基于NOD2介导的AMPK/mTOR信号通路探讨宫颈癌细胞恶性行为的机制

目的 基于核苷酸结合寡聚化结构域受体2(NOD2)介导的AMP活化蛋白激酶(AMPK)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路探讨宫颈癌(CC)细胞恶性行为的机制。方法 生物信息学分析确定NOD2在CC组织中的表达。将靶向NOD2(shNOD2)、shRNAs阴性对照(shNC)以及NOD2过表达(NOD2)质粒和载体(Vec)转染CC细胞。通过CCK-8测定、集落形成和Transwell细胞侵袭测定来确定NOD2对CC细胞生长的影响。通过高通量RNA测序(RNA-Seq)进行转录组分析。Western blot试验检测细胞系中NOD2、AMPK/mTOR信号通路和自噬蛋白的表达。24只雌性BALB/c裸鼠随机分为4组,每组6只:载体组(Vec组)、NOD2过表达组(NOD2组)、shNC组和shNOD2组。构建小鼠远处转移模型,监测肺转移的荧光强度,计数肺转移结节的数量。结果 在线数据库分析显示,NOD2在CC组织中表达明显高于正常组织,并且不同分期的CC中NOD2的mRNA表达差异有统计学意义(P<0.05)。此外,NOD2的高表达与较差的总生存期和无病生存期相关(P<0.05)。NOD2过表达对CC细胞增殖、集落形成、迁移和侵袭具有促进作用,而NOD2敲低则相反。与体外结果一致,在转移的小鼠尾静脉注射模型中,NOD2组CC细胞的肺定殖、肺转移灶较Vec组增加(P<0.05),而shNOD2组CC细胞的肺定殖、肺转移灶较shNC组减少(P<0.05)。RNA-Seq结果显示NOD2表达与AMPK信号激活、mTOR信号抑制、自噬调节途径激活和自噬体形成显著相关。与shNC组相比,shNOD2组磷酸化AMPK、LC3蛋白表达水平减少(P<0.05),磷酸化mTOR、p62蛋白表达水平增加(P<0.05);与Vec组相比,NOD2组LC3、AMPK蛋白表达水平增加(P<0.05),磷酸化mTOR、p62蛋白表达水平减少(P<0.05)。与shNC组相比,shNOD2组GFP-mRFP-LC3的点积累减少(P<0.05);与Vec组相比,GFP-mRFP-LC3的点积累增加(P<0.05)。结论 NOD2可能通过AMPK/mTOR信号促进CC增殖、迁移和侵袭,其作用机制部分涉及自噬激活。

经阴道自然腔道内镜手术与经脐单孔腹腔镜手术在治疗肥胖患者子宫良性病变的效果比较

目的通过比较肥胖患者子宫良性病变时经阴道自然腔道内镜手术(transvaginal natural orifice transluminal endoscopic surgery,vNOTES)与经脐单孔腹腔镜手术(laparoendoscopic single-site surgery,LESS)的全子宫切除术的效果,探讨vNOTES在肥胖患者子宫良性病变的应用价值。方法选取2022年1月至2023年1月妇科肥胖患者(BMI>28.0 kg/m^(2))因良性病变需行全子宫加双侧输卵管切除术100例,按照随机数字表法将患者分为LESS组51例、vNOTES组49例。比较患者一般资料、手术时间、术中出血量、血红蛋白变化情况、疼痛评分、术后首次肛门排气时间、住院时间、盆底功能情况、性生活质量及术后并发症等情况。结果2组患者在出血量、手术前后血红蛋白变化、盆底功能情况、性生活质量以及术后并发症方面差异无统计学意义(P>0.05)。而vNOTES组手术时间、肛门首次排气时间、住院时间均短于LESS组(P<0.05),同时vNOTES组术中疼痛评分小于LESS组(P<0.05)。结论在肥胖的子宫良性病变患者中vNOTES子宫切除术手术时间和术后住院时间更短,术后疼痛评分更低,更符合快速康复外科的理念,值得进一步推广。

