灵芝多糖拮抗环孢素A,氢化可的松及抗肿瘤药的免疫抑制作用

灵芝多糖在50,100和200μg·ml^1时可完全拮抗环孢素A,丝裂霉素C,氟尿嘧啶和阿糖胞苷对小鼠混合淋巴细胞反应(MLR)的轻度抑制(抑制50％以下)作用,部分拮抗氢化考的松对MLR的严重抑制(抑制50％以上)作用。

灵芝多糖对小鼠脾细胞白细胞介素1、肿瘤坏死因子的产生及其mRNA表达的影响

小鼠脾细胞体外培养３ｈ即可检测到ＩＬ１αｍＲＮＡ的表达，４ｈ达到高峰，５ｈ后降至不能检出的水平。ＴＮＦαｍＲＮＡ在４ｈ开始出现，４．５ｈ时达到高峰，５．５ｈ后逐渐消失。在培养开始时分别加入灵芝多糖ＧＬＢ７５、１０、２０、４０μｇ／ｍｌ，４ｈ及４．５ｈ分别检测ＩＬ１α及ＩＬ１αｍＲＮＡ的表达情况。结果ＧＬＢ７能促进ＩＬ１α及ＩＬ１αｍＲＮＡ的表达，对ＩＬ１αｍＲＮＡ的表达提高率分别为７．６％、６７．３％、１０５．０％、１４３．１％；对ＴＮＦαｍＲＮＡ的表达提高率分别为９．９％、３３．９％、４５．９％、７５．８％。８ｈ后ＧＬＢ７对培养上清中ＩＬ１活性的提高率分别为１．４％、３．０％、６．７％、８．１％；１２ｈ后对培养上清中ＴＮＦα活性的提高率分别为３．０％、１４．１％、２８．２％、３５．７％。结果说明灵芝多糖ＧＬＢ７能通过促进小鼠脾细胞原代培养时ＩＬ１α及ＴＮＦαｍＲＮＡ的表达从而促进ＩＬ１及ＴＮＦα的合成与分泌。

有限稀释微量溶血法测定小鼠血清溶血素的活性

目的检测抗绵羊红细胞（ＳＲＢＣ）抗体（溶血素）。方法将含有溶血素的血清样品适当预稀释，然后取１００μｌ加入９６孔板中进行有限的倍比稀释，每孔再加入体积分数为１５％ＳＲＢＣ和１∶１０稀释的豚鼠血清各５０μｌ，在３７℃温育１～１２ｈ后，有足够溶血素活性孔的红细胞将全部溶解，小孔液体清彻见底；溶血素活性低于足量时，只能部分溶血，受未溶解红细胞的阻挡，小孔底部只有不同程度的透明度，将印有字母“Ｒ”的测试纸放在９６孔板底部，根据字母“Ｒ”的能见程度和已知的稀释倍数判断样品的活性。结果样品的测定值与理论值成良好直线关系。对已知药物的效果测定与用分光光度法所测得结果一致。结论本方法简单、快速、准确、重复性好。

灵芝多糖对混合淋巴细胞培养反应中白细胞介素2生成和T细胞亚类的影响(英文)

利用混合淋巴细胞培养反应研究了灵芝多糖的免疫作用机理。结果表明培养12h,灵芝多糖(25,50,100,200μg/ml)可促进白细胞介素2的分泌,且具有剂量依赖关系。培养4d后,可增加总的细胞回收量以及Lyt 2^+和L3T4^+细胞的回收量。灵芝多糖还明显增强细胞毒T细胞的功能,在浓度为200μg/ml时,其杀伤活性增加100％。

灵芝多糖对老年小鼠脾细胞DNA多聚酶α活性及免疫功能的影响

24月龄老年小鼠脾细胞中DNA多聚酶α的活性比3月龄小鼠明显低下。每日ip灵芝多糖(GL-B)25和50 mg·kg^(-1)共4 d,均可明显增强老年小鼠脾细胞内DNA多聚酶α的活性,与老年对照组相比分别增加44.0和58.4%。体外实验发现,老年小鼠脾细胞自发增殖能力和自发分泌IL-2的能力明显低于年轻对照组,对同种异型抗原引起的混合淋巴细胞反应也明显减弱,加入GL-B(50,100,200μg·ml^(-1))以后,这些指标均可明显恢复。

