龄断奶后饲喂配合日粮,两组羊日粮相同。试验期240 d。试验结束后,采集样品进行分析。1)相对于背最长肌肌内脂肪和内脏脂肪,断尾对尾部脂肪、皮下脂肪基因表达影响较大,断尾组尾部脂肪SCD、LEP、PLIN1的mRNA表达量显著升高,LPL、FAS、PEPCK的表达量显著降低(P<0.05);皮下脂肪中SCD显著升高,LEP、ADPN、FABP4、PLIN1显著降低(P<0.05);肾周脂肪中LPL、ADPN、PEPCK、UCP1和大网膜脂肪中的PEPCK显著降低(P<0.05);背最长肌中SCD显著升高,PEPCK、PLIN1显著降低(P<0.05)。2)断尾组背最长肌的肌内脂肪含量(6.96%和6.05%)、脂滴面积比(4.28%和3.04%)显著增加(P<0.05),脂滴面积比增加了约1%,而尾部脂肪中脂滴面积比例降低了约10%(87.43%和97.58%),尾部脂肪细胞直径显著降低(P<0.05);3)兰州大尾羊尾部脂肪细胞被融合的大脂滴填充,细胞核、细胞质等被大脂滴挤到细胞边缘,细胞边缘的细胞质薄层中含有线粒体、内质网、高尔基体、自噬小体等细胞器和小脂滴,断尾组尾部脂肪细胞质中单个脂滴体积较小,周围糖原颗粒较多。综上所述,长脂尾型绵羊兰州大尾羊早期断尾后,背最长肌的脂滴面积比增加,尾部脂肪中脂滴面积比降低,尾部脂肪细胞直径减小,各部位脂肪代谢相关基因表达也发生变化,断尾后脂肪沉积分布改变可能是在SCD、PLIN1、LPL、FAS、PEPCK等一系列脂肪代谢相关基因的调控下实现的。

藏绵羊PFKM基因克隆、生物信息学及组织表达分析

本研究旨在分析藏绵羊PFKM的序列特征、生物信息学及其在不同发育阶段(1日龄、3月龄、1岁龄和3岁龄)肌肉组织中的表达模式。以成年(3岁龄)藏绵羊的背最长肌cDNA为模板,克隆PFKM基因的编码区序列,并进行生物信息学分析。利用实时荧光定量(RT-qPCR)技术检测PFKM基因在背最长肌、心肌、冈上肌、肱二头肌、肺脏、肝脏、脾脏和肾脏中的表达情况,并检测不同发育阶段上述组织中PFKM mRNA表达水平的变化。同时,用Western Blot检测不同年龄阶段藏绵羊背最长肌中PFKM蛋白的表达水平。结果表明,藏绵羊PFKM基因的CDS区全长2 556 bp,共编码851个氨基酸,与绵羊参考序列相比存在19个突变位点,与绵羊(98.82%)和山羊(98.59%)具有较近的亲缘关系;预测PFKM蛋白为亲水性蛋白,不存在信号肽,主要分布在细胞质中,蛋白的二级结构以α-螺旋为主,PFKM蛋白与10个糖酵解相关蛋白质分子间存在潜在的相互作用;RT-qPCR结果显示,随着年龄的增加,PFKM mRNA在藏绵羊各组织中基本呈现先上升后下降(1日龄<3月龄<1岁龄>3岁龄)的表达趋势,背最长肌中PFKM蛋白的表达也先上调后下调。本研究获得了藏绵羊PFKM基因完整的CDS区,发现其在物种间的保守性较高,并在藏绵羊肌肉生长发育过程中发挥重要的作用。

环状RNA在雌性家畜生殖过程中的表达及作用研究进展

环状RNA(circular RNA,circRNA)是由线性前体mRNA通过反向剪接产生的一种单链共价闭合的环状长链非编码RNA分子,参与调节真核生物的基因表达。随着高通量测序技术的发展,越来越多的circRNA在雌性哺乳动物生殖系统中被发现,但其在动物生殖发育过程中的功能研究尚处于起步阶段。本文就circRNA的形成、特点、功能及其在雌性家畜生殖过程中的作用进行综述,以期为深入探究circRNA调控雌性家畜生殖发育的机制奠定理论基础。

