2015年北京地区成人急性呼吸道感染9种病原体IgM抗体检测分析

目的探讨成人急性呼吸道感染(ARI)患者病原体感染状况,分析其流行病学特征。方法收集2015年2 700例ARI患者血清,用间接免疫荧光法检测嗜肺军团菌血清1型(LP1),肺炎支原体(MP),Q热立克次体(COX),肺炎衣原体(CP),腺病毒(ADV),呼吸道合胞病毒(RSV),甲型和乙型流感病毒(INFA,INFB)以及副流感病毒1,2和3型(PIVs)等9种病原体IgM抗体。结果共检测到620例阳性患者,感染率为22.97%;感染率由高到低依次为MP,LP1,INFB,COX,CP,PIVs,INFA,ADV和RSV。其中混合感染占17.58%(109/620),以LP1+MP混合感染最常见。若以月份划分,11月份病原体感染率最高,4月份感染率最低(x^2=31.288,P<0.01);不同病原体流行季节也不同。男性患者感染率显著高于女性(x^2=6.402,P=0.011)。若以年龄段划分,40岁的青壮年感染率最高(x^2=9.094,P=0.059)。门诊病人与住院患者相比感染率无差异(x^2=0.114,P=0.736)。结论 MP,LP1和INFB是2015年北京地区成人呼吸道感染的主要病原体。

血清糖化血红蛋白和CA15-3水平检测与女性乳腺癌发病风险的相关性研究

目的探讨糖化血红蛋白和糖蛋白抗原15-3(CA15-3)水平与女性乳腺癌发病风险的关系。方法收集2016~2018年107例确诊为乳腺癌的女性患者,选取年龄相匹配的110例女性体检者为对照组,采用高效液相色谱法和化学发光法检测血清中HbA1c和CA15-3的水平,非条件Logistic回归分析其与乳腺癌的相关性。结果乳腺癌组HbA1c和CA15-3异常率分别为30.84%(33/107)和8.41%(9/107),对照组HbA1c和CA15-3异常率分别为23.64%(26/110)和2.73%(3/110),差异均有统计学意义(t=2.830,P=0.005;t=3.349,P=0.001)。回归分析显示,HbA1c和CA15-3异常患者发生乳腺癌的风险都显著升高(OR=1.332,95%CI=1.016~1.745;OR=1.047,95%CI=1.008~1.088)。结论高水平HbA1c和CA15-3是女性乳腺癌发生的危险因素。

2015年北京地区孕前妇女血清TORCH抗体及TNF-α水平检测与相关分析

目的了解2015年北京地区育龄妇女 TORCH 感染情况，并探讨近期感染与 TNF-α水平的关系。方法采用ELISA法对2015年1月～12月进行孕检的970例妇女筛查 TOX，RV，CMV，HSV-I，HSV-II IgM和 IgG抗体。同时对IgM阳性妇女检测血清TNF-α水平，对结果进行统计分析。结果孕前妇女TOX，RV，CMV，HSV-I和HSV-II IgM的阳性率分别为1.65％，2.16％，4.54％，17.42％和6.08％。IgG 的阳性率依次是3.81％，93.40％，92.47％，64.02％和14.64％。＜30岁妇女CMV和 HSV-I IgM阳性率高于≥30岁妇女（χ2＝4.558，4.051；均P＜0.05）。HSV-I型夏季感染率高于其他季节（χ2＝5.356，P＜0.05）。TORCH IgM阳性患者血清TNF-α水平高于正常体检组（t＝10.219，P＜0.01）。结论2015年北京地区孕前妇女TORCH感染率较高且有其流行特点，检测 TNF-α水平对于生殖健康具有重要病理意义。

pre-miR-27a单核苷酸多态与非吸烟女性肺癌发生的相关性

目的:探讨miR-27a(rs895819,A>G)多态与非吸烟女性肺癌发生的相关性。方法:采用病例-对照研究方法,使用PCR-RFLP技术检测90例非吸烟女性原发性肺癌患者和97例非吸烟女性体检者rs895819位点基因型分布频率。非条件Logistic统计分析不同基因型与肺癌发生的相关性,并分析该多态与烹饪油烟暴露的协同效应及与临床参数的相关性。结果:肺癌组rs895819位点GG突变基因型和G等位基因频率明显高于对照组(P=0.047,P=0.016)。AG+GG基因型明显增加了非吸烟女性肺癌的发生风险(OR=1.82,95%CI=1.01~3.28,P=0.038)。肺癌组和对照组烹饪油烟暴露率分别为57%和42%,差异有统计学意义(P=0.035)。回归分析显示该多态位点与烹饪油烟无交互作用;与临床病理特征(病理类型,临床分期和淋巴结转移)均无相关性。结论:has-miR-27a rs895819 G等位基因增加了非吸烟女性肺癌发生的风险。