钩吻碱类提取物对小鼠脾细胞增殖反应的影响

钩吻碱类提取物在浓度大于１．２５μｇ／ｍｌ以上时对混合淋巴细胞培养反应（ＭＬＲ）均有不同程度的抑制作用，具有统计学意义（Ｐ＜０．０５）的最低抑制浓度为２．５μｇ／ｍｌ，抑制率为１８．３％。单独采用Ｃ５７ＢＬ／６ｊ小鼠脾细胞进行实验，促有丝分裂剂为细菌脂多糟（ＬＰＳ５μｇ／ｍｌ），在钩吻碱类提取物浓度为４０μｇ／ｍｌ才出现抑制作用（Ｐ＜０．０５），抑制率为１８％，改用刀豆蛋白Ａ（ＣｏｎＡ２μｇ／ｍｌ）刺激，钩吻碱类提取物最低抑制浓度为２０μｇ／ｍｌ，抑制率为１２．４％（Ｐ＜０．０５）．脾细胞先经ＣｏｎＡ活化．后用白细胞介素２（５ｕ／ｍｌ）维持培养，此时钩吻碱类提取物的最低抑制浓度为４０μｇ／ｍｌ．抑制率为１７．１％（Ｐ＜０．０５）。

灵芝多糖对同种异型抗原刺激的小鼠脾细胞DNA多聚酶α活性的影响(英文)

去蛋白灵芝多糖是从芝灵Ganoderma lucidum(Leyss·ex Fr.)Karst子实体中提取的纯多糖部分,根据分子量不同,命名为GL-A,GL-B和GL-C。混合淋巴细胞培养反应是同种异型抗原(主要组织相容性抗原)刺激的特异性免疫反应。GL-A(16～250μg·ml^(-1)),GL～B(62～250μg·ml^(-1)),GL-C(16～250μg·ml^(-1))都可以明显促进混合淋巴细胞培养中脾细胞对[~3H]TdR的摄取。而且促进作用与药物浓度之间呈正相关。三种灵芝多糖还可以在同样条件下增加脾细胞中DNA多聚酶α的活性。但是在无细胞体系中,同样的药物浓度反而抑制[~3H]TTP参入酸不溶物。以上结果提示,去蛋白灵芝多糖可以促进由同种异型抗原刺激的淋巴细胞转化作用。其作用机制是通过间接诱导DNA多聚酶的产生,从而促进免疫细胞中DNA的合成和促进细胞的增殖,加速免疫应答过程。

灵芝多糖与刀豆素A相互作用对小鼠脾细胞体外增殖反应的影响

灵芝多糖（GLB）与刀豆素A（ConA）对小鼠脾细胞增殖反应有三种不同的相互作用。当ConA为亚适浓度（0．5mg／L）时，GLB有轻度的协同刺激作用；当ConA为最适浓度（2mg／L）时，高浓度GLB（＞100mg／L）可轻度对抗ConA的刺激作用；当ConA为超适浓度（16mg／L）时，GLB可逆转ConA的抑制作用，并恢复ConA的刺激作用至最适水平，可能是多糖与ConA发生沉淀反应所致。

浅谈用PowerPoint软件制作药理学教学幻灯中的文字与图形安排

利用PowerPoint对药理学教材内容进行二次加工,以简洁的形式展现出来,变详细文字叙述为纲要式简述或流程图;利用重叠技术,动画显示图中的特定部分;借助Photoshop软件的强大图片处理能力对扫描图加以修饰、美化;同时从互联网上下载有用的专业图片,丰富教学内容.

