软骨细胞条件性敲除PTEN基因的FGFR3功能增强型点突变小鼠的获得及其表型初步分析

目的获得在软骨细胞中条件性敲除PTEN基因的FGFR3增强型点突变小鼠并进行初步表型分析。方法通过PTEN条件性基因敲除小鼠（Pten^flox/flox小鼠），与软骨细胞特异表达Cre重组酶的小鼠（Col2αCre）交配，获得在软骨细胞中特异敲除PTEN基因小鼠（Co12αCre：Pten^flox/flox）；同时，利用Pten^flox/flox小鼠与FGFR3增强型点突变小鼠（Fgfr3^G369C/小鼠，即ACH小鼠）交配，子代杂合子小鼠（Pten^flox/＋：ACH）之间再交配，获得Pten^flox/flox：ACH小鼠；通过Col2αCre：Pten^flox/flox和Pten^flox/flox：ACH交配即可获得在软骨细胞中特异性敲除PTEN基因的FGFR3增强型点突变小鼠（Col2αCre：Pten^flox/flox：ACH）。采用PCR对小鼠基因型进行鉴定，免疫荧光染色检测PTEN基因的敲除效率，通过X光平片摄影对小鼠的表型进行初步分析。结果获得了在软骨细胞中敲除PTEN的FGFR3点突变小鼠，免疫荧光染色证实Col2αCre：Pten^flox/flox：ACH小鼠软骨细胞中PTEN蛋白因为基因敲除而表达很低。初步的表型分析显示：Col2αCre：Pten^flox/flox：ACH小鼠身长、尾长均较Pten^flox/flox：ACH小鼠长（P〈0．05，n=5）。Col2αCre：Pten^flox/flox：ACH小鼠表型，较Pten^flox/flox：ACH小鼠的侏儒表型有所缓解。结论采用基于Cre／LoxP系统的条件性基因敲除策略，获得了在软骨细胞中敲除PTEN基因的FGFR3增强型突变小鼠，表型分析初步显示，软骨细胞特异性敲除PTEN基因可部分缓解由FGFR3增强型点突变所导致的小鼠侏儒表型。该小鼠的获得，为研究P13K／AKT信号通路在FGFR3突变介导的软骨生长抑制中的作用提供了实验动物平台。

经椎弓根及伤椎内固定治疗胸腰段椎体骨折体会

目的总结跨伤椎和经伤椎椎弓根置钉复位固定治疗胸腰椎骨折的临床效果。方法 2003年1月至2010年4月我们收治126例胸腰段椎体骨折,年龄23～61岁。采用后路减压椎管成形椎弓根内固定植骨融合术,跨伤椎固定97例,经伤椎置钉固定29例。结果所有伤椎椎体前缘高度与后缘高度(PVH)的比值由术前(0.34±0.11)增加到术后(0.84±0.10);矢状位后凸Cobb角由术前(25.46±2.59)°减少至术后(12.12±1.23)°。跨椎体组伤椎椎体前缘高度与后缘高度的比值由术前(0.36±0.12)增加到术后(0.83±0.11);矢状位后凸Cobb角由术前(25.40±2.50)°减少至术后(12.2±1.21)°。经伤椎组伤椎椎体前缘高度与后缘高度的比值由术前(0.345±0.11)增加到术后(0.882±0.12),矢状位后凸Cobb角由术前(25.43±2.53)°减少至术后(10.17±1.21)°。两组间结果对比显示经伤椎组椎体高度恢复和矫正后凸畸形效果好于跨椎体组(P<0.01),末次随访显示跨椎体组矫正角度有所丢失。跨伤椎组发生断钉3例,松动2例,经伤椎椎弓根螺钉内固定组无松动,无断裂、断棒。结论椎弓根钉固定是治疗胸腰椎骨折的一种有效方法,经伤椎固定可以有效维持脊柱复位效果。