北京地区汉族女性人群SYK基因启动子区-803A>T(rs290987)单核苷酸多态性与乳腺癌易感性分析

目的探讨脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase,SYK)基因启动子区-803A>T(rs290987)单核苷酸多态与汉族女性人群乳腺癌的相关性。方法采用病例-对照研究,以聚合酶链反应(PCR)联合DNA直接测序法检测57例乳腺癌患者和60例与之年龄相匹配的健康对照者syk基因启动子区-803位点的基因型及等位基因频率。采用ELISA方法定量检测受试者血清SYK水平。结果 -803A>T多态T等位基因频率在乳腺癌组明显高于对照组(χ~2=5.348,P=0.021)。与AA基因型相比(TA+TT)基因型可显著增加乳腺癌发病风险,OR值为2.87,95%CI=1.27~6.49。乳腺癌组血清SYK水平显著低于对照组(F=33.278,P<0.01)。结论北京地区汉族女性人群SYK基因-803位点基因型TA和TT是乳腺癌发病的危险因素。

北京地区汉族人群胃癌发生与EBV A73基因外显子区A157154C多态性的相关性研究

目的探讨北京地区EBV A73基因外显子区A157154C多态性与胃癌的相关性。方法采用病例-对照研究方法,以聚合酶链反应(PCR)联合DNA测序检测29例EBV IgM+胃癌患者和40例同期健康体检者EBV A73基因外显子157154nt位点的基因型和等位基因频率。结果胃癌组A157154CC等位基因频率和CC基因型频率明显高于对照组(χ~2=8.997,P=0.003;χ~2=6.801,P=0.033)。C等位基因携带者患胃癌的风险是A等位基因携带者的2.95倍(OR=2.95,95%CI=1.44~6.04)。胃癌组男性患者C等位基因频率显著高于女性患者(χ~2=5.392,P=0.020)。两组间比较显示A157154C不同基因型与年龄、性别、吸烟、饮酒和临床分期均无相关性。结论 EBV A73基因A157154CCA+CC基因型可能是中国北方地区汉族人群胃癌发病的危险因素。

酸感受离子通道亚基1a的研究进展

酸感受离子通道是一类由细胞外酸化所激活的阳离子通道,在胞外H+浓度增高时离子通道开放,形成H+门控电流。目前,已发现7个ASICs亚基,ASIC1a是其中之一。研究表明,ASIC1a在突触传递及其可塑性的调节、空间学习记忆、痛觉传导和缺血性脑损伤等生理和病理过程中起重要作用。该文对有关ASIC1a研究的最新进展作一综述,以增进对ASICs生物学功能和病理作用的了解。

shRNA干扰HERG钾通道治疗裸鼠皮下人成神经细胞移植瘤

目的:探讨发卡结构小片段RNA(small hairpin interfering RNA,shRNA)干扰人ERG(human ether-α-go-go-related gene,HERG)钾通道治疗裸鼠皮下人成神经细胞移植瘤的疗效和作用机制。方法:用真核转录载体mU6pro构建针对herg基因的发卡状RNA干扰质粒(shRNA-herg)。18只BALB/c裸小鼠皮下接种成神经细胞瘤SH-SY5Y细胞,建立裸鼠皮下人成神经细胞移植瘤模型,当瘤体积达到100mm3时随机分成3组,分别为生理盐水组(Ⅰ)、对照质粒组(Ⅱ)、干扰质粒组(Ⅲ)。各组瘤内分别注射生理盐水、对照质粒、干扰质粒,以后每7d注射1次,连续15d。观察各组肿瘤生长情况,RT-PCR测定肿瘤组织herg基因mRNA含量变化,免疫组化检测肿瘤组织中HERG钾通道蛋白变化。结果:经治疗后,第Ⅲ组肿瘤生长受到明显抑制,Ⅱ、Ⅲ组抑瘤率分别为3.04%和29.78%(P<0.05)。肿瘤组织内herg基因mRNA含量、HERG钾通道蛋白,Ⅲ组较Ⅰ、Ⅱ组表达减弱。结论:构建的shRNA干扰质粒可通过靶向性抑制herg基因及其编码的HERG钾通道蛋白的表达,有效地抑制人成神经细胞瘤的生长。