不同浓度营养液对烤烟漂浮育苗烟苗生长及生理特性的影响

试验采用漂浮育苗方式对K326包衣种子进行了不同浓度营养液对烤烟烟苗生长及生理特性的影响进行了研究.试验设8个处理(以氮含量计算)0,50,75,100,125,150,175,200mg/L.结果表明,播种后30 d和35 d,随着营养液浓度的增加,烟苗的株高、叶数、一级侧根、二级侧根、根体积和干物质重依次增加;播种后45 d和50 d,在100～150 mg/L范围内烟苗的各生物学性状表现较好.播种后46d,随营养液浓度的增加,NR活性逐渐下降,除此以外,在0～125 mg/L范围内可溶性蛋白质含量和NR活性在整个苗期随营养液浓度的增加逐渐上升,超过125 mg/L又呈下降趋势;INV活性在整个苗期都呈先降后增趋势,在150 mg/L时活性最弱.

腹腔镜下卵巢囊肿剔除术中电凝和缝合止血对卵巢储备功能的影响

目的探讨腹腔镜下卵巢囊肿剔除术中电凝和缝合止血对卵巢储备功能的影响。方法选取2018年1月—2020年11月青海省人民医院收治的卵巢囊肿患者200例作为研究对象,随机分为电凝组和缝合组,每组100例。比较两组患者手术前后抗缪勒管激素(AMH)、雌二醇(E2)、促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)水平,并分析其相关性。结果电凝组与缝合组手术时间、术中出血量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。术后1个月,两组窦卵泡数、卵巢动脉收缩期峰值血流速度少或慢低于术前(P<0.05);且缝合组多或快于电凝组(P<0.05)。两组血清AMH、E2水平均低于术前(P<0.05),且缝合组高于电凝组(P<0.05)。两组血清FSH、LH水平均高于术前(P<0.05);且缝合组低于电凝组(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,术后血清AMH与E2水平呈正相关(r=0.553,P<0.05),与FSH、FSH/LH呈负相关(r=-0.614和-0.482,均P<0.05),与LH无相关性(r=0.115,P>0.05)。结论相较电凝止血,腹腔镜下卵巢囊肿剔除术中应用缝合止血更有利于保护卵巢储备功能。患者术后血清AMH水平与E2、FSH、FSH/LH相关,AMH检测可作为辅助手段评价患者术后卵巢储备功能。

剪叶程度对烟草漂浮育苗生长生理指标的影响

通过2年的漂浮育苗不同剪叶程度试验,研究了剪叶程度对漂浮育苗生长生理指标的影响。结果表明:随着剪叶程度的加重,烟苗的高度、茎围、叶数、叶面积、鲜重、干重、根体积、烟碱含量、叶绿素含量、NR酶和INV酶活性等指标都是明显降低,而茎围/苗高、干鲜比、根冠比、叶片厚度、叶氮含量等指标呈增大趋势。剪叶程度越重对烟苗生长的抑制作用越大,但剪叶能协调烟苗根系与地上部分的比例,相对地促进根系和增加茎围,提高根系活力。烟草育苗的剪叶程度应根据移栽计划在剪掉较大叶片的1/3-2/3之间灵活确定,但不能不剪或剪叶过重至只留心叶。

弱光胁迫对烤烟化学成分及中性挥发性致香物质的影响

通过设置全光照与遮光处理(透光率分别为80%、50%、20%),研究了弱光胁迫对烤烟中部叶化学成分和主要挥发性致香物质含量的影响。结果表明:弱光降低了淀粉、还原糖、水溶性总糖的含量,增加了总氮,钾含量;弱光提高了中性挥发性致香物质总量,其中新植二烯含量随光照的减弱而显著提高,而类胡萝卜素降解产物、芳香族氨基酸代谢产物、美拉德反应产物、西柏烷类降解产物所占比例下降。