用Rusitec系统研究两种粒度日粮对绵羊瘤胃发酵特性的影响

试验旨在应用Rusitec系统研究不同粒度日粮对绵羊瘤胃发酵特性的影响。试验分为两个处理组,日粮颗粒分别为5和0.45mm,每个处理4个重复,适应期10d,采样期2d,测定不同时间发酵液总产气量、甲烷产量及发酵参数。结果显示,5mm颗粒组的总产气量极显著高于0.45mm颗粒组(P<0.01),甲烷产量不受粒度的影响(P>0.05);5mm颗粒组投料后6h的pH、6和9h的乙酸、6h的异丁酸、12h的乙酸/丙酸、0和12h的总挥发性脂肪酸、6和9h的总氮均显著或极显著大于0.45mm颗粒组(P<0.05;P<0.01),而5mm颗粒组12h的丙酸及3、6、9、12h戊酸则显著或极显著小于0.45mm组(P<0.05;P<0.01),不同粒度对其余指标没有显著影响(P>0.05)。由此可知,人工瘤胃试验中日粮的不同粒度可影响发酵特性,较大颗粒有较高的总产气量、乙酸、乙酸/丙酸、总挥发性脂肪酸和总氮含量。

马铃薯茎叶和甜高粱混合青贮的效果研究

试验旨在研究不同比例的马铃薯茎叶和甜高粱混合青贮的效果。试验共分为7个处理,分别为马铃薯茎叶单独青贮、马铃薯茎叶和甜高粱混合青贮(50%+50%、40%+60%、30%+70%、20%+80%和10%+90%)及甜高粱单独青贮,每个处理4个重复。真空袋青贮,室温避光贮存60 d。结果表明:与马铃薯茎叶单独青贮相比,随着甜高粱混合比例的增加,青贮料的青贮品质明显提高,感官评分、乳酸含量持续升高(P<0.05),p H值、氨氮、乙酸和丁酸含量持续降低(P<0.05);在营养成分上,混合青贮料的干物质、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维显著提高(P<0.05),粗蛋白质含量显著降低(P<0.05)。综合考虑,10%马铃薯茎叶和90%甜高粱混合青贮可获得品质良好的青贮饲料。

马铃薯茎叶和玉米秸混合青贮效果的研究

为研究不同比例的马铃薯茎叶和玉米秸混合青贮的效果,试验共分为7个处理,分别为马铃薯茎叶单独青贮、马铃薯茎叶和玉米秸混合青贮(50%+50%、40%+60%、30%+70%、20%+80%、10%+90%)及玉米秸单独青贮,每个处理4个重复。真空袋青贮,室温青贮55 d。结果表明:与马铃薯茎叶单独青贮相比,随着玉米秸混合比例的提高,青贮料的青贮品质明显提高,其中感官评分、乳酸含量持续升高(P<0.05),p H、氨氮、乙酸、丁酸含量持续降低(P<0.05)。在营养成分上,混合青贮料的干物质、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量提高,粗蛋白质含量降低。综合考虑,20%马铃薯茎叶和80%玉米秸混合青贮可获得与玉米秸单独青贮相似品质的青贮料。

