红色原鸡群体遗传多样性

为了阐明红色原鸡的群体遗传结构,以对其有效保护提供遗传学依据,采用33个微卫星标记对其群体中56个个体进行了PCR-聚丙烯酰胺多态性电泳检测。33个微卫星座位共检测到140个等位基因,所有座位都呈现出多态性,每个座位的等位基因数在2～8个之间,平均每个座位等位基因数4.24个,有效等位基因数3.30个。根据等位基因频率,计算出的群体表观杂合度、期望杂合度及多态信息含量分别为0.7980、0.6506和0.5948。结果表明,红色原鸡群体遗传多样性较丰富。

猪α干扰素基因克隆、进化及表达特性分析

为深入研究α干扰素在猪体内的调节和功能,本研究以猪为实验动物,通过RT-PCR扩增得到α干扰素基因全长编码区序列,提交Gen Bank数据库,获得登录号为"JQ839262"。生物信息学分析显示,该基因编码189个氨基酸,预测蛋白分子量为21.32 ku,等电点为6.37。蛋白质结构分析得出,IFN-α存在1个保守域,无跨膜结构,存在信号肽。疏水性分析显示其N端疏水,C端亲水。亚细胞定位显示,该蛋白分泌到细胞周质的概率为92.2%。系统进化分析表明,猪与牛、山羊的亲缘关系较近。同时通过荧光定量PCR法检测了α干扰素基因mRNA在猪13个组织中的表达量,发现在皮肤、肺、肌肉、心、脾中表达量较高。本研究为进一步研究猪α干扰素基因的表达调控奠定研究基础。

绿色荧光蛋白基因原核表达质粒pET32a-AcGFP1的构建及其在大肠杆菌中的高效表达

为了构建绿色荧光蛋白AcGFP1基因的原核表达载体pET32a-AcGFP1,并诱导使其在大肠杆菌中高效表达,本研究以pIRES-AcGFP1质粒为模板,采用PCR技术特异性扩增绿色荧光蛋白AcGFP1基因,通过酶切和连接使其与原核表达载体pET32a(+)构成重组子,经PCR、酶切和测序鉴定后,重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3),用不同浓度的异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达绿色荧光蛋白,经15%SDS-PAGE鉴定,结果显示:重组质粒pET32a-AcGFP1中的AcGFP1序列与Clontech公司的pIRES-AcGFP1质粒的AcGFP1序列完全一致,表明本实验已成功构建了含有绿色荧光蛋白基因AcGFP1的原核表达质粒。此外,pET32a-AcGFP1转化Rosetta(DE3),经不同浓度的IPTG诱导,SDS-PAGE检测均获得高效表达,为今后构建pET32a(+)-TAT-AcGFP1融合表达载体以及深入研究TAT的细胞膜穿透作用的机制奠定基础。

猪白细胞介素6和α干扰素基因的融合及其原核表达

为了获得猪白细胞介素6(IL6)和α干扰素(IFNα)双重活性的融合蛋白,研究其作为免疫佐剂的可行性,利用IL6和IFNα基因的编码区序列以及原核表达载体pET32a序列,设计了带有限制性内切酶位点、Linker序列以及His标签的特异性引物扩增出猪IL6和IFNα的成熟肽基因序列,并分别与克隆载体pMD18连接后转化Esche-richia coli DH5α,提取质粒酶切并连接构建重组质粒pMD18-IL6-IFNα。将该重组质粒和表达载体pET32a同时酶切并连接构建pET32-IL6-IFNα重组质粒,依次转化E.coli DH5α和E.coli Rosetta(DE3)感受态细胞,并经不同终浓度的IPTG以及不同时间的诱导表达。结果成功构建了IL6和IFNα的融合表达载体,SDS-PAGE检测pET32-IL6-IFNα融合蛋白在E.coli Rosetta(DE3)中得到了较高表达,且经1.00 mmol/L IPTG诱导7.0 h后表达量最大,目的蛋白的相对分子量为44 960,与理论预期值一致。SDS-PAGE检测显示融合蛋白主要以不溶性的包涵体形式存在。