四川万源市烟区生态条件与雪茄烟叶质量分析

为探明四川省万源市雪茄烟区生态条件及雪茄烟叶质量特征,分析了万源市烟区的气温、空气相对湿度、降雨量和日照条件等气候特点,植烟土壤pH值、有机质和营养元素含量状况,雪茄烟叶物理特性、化学成分含量和感官评吸质量。结果表明:(1)万源市烟区气温及其年度变化规律与烟草适宜温度要求一致,降雨量充沛,年度降雨分配与烟草生长期需水规律一致,空气相对湿度较高,有利于优质雪茄烟生长和调制,山地云雾较多光照柔和,适宜优质茄衣形成。(2)万源市植烟土壤pH值微酸至中性,有机质含量中等,土壤阳离子交换量适宜,大部分营养元素含量丰富或适宜,速效磷、速效钾含量不足,土壤缺锌,缺硼较重。(3)万源市雪茄烟叶物理特性适宜,烟叶总植物碱含量偏高,其它化学成分含量基本适宜,评吸质量总体较好。万源市烟区具备生产优质雪茄烟叶的生态条件,应注意补充钾肥和锌、硼元素,采取措施降低雪茄烟叶总植物碱含量。

不同种类钾肥对烤烟生长过程中几种酶活性的影响

研究了不同种类钾肥和组合对烤烟生长过程中硝酸还原酶(NR)、超氧化物歧化酶(SOD)、蔗糖酶(INV)、根系ATP酶活性和根系活力的影响。结果表明,有机钾肥和生物钾肥都能够提高烟株的NR活性,促进烟株早期对氮素的吸收,提高SOD活性,增强根系活力,促进INV和ATP酶活性的提高。其中生物钾肥有利于促进烤烟生长前期根系活力的提高,有机钾肥能促进生长后期的根系活力的提高。以KNO3为基础的钾肥处理比以K2SO4为基础的钾肥处理更能促进烟株的生长发育。

光照条件对烤烟叶片理化指标和致香物质含量的影响

为明确光照条件对烤烟生长和品质的影响,在四川中海拔烟区通过对盆栽烤烟全生育期进行人工遮光,设置5个光照水平即自然光(T1)、60%自然光(T2)、40%自然光(T3)、20%自然光(T4)和10%自然光(T5),比较分析了不同光照条件下烤烟叶片理化成分和致香物质含量等指标的差异。结果表明:随着光照条件从自然光逐级减至10%,烤烟叶片表皮厚度、栅栏组织厚度和海绵组织厚度逐渐降低,烤后烟叶单叶重、厚度、叶质重逐渐降低,叶片含梗率逐渐增加,对叶片平衡含水率的影响不显著;烤后烟叶总糖和还原糖含量逐渐降低,总氮、烟碱、钾和氯含量有不同程度的增加;叶黄素、β-胡萝卜素、类胡萝卜素总量、部分中性致香成分含量和总量呈增加趋势。研究结果可为中高海拔烟区烟草种植布局和特色烟叶形成机理提供理论依据。

烤烟和白肋烟互换调制方法对烟叶中性香气物质含量及感官质量的影响

为探究调制方法对烟叶中性香气物质含量的影响,分别在四川达州和云南大理以白肋烟和烤烟为材料设置田间试验,成熟采收后同一品种分别以烘烤和晾制两种方式进行调制,进而比较中性香气物质含量及感官质量。结果表明:烤烟及白肋烟在烘烤和晾制两种调制方法下中性香气物质组分差异较小,而各组分含量及比例存在显著差异。晾制条件不利于烤烟特征香气物质及新植二烯的积累,但可显著提高烤烟棕色化反应产物总量及茄酮含量;烘烤条件不利于白肋烟茄酮、芳樟醇、香叶基丙酮、二氢猕猴桃内酯、法尼基丙酮的积累,但有利于白肋烟新植二烯、脱氢β-紫罗兰酮、氧化异佛尔酮、巨豆三烯酮、螺岩兰草酮及芳香族氨基酸降解产物的积累。烤烟在晾制条件下烤烟风格、香气质和甜感下降,刺激性增加,而白肋烟在烘烤条件下香气质改善,刺激性减少,甜感增加,但白肋烟风格程度明显下降。