新兵股骨疲劳性骨折诊断治疗与预防

疲劳性骨折是部队常见训练性损伤,如何早期诊断,正确治疗和有效预防是每一个基层军医要掌握的基本技能。现将我院2008-01～2011-03诊断治疗的46例股骨疲劳性骨折进行回顾性分析。

CBL模式皮肤影像技术在皮肤性病科见习中的应用

探讨以病例为基础的学习(case-based learning,CBL)联合皮肤影像技术在皮肤性病科见习中的应用。方法 选取2023年9月至11月在新疆维吾尔自治区人民医院皮肤性病科实习的108名临床医学专业的本科学生作为研究对象,分为试验组52人和对照组56人。其中,对照组采用传统教学,试验组采用CBL教学联合皮肤影像技术的教学方式。课后进行问卷调查,评价教学效果,采用SPSS 17.0进行Wilcoxon 秩和检验和Welch’s correction t检验。结果 试验组对知识的理解力优于对照组(P=0.023),学习的积极性也得到了调动(P<0.001),试验组的平均理论成绩高于对照组(P=0.038)。结论 将CBL教学联合皮肤影像技术运用于皮肤性病科见习教学中具有较好的教学效果。

成骨细胞特异性过表达h1 calponin转基因小鼠的建立

目的为从整体动物水平研究碱性调宁蛋白(h1-calponin)在骨形成过程中的直接作用,我们构建了成骨细胞中特异性过表达h1-calponin的转基因小鼠模型,并对其表型进行了初步分析。方法构建在成骨细胞特异性启动子(collagen I promoter)驱动下表达h1-calponin的载体(pColI-calponin),纯化DNA片段,再以显微注射的方法将转基因片段导入小鼠受精卵,经移植后得到小鼠。PCR法检测整合到小鼠基因组中的外源基因,提取F1代阳性小鼠原代成骨细胞RNA,RT-PCR检测h1-calponin在小鼠成骨细胞中的表达情况,并观察转基因小鼠表型及体重变化情况。结果PCR检测结果显示1只G0代转基因鼠中检测到阳性信号,RT-PCR显示F1代转基因小鼠成骨细胞中表达h1-calponin较野生对照小鼠明显增加,且转基因小鼠体重与野生小鼠相比有明显降低。结论成功构建了在成骨细胞特异性过表达h1-calponin的转基因小鼠,为深入研究h1-calponin在骨骼发育中的作用提供了良好的动物模型。

异鼠李素抑制H_(2)O_(2)诱导的黑素细胞ROS水平升高和细胞活性降低

目的探讨异鼠李素(isorhamnetin,ISO)对人表皮黑素细胞免受H_(2)O_(2)诱导氧化应激损伤的预保护作用。方法不同浓度的H_(2)O_(2)处理人表皮黑素细胞,CCK-8检测细胞活性,筛选出H_(2)O_(2)体外诱导人黑素细胞氧化应激的最适浓度;用ISO预处理细胞后,使用最适浓度H_(2)O_(2)刺激,CCK-8检测细胞活性,NaOH裂解法测定黑素含量,流式细胞术检测细胞内ROS水平。结果0.8mmol/L H_(2)O_(2)处理人表皮黑素细胞24h后细胞活性显著降低;ISO预处理可使人黑素细胞活性显著增强,黑素合成增加,并可使H_(2)O_(2)刺激细胞内ROS水平明显降低。结论ISO对H_(2)O_(2)引起的正常人表皮黑素细胞的氧化损伤具有保护作用。该结果为抗氧化剂ISO应用于白癜风的治疗提供了一定的实验基础。