新疆西昆仑509道班西锂矿伟晶岩石英变形特征、温度及其对伟晶岩就位的约束

509道班西锂矿床是西昆仑造山带新近发现的大型伟晶岩型锂多金属矿床。作为区内典型的花岗伟晶岩型锂矿床,509道班西锂矿的成矿机制和伟晶岩演化过程对认识整个西昆仑成矿带的成矿作用具有重要意义。作为花岗伟晶岩中的重要矿物,石英是追踪伟晶岩成矿作用过程的理想对象。509道班西矿床的花岗伟晶岩普遍发育强烈的糜棱岩化作用,具有典型的韧性变形特征,通过对糜棱岩化伟晶岩脉进行变形组构分析、石英包裹体测温和石英Ti温度计计算,揭示了与伟晶岩就位相关的大陆地壳变形过程中流体的热力学演化过程,并探讨了韧性变形对区域找矿的启示意义。糜棱岩化伟晶岩中锂辉石、斜长石等矿物主要以脆性破裂为主,具有刚体变形的特征;石英主要发育膨凸重结晶现象,细小的新晶体在较大的石英条带边部形成,可见石英残斑,并具有亚颗粒旋转现象,部分发育核幔构造;白云母普遍变形成云母鱼。石英包裹体、锂辉石和石英的变形特征等微观结构证据表明,糜棱岩化伟晶岩的变形温度为300~400℃,石英Ti温度计得出的变形温度为371~398℃和351~377℃。伟晶岩中石英包裹体的均一温度平均为260~283℃,可能记录了石英变形晚阶段的温度。研究表明,509道班西地区的伟晶岩在侵位过程中经历了一期强烈的低温、高应变速率的韧性变形,伟晶岩就位是快速冷却过程的产物,在高应力和较低温度条件下,动态重结晶(GBM)导致的晶粒粒径减小严重改变了岩石的流变学性质;从~400℃到~260℃的超冷却过程(ΔT=±140℃)中,造成伟晶岩中矿物结晶新核迅速减少,更有利于形成粗大的石英等矿物颗粒,形成伟晶岩脉所有显著特征和独特的岩石结构和矿物组合的空间分带,超冷却在伟晶岩就位过程中具有重要的作用。

关于我国银行业全面对外开放的几点思考

到2006年12月,我国银行业将向国外全面开放。2007年起,外资银行将享有与中资银行几乎同等的权利,提供全面的人民币业务,中外资银行的竞争将全面展开。文章就此展开论述,提出几点对策措施。

基于BiSS协议的编码器及其在伺服驱动系统中的应用

介绍了BiSS通信协议的特点、通信模式,分析了BiSS协议编码器在伺服驱动系统中应用的特点,优势。在实验的基础上完成了其硬件设计和基于FPGA的通信协议实现。实验表明,BiSS协议通信速度快、稳定性强、易于实现,在伺服驱动系统中的开发和应用成本低。

猪睾丸表达序列37(TEX37)克隆、mRNA表达及蛋白质功能生物信息学分析

【目的】以版纳微型猪近交系(Banna mini-pig inbred line,BMI)为材料,初步探索猪睾丸表达序列37(TEX37)基因的特性和功能,为该基因在猪精子生成过程的作用研究奠定基础。【方法】利用Oligo7软件设计特异引物扩增BMI TEX37基因整个编码区,应用实时荧光定量PCR技术检测BMI 15个组织的TEX37 mRNA表达谱,并初步预测TEX37蛋白质的功能,最后构建TEX37的多物种氨基酸系统进化树。【结果】扩增得到BMI TEX37编码区序列长561 bp,编码186个氨基酸,基因登录号KU705619,氨基酸登录号AOC89037。多组织相对荧光定量表达分析表明:TEX37基因在睾丸中呈相对最高表达,在其他组织中呈相对较低表达。生物信息学分析表明:TEX37蛋白质含有TSC21结构域,二级结构以无规则卷曲为主,N末端疏水,C末端亲水,有2类磷酸化位点,无跨膜螺旋结构和信号肽。系统聚类表明:BMI与其他物种相似度在67%以上,进化较保守。【结论】该研究可为TEX37基因在猪精子生成方面的作用机理研究提供参考。