玉米和米糠对两个马铃薯品种茎叶青贮品质的影响

本试验采用2×6试验设计,研究米糠和玉米(Zea mays)对马铃薯(Solanum tuberosum)茎叶青贮品质的影响。两个马铃薯品种是庄薯3号和青薯169号,米糠和玉米的6个混合比例(鲜重)分别是马铃薯茎叶、85%马铃薯茎叶+15%米糠(单加米糠)、81%马铃薯茎叶+15%米糠+4%玉米(4%玉米)、77%马铃薯茎叶+15%米糠+8%玉米(8%玉米)、73%马铃薯茎叶+15%米糠+12%玉米(12%玉米)、69%马铃薯茎叶+15%米糠+16%玉米(16%玉米)。结果表明,与青薯169号相比,庄薯3号有较低的干物质(DM)、中性洗涤纤维(NDF)和粗灰分(Ash),有较高的pH、缓冲能值(BC)、粗蛋白(CP)和钙(Ca)含量。青薯169号青贮料的氨氮∶总氮(NH3-N∶TN)、乳酸(LA)、丁酸(BA)、LA∶乙酸(AA)、CP、DM和NDF含量显著低于庄薯3号青贮料(P<0.05)。马铃薯茎叶单独青贮品质最差,与其相比,仅添加米糠可以提高青贮料的LA、LA∶AA、DM和NDF,降低pH、NH3-N∶TN、AA、BA和CP(P<0.05)。在此基础上,添加玉米可进一步提高LA、LA∶AA、DM和降低pH、AA(P<0.05)。在pH、NH3-N∶TN、LA、AA、BA和CP上,玉米添加量为8%、12%和16%的处理组间无显著差异(P>0.05)。在NH3-N∶TN、LA、BA、LA∶AA和DM上,马铃薯品种和米糠、玉米的混合比例间存在互作(P<0.05)。总之,马铃薯茎叶靑贮料的发酵品质随品种而变化,青薯169号马铃薯茎叶具有较好的青贮特性,并且添加15%米糠和8%玉米即可获得高品质的青贮饲料。

基于瘤胃模拟技术的马铃薯茎叶混合青贮料体外瘤胃发酵特性研究

本试验采用瘤胃模拟技术(Rusitec)研究了马铃薯茎叶混合青贮料饲粮体外瘤胃发酵特性。采用单因素完全随机设计,将Rusitec系统的8个发酵罐分为2组,分别采用玉米秸青贮料、马铃薯茎叶混合青贮料(马铃薯茎叶与玉米秸按40∶60混合青贮)配制发酵绵羊饲粮,2组分别以此为发酵底物,每组4个重复,每个重复1个发酵罐。试验包括8 d的预试期和2 d的采样期。结果表明:马铃薯茎叶混合青贮料组的产气量,全期发酵液总氮、氨氮(除了换料后3 h)和微生物氮含量,换料后6、9 h的发酵液丙酸含量均显著高于玉米秸青贮料组(P<0.05),甲烷产量、换料后3 h的发酵液p H、换料后9 h的发酵液乙酸含量、换料后6和9 h的发酵液乙酸/丙酸显著低于玉米秸青贮料组(P<0.05)。2组的营养物质降解率和其他瘤胃发酵指标无显著差异(P>0.05)。由此可以看出,马铃薯茎叶混合青贮料对绵羊瘤胃体外发酵没有产生不良影响,且有利于减少瘤胃甲烷对环境的污染,同时还促进了反刍动物对能量和氮的利用。

马铃薯茎叶制作青贮饲料的研究进展

马铃薯茎叶产量较高,具有一定的营养价值。青贮是提高其适口性、改善品质的一种方法。本文就马铃薯茎叶的营养特点、青贮特性及不同方法制作青贮饲料的效果等进行综述,为马铃薯茎叶非常规饲料的开发和利用提供参考。

猪miR-204组织表达与重要靶基因筛选

基于Illumina Hiseq 4000高通量测序技术筛选得到仔猪感染C型产气荚膜梭菌耐受和易感组中显著上调表达的miR-204。为研究miR-204在各组织中的表达,进一步筛选miR-204参与调控仔猪C型产气荚膜梭菌感染的关键靶基因,采用实时荧光定量PCR方法检测了miR-204在7日龄仔猪各组织中的表达,利用MEGA7.0软件对其成熟体序列保守性进行分析,运用TargetScan、miRDB、PicTar软件进行靶基因预测,并用DAVID软件对靶基因进行Gene Ontology和KEGG Pathway通路富集分析,进一步采用qRT-PCR方法对筛选得到的关键靶基因在猪肠上皮细胞(IPEC-J2)中进行靶向关系验证。结果表明,miR-204在7日龄仔猪肾脏、肝脏、胸腺、淋巴、十二指肠和回肠组织中均高度表达,其成熟体序列在脊椎动物间高度保守。3种软件预测到的共同靶基因有114个,这些靶基因显著(P<0.05)富集在15个GO功能和13个信号通路。结合前期得到的抗性基因,筛选到4个关键靶基因NR3C1、SIRT1、BCL2L2和DLG5,转染miR-204 mimics后,靶基因SIRT1、BCL2L2和DLG5极显著(P<0.01)下调表达。miR-204是参与调控仔猪抵抗C型产气荚膜梭菌感染的重要因子,SIRT1、BCL2L2和DLG5可能是miR-204的关键靶基因,其功能还需进一步验证。