探讨婴幼儿呼吸道合胞病毒感染及与白介素4的相关性

目的 了解2014年北京地区小儿呼吸道合胞病毒(RSV)的感染情况,分析RSV感染与血清IL-4水平的相关性.方法 选取以急性呼吸道感染(ARI)而就诊的150例患儿,留取咽拭子标本,采用荧光定量PCR法检测RSV及其亚型,ELISA法检测患儿血清中IL-4的水平.结果 150例患儿中检测到RSV阳性32例,阳性率为21.33％;其中A亚型有25例,B亚型有7例.RSV感染组IL-4水平显著高于对照组(328.67±52.96 ng/L vs.217.34±51.21 ng/L,P＜0.01),且B亚型组显著高于A亚型组(371.09±61.96 ng/L vs.316.80±44.63 ng/L,P＜0.05).对RSV阳性患儿临床资料评估显示B亚型组喘息症状更严重.结论 2014年秋冬-2015年春RSV感染以A亚型为主,RSV感染致血清IL-4水平显著升高,感染B亚型可能会引起更严重的疾病.

2014年北京地区成人呼吸道感染常见病原体IgM抗体检测分析

目的 探讨北京地区成人急性呼吸道感染（ARI）患者9种常见病毒的感染情况,分析病原体流行病学特征.方法 采用ELISA法检测1887例ARI患者巨细胞病毒（CMV）、EB病毒（EBV）、柯萨奇病毒（CVB）,单纯疱疹病毒Ⅰ型和Ⅱ型（HSV-Ⅰ和HSV-Ⅱ）,腺病毒3、7和11型（ADV3、ADV7和ADV11）及风疹病毒（RV）等9种病原体IgM抗体.结果 1887例标本中共检出阳性706例,总感染率为37.41％（706/1887）,其中CMV感染率最高为10.92％,其次为HSV-Ⅰ（9.59％）,其它病原体检出率由高到低依次为ADV7、ADV11、EBV、ADV3、HSV-Ⅱ、CVB和RV.混合感染者有260例,占36.83％ （260/706）.10月份感染率最高,4月份感染率最低,且各病原体的流行季节也不同.病例以中青年感染者居多,不同性别间感染率差异无显著性.结论 2014年北京地区存在多种病原体流行,以CMV、HSV-Ⅰ和ADV7为主要病原体,各病原体流行有季节性特点.

酸感受离子通道亚基1a敲减后的细胞抗酸性研究

目的:通过酸感受离子通道(ASIC)1 a表达抑制的细胞模型,探讨在酸性条件下ASIC1 a对细胞生长增殖的影响。方法:以大鼠神经胶质瘤(C6)为模型细胞,利用RNA i技术建立ASIC1 a表达抑制的细胞模型。通过绘制细胞生长曲线、集落形成试验、MTT试验和乳酸脱氢酶(LDH)释放试验来观察不同pH条件下,ASIC1 a表达抑制细胞和阴性对照细胞生长增殖能力的变化。结果:RNA i技术可明显抑制C6细胞ASIC1 a蛋白的表达。在正常pH条件下,ASIC1 a表达缺失对C6细胞的生长增殖没有显著影响。但在不同酸性条件下,ASIC1 a表达抑制细胞与阴性对照细胞相比对酸的耐受性明显提高,表现为细胞损伤减轻,存活数目明显增多。结论:C6细胞中有ASIC1 a,ASIC1b,ASIC2 a,ASIC2b和ASIC3亚基的表达。抑制ASIC1 a的表达不影响正常pH条件下细胞的生长增殖,但能明显提高细胞对酸的耐受性,提示ASIC1 a可能是潜在的抗酸靶分子。