光照强度对烤烟漂浮育苗成苗素质的影响

以烤烟幼苗为试验材料,采用白纱布遮光方法,设置了自然光、透光68.2%、透光35.4%和透光16.7%4个光照强度处理,研究了光照强度对漂浮育苗成苗素质的影响。结果表明:随着相对光照强度的减弱,烟苗高度增加,茎围、干鲜比、叶片厚度和比叶重等均呈现降低的趋势,烟苗物质积累减少,光强对烟苗叶数的影响不大;遮光条件下生长的烟苗根系不发达,根冠比和根重比减小,根系活力下降;光照强度会影响烟苗的含水率,遮光条件下的烟苗自由水含量增加,束缚水含量降低,适宜光照条件下生长的烟苗则保水能力较强,遮光程度越大保水力越低;随着光照强度的减弱,烟苗叶绿素含量增加,Chla/Chlb比值减小;遮光条件下烟苗的硝酸还原酶活性升高,转化酶活性降低,表明烟苗体内的氮代谢强于碳代谢,抗逆性降低;随着光强的减弱烟苗总氮和蛋白质含量增加,总糖和烟碱含量降低。总之,随着育苗环境的光照强度降低成苗素质下降。

白肋烟新品种川白1号的选育及其特征特性

川白1号是以MSB21为母本、达所26为父本杂交选育的白肋烟新品种,2012年12月通过全国烟草品种审定委员会审定。该品种田间生长势强,群体整齐一致,有效叶数较多;抗TMV,中抗至中感黑胫病;主要经济性状优于对照品种鄂烟1号,原烟外观质量、物理特性较好,内在化学成分含量适宜协调,感官质量较好,是一个产量、品质、抗性兼顾,综合性状优良的新品种。

白肋烟不同类型转化株烟碱转化率的叶位间和叶点间变异

采用气相色谱法对具有不同烟碱转化能力白肋烟烟株不同叶位和叶点的烟碱转化率进行测定。结果表明,非转化株和高转化株不同叶位以及同一叶片不同叶点的烟碱转化率分布比较一致,变异性较小,非转化株各样品烟碱转化率均在2%以下,高转化株烟碱转化率均在85%以上,不表现烟碱转化的嵌合特征,取样部位对转化株鉴别效果无显著影响。低转化和中转化烟株,不同叶位烟叶和不同叶点间烟碱转化率存在较大的变异性,表现明显的嵌合特征,低转化株不同叶位烟叶烟碱转化率的变异范围为2.5%～4.8%,不同叶点的变异范围为2.6%～7.0%;中转化株不同叶位烟碱转化率的变异范围为2.51%～90.6%,不同叶点的变异范围为2.7%～66.9%。由于一部分叶片和叶点的烟碱转化率低于3%的现行转化株鉴别标准,取样部位会对转化株的鉴别效果产生影响,降低转化株鉴别标准十分必要。

白肋烟新品种川白2号的选育及其应用评价

川白2号是达州市烟草公司以MSVA1061为母本、达所26为父本杂交选育的白肋烟雄性不育杂交新品种,于2015年4月通过全国烟草品种审定委员会审定。试验与示范结果表明,该品种田间生长势强,群体整齐一致,有效叶数较多;免疫TMV,中抗-抗黑胫病,中感-中抗根结线虫病,感赤星病,对青枯病的抗性强于对照品种鄂烟1号,综合抗病能力强于对照品种;产量、产值较高,主要经济性状显著优于对照;烟叶外观质量好,物理特性适宜,内在化学成分协调,感官评吸质量较好;适应性广,适宜四川、湖北、重庆、云南等国内主要白肋烟烟区种植。

达州烟区生态因素与白肋烟质量特点分析

通过分析四川省达州市烟区适宜烟草种植的基本条件、气候因素、土壤养分状况及所产白肋烟叶的质量特点,结果表明:(1)该烟区具有热量资源丰富、温度较高、降雨量和空气湿度大等突出气候特点,地貌类型丘陵、低山、中低山等为主,土壤类型有紫色土、红壤、红黄壤、冲积土、水稻土等。分析表明达州烟区多项指标达到了适宜烟草生长发育的生态条件,是烟草种植适宜区。(2)达州烟区土壤养分含量存在较大差异,一般土壤多为弱酸性,有机质含量中等,大部分养分含量适宜,应注意追施钾肥、补充硼、镁等微肥。(3)达州烟区白肋烟叶外观质量一般,物理特性和化学成分适宜,感官评吸质量较好。