新生仔猪C性产气荚膜梭菌性腹泻的研究进展

C型产气荚膜梭菌是引起仔猪腹泻的主要细菌性病原菌之一,主要感染7日龄以内的新生仔猪,该菌通过接触感染,引起坏死性肠炎、仔猪腹泻等疾病,影响发病仔猪的生长发育,甚至导致仔猪死亡.近几年C型产气荚膜梭菌的危害日益严重,每年因产气荚膜梭菌感染导致许多动物患病和死亡,给我国乃至世界养猪业带来严重的经济损失.本文主要从C型产气荚膜梭菌的毒素类型、致病机制、防治措施及调控机制等方面就仔猪C型产气荚膜梭菌性腹泻的研究进展进行了综述,以期为将来深入开展相关研究提供参考.

应用Rusitec-S系统研究甘露寡糖对绵羊体外瘤胃发酵的影响

本研究应用Rusitec-S型人工瘤胃模拟装置,采用单因素完全随机设计,在基础饲粮中分别添加0、0.8%、1.6%和2.4%的甘露寡糖(mannan oligosaccharides,MOS),测定总产气量、甲烷产量、养分降解率及培养液pH、总氮、氨氮、尿素氮、蛋白氮和挥发性脂肪酸浓度以及比例的变化,分析饲粮中添加甘露寡糖对绵羊体外瘤胃发酵的影响。试验共两期,每期9d(预试期7d,采样期2d),每个处理4个重复。结果表明,添加甘露寡糖对体外培养液pH、总氮、氨氮、尿素氮、蛋白氮和总挥发性脂肪酸浓度、各挥发性脂肪酸比例、养分降解率及甲烷产量和总产气量均没有产生显著影响(P>0.05)。由此可知,饲粮中添加甘露寡糖在人工瘤胃试验中不会影响瘤胃发酵模式。

Dmrt7在绵羊不同发育期睾丸组织中的表达与定位

探讨Double sex和mab-3相关转录因子7(Double sex and mab-3related transcription factor7,Dmrt7)在不同发育期绵羊睾丸组织中的表达规律和定位情况,本试验选取0、2、6、12和24月龄健康绵羊15只,每组3只,采集睾丸组织,运用实时荧光定量PCR、Western blot和免疫组织化学染色方法检测不同月龄睾丸组织中Dmrt7的表达与定位情况。结果显示,在不同月龄绵羊睾丸组织中均检测到Dmrt7mRNA和蛋白,并且表达趋势较为一致,但不同月龄睾丸中表达量存在差异;在0、2和6月龄绵羊睾丸中,Dmrt7mRNA和蛋白表达量很低,而在12和24月龄表达量较高,并且极显著高于0、2和6月龄(P<0.01);0、2和6月龄绵羊睾丸组织中免疫阳性反应定位于少量的精原细胞,而在12和24月龄睾丸组织中免疫阳性反应主要定位于次级精母细胞和部分初级精母细胞及精子细胞。研究结果表明,Dmrt7可能对各级生精细胞的分裂过程尤其是初级精母细胞通过两次减数分裂形成精子细胞的过程起着重要的调控作用。