山柰酚对人表皮黑素细胞黑素合成及增殖凋亡的影响观察

目的观察山柰酚对人表皮黑素细胞黑素合成及增殖凋亡的影响。方法取20岁以下男性包皮标本制作人表皮黑素细胞悬液,培养后采用CCK-8法确定山柰酚、H_(2)O_(2)的应用剂量。取黑素细胞分成10μmol/L山柰酚组、阴性对照组:10μmol/L山柰酚组加入10μmol/L的山柰酚,阴性对照组加入等体积培养液,采用NaOH裂解法观察山柰酚对人表皮黑素细胞黑素合成的影响,以黑素合成量表示。取黑素细胞分成对照组、山柰酚组、H_(2)O_(2)组、山柰酚+H_(2)O_(2)组:对照组加入黑素细胞培养48 h,山柰酚组加入10μmol/L山柰酚培养48 h,H_(2)O_(2)组加入0.8 mmol/L H_(2)O_(2)培养48 h,山柰酚+H_(2)O_(2)组加入10μmol/L山柰酚处理24 h后继续加入0.8 mmol/L H_(2)O_(2)再培养24 h;采用CCK-8法观察山柰酚对黑素细胞增殖的影响,以细胞增殖率表示;采用Annenxin V/PI双染色法观察山柰酚对黑素细胞凋亡的影响,以细胞凋亡率表示。结果阴性对照组、10μmol/L山柰酚组黑素合成量分别为100.33±0.68、162.97±3.34,两组相比,P<0.05。对照组、山柰酚组、H_(2)O_(2)组、山柰酚+H_(2)O_(2)组细胞增殖率分别为100.61%±1.71%、110.27%±5.83%、51.49%±2.35%、74.96%±0.53%,组间相比,P均<0.05。对照组、山柰酚组、H_(2)O_(2)组、山柰酚+H_(2)O_(2)组细胞凋亡率分别为4.30%±0.72%、3.80%±1.21%、25.93%±2.23%、9.73%±2.39%,其中H_(2)O_(2)组细胞凋亡率高于其余各组(P均<0.05);对照组、山柰酚组、山柰酚+H_(2)O_(2)组细胞凋亡率组间相比,P均>0.05。结论10μmol/L的山柰酚可促进人表皮黑素细胞的黑素合成。山柰酚预处理可促进H_(2)O_(2)刺激下的黑素细胞增殖,抑制其凋亡。

耳部瘢痕疙瘩核切除联合术后放疗的临床研究

目的:观察采用瘢痕核切除方案联合术后浅层电子线放疗治疗耳部瘢痕疙瘩临床疗效。方法:选取2016年3月-2021年3月新疆维吾尔自治区人民医院皮肤科治疗的耳廓瘢痕疙瘩48例,根据瘢痕疙瘩的分型及大小设计切口线,采用瘢痕核切除的方式尽量切除瘢痕保证无张力缝合,术后24 h内联合浅层电子线放疗,随访分析治疗效果及满意度。结果:本组48例患者,病灶62处,所有患者均一期愈合,外形良好,术后均按要求联合放射治疗,术后随访12~36个月,治愈32例(66.6%),显效14例(29.2%),总有效率95.83%,复发2例(4.16%)。结论:采用核切除联合放疗治疗耳部瘢痕疙瘩效果理想,复发率低,手术创伤小简单易行,值得推广应用。

Th1/Th2/Th17相关细胞因子失衡与非节段型白癜风病情相关性研究

目的探讨Th1/Th2/Th17相关细胞因子在非节段型白癫风患者表达水平及其与疾病发生发展的关系。方法收集2020年5月-2021年1月新疆维吾尔自治区人民医院皮肤科住院的非节段型白癫风患者56例,同期健康体检者40例,采用流式细胞仪检测两组受试者血清中ThI[白细胞介素(IL)-2、IL-12p70、干扰素(IFN)-γ肿瘤坏死因子(TNF)-α],Th2(IL-4、IL-10),Th17(IL-1β、IL-6、IL-17)细胞因子水平,并分析其在白癫风患者的不同分期、分型、皮损面积、疾病活动程度等临床亚组中的表达差异。结果除IL-12p70和TNF-α外,其余7种细胞因子在白癫风患者中的表达水平均高于对照组(P<0.05)。IL-6、IFN-γ、IL-17与白癫风疾病活动度(VIDA)呈正相关,差异有统计学意义。IL-1β与皮损面.积严重程度呈正相关(P<0.05)。IL-6在白癫风甲状腺功能异常组中表达水平高于甲状腺功能正常组(P=0.03)。结论非节段型白癫风患者Th1/Th2/Th17细胞因子失衡可能在疾病的发生发展中起重要作用,IL-6、IFN-γ及IL-17与疾病活动度有关,IL-1β与皮损面积大小有关,可作为疾病活动监测的重要指标。