灵芝多糖免疫增强作用机制研究(三等奖)

灵芝多糖是灵芝中最有效的活性成分之一,日本学者主要研究了灵芝多糖抗肿瘤的构效关系,国内学者对灵芝多糖的免疫调节作用进行了初步研究。本项目从细胞分子水平进一步研究了灵芝多糖的免疫增强机理。灵芝多糖 GL—B 系从灵芝子实体中提取分离所得,分子量7100～9300.粉末状,易溶于水。体外实验可见 GL—B(62—250μg/ml)可明显促进混合淋巴细胞培养反应中淋巴细咆对[~3H]TdR 的摄取,说明它可以促进淋巴细胞的 DNA 合成。DNA

类比法在解释药理学基本概念中的应用

类比法教学是常用的一种教学手段,几乎在各门学科中均可应用.本文用电风扇从启动到产生风的过程来解释药物作用和药物效应的关系;用跑步能力的暴发力和耐力来解释效能和效价;用路障原理来解释使用依赖性.

灵芝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞胞浆游离Ca^(2+)浓度的影响

目的：探讨灵芝多糖（ＧＬＰ）对免疫细胞信号转导过程的影响。方法：采用激光扫描共聚焦显微镜（ＬＳＣＭ） 技术，动态监测ＧＬＰ均一体组分ＧＬＢ７ 对小鼠腹腔巨噬细胞（ＭΦ）胞浆游离Ｃａ２＋ 浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）的影响。结果：ＧＬＢ７（２０μｇ·ｍｌ－１） 引起小鼠腹腔ＭΦ中［Ｃａ２＋］ｉ 明显升高，升高值为（２４８ ±１８） ％（ｎ ＝６）；ＧＬＢ７ 引起小鼠腹腔ＭΦ外钙内流及ＭΦ内ＩＰ３ 敏感和ＩＰ３ 非敏感钙池释放Ｃａ２＋ ，［Ｃａ２＋］ｉ 升高值分别为（７６±１０） ％ ，（５８ ±１０） ％ ，（４１ ±８）％ （ｎ ＝ ６） ；ＧＬＢ７ 对ＭΦ［Ｃａ２＋］ｉ 的影响与Ｋ＋ 通道及其引起的膜电位变化无关。结论：ＭΦ是灵芝多糖作用的靶细胞；ＧＬＢ７ 引起ＭΦ中［Ｃａ２＋］ｉ 快速升高，可能是灵芝多糖产生作用的重要途径。

灵芝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞活性氧自由基的影响

为进一步探讨灵芝多糖 ( GLP)免疫调节作用机理 ,采用激光扫描共聚焦显微镜技术 ,动态监测灵芝多糖均一体 GLB7对小鼠腹腔巨噬细胞 ( M )活性氧自由基含量的影响 .以 GLB7( 2 0 mg· L-1)刺激 M ,发现探针 DCHF- DA的荧光强度明显下降 ,与静息水平相比 ,平均下降 ( 36± 6) % ( n=6,P<0 .0 5) ;同时还能拮抗 PMA引起的 M 呼吸爆发 ,荧光强度下降幅度为 ( 1 9± 4) % ( n=6,P<0 .0 5) .结果证明 :GLB7能减少 M 内活性氧自由基的生成 ,具有清除活性氧的作用 ,这也是 GLB7产生免疫增强和抗衰老作用的重要途径 .

灵芝多糖抗肿瘤作用的免疫学相关性研究

目的:通过观察免疫细胞数量变化与肿瘤大小的关系,探讨灵芝多糖抗肿瘤作用的免疫学机制。方法:取荷瘤(S180)小鼠40只随机分为生理盐水对照组、灵芝多糖Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,剂量分别为400、200、100 mg/kg体重,每组10只,灌胃给药,每天一次,连续9天。采用血细胞分析仪计数血液中白细胞、淋巴细胞的数量;流式细胞仪检测T细胞亚群百分率;肿瘤称重后做病理石蜡切片,经HE染色,光镜下照相,形态立体计量学方法测量肿瘤组织中淋巴细胞的体密度。结果:灵芝多糖抑瘤率分别为37.85%(Ⅰ组)、45.67%(Ⅱ组)、17.98%(Ⅲ组),第Ⅱ组效果最好,P<0.01;灵芝多糖组血液中白细胞总数、淋巴细胞总数均高于对照组,第Ⅱ组增加最多,P<0.01;给药组CD4+/CD8+T细胞比值明显高于对照组,以第Ⅱ组为最高,P<0.01;肿瘤组织中淋巴细胞的体密度(%),给药组也高于对照组,仍以第Ⅱ组为最高,P<0.01。经相关分析发现,被检各项免疫学指标均与抑瘤率呈正相关趋势。结论:灵芝多糖可能通过促进荷瘤小鼠免疫细胞的增殖与分化,增加效应免疫细胞的数量,从而达到抗肿瘤作用。