不同萎蔫时间对马铃薯茎叶品质的影响

本试验通过研究马铃薯茎叶在自然萎蔫过程中感官品质及营养成分的变化规律,为其制作青贮饲料提供参考。采用单因子试验设计,共设5个处理,分别为5个萎蔫时间:刈割后第1天、第2天、第3天、第4天、第5天,每个处理4个重复。第4天水分达到青贮要求,但叶片有所褐变,第5天有部分霉变;随着萎蔫天数的增加,水分、粗蛋白质和粗脂肪含量下降(P<0.05),第4天时分别下降了18.6%、6.9%、21.8%,其他养分含量无显著变化(P>0.05)。由以上结果说明,如果以马铃薯茎叶制作青贮饲料,最好在保存条件好的情况下刈割后3天内完成,但需要添加吸收剂以使水分达到青贮要求。

豌豆秸和胡麻秸对马铃薯茎叶青贮发酵品质的影响

为研究豌豆秸、胡麻秸及玉米对马铃薯茎叶青贮发酵品质的影响,采用单因子试验设计,分为5个处理组,分别为马铃薯茎叶单独青贮,83%的马铃薯茎叶混合17%的豌豆秸或胡麻秸,81%的马铃薯茎叶混合3%的玉米及16%的豌豆秸或胡麻秸,每个处理4个重复。结果显示:马铃薯茎叶单独青贮的品质最差,pH、氨氮含量最高,感官评分和乳酸含量最低。混合豌豆秸与胡麻秸后,青贮品质提高,pH分别显著下降(P <0.001)9.59%和23.69%。氨氮分别显著下降(P <0.001)13.77%和29.90%。感官评分分别显著提高(P <0.001)50.00%和104.17%。在添加豌豆秸与胡麻秸的基础上再添加3%的玉米,青贮品质进一步提高。添加豌豆秸、胡麻秸和玉米均可显著影响青贮料的养分含量(P <0.001),胡麻秸的效果优于豌豆秸。

水分含量及处理时间对小麦秸氨化效果的影响

试验探讨水分含量及处理时间对小麦秸氨化效果的影响。采用4×4双因子设计,为4种水分添加量(0、20.00%、35.00%及50.00%)和4种氨化时间(3、4、5及6周)。在实验室用小塑料袋进行氨化,水分含量对小麦秸氨化后的干物质、粗蛋白质和中性洗涤纤维(NDF)含量产生显著影响(P<0.05),随水分含量增加,各组间干物质含量顺序显著下降;粗蛋白质含量为20.00%时加水组最高;中性洗涤纤维3个加水组间显著低于未加水组,但3个加水组无显著差异(P>0.05)。处理时间对氨化后养分无显著影响(P>0.05),但6周时粗蛋白质含量最高。水分含量与处理时间无显著差异(P>0.05)。

澳洲白绵羊和杜泊羊与湖羊杂交的F1代体尺、器官重量及肌肉脂肪酸含量的比较研究

为探究澳洲白绵羊和杜泊羊与湖羊杂交对F1代的体尺、器官重量及肌肉脂肪酸含量的影响,本试验设澳湖杂交F1代(AH组)、杜湖杂交F1代(DH组)和纯繁湖羊(HH组)3个组,每组分别选取4月龄体重相近、体况良好的公羊3只、母羊2只。经试验测定发现,DH组体长和体高显著高于HH组(P<0.05),AH组与HH组差异不显著(P≥0.05)。AH组头重指数和脾脏占比显著高于DH组(P<0.05);AH组和DH组的脾脏和肺脏占比均显著高于HH组(P<0.05)。利用气相色谱方法检测羔羊背最长肌脂肪酸含量,结果显示,3组肌肉中共检测出27种脂肪酸,硬脂酸含量在HH组与AH组显著高于DH组(P<0.05),而油酸含量DH组显著高于HH组(P<0.05),总饱和脂肪酸含量DH组显著低于HH组和AH组(P<0.05);总单不饱和脂肪酸和总不饱和脂肪酸含量DH组均显著高于HH组(P<0.05)。因此,引入的2个绵羊品种与湖羊的杂交可以提高湖羊的生长性能及肉用品质。