山奈酚减轻人角质形成细胞氧化应激损伤

目的探究驱虫斑鸠菊成分山奈酚(KP)在人角质形成细胞系(HaCaT)中的抗氧化作用及作用机制。方法用选择性反应/多反应监测技术定量分析驱虫斑鸠菊种子黄酮类物质。将HaCaT细胞分为对照组、模型组[用2,2-偶氮二(2-甲基丙基咪)二盐酸盐(AAPH)处理HaCaT细胞,构建氧化应激模型]、不同浓度山奈酚干预组;CCK-8法检测增殖;RT-qPCR检测Nrf2、HO-1、NQO1、GCLC和GCLM mRNA表达;Western blot检测Nrf2蛋白表达。结果1)驱虫斑鸠菊种子中总黄酮类物质含量为0.97 g/100 g,共获得36种黄酮类化合物,其中KP含量为62.96 ng/100 g。2)构建氧化应激模型的AAPH最适浓度为25 mmol/L;KP浓度为0~40μmol/L时,未见明显细胞毒性。3)低剂量KP可增加HaCaT细胞内Nrf2、HO-1和GCLC mRNA的表达,其中血红素加氧酶-1(HO-1)的表达变化最为显著。4)KP可呈浓度依赖性增加各组细胞内Nrf2蛋白表达。结论驱虫斑鸠菊成分KP减轻人角质形成细胞氧化应激损伤,其作用机制与上调核因子E2相关因子2(Nrf2)的表达有关。

毽子的秘密

随着欢快的下课铃声响遍操场,这“哒哒哒哒……”的声音宛如一个个音符进入了我的耳膜。我想:“这是谁在‘唱歌’啊?”没错!就是我最喜欢的毽子。说起毽子,它的历史可悠久了!唐宋时,踢毽子在我国民间已很盛行,平民百姓中都有开展踢毽子这项活动,至今我们仍可见到匠工们在花瓶上绘制的踢毽图,只见图中的古人甩着手,跷着脚,毽子像一只飞舞的花蝴蝶嵌在他的身边,看起来精美极了!这是毽子的第一个秘密:历史悠久。

飞行员跟腱断裂26例的治疗与医学监督

部队飞行员是一种专业性很强的职业，也是一组特殊的战斗群体，对身体素质有着严格的要求，其体能训练的一项重要内容就是日常的篮球运动，但在运动中容易发生跟腱损伤。2006年以来，为预防和减少训练损伤，我们对飞行员进行了有计划、有组织和系统的运动伤宣传教育及医学监督，显著降低了飞行员在运动、训练中跟腱损伤的发生率，有力保障了部队的战斗力。现就飞行员运动伤的预防及跟腱断裂的诊断与治疗报告如下。

内毒素血症小鼠骨骼Toll样受体4基因的变化

目的通过检测内毒素血症模型动物骨骼相关基因表达变化，进一步明确内毒素对机体的损害机制，为下一步研究骨骼变化对脏器产生何种影响奠定基础。方法腹腔注射内毒素脂多糖（LPS）制作内毒素血症小鼠模型。将48只小鼠随机分为正常组和LPS处理4、6、8、12、24、48和72h组，每组6只。采尾血计数全血白细胞；取眼眶血检测肝、肾功能；用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测骨骼中TLR4mRNA表达；苏木素-伊红（HE）染色，镜下观察骨骼病理学变化。结果与正常组比较，LPS4h组白细胞计数显著下降（P〈0．01），之后逐渐升高，于72h时显著高于正常组（P〈0．05）；LPs4h和6h组丙氨酸转氨酶（ALT）水平显著升高（P均〈0．05），于8h降至正常水平（P〉0．05）；LPS6h组血尿素氮（BuN）水平逐渐升高（P〈0．05），于8h达峰值（P〈0．05），然后下降，12h趋于正常（P〉0．05）；LPS6h组TLR4mRNA表达增加（P〈0．01），24h达峰值（P〈0．01），然后逐渐下降，72h仍处在较高水平（P〈0．05）。LPS作用于骨骼后，HE染色显示骨骼无明显改变。结论内毒素血症中骨骼TLR4mRNA表达量显著增加。