灵芝多糖对小鼠T细胞胞浆游离Ca^(2+)浓度和胞内pH的影响

目的通过考察灵芝多糖（ＧＬＰ）对免疫细胞信号转导过程的影响，探讨ＧＬＰ免疫调节作用机制。方法采用激光扫描共聚焦显微镜（ＬＳＣＭ）技术，动态监测ＧＬＰ均一体组分ＧＬＢ７对小鼠Ｔ细胞胞浆游离Ｃａ２＋浓度（［Ｃａ２＋）和胞内 ｐＨ（［ｐＨ］ｉ）的影响。结果 ＧＬＢ７（２０ｍｇ·Ｌ－１）引起小鼠 Ｔ细胞中［Ｃａ２＋］；和［ｐＨ］；明显升高，１ｍｉｎ即分别升高至３３４．７０％±１６，４％（ｎ＝３）、１７１．６％ ± １０．４％（ｎ＝３），之后一直分别维持在该平台期，至 １０ ｍｉｎ仍维持高峰水平。加入ＥＣＴＡ和 ｖｅｒａｐａｍｉｌ处理后， １０ ｍｉｎ ＧＬＢ７ 引起 Ｔ细胞［Ｃａ２＋］；和［ｐＨ］；分别升高为 ２０２．４％± １３．６％（ｎ＝３）。１４０．２％±７．８％（ｎ＝３），与正常对照组比较差异有显著性（Ｐ＜０．０1）。以 ＥＧＴＡ和 ｖｅｒａｐａｍｉｌ处理后，再分别以 ｈｅｐ－ｅｒｉｎ和 ｐrocaine处理细胞 １０ ｍｉｎ，之后以 ＧＬＢ７刺激Ｔ细胞，１０ｍｉｎ［Ｃａ２＋］ｉ值分别为１５１．５％±９．４％（ｎ＝３）、１４３．２％± ８．１ ％（ ｎ＝ ３），与 ＥＧＴＡ和 ｖｅｒａｐａｍｉｌ处理组相比差异有显著性（ Ｐ＜ ０．０１）。

灵芝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞蛋白激酶A活性的影响

为观察灵芝多糖 (GL B7)体外对小鼠腹腔巨噬细胞 (MΦ)蛋白激酶 A(PKA)活性的影响 ,采用反相离子对高效液相色谱法测定 MΦ中 RKA活力。结果表明 GL B7(40 mg/ L )能引起小鼠腹腔 MΦ中 PKA活性明显升高 ,10min达峰值 ,30 min恢复到基础水平。提示灵芝多糖的免疫增强作用与其增强 MΦ中 PKA活性有关。

金针菇多糖对小鼠免疫细胞产生细胞因子及对荷瘤小鼠血清细胞因子含量的影响

目的:研究金针菇多糖(FVP)对小鼠免疫细胞产生肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(INF-γ)、白细胞介素-2(IL-2)的影响。方法:MTT比色法检测细胞代谢活力,ELISA方法检测TNF-α、INF-γ、IL-2的含量。结果:FVP(200、100、50μg/mL)可增强小鼠脾细胞及腹腔渗出细胞代谢MTT的活力,促进小鼠脾细胞分泌TNF-α、IFN-γ、IL-2,促进小鼠腹腔渗出细胞分泌TNF-α,并且以促进TNF-α分泌作用最为明显;FVP(100、50、25 mg/kg)可以提高荷S180瘤小鼠血清TNF-α、IFN-γ的含量。结论:FVP可能通过促进小鼠免疫细胞产生TNF-α、IFN-γ、IL-2而发挥免疫调节功能。