耶氏肺孢子菌主要表面糖蛋白合成及人群IgG抗体调查

目的原核表达耶氏肺孢子菌（Pneumocystis jirovecii,Pj）主要表面糖蛋白（major surface glycoprotein,Msg）氨基端片段,获得可溶性Pj重组Msg抗原（recombinant Msg,rMsg）,利用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测266例成年人外周血抗Pj rMsg IgG抗体。方法从耶氏肺孢子菌感染者的痰液获得Pj DNA,构建表达载体pGEX-3X-Pj Msg,转化感受态大肠埃希菌DE3,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷（IPTG）诱导表达。利用谷胱甘肽转移酶（GST）标签进行亲和纯化,对纯化Pj rMsg抗原进行鉴定并建立ELISA方法,检测266例成年人外周血抗Pj rMsg IgG抗体。结果成功构建了表达质粒pGEX-3X-Pj Msg,并诱导表达分子质量单位约39ku的可溶性Pj rMsg蛋白,产量为13mg/500ml菌液,以此为抗原,采用ELISA检测266例成年人外周血抗Pj rMsg IgG抗体,阳性率为42.5%（113/266）。其中男、女性患者阳性率分别为43.3%（58/134）和41.7%（55/132）,差异无统计学意义（χ2=0.071,P〉0.05）;20~29岁、30~39岁、40~50岁组阳性率分别为31.8%（27/85）、48.3（42/87）和46.8%（44/94）,差异无统计学意义（χ2=5.911,P〉0.05）。结论成功表达了可溶性Pj rMsg抗原,Pj rMsg-ELISA检测结果表明北京地区成人耶氏肺孢子菌感染率较高。

弓形虫毒力因子的研究进展

弓形虫(Toxoplasma gondii)是世界性分布的专性细胞内寄生原虫,可感染人类和几乎各类哺乳动物,导致弓形虫病。弓形虫的毒力取决于参与寄生虫-宿主细胞相互作用或者宿主免疫应答的弓形虫毒力因子。研究弓形虫毒力相关因子,对于寻找有效的药物作用靶位点和疫苗候选分子,预防和控制这种社会性寄生虫病具有重大意义。本文对弓形虫毒力相关因子的研究进展进行了综述。

云南省普洱地区猪带绦/囊虫病流行病学调查

目的了解云南省普洱地区的猪带绦/囊虫感染情况。方法在云南省普洱地区的景东县、景谷县和孟连县随机抽查了2 870人,进行了猪带绦/囊虫IgG抗体检测,并进行了猪带绦/囊虫病的流行因素问卷调查。结果猪带绦/囊虫IgG抗体阳性人数为1 108人,占调查总人数的38.61%。显示当地猪带绦/囊虫感染情况较为严重,而且当地存在较多的造成猪带绦/囊虫感染的流行因素。结论云南省普洱地区的猪带绦/囊虫感染情况较为严重,应当因地制宜地对当地进行猪带绦/囊虫感染的综合防治干预。

人组氨酸磷酸酶蛋白PHP14的过表达及其对NIH-3T3细胞体外增殖和非锚定依赖性生长的影响

目的:获取人组氨酸磷酸酶蛋白PHP14基因,并构建其N端和C端GFP融合的真核表达载体,建立过表达PHP14的NIH-3T3细胞系,并观察其对NIH-3T3细胞体外增殖和非锚定依赖性生长的影响。方法:以HeLa cDNA为模板,PCR扩增PHP14的全长编码基因,分别克隆到pEGFP-N2和pEGFP-C3载体中,构建pEGFP-N2-PHP14和pEGFP-C3-PHP14真核表达载体,利用脂质体将构建的载体转染到NIH-3T3细胞中,MTT法检测细胞增殖,软琼脂成集落法检测体外非锚定依赖性生长能力。结果:成功构建了过表达PHP14的真核表达载体pEGFP-N2-PHP14和pEGFP-C3-PHP14,并在NIH-3T3细胞中检测到了目的基因的过表达,PHP14在NIH-3T3细胞中过表达并不影响NIH-3T3细胞的体外增殖,但赋予了NIH-3T3细胞非锚定依赖性生长的能力。结论:成功构建了过表达PHP14的NIH-3T3细胞模型,在NIH-3T3细胞中过表达PHP14并不影响NIH-3T3细胞的体外增殖,但赋予了NIH-3T3细胞非锚定依赖性生长能力。

单纯疱疹病毒血清学检测及其临床应用进展

单纯疱疹病毒是一种常见的疱疹病毒。近年来，随着发病率的不断上升，受到越来越多临床和科研工作者的重视，通过血清学方法来检测单纯疱疹病毒是该领域的热点之一。该文就对用血清学检测方法未诊断单纯疱疹病毒以及其在临床中的应用进行简单的综述。

诺如病毒快速检测试剂的评价

目的评价德国R—Biopharm公司生产的RIDA QUICK诺如病毒快速检测试剂卡（免疫层析法）的准确性、安全性以及与对照试剂的等效性。方法以上市的IDEA Norovirus检测试剂盒（酶联免疫法）平行测定结果为参考，评价RIDA QUICK诺如病毒快速检测试剂卡（免疫层析法）的灵敏度、特异性及符合率。结果临床检测样本1042份，新型快速检测试剂诺如病毒检测特异性98．4％，灵敏度92．4％，与对照试剂的符合率为97．6％。结论RIDA QUICK诺如病毒快速检测试剂卡对于诺如病毒抗原的检测具有良好的特异性和灵敏度。