不同基质对烤烟漂浮育苗烟苗生理特性的影响

采用漂浮育苗方式研究了商品、麦秸加玉米秸和花生壳加玉米秸3种育苗基质对烤烟烟苗生理特性的影响。结果表明,商品基质最有利于烟苗的生长发育,花生壳加玉米秸基质对烟苗成苗期的生长发育影响与商品基质接近,对烟苗苗床后期的蛋白质含量和可溶性糖含量有促进作用,能降低烟苗成苗时的电解质外渗率和MDA含量。麦秸加玉米秸基质在苗床期对烟苗的根系活力、NR活性、蛋白质含量和可溶性糖含量都有不同程度的抑制作用。

不同白肋烟晾房调制期间温湿度和烟叶含水率与色素含量比较

为了选择适宜的晾房类型与材料,通过设计4种不同类型晾房于2010年在四川达州研究比较了白肋烟晾制期间晾房内温湿度和烟叶含水率、色素含量变化趋势及晾制后烟叶化学成分含量。结果表明,不同晾房对温度和相对湿度的调节能力有差异,美式晾房平均温度较高而涂泥晾房温度较低,钢架晾房平均相对湿度较低而涂泥晾房较高;晾房内部不同空间的温湿度有差异,晾房中部的温度、湿度要高于晾房两侧边的温度、湿度,晾房上层平均温度高于下层而上层的平均相对湿度低于下层;不同晾房晾制期间烟叶含水率与色素含量变化有差异,不同晾房对晾制后的烟叶化学成分含量有不同程度的影响。说明设计的4种类型晾房均能够达到调制要求,各烟区可根据本地实际材料选择适宜类型。

达州白肋烟植烟土壤中、微量元素含量分析及施肥对策

对达州白肋烟主产区宣汉县30个土壤样品的中量、微量元素含量进行了分析。结果表明:交换性钙、交换性镁和有效硫的平均含量分别为278.88、27.56和37.08 mg/kg;有效铁、锰、铜、锌、硼和氯的平均含量分别为63.72、55.96、0.19、2.11、0.15和91.81 mg/kg;该区植烟土壤交换性钙、交换性镁、有效铜及有效硼含量不足,有效硫、锌、铁、锰的含量总体上较丰富,氯含量偏高。在烟草生产上,要因地制宜,科学补充缺乏元素,禁止施用含氯肥料。

白肋烟晾制期晾房内温度和湿度变化分析

通过对白肋烟晾制期间晾房内温度、相对湿度的测定,分析了9月上旬至10月中旬的平均温湿度、最高温湿度、最低温湿度、温湿度极差、日平均温湿度波动状况。结果表明,晾房内的温湿度主要受外界气候影响,晾房内24 h内的温湿度呈波动状态,温度与相对湿度呈相反的波动趋势;10月份以后达州烟区温度偏低,不太适宜白肋烟晾制;9月中旬到10月中旬晾房内的相对湿度呈逐步增加趋势,对烟叶干燥不利。达州烟区白肋烟生产应合理安排播收季节,调控自然气候条件对晾制的影响。

循环通风对白肋烟晾制期间晾房内温湿度的影响

为改进白肋烟晾制技术,利用温湿度自动记录仪定时测量白肋烟晾制期间晾房内的温度和相对湿度,在晾房内加装循环通风风机调控温湿度,分析了白肋烟晾制期间晾房内外的温湿度差异,比较了加装风机循环通风对晾房温湿度的影响。结果表明,晾房内温湿度主要受外界天气的影响,但晾房可缓解外界天气的影响;晾房内温度变化与相对湿度变化呈相反趋势,温度高时相对湿度低,温度低时相对湿度高;晾房内上层温度较下层高,上层湿度较下层低。在晾房内加装风机能够调控晾房内的温湿度状况,可适度减少晾房上层与下层的温湿度差异,但是由于晾房内温湿度主要受外界气象条件影响,仅安装循环风机对降低晾房内相对湿度的效果有限。