灵芝多糖体外对小鼠脾细胞IL-2,IL-3 mRNA表达的影响

目的观察灵芝多糖体外对小鼠脾细胞ＩＬ－２、ＩＬ－３ｍＲＮＡ的表达水平是否有影响。方法逆转录多聚酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ｍＲＮＡ表达，凝胶图象光密度分析系统进行相对定量。结果在原代小鼠脾细胞培养开始时加入不同浓度的灵芝多糖ＧＬＢ７（５，１０，２０，４０ｍｇ·Ｌ－１），培养１２ｈ及２１ｈ后观察ＧＬＢ７与ＩＬ－２及ＩＬ－３ｍＲＮＡ表达水平之间的量效关系。发现在一定范围内，随着ＧＬＢ７浓度的升高，ＩＬ－２及ＩＬ－３ｍＲＮＡ表达水平也相应提高，对ＩＬ－２ｍＲＮＡ的提高率分别为１０．４％，２１．９％，３７．８％，４６．６％；对ＩＬ－３ｍＲＮＡ的提高率分别为１５．４％，３５．２％，５２．４％，７４．５％。１９９８－０４－０８收稿，１９９８－０７－２６修回＊国家自然科学基金资助课题，Ｎｏ３９４００１６５作者简介：王庆彪，男，２６岁，硕士；雷林生，男，３８岁，医学博士，副教授培养１２ｈ和３０ｈ的上清液中ＩＬ－２样活性及ＩＬ－３样活性处理组与对照组相比亦有明显升高，且有一定的浓度依赖关系。

灵芝多糖对S180荷瘤小鼠肿瘤细胞核酸及其细胞周期的影响

目的研究灵芝多糖对S180荷瘤小鼠肿瘤细胞核酸及其细胞周期的影响,探讨其抗肿瘤作用的可能机制。方法分别给荷S180腹水瘤小鼠灌胃灵芝多糖(400,200,100mg/kg·b.w.)、生理盐水、或皮下注射环磷酰胺(25mg/kg·b.w.),1次/d,连续9d。观察腹水瘤细胞RNA、DNA含量,RNA/DNA比值以及细胞周期的改变。激光扫描共聚焦显微镜技术和吖啶橙(AO)荧光染色技术检测肿瘤细胞DNA和RNA荧光强度。流式细胞仪和碘化丙啶荧光染色技术分析肿瘤细胞的细胞周期。结果与生理盐水组比较,灵芝多糖各剂量组的RNA、DNA含量有不同程度的减少,中剂量组(200mg/kg)具有统计学意义(P=0.000);灵芝多糖各剂量组的RNA/DNA比值均下降(P=0.003,0.000,0.008),说明灵芝多糖减少在体肿瘤细胞RNA的含量比DNA更为明显。环磷酰胺使肿瘤细胞的RNA和DNA含量均下降(P=0.000),但对RNA/DNA比值没有影响。灵芝多糖各剂量组使G0/G1期细胞百分数增加(P=0.003,0.000,0.000),而环磷酰胺作用相反(P=0.000)。灵芝多糖对S期细胞的百分率没有影响,而环磷酰胺使S期细胞的百分率减少(P=0.011)。灵芝多糖各剂量组使G2/M期细胞百分数下降(P=0.014,0.049,0.016),而环磷酰胺作用相反(P=0.000)。结论灵芝多糖对在体S180肿瘤细胞DNA和RNA含量及细胞周期的影响与环磷酰胺不同;通过动员机体的免疫功能,抑制肿瘤细胞DNA和RNA的复制与合成,从而影响其细胞周期的正常运转,可能是灵芝多糖抑制肿瘤细胞生长的机制之一。

灵芝多糖对小鼠T细胞蛋白激酶A和蛋激酶C活性的影响

:目的 :观察灵芝多糖体外对小鼠T细胞蛋白激酶A (PKA)和蛋白激酶C(PKC)活性是否有影响。方法 :采用反相离子对高效液相色谱法测定PKA和PKC活力。结果 :灵芝多糖GLB7 能引起T细胞中PKA和PKC活性明显增强并具有剂量依赖性 ,达峰时间分别为5min和20min ,于20min及1h分别恢复到基础水平 ;GLB7 还可引起T细胞中PKC发生质膜转位 ,并拮抗Stau rosporine对T细胞中PKC的抑制作用。结果