miR-223-3p对H_(2)O_(2)诱导的人表皮黑素细胞氧化应激反应和生物学功能的影响

目的 探讨miR-223-3p的表达对H_(2)O_(2)诱导的人表皮黑素氧化应激反应及生物学功能的影响。方法 建立H_(2)O_(2)诱导的人表皮黑素细胞氧化应激白癜风细胞模型,将miR-223-3p模拟物、miR-223-3p抑制剂以及阴性的对照物分别转染至人表皮黑素细胞氧化应激白癜风模型,并利用qRT-PCR测定miR-223-3p的表达;通过WST-1法和TBA法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)的含量活性;通过CCK-8法测定细胞增殖;流式细胞术测定细胞周期、凋亡和线粒体膜电位;使用生物信息软件预测FBXW7为miR-223-3p的潜在靶基因,并采用双荧光素酶报告基因实验加以证明。结果 成功确定了构建白癜风氧化应激细胞模型的H_(2)O_(2)的浓度为0.4 mmol/L,miR-223-3p模拟物可明显提高H_(2)O_(2)诱导的人表皮黑素细胞增殖率及SOD活性,改善细胞线粒体膜电位,降低细胞凋亡率及MDA和ROS含量,而miR-223-3p抑制剂组作用效应则相反。同时过表达miR-223-3p可降低氧化应激损伤的人表皮黑素细胞在G0/G1期的比例,提高在S期和G2/M期细胞的比例。同时验证了FBXW7是miR-223-3p的潜在靶基因。结论 过表达miR-223-3p可对人表皮黑素细胞H_(2)O_(2)诱导的氧化应激损伤起到一定的保护作用,在H_(2)O_(2)诱导的人表皮黑素细胞增殖和凋亡中发挥重要作用。

人TERT基因启动子区生物信息学分析

目的:探讨人端粒酶逆转录酶基因启动子区的序列特征、转录因子及其结合位点。方法:从NCBI数据库中获取人TERT基因组序列及其启动子序列:利用EMBOSS 6. 6. 0、Cp G finder 1. 0和MethPrimer 1. 0软件预测启动子区Cp G岛的位置;利用Patch 1. 0和PROMO 3. 0. 2软件预测可与TERT基因结合的潜在转录因子及结合位点。结果:TERT基因定位于5p15. 33,基因序列全长共41 881 bp,其启动子位于TERT基因5’端上游2 500 bp处,全长2 043bp。TERT基因启动子区可能存在2个Cp G岛和118个转录因子。结论:通过生物信息学软件对h TERT基因启动子进行预测分析,可提高对h TERT基因启动子的研究效率,以便更加深入了解h TERT基因的调控机制及其生物学功能。

跟骨骨折手术切口一期愈合的经验体会

目的总结跟骨骨折手术切口一期愈合的经验体会。方法2009年5月至2010年9月应用切开复位内固定治疗32例（36足）跟骨骨折患者，均为男性；年龄18～50岁，平均36．5岁。入院后即刻行手法复位石膏托外固定和脱水消肿。手术采用足外侧“L”形切口，于跟骨表面全层剥离软组织，显露跟骨外侧面，恢复跟骨的高度、宽度及距下后关节面平整，再用钢板螺丝钉内固定。结果术后3周切口均获一期愈合。患者术后获6—12个月（平均9个月）随访，全部患者切口愈合平整，无切口感染、破溃及皮肤坏死等并发症发生。结论选择合适手术时机，重视软组织保护和手术操作技巧，是确保切口一期愈合的重要因素。