14岁以下儿童抗耶氏肺孢子菌合成抗原IgG和IgM抗体的调查

目的 调查北京地区14岁以下人群,抗耶氏肺孢子菌（Pneumocystis jirovecii,Pj）人工合成主要表面糖蛋白（Recombinant major surface glycoprotein,rMsg）IgG和IgM抗体检出率,探讨Pj在该人群中感染和流行情况.方法 利用原核表达的Pj rMsg可溶抗原,建立酶联免疫吸附试验,随机收集201例北京地区14岁以下人群血清,分析其抗Pj rMsg IgG和IgM抗体的检出情况.结果 收集病例按年龄分为3组,分别为出生日龄1 ～30 d 78例、出生1～12月龄33例、出生年龄1～14岁90例,3组人群中抗Pj rMsg IgG抗体检出率分别为10.3％ （8/78）,21.2％ （7/33）和41.1％（37/90）,组间比较x2 =21.190,P =0.000;抗Pj rMsg IgM抗体检出率分别为6.4％ （5/78）,39.4％（13/33）和76.7％（69/90）,组间比较x2=84.260,P=0.000.人群IgG和IgM抗体总体检出率为25.9％（52/201）和43.3％（87/201）（x2=53.463,P=0.000）.同一份血清中IgG阳性IgM阳性、IgG阳性IgM阴性、IgG阴性IgM阳性和IgG阴性IgM阴性的检出率分别为22.4％ （45/201）、3.5％（7/201）、20.9％ （42/201）和53.2％（107/201）.结论 北京地区14岁以下人群抗Pj rMsg IgG或IgM抗体总体检出阳性率为46.8％,阳性率随着出生后年龄的增加而逐渐增加.

爪蟾卵母细胞表达的大鼠ASIC3电生理学特性研究

目的:研究大鼠酸感受离子通道亚基3(acid-sensing ion channel subunit 3,ASIC3)组成的同聚体离子通道的电生理学特性。方法:将编码ASIC3亚基的cRNA注射到爪蟾卵母细胞中以表达ASIC3离子通道,使用双电极电压钳技术记录H+诱发电流,分析电流的药理学和门控动力学特征,并观察了Ca2+、Na+及K+离子对H+诱发电流的影响。结果:在注射ASIC3亚基cRNA的爪蟾卵母细胞上,降低胞外液pH值可诱导出内向电流。pH值越小则H+诱发的电流幅度越大,pH50=5.83。H+诱发电流可被阿米洛利(氨氯吡咪)可逆性阻断,电流呈现快速和稳态失活,其失活常数分别为T1=(1.5±0.7)ms,T2=(364.5±1.3)ms。提高胞外Ca2+浓度可降低H+诱发的电流幅度,IC50=9.16 mmol/L。当细胞外液中无Na+时,H+基本上不能诱发出内向电流;当同时去除细胞外液中Na+和K+时,H+可诱发出外向电流。结论:成功建立了特异性表达大鼠ASIC3亚基同聚体离子通道细胞模型。ASIC3除了对Na+通透外,对K+具有一定程度的通透。胞外Ca+对ASIC3的开放具有抑制性作用。

基于CLINPROT技术鉴定弓形虫感染的血清分子标志物

目的旨在通过液体蛋白芯片-MS/MS技术(即CLINPROT技术)发现并鉴定弓形虫感染的血清分子标记物,并分析其应用于临床检测的敏感性和特异性。方法运用CLINPROT技术对弓形虫感染患者的血清样本进行分析,并进一步采用蛋白电泳、质谱鉴定等方法对筛选的蛋白分子进行鉴定,最后通过ELISA方法对其在健康正常人和弓形虫感染患者的血清样品中的表达情况进行了检测,并采用ROC曲线评价了其临床应用价值。结果通过CLINPROT技术,发现了一个在弓形虫感染的血清样本中特异性上调的蛋白,进一步通过蛋白电泳和质谱鉴定方法,发现该特异性上调蛋白为SAA;采用ROC曲线分析显示,其敏感性和特异性分别为84.1%和80%。结论可将CLINPROT技术应用于弓形虫感染血清分子标记物的寻找和鉴定;可将SAA蛋白用作为弓形虫感染的血清分子标志物。