猪雄性增强抗原1基因MEA1编码区克隆、表达及生物信息学分析

【目的】克隆猪MEA1基因编码区序列,获得基因表达谱并了解其蛋白质的基本功能。【方法】从GenBank下载猪及近缘物种MEA1序列作为参考序列,设计特异引物从版纳微型猪近交系(BMI)睾丸组织中扩增MEA1基因完全编码序列及部分侧翼序列,对MEA1翻译的蛋白质序列进行多种功能生物信息学分析并构建多物种系统进化树,最后用实时荧光定量PCR技术检测BMI 15个重要组织的MEA1 mRNA转录表达水平。【结果】扩增得到BMI MEA1编码区序列长525 bp,编码174个氨基酸。功能生物信息学分析表明:MEA1含有1个完整的保守结构域,无跨膜螺旋结构,无N端信号肽序列,二级结构以无规卷曲为主,N末端疏水,C末端均亲水,有3类功能活性位点。系统进化分析表明:MEA1基因在进化中高度保守,且与人、长臂猿的亲缘关系最近,符合物种的系统分类地位。多组织相对荧光定量表达分析表明:MEA1基因在睾丸中高表达,在心、肝等其他14个组织中低表达。【结论】为探索BMI MEA1基因在睾丸形成和精子发生过程中的作用及功能奠定基础。

山西省小贷公司可持续发展的思考

中央提出建立小贷公司以来,山西省小贷公司快速发展,小贷公司的建立在引导民间资本、完善金融服务、优化资源配置等方面得到了积极的作用,与此同时,制约小贷公司发展的不利因素逐步显现。文章通过调研与分析,提出小额贷款公司发展的三个主要方向。

山西省煤炭企业转型发展研究

随着经济的不断发展,世界能源格局不断发生变化,"煤炭"独大的格局日渐消散,煤炭企业转型迫在眉睫。以30家煤炭企业作为调查样本,探究煤炭企业转型的发展现状与方向。

江西景德镇朱溪铜钨矿床控矿构造特征及矿床成因探讨

钦杭成矿带是位于扬子与华夏两大古陆块之间的过渡部位,主要包括中新元古代的扬子与华夏两个古板块及其间的结合带(杨明桂,1997)。由于沿该带发育一系列铜多金属和钨锡多金属矿产,一直以来作为国家部署找矿的重要区带。江西省景德镇浮梁县朱溪铜钨矿床作为钦杭成矿带东段新近发现的特大型铜钨多金属矿床,对其构造特征及成因演化进行研究具有重要意义。本文通过对朱溪铜钨矿床构造地质特征及成因演化进行研究,以探讨构造-岩浆活动与成矿的关系。

银行业交叉性金融业务现状及特点 ——以山西为例

随着经济金融的快速发展,'交叉性金融业务'作为不同类别金融机构之间横向联系的重要'纬度',在进一步激发市场活力的同时,也打破了原有创新与监管的平衡.本文以山西省银行业交叉性金融业务为例,进一步诠释交叉性金融业务的基本状况及潜在风险,为防范和化解可能的金融风险提供必要的参考.

煤炭的国际竞争之路

山西省是煤炭大省,煤炭行业在生产总值及进出口业务中均占有很重要的地位.在目前国内市场比较低迷的情况下,如何发挥资源优势,成为山西省政府和经济金融界非常重要的研究课题.

利用微卫星PCR技术分析山猪的遗传结构

选用世界粮农组织（FAO）和国际动物遗传学会（ISAG）联合推荐的23个微卫星位点对山猪群体的遗传多样性进行检测。通过等位基因频率、有效等位基因数、杂合度、多态信息含量的计算以及瓶颈效应分析，判断山猪群体目前遗传结构和濒危状况。结果表明，23个微卫星座位的多态信息含量在0．452-0．847之间。群体平均多态信息含量和平均杂合度分别为0．686和0．731。瓶颈效应分析表明，山猪群体拥有极显著的杂合度过剩位点数，在无限等位基因模型和逐步突变模型下的平均杂合度为0．559和0．672，推断其有效群体大小近几十年在明显下降，从而说明山猪群体已经处于被灭绝的威胁中。上述研究结果对于山猪的保种和开发利用具有重要的指导意义。

利用76个微卫星标记分析滇南小耳猪的遗传多样性

滇南小耳猪是云南省优良地方猪种之一，其数量大，分布广。为了阐明其群体遗传变异情况，以对其进一步有效保护和合理利用提供科学依据，本研究采用分布在家猪19条染色体上的76个微卫星标记对该猪群体54个个体进行了群体遗传变异检测。共检测到338个等位基因，每个座位的等位基因数在2～8个之间，有效等位基因数在1．9560～5．71432：间，平均每个座位等位基因数（4．4474±1．2044）个，有效等位基因数（3．5091±0．9197）个，群体平均杂合度及平均多态信息含量分别为0．6917±0．09797和0．6388±0．1142。研究结果表明，滇南小耳猪群体遗传多样性较丰富。

大河猪76个STR基因座的遗传多态性

大河猪是中国西南中海拔地区代表性猪种之一,长期以来在当地养猪生产中发挥了重要作用。为了阐明其群体遗传变异情况,为进一步有效保护和合理利用提供科学依据,采用分布在家猪19对染色体上的76个微卫星标记对该猪种60个随机抽样个体进行了微卫星PCR–聚丙烯酰胺凝胶电泳检测。共检测到347个等位基因,所有座位都呈现出多态性,每个座位的等位基因数在3—10个之间,平均每个座位等位基因数4.57个,有效等位基因数3.50个,群体平均杂合度及平均多态信息含量分别为0.6962±0.0716和0.6441±0.0914。结果表明,大河猪群体遗传多样性较丰富,选择潜力较大。

云南南部地区野猪群体的遗传多样性

野猪(Sus scrofa)是家猪的祖先,也是野生动物遗传资源和生物多样性的重要组成部分。为了阐明其群体遗传变异,以对其进一步有效保护和合理利用提供科学依据,本研究采用分布在家猪19条染色体上的76个微卫星标记对云南南部地区野猪群体65只个体进行了群体遗传变异分析。共检测到349个等位基因,每个座位的等位基因数从3到9不等,有效等位基因数在1.6835～8.0667之间,平均每个座位等位基因数(4.5921±1.1452)个,有效等位基因数(3.7099±0.9904)个,群体平均表观杂合度、期望杂合度及平均多态信息含量分别为(0.9492±0.1135)、(0.7116±0.0787)和(0.6634±0.0921)。结果表明,本实验检测到的野猪群体遗传多样性较丰富。

猪胰岛素样生长因子-Ⅰ的克隆及生物信息学分析

为了克隆猪胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-I)以及检测该因子在各组织中的转录水平,分别提取猪13种组织RNA并反转录为cDNA,利用RT-PCR方法扩增IGF-I编码区全长序列,将纯化的片段与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌DH 5α,筛选阳性克隆并测定其序列,利用生物信息学方法分析其序列特征,并与牛等5个物种构建系统进化树。同时采用半定量RT-PCR方法分析IGF-I在猪13种组织中的表达情况。结果显示,猪IGF-I编码区全长462 bp(GenBank登录号:JX827417),编码153个氨基酸。氨基酸二级结构预测表明无规卷曲占的比例最大,为57.52%。氨基酸序列同源性分析表明,与牛、马、羊、鹿、鸡等5个物种的相似性分别为98.0%、97.4%、96.1%、96.1%、83%,多组织半定量RT-PCR研究表明IGF-I mRNA在猪的13个组织中均有表达,其中在肌肉、肝脏、脾脏、卵巢、大肠中表达量较高,其他组织略低。

明光小耳猪遗传多样性分析

为深入了解明光小耳猪群体遗传结构，使之得到更好的保护和利用，采用分布在家猪19对染色体上的76个微卫星标记对该猪种65个样品进行群体遗传变异分析。共检测到343个等位基因，每个座位的等位基因数从2到9不等，有效等位基因数在1．2239～4．8079之间，平均每个座位等位基因数为（4．5132±1．2055）个，有效等位基因数为（3．2169±0．7736）个，群体平均表观杂合度、期望杂合度及平均多态信息含量分别为0．9442±0．1595、0．6685±0．0945和0．6103±0．1083。结果表明，明光小耳猪群体遗传变